寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及共刺激分子CD28,CD40的表达情况。方法采用流式细胞仪检测实验组60例(寻常疣、跖疣患者各30例)和健康对照组30例的外周血T淋巴细胞亚群和CD28,CD40分子在淋巴细胞上的表达水平。结果寻常疣组、跖疣组与健康对照组相比:外周血CD4+T淋巴细胞(34.57%,35.39%,42.02%)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+/CD8+比值(1.38,1.44,1.72)降低,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞上CD28的表达(52.80%,51.87%,37.41%)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),CD40的表达(12.88%,11.94%,15.82%)减少,差异有统计学意义(P<0.05)。而寻常疣和跖疣两组间,外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组患者的疣体数量和外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的变化均无相关性(P>0.05)。结论寻常疣和跖疣患者体内存在T淋巴细胞亚群改变和共刺激分子CD28,CD40表达异常,可能与其免疫功能紊乱和病程慢性化有关。

慢性乙型肝炎患者外周血细胞CD40^+、CD40L^+及CD8^+/CD28^+表达的研究

目的 :检测慢性乙型肝炎 (简称慢乙肝 )患者外周血淋巴、单核细胞表面CD4 0 + 、CD4 0L+ 及淋巴细胞表面CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 的表达 ,评价患者的细胞免疫状态 ,为临床治疗提供指导。方法 :流式细胞仪测定慢乙肝患者单核细胞、淋巴细胞表面CD4 0 + 、CD4 0L+ 表达的百分率及淋巴细胞表面CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 表达的百分率。结果 :慢乙肝组外周血淋巴、单核细胞表面CD4 0 + 、CD4 0L+ 及淋巴细胞表面CD8+ CD2 8+ 的表达明显低于正常对照组 (P <0. 0 1,P <0.0 5 ,P<0.0 1,P <0.0 5 ,P <0 .0 1) ,乙肝肝硬化组 (简称肝硬化 )均明显低于正常对照组 (均P <0.0 1) ,而慢乙肝组、肝硬化组CD8+ CD2 8- 的表达高于正常对照组 (P <0.0 5 ,P <0 .0 1)。慢乙肝组与肝硬化组均无显著差异 (均P >0 .0 5 )。慢乙肝轻、中、重度和肝硬化三组间均无显著差异 (均P >0 .0 5 )。相关性分析结果显示 ,慢乙肝患者淋巴、单核细胞表面CD4 0 + 和CD4 0L+ 的表达之间存在正相关 ,淋巴细胞CD4 0 + 、CD4 0L+ 表达与CD8+ CD2 8+ 表达存在正相关 ,而与CD8+ CD2 8- 表达相关性不明显。结论 :慢乙肝患者外周血淋巴、单核细胞CD4 0 + 、CD4 0L+ 及淋巴细胞CD8+ CD2 8+ 表达低下 ,而CD8+ CD2 8- 的表达增加。

CD28、CD40通路共刺激对淋巴细胞增殖反应的影响及CsA的抑制作用

目的 :探讨CD2 8、CD4 0通路共刺激后淋巴细胞增殖反应的变化及免疫抑制剂环孢素A(CsA)、抗CTLA4单克隆抗体对共刺激通路激活后淋巴细胞增殖反应的影响。方法 :采用单克隆抗体与淋巴细胞表面CD3、CD2 8及CD4 0L分子结合产生相应刺激信号 ,根据刺激条件不同设组为 :①抗CD3单抗单刺激 (A组 ) (剂量为 1 0 μg/L、1 0 0μg/L、1 0 0 0 μg/L) ;②抗CD3单抗 +抗CD2 8单抗 (B组 ) ;③抗CD3单抗 +抗CD4 0L单抗 (C组 ) ;④抗CD3单抗 +抗CTLA4单抗 (D组 )共刺激 (A、B、C、D组中抗CD3单抗剂量固定为 1 0 0 μg/L ,其余 3种单抗各设 1 0 μg/L、1 0 0 μg/L、1 0 0 0 μg/L 3种剂量 ) ;⑤抗CD3单抗 +抗CD2 8单抗 +抗CD4 0L单抗 (E组 ) ;⑥抗CD3单抗 +抗CD2 8单抗 +抗CTLA4单抗 (F组 )共刺激 (E、F组中抗CD3单抗和抗CD2 8单抗的剂量固定为 1 0 0 μg/L ,抗CD4 0L单抗和抗CTLA4单抗的剂量各设 1 0 μg/L、1 0 0 μg/L、1 0 0 0 μg/L) ;⑦CsA干预组 :抗CD3单抗 +CsA(G组 ) ;⑧抗CD3单抗 +抗CD2 8单抗 +CsA(H组 ) ;⑨抗CD3单抗 +抗CD2 8单抗 +抗CD4 0L单抗 +CsA(I组 ) ,G、H、I组中所有单抗浓度均固定为1 0 0 μg/L ,CsA浓度设为 1 0 μg/L、1 0 0 μg/L、1 0 0 0 μg/L。采用 [3 H]

强直性脊柱炎患者外周血CD28 CD40共刺激通路相关分子的表达

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血淋巴细胞CD28和CD40共刺激通路相关分子的表达及其与免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞仪检测69例AS初诊患者和50名健康对照者CD28、CTLA-4和CD40L在外周血CD3^+T细胞上的表达及CD80、CD86和CD40在CD19^+B细胞上的表达。用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果AS患者CD3^+T细胞上的CD28、CTLA-4和CD40L,CD19^+B细胞上CD86和CD40的表达均较正常对照组显著增高(P＜0．01),CD80在CD19+B细胞表达增高(P＜0．05)：AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P＜0．01)。结论AS患者CD28和CD40共刺激通路相关分子表达增强,机体处于免疫激活状态,CD28和CD40共刺激通路在AS的发病中可能起重要作用。

肾移植受者外周血中共刺激分子CD_(28)与CD_(40)/CD_(154)的表达研究

目的检测肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154表达的动态变化情况。方法对同种异体移植肾患者于术前1、术后1、3、7、14、21和28d分别取外周血,对AR受体,在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血。对白细胞进行免疫荧光双标记,用流式细胞仪检测各共刺激分子在外周血淋巴细胞中的表达。结果术后1、3d内CD28+、CD4+CD28+、CD8+CD28+细胞比率均有显著下降,但术后7d逐渐恢复至术前水平;AR时表达上升,其中CD28+和CD4+CD28+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后下降至术前水平。AR时CD40+和CD154+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后恢复至术前水平。结论外周血淋巴细胞CD28、CD40、CD154在移植后排斥反应时表达上调,提示外周血淋巴细胞共刺激分子的表达在临床肾移植急性排斥反应中起重要作用。

强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞和CD28CD40的检测及临床意义

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血淋巴细胞中数量的变化和共刺激分子CD28CD40外周血淋巴细胞上的表达的临床意义。方法采用流式细胞术检测60例AS患者和30例健康对照者外周血淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19相对数量,检测CD28、CD40L在CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞上和CD40在CD19+B细胞上的表达情况。结果AS患者CD3+、CD3+CD4+、CD19+细胞较正常对照组显著增高(P<0.05),CD3+CD8+T细胞较正常对照组降低(P<0.05);AS患者CD28、CD40L在CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞上和CD40在CD19+B细胞上的表达都较正常对照组显著增高(P<0.05)。结论强直性脊柱炎(AS)外周血淋巴细胞中数量变化及共刺激分子CD28、CD40表达情况与AS患者免疫功能紊乱和发病机制密切相关。

大鼠心脏移植排斥反应过程中外周血CD28、CD40通路相关分子的变化

目的探讨CD28、CD40共刺激通路与排斥反应的关系,同时也为排斥反应的诊断寻找一种新的检测指标。方法采用大鼠异位心脏移植模型,用免疫组化方法动态检测外周血单核细胞(PBMC)CD28、CTLA4、CD40及CD40L分子的表达。结果在0～4级排斥反应中,外周血细胞CD28分子阳性表达率在各组间的差异无统计学意义。外周血细胞表达CTLA4分子的阳性率随排斥反应增强而升高(P<0.01)。CD40及CD40L在PBMC中的表达强度也随排斥反应的分级逐渐增强(P<0.01)。结论外周血CTLA4、CD40及CD40L分子的表达与排斥反应有密切关系,动态检测这些分子有助于对排斥反应状态的评价。

尖锐湿疣患者外周血单一核细胞共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨免疫共刺激分子CD28/CD152-CD80/CD86,CD40-CD40L在尖锐湿疣患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达情况。方法采用流式细胞仪(FCM)检测60例CA患者(初发组30例、复发组30例)和30例健康对照者外周血CD28,CD152,CD40L在CD4+,CD8+T细胞上CD80,CD86,CD40在CD19+B细胞上的表达水平。结果CA患者CD28,CD40L在CD4+,CD8+T细胞的表达,与对照组(42.36%,13.85%,5.08%,2.58%)相比,复发组(37.10,11.66%,2.57%,1.25%)较初发组(39.69%,12.76%,3.93%,1.96%)明显降低(P<0.01);CD80,CD86,CD40在CD19+B细胞上的表达与对照组(1.59%,3.83%,14.25%)相比,复发组(0.65%,3.05%,10.24%)较初发组(1.04%,3.45%,12.21%)显著降低(P<0.01),而CD152在CD4+,CD8+T细胞上的表达与对照组(1.71%,9.62%)相比,复发组(39.2%,12.15%)较初发组(2.64%,10.90%)显著增高(P<0.01)。结论尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞CD28/CD152-CD80/CD86,CD40-CD40L共刺激分子的异常表达可能与其免疫功能紊乱及复发机制有一定关系。

协同刺激分子CD28/B7及CD40/CD40L在哮喘特异性免疫治疗中的作用

目的探讨协同刺激分子CD28/B7-1、CD28/B7-2及CD40/CD40L在哮喘发病中的作用及在特异性免疫治疗前后表达水平的变化。方法选择30例哮喘患者为实验组,30例健康人群为对照组。采用流式细胞仪方法比较两组间T、B淋巴细胞表面CD28/B7-1、B7-2及CD40/CD40L的表达及与血清总IgE水平的相关性,以及哮喘患者特异性免疫治疗前后T、B淋巴细胞表面CD28/B7-1、B7-2及CD40/CD40L的表达水平。结果与健康人群相比,哮喘患者CD28、CD40L、B7-2及CD40表达水平均增高。血清总IgE水平与T淋巴细胞表达CD40L水平呈正相关。特异性免疫治疗6个月后,哮喘患者T、B淋巴细胞表达的CD28/B7-2及CD40/CD40L水平均有所下调,但均未达正常水平。结论协同刺激分子CD28/B7-2及CD40/CD40L表达水平的上调在哮喘发病中可能起重要作用,特异性免疫治疗能下调哮喘患者CD28/B7-2及CD40/CD40L的表达水平,并可能由此间接下调血清总IgE水平,起到相应的治疗作用。

共刺激分子CD40/CD40L及B7/CD28与动脉粥样硬化

共刺激分子CD40/CD40L及B7/CD28是T细胞活化的两条重要辅助刺激通路,不仅在调节T细胞免疫反应中起关键作用,而且也在B细胞的活化、增殖、分化、抗体的分泌起重要作用。近年来它们在动脉粥样硬化方面的研究成为国内外学者研究的热点。对共刺激分子和动脉粥样硬化关系的深入了解,将有助于阐明动脉粥样硬化发生的炎症和免疫机制,并为临床治疗开辟新途径。本文综述了共刺激分子的免疫学特征及功能以及在动脉粥样硬化中发挥的作用与免疫学治疗的前景。

共刺激分子CD28:CTLA4/B7及CD40/CD40L和SLE

共刺激分子CD2 8:CTLA 4/B7和CD40 /CD40L对B细胞的增殖、分化、抗体的分泌和T细胞的活化、细胞因子的分泌具有重要作用 ,其对系统性红斑狼疮的发生、发展具有重要的促进作用。本文综述了CD2 8:CTLA 4/B7和CD40 /CD40L生物学特性、功能及在系统性红斑狼疮发生、发展中的作用 ,以及免疫学治疗的临床应用前景。

自身反应性T细胞及共刺激分子CD28／CTLA-4／B7、CD40／CD40L和ITP

血小板抗原特异性自身反应性T细胞的活化在特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制中起着关键性作用,T细胞的活化除需要抗原递呈细胞表面MHCⅡ抗原复合物外还需要共刺激分子(第二信号),主要包括CD28／CTLA-4／B7和CD40／CD40L。本文就自身反应性T细胞和共刺激分子CD28／ CTLA-4／B7、CD40／CD40L在ITP中的作用机制及潜在的治疗价值作一综述。

CD_(28):CTLA-4/B7及CD_(40)/CD_(40)L与多发性硬化

共刺激分子CD28:CTLA-4/B7及CD40/CD40L对T细胞的活化、调节、B细胞的增殖、分化具有重要作用,共刺激分子在多发性硬化中的表达发生明显变化,它们对多发性硬化的发生、发展起着重要的促进作用,选择性阻断共刺激分子可控制疾病的发展,对多发性硬化治疗具有重要的意义。本文综述了CD28:CTLA-4/B7和CD40/CD40L生物学特性、功能,在多发性硬化的发生、发展中的作用以及相关的治疗前景。

协同刺激分子CD28与CD40L在鼠衣原体生殖道感染中的作用

目的初步探讨由CD28和CD40L介导的协同刺激信号在衣原体感染中的作用。方法用1×104IFUs的沙眼衣原体鼠生物型(MoPn)经生殖道感染雌性C57BL/6 J野生型(wt)、CD28 KO、CD80/CD86 KO、CD40L KO及CD40 KO小鼠,免疫荧光法测定生殖道分泌物中衣原体包涵体的数量。初次感染后80天和115天,处死小鼠,分离生殖道,做病理检查;用衣原体EB刺激脾细胞,测定特异性细胞免疫应答水平。结果 CD40LKO及CD40 KO小鼠阴道带菌时间比wt、CD28 KO及CD80/CD86 KO组明显延长;而CD28 KO及CD80/CD86 KO小鼠在初次感染衣原体后,生殖道病理变化比其他组轻。脾细胞因子水平显示,CD40L KO及CD40 KO组IFN-γ产生量较其它组低。结论不同的协同刺激信号在抗衣原体感染中发挥不同的作用,其中CD28分子与保护性免疫无关,但与炎症损伤反应有关;而CD40L-CD40介导的协同刺激信号与衣原体保护性免疫有关。

CD28:CTLA4/B7及CD40/CD40L在炎症性肠病发病机制中的作用

炎症性肠病(IBD)是一组病因未明的累及肠道的免疫反应异常性疾病,T细胞功能失调与IBD发病密切相关。CD28：CTLA4/B7及CD40/CD40L是重要共刺激分子,对调节免疫具有非常重要的作用,可能在IBD发生和发展中起着关键作用。

CD_(40)-CD_(40)L和CD_(28)-B7共刺激信号在同种异体角膜移植免疫排斥反应中的研究进展

角膜移植在器官移植手术中的成功率很高,而术后免疫排斥反应是导致移植失败的主要因素之一。目前已知角膜移植后免疫排斥反应的主要原因是T淋巴细胞介导的免疫排斥反应,而T淋巴细胞的激活是共刺激信号协同作用的结果。CD40-CD40L和CD28-B7共刺激信号在同种异体角膜移植免疫排斥中具有重要意义,而且两者具有协同作用,同时阻断这两个信号比单独阻断任一信号可延长移植物的存活时间。该文对CD40-CD40L和CD28-B7的生物学特性、免疫学功能以及两者的关系进行综述。

急性冠脉综合征患者CD4^+CD28^-T细胞表面OX40和4-1BB表达上调

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+CD28-T细胞表面OX40和4-1BB的表达及其临床意义。方法采用流式细胞术检测57例ACS患者、46例稳定性心绞痛(SA)患者和60例健康体检者(HC)外周血CD4+CD28-T细胞表面OX40和4-1BB的表达。结果 HC组、SA组和ACS组,三组相比CD4+CD28-T细胞表面OX40的表达水平依次升高;HC组、SA组和ACS组,三组相比CD4+CD28-T细胞表面4-1BB的表达水平依次升高。结论 ACS患者外周血CD4+CD28-T细胞表面OX40和4-1BB表达上调。

抗B7-1和抗CD40L单抗延长小鼠皮肤移植物存活实验研究

将C57BL/6小鼠腹部全层皮肤移植于BALB/c小鼠中段背部,实验分组(每组7只小鼠):1.B7-1功能性单抗(4E5)治疗组;2.抗CD40L单抗(4F1)治疗组;3.4E5+4F1治疗组,各单抗以20㎎/㎏的剂量注入腹腔内;4.空白对照组,只注射同等量的生理盐水。注射时间为移植后0﹑1﹑3﹑5d,观察移植皮肤排斥情况。于术后第6天分别杀死各组受体和供体鼠,取受体脾细胞与供体作混合淋巴细胞反应(MLR)。收集培养6d的初次反应细胞,检测再次MLR。结果发现,与对照组相比,各单抗治疗组皮肤移植物存活时间延长(P<0.05﹚;与各单独应用4F1和4E5相比,联合使用4F1和4E5产生一定的协同作用,但未能进一步延长移植物的寿命(P>0.05)。初次单向MLR:4F1﹑4E5和4F1+4E5治疗组受体T淋巴细胞在MLR中表现对供体淋巴细胞特异性低反应性,能有效抑制T细胞对同种异体抗原的初次应答。再次单向MLR:4F1﹑4E5﹑4F1+4E5对供体淋巴细胞在再次反应中仍保持着对同种抗原的反应性,与对照组无显著差异,未能诱导特异性免疫耐受。综上结果证实,anti-CDB7-1mAb(4E5)和anti-CD40LmAb(4F1)作为新型免疫抑制剂,在一定程度上抑制细胞免疫应答,干预排斥反应。

老年2型糖尿病肾病患者CD_(40)配体表达分析

目的分析不同分期老年2型糖尿病肾病(DN)患者T细胞亚群,CD40配体表达水平。方法连续选择近期诊或住院的老年DN 38例(早期DN23例和中、晚期DN15例),另择同期就诊确诊为老年糖耐量异常(IGT)患者19例,同期体检且结论健康老年人21例为对照组,入选对象均接受外周血T细胞亚群表面标志物及其共刺激分子CD28,CD40配体表达分析。结果不同分期的老年DN或患者外周血CD+4水平、CD+4/CD+8比值和CD28、CD40配体水平均显著高于对照组,CD+8水平显著低于对照组(P<0.05或P<0.01),中、晚期DN患者CD+4水平、CD+4/CD+8比值和CD28、CD40配体水平均显著高于早期DN组(P<0.05或P<0.01)。结论老年DN患者存在着明确的外周血T细胞亚群失衡,并随病情分期升级而进一步失衡,老年DN患者CD40配体表达增加,并加重其病情。

CD40/CD40L和B7-1/CD28在小鼠叶酸性肾病中的作用

目的研究CD40/CD40L、B7-1/CD28在肾小管间质浸润的免疫活性细胞、损伤的肾组织固有细胞上的表达以及其可能的作用。方法一次性腹腔注射叶酸制作CD1小鼠叶酸性肾病模型,在第1、2、3、7、14、21天分别处死动物,取其右肾进行免疫组织化学染色;取左肾提取蛋白进行蛋白印迹分析;采血检测BUN、Scr。以抗B7-1功能性单克隆抗体(B7-1mAb)联合叶酸应用,观察21d后,采血行BUN、Scr检测,病理图像分析肾病变区域及保护率。结果小鼠在给予叶酸后第1天,CD40、B7-1在肾小管上皮表达上调,并持续至第21天。通过蛋白印迹半定量检测,CD40在各时间点实验组肾组织表达量均增加5倍以上(P均<0.01),在间质区域浸润的免疫活性细胞上可见CD28和CD40L的表达。经B7-1mAb干预性治疗,小鼠死亡率从47.83%下降到11.01%,P<0.01;BUN、Scr水平明显降低;肾组织保护率从7.45%上升至66.51%。结论在小鼠叶酸性肾病中,肾组织CD40/CD40L和B7-1/CD28的表达上调并参与了肾小管上皮细胞损伤、免疫活性细胞浸润和肾小管间质纤维化的过程。B7-1mAb干预治疗能减轻上述的肾损害,为肾间质纤维化的特异性免疫治疗提供新的途径。