解毒通络保肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织中Col Ⅳ及FN表达的影响

目的探讨解毒通络保肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中Ⅳ型胶原(ColⅣ)及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法高脂饲料喂饲加腹腔注射链脲佐菌素复制DN大鼠模型,随机分为正常对照组、模型组、解毒通络保肾组、阳性对照组(罗格列酮联合贝那普利)。16周后采用免疫组化技术检测各组大鼠肾小球中ColⅣ及FN的表达水平,同时检测血糖、尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白等指标的变化情况。结果模型组大鼠血糖、尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白、ColⅣ及FN的表达明显升高(P<0.01),与模型组相比,解毒通络保肾组大鼠血糖、尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白、ColⅣ及FN的表达均明显降低(P<0.01)。结论解毒通络保肾胶囊能够减少肾组织中ColⅣ、FN含量,抑制肾小球ECM积聚,延缓DN的进展。

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞MMP-2、uPA及Col Ⅳ表达的改变

目的 通过大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad7基因 ,观察转基因MsCMMP 2、uPA和ColⅣ表达的改变 ,以阐明Smad7在肾小球硬化发生中的作用及其机制。方法 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及Westernblot、RT PCR法鉴定 ;采用Westernblot、酶谱分析和RT PCR法 ,检测转染阳性MsC克隆MMP 2、uPA和ColⅣ表达改变。结果 成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆 (S 2 2 ,S 2 6 ) ,并证实其MMP 2蛋白分泌和酶活性明显增加 ,以及uPAmRNA及其蛋白的表达明显增强 ,并伴有MsCColⅣ合成的显著下降。结论 Smad7可能通过增强MsCMMP 2。

健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响

目的观察健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠t-PA、PAI-1、ColⅣ的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组,每组12只。采用线栓法制备MCAO模型,治疗7 d后处死,并在大鼠处死前进行神经功能缺损评分,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及组织型纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的变化,运用免疫组化法测定胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的含量变化。结果与模型组相比,健脾补土小、中、大剂量组神经功能缺损症状评分减少(P<0.05);健脾补土方小、中、大剂量组t-PA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中、大剂量组PAI-1表达明显升高(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中剂量组Col IV表达明显升高(P<0.05)。结论健脾补土法组方能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠神经缺损,可能与其下调t-PA及上调PAI-1的表达,从而减少细胞外基质(ECM)的降解,上调ColⅣ的表达有关。

通肺络补宗气方对肺纤维化大鼠肺功能、MMP9/TIMP1平衡及FN、Col Ⅳ表达的影响

目的:观察通肺络补宗气方对肺纤维化大鼠肺功能、基质金属蛋白酶9(MMP9)/基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)平衡及纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响。方法:健康雄性SD大鼠96只,按随机数字表法分为空白组、模型组、中药初、中、后期干预组和西药初、中、后期干预组,中药各组给予通肺络补宗气方灌胃,西药各组给予N-乙酰半胱氨酸灌胃,均连续给药90 d。实验第19周检测各组大鼠肺功能相关指标变化以及肺组织中FN、ColⅣ、MMP9和TIMP1蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型大鼠肺功能FVC、Cdyn明显降低,肺组织中FN、ColⅣ、MMP9和TIMP1表达水平明显升高;与模型组比较,中药初、中期干预组大鼠肺功能Cdyn明显升高(P<0.05),中西药各干预组大鼠FN、ColⅣ和TIMP1表达水平明显降低,中药初期干预组大鼠MMP9表达水平明显降低。结论:通肺络补宗气方可调节MMP9/TIMP1失衡,减少FN、ColⅣ的过度沉积,进而改善大鼠肺功能,抑制大鼠肺纤维化的发生发展。

复方黄芪合剂对早期DN模型鼠Col-Ⅳ及MMP-2/TIMP-2的影响

为研究复方黄芪合剂 (主药 :黄芪、牛蒡子 )治疗DN的疗效与机理 ,4 5只大鼠以STZ诱导造成糖尿病模型 ,3d后分为 3组 ,B组给予复方黄芪合剂 ( 5g·kg- 1·d- 1)、C组给予洛汀新 ( 4mg·kg- 1·d- 1)药液灌胃 ,D组予等量生理盐水灌胃 (模型组 ) ,另一组大鼠为对照组 (A组 ) ,不作任何处理。 6周后比较各组大鼠的有关指标。结果 :B、C组大鼠的Ccr、Ualb、肾脏基质阳性面积比、Col Ⅳ、MMP 2、TIMP 2诸项指标均高于D组 ,其中GLU、HbAlc、Ccr三项指标B组优于C组。提示 :降低肾脏Col Ⅳ、MMP 2 /TIMP 2的表达 。

MMP-9及ColⅣ在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的 探讨鼻咽癌组织中MMP-9表达情况和ColⅣ分布形式及其意义。方法 应用免疫组化S-P法,对经福尔马林固定、石蜡包埋的41例鼻咽癌标本和30例慢性鼻咽炎(对照组)标本进行了检测。结果(1)MMP-9阳性表达率鼻咽癌组织(90.2%)显著高于对照组(30.0％)(P<0.01);(2)鼻咽癌组织中MMP-9阳性表达级别Ⅲ-Ⅳ期高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05)有颈部淋巴结转移也明显高于无颈部淋巴结转移(P<0.01);鼻咽癌组织中MMP-9阳性表达率与临床分期和颈部淋巴结转移无明显关系;(3)鼻咽癌组织中ColⅣ分布均呈崩解缺失型,未见包裹型。结论 MMP-9在鼻咽癌组织扩散中起重要作用,其表达强度与鼻咽癌病期进展和颈部淋巴结转移关系密切,可作为判断鼻咽癌恶性度的一个重要生物学指标。

人参皂苷对糖尿病肾病大鼠体内ColⅣ、Nrf2和NQO1表达的影响

目的研究人参皂苷对糖尿病肾病大鼠体内Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、Nrf2和醌氧化还原酶1(NQO1)表达的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组),糖尿病肾病模型组(DN组),糖尿病肾病模型加人参皂苷治疗组(MG组),每组10只。对3组大鼠的体重、血糖和生化指标分别进行记录;HE染色观察大鼠肾组织形态;Western blot检测大鼠ColⅣ、Nrf2和NQO1蛋白并比较,用RT-PCR法检测mRNA的相对表达量。结果实验前3组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),实验后与NC组大鼠的体重和血糖比较,DN组大鼠显著降低,血糖值显著升高(P<0.05);与DN组大鼠比较,GM组大鼠的体重和血糖值明显得到改善(P<0.05)。DN组生化指标的浓度明显高于NC组,而Ins明显降低(P<0.05);和DN组生化指标比较,GM组的浓度明显降低,Ins明显升高(P<0.05);与NC组大鼠的肾组织形态比较显示,DN组大鼠的情况明显较差,并且肾小球系膜细胞与高度增生出现;GM组大鼠的肾组织形态比DN组大鼠有明显的改善。蛋白和mRNA比较显示,DN组大鼠ColⅣmRNA和蛋白的表达均比NC组显著增高(P<0.05),Nrf2、NQO1表达明显减少,MG组和DN组大鼠比较,经过人参皂苷治疗后,其ColⅣ表达量明显降低,Nrf2、NQO1表达量显著升高(P<0.05)。结论人参皂苷可以抑制大鼠体内ColⅣ的表达,提高Nrf2和NQO1蛋白的表达,从而改善糖尿病肾病大鼠血糖及肾功能水平。

大肠癌ColⅣ、LN及FN的免疫组化研究

目的 :检测基底膜主要成分层粘连蛋白 (LN)、纤维粘结蛋白 (FN)及Ⅳ型胶原纤维 (ColⅣ )在大肠癌中的表达以及与浸润、转移的关系。方法 :免疫组化标记大肠癌组织中ColⅣ、LN及FN。结果 :大肠癌组织中基底膜成分存在不同程度的缺失 ,表现为ColⅣ、LN呈不连续、片状分布 ;癌组织分化越低 ,LN缺失越明显 ;ColⅣ表达与组织类型有显著关系 ,而与分化程度无关。一般腺癌阳性率明显高于粘液腺癌及印戒细胞癌 ;DukesB、C期大肠癌ColⅣ表达阳性率低于A期大肠癌 ;FN表达与上述因素关系不大。结论 :大肠癌基底膜成分的缺失与其侵袭、转移能力有关 ,尤其是ColⅣ的缺失可能标志其具较强的侵袭、转移能力。

人血清白蛋白对HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1、MMP-9mRNA表达水平的影响

目的探讨人血清白蛋白对体外培养的HK-2细胞Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,col-Ⅳ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达水平的影响。方法 HK-2细胞随机分为4组。A组细胞(空白对照组),未添加刺激物;B组、C组和D组细胞分别与5 mg.mL-1人血清白蛋白培养12、24、48 h。在0、12、24、48 h应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测col-Ⅳ、TIMP-1和MMP-9 mRNA的相对表达量。结果人血清白蛋白刺激HK-2细胞可上调col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA的表达,且随着刺激时间延长,表达水平逐渐增高。B、C、D 3组HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01)。人血清白蛋白刺激HK-2细胞,MMP-9 mRNA的表达随着刺激时间的延长,表达水平先增高后下降。B、C 2组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01),D组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平低于A组(P<0.05)。相关性分析结果显示,TIMP-1 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达呈正相关(r=0.987,P<0.05),MMP-9 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达无关(r=0.146,P>0.05)。结论人血清白蛋白刺激HK-2细胞可能通过促进col-Ⅳ的合成及上调TIMP-1、下调MMP-9使细胞外基质积聚,参与肾间质纤维化。

慢性肾炎血瘀证血尿Col-Ⅳ LN的改变及丹参注射液的作用初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎血瘀证患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层粘蛋白(LN)含量的变化与中医本虚证、血瘀证症状积分的关系及临床应用价值;观察复方丹参注射液治疗前后的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化,探讨复方丹参注射液治疗肾脏纤维化的疗效及可能机制。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎血瘀症患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量,观察以上指标与中医本虚证及血瘀证症状积分的关系;67例慢性肾炎患者随机分为35例复方丹参治疗组和32例对照组,对照组给以潘生丁、雷公藤多苷等常规处理,伴肾病综合征者加用激素,血压高者加用降压药,治疗组给予以上对照组治疗+复方丹参注射液50mL静脉滴注。比较治疗前后两组的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化。结果:与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05);各本虚证型血、尿Col-Ⅳ及尿LN较健康者均明显增高(P<0.01),气阴两虚与健康者相比,血LN明显增高(P<0.01),气阴两虚与肺肾气虚比较,血Col-Ⅳ及血、尿LN均明显增高(P<0.05),脾肾阳虚与肝肾阴虚比较,尿Col-Ⅳ明显下降(P<0.01);各血瘀证组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05,P<0.01),而各血瘀证组间两两比较,各指标均无显著差异,Spearm an相关分析结果显示,血、尿Col-Ⅳ与LN水平与血瘀证积分均无线性相关关系;治疗组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN均明显下降(P<0.05)。治疗组与对照组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN差值比较有显著差异(P<0.05)。Spearm an相关分析:治疗前后血Col-Ⅳ与血LN二者水平的改变呈显著正相关(P<0.01)。结论:肾脏纤维化可能是慢性肾炎血瘀证的内在物质基础,肾脏纤维化是肾脏局部的血瘀状态,即所谓的微型癥积。外在的血瘀证症状积分难于体现肾脏局部的瘀血严重程度。复方丹参注射液对于减轻慢性肾炎的纤维化程度,延缓纤维化进展可能有一定的益处,其抗肾脏纤维化作用可能是通过多个途径而实现的。对延缓肾脏纤维化的治疗提供了又一药物选择。

大肠癌患者围手术期血清bFGF、ColⅣ、HA的变化及临床意义

目的：探讨大肠癌患者围手术期血清碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和透明质酸(HA)的变化及其临床意义。方法：分别采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)和放射免疫法测定66例大肠癌患者手术前后血清bFGF、ColⅣ和HA的含量，并与健康对照组比较分析。结果：大肠癌组治疗前bFGF、ColⅣ和HA均增高，与对照组比较有显著性差异(P<0．01)：且与淋巴结转移和肿瘤临床Duke's分期有明显相关性(p<0．01)。行根治性手术组术后bFGF、ColⅣ和HA均有显著性降低(P<0．01)，而姑息性手术组bFGF、ColⅣ和HA则无显著性降低(P>0．05)。结论：大肠癌患者血清bFGF、ColⅣ和HA的水平与肿瘤的浸润转移和病程有关，检测大肠癌患者血清bFGF、ColⅣ和HA的变化，有助于估计患者的预后。

1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染的高糖条件下HMC细胞TGF-β1/Smad3及Col-Ⅳ表达的影响

目的观察高糖环境下1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad3、Col-IV表达水平的变化,探索1,25(OH)_(2)D_(3)是否可通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。方法HMC细胞传代培养,miR-130b mimics及miR-130b inhibitor经LipofectamineTM 2000转染肾小球系膜细胞,依据分组加入1,25(OH)_(2)D_(3)1.0×10^(-8) mol/L,37℃、5%CO_(2)饱和湿度条件下继续培养48 h,共分为6组:①空白对照组;②细胞+无水乙醇组(A组);③细胞+miR-130b mimics+无水乙醇组(B组);④细胞+miR-130b mimics+1,25(OH)_(2)D_(3)组(C组);⑤细胞+miR-130b inhibitor+无水乙醇组(D组);⑥细胞+miR-130b inhibitor+1,25(OH)_(2)D_(3)组(E组)。以实时荧光定量PCR检测细胞miR-130b及TGF-β1、Smad3、Col-IVmRNA的表达水平,以Western blot方法检测细胞TGF-β1、Smad3、Col-IV蛋白的表达水平。采用多组间比较的单因素方差分析及组内两两比较采用LSD、Dunnett s T3法比较各组数据。结果空白对照组与A组细胞miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平,差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,B组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显升高(P<0.05),D组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。经1,25(OH)_(2)D_(3)治疗发现,与B组相比,C组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05),与D组相比,E组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。结论1,25(OH)_(2)D_(3)可降低miR-130b转染肾小球系膜细胞miR-130b及纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Col-IV的表达水平,1,25(OH)_(2)D_(3)可能通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。

怡肾汤对5/6肾切除大鼠残肾组织形态与Col-Ⅳ及MMP-2的干预作用

目的:研究怡肾汤在改善肾功能和减轻肾小球硬化中的作用。方法:将72只SD大鼠随机取8只为正常对照组,其余分为模型组(n=32)及怡肾汤治疗组(n=32)。模型组和治疗组大鼠行5/6肾切除术。术后,模型组大鼠予以自由饮食、生理盐水灌胃1ml·100g-1·d-1;怡肾汤治疗组大鼠予以怡肾汤灌胃(0.3ml·100g-1·d-1),1次/d。于术后第5、6、7、8周4个时间点分别分批处死大鼠,用PAS染色观察大鼠残肾肾组织形态学改变,计算肾小球硬化指数(GSI);用免疫组织化学方法分别检测肾组织中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果:(1)细胞形态学观察示:模型组中肾小球内细胞数目增多明显,基质增多,有新月体形成;系膜区增宽染色深,毛细血管开放不良甚至闭塞,肾小囊囊壁增厚。治疗组细胞增生明显轻于模型组,毛细血管开放较好,肾小管结构基本正常。治疗组和模型组大鼠肾小球呈不同程度硬化表现,治疗组GSI显著低于模型组(P<0.05)。(2)免疫组化发现:与正常组和治疗组比较,模型组肾组织中Ⅳ型胶原表达强烈,肾小球硬化严重;怡肾汤治疗组大鼠Ⅳ型胶原表达减少而MMP-2表达强于模型组。结论:Ⅳ型胶原在5/6肾切除大鼠肾组织中有较高的表达。怡肾汤可减轻肾组织中炎性细胞浸润和细胞增生,降低Ⅳ型胶原的表达、增加MMP-2的表达,延缓肾小球硬化进程和肾功能恶化的速度。

MR扩散成像结合血清COLⅣ、CEA水平在诊断结直肠癌肝转移中的临床价值

目的分析MR扩散成像(DWI)结合血清Ⅳ型胶原(COLⅣ)、癌胚抗原(CEA)水平在诊断结直肠癌肝转移中的临床价值。方法选取2016年7月至2018年2月我院收治的结直肠癌患者370例为研究对象,将发生肝转移者纳入转移组(n=50),未转移者纳入未转移组(n=320),均接受常规MRI、MRI+DWI检查(b=0、1000s/mm2),分析MRI影像特点、表观扩散系数(ADC),并检测两组血清COLⅣ、CEA水平,对比肝转移不同亚型患者ADC与血清COLⅣ、CEA水平,分析MRI+DWI结合血清学指标的诊断效能。结果肝转移灶在MRIT2WI上呈等或稍高信号,部分信号不均匀,边缘呈毛刺或分叶状,T1WI上呈等或稍低信号,在DWI上呈明显高信号,在ADC图上呈低信号;b=1000s/mm2时,转移组ADC低于未转移组,且转移组血清COLⅣ、CEA水平高于未转移组(P<0.05);结直肠癌肝转移患者中,混合型ADC低于促结缔组织增生型、推压型,促结缔组织增生型ADC低于推压型(P<0.05),而三亚组血清COLⅣ、CEA水平比较差异无统计学意义(P>0.05);MRI+DWI联合血清COLⅣ、CEA诊断结直肠癌肝转移的灵敏度、特异度、准确度、kappa值分别为92.00%、89.06%、89.46%、0.643,均高于MRI、MRI+DWI诊断(P<0.05)。结论 MRI+DWI联合血清COLⅣ、CEA可较好诊断结直肠癌肝转移,值得临床推广实践。

血清HA、LN、COLⅣ、PLD含量测定对肝纤维化诊断的价值

作者采用放射免疫法测定了20名健康输血员及106名各类肝病病人血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(COL Ⅳ)及用比色法测定了脯氨酸肽酶(PLD)降解产物等4项指标,以探讨它们对肝维化的诊断价值。1

慢性肾小球肾炎血、尿Ⅳ型胶原及尿黏蛋白的改变与肾脏病理关系初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层黏蛋白(LN)含量的变化与肾脏病理改变的关系及临床应用价值。方法:(1)采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量。(2)慢性肾炎患者均接受肾活检病理检查。观察以上指标与肾脏病理改变的关系。结果:(1)与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05)。(2)系膜细胞增生Ⅲ级组、Ⅳ级组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。系膜细胞增生程度与血Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.05)。(3)各系膜基质增生组与健康组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均显著增高(P<0.05)。系膜基质增生程度与尿Col-Ⅳ水平关系最为密切(P<0.05)。(4)肾小球球性硬化10%～25%组与健康人比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。硬化率与血LN关系最密切(P<0.05)。(5)间质纤维化程度与尿Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.01)。(6)小管萎缩≤10%者较健康者,尿Col-Ⅳ、LN均显著增高(P<0.01)。小管萎缩>5%者较健康者,血Col-Ⅳ明显增高(P<0.01)。小管萎缩>10%者尿Col-Ⅳ则明显降低(P<0.05)。(7)血Col-Ⅳ水平与血LN水平正相关(P<0.01)。尿Col-Ⅳ水平与尿LN水平正相关(P<0.01)。但血、尿Col-Ⅳ水平之间及血、尿LN水平之间均无线性相关关系。结论:(1)肾功能正常的慢性肾炎患者血、尿Col-Ⅳ与LN水平显著高于健康人群。(2)血与尿Col-Ⅳ、LN水平的变化可在一定程度上反映肾脏病理的改变,与系膜细胞基质的增生程度、间质纤维化、肾小球球性硬化有一定的关系。但血Col-Ⅳ、LN水平主要反映了Col-Ⅳ、LN代谢的活跃,与系膜细胞增生关系更为密切;而尿Col-Ⅳ、LN水平则与基质增生、间质纤维化关系更为密切。它们之间均存在着相关关系。因此监测血与尿Col-Ⅳ、LN的动态变化,综合判断,对于监测肾脏纤维化倾向有一定价值。

层粘连蛋白、纤粘连蛋白及Ⅳ型胶原抗血清对小鼠胚泡着床的影响

文中报道了子宫角单次注射层粘连蛋白 (LN)抗血清、纤粘连蛋白 (FN)抗血清以及Ⅳ型胶原 (ColⅣ )抗血清对小鼠胚胎植入的作用。选用 6 0只 30 g左右的昆明品系雌性成年小鼠 ,与有生殖能力的雄性小鼠按 1∶1合笼 ,翌晨检查外阴 ,以出现阴栓为妊娠第 1天。于妊娠第 3天下午 ,给每个雌性小鼠左侧子宫角单次注射 5 μlLN抗血清、FN抗血清或ColⅣ抗血清作为实验组 ;给同一小鼠右侧子宫角注射 5 μl正常兔血清 (Normalrabbitserum ,NRS)作为对照组。于妊娠第 8天剖检受试雌鼠 ,观察并统计每侧子宫角着床的胚胎数 ,并以t检验。实验发现 :LN抗血清和正常兔血清处理的子宫角 (n =19)着床胚胎数 (平均值±标准差 )分别为 2 0 7± 1 0 6和 5 15± 1 14;FN抗血清和正常兔血清处理的子宫角 (n =2 4)着床胚胎数分别为 1 83± 1 46和 5 6 6± 2 0 2 ;ColⅣ抗血清和正常兔血清处理的子宫角 (n =17)着床胚胎数分别为 2 0 7± 1 0 3和 5 71± 2 0 2。三组实验侧着床胚胎数均极显著低于对照侧的着床数 (P <0 0 1)。结果表明 ,子宫角单次注射 5 μlLN抗血清。

COL4A1基因多态性与中国女性骨密度关系分析

目的 研究COL 4 A 1基因多态性与中国农村女性骨密度关系.方法 采用双能X线吸收仪对343名女性研究对象进行腰椎及股骨扫描,应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测COL4 A 1基因（谷酰氨酸Q 1334 H组氨酸）多态位点基因型,用广义线性模型分析此位点多态性与腰椎2～4及股骨骨密度关系.结果 在调整环境危险因素后,均未显示COL 4 A 1基因H 1334 H基因型与股骨颈、腰椎2～4骨密度相关（P=0.409、0.705）.结论 在中国农村女性人群中COL 4 A 1基因Q 1334 H多态性与股骨颈、腰椎2～4骨密度无显著相关性.

乳腺癌中Ⅳ型胶原的表达及临床意义

目的研究Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法用免疫组化方法检测108例乳腺癌及8例良性肿瘤组织中ColⅣ的表达情况,分析ColⅣ与乳腺癌患者临床资料间的关系及预后价值。结果8例良性肿瘤ColⅣ表达完整呈闭和线状。108例乳腺癌中,ColⅣ表达完整,局部断裂、碎片状或缺如分别为32例,11例,65例。ColⅣ不完整或缺如与差预后,腋窝淋巴结受累、肿瘤大小、TNM分期呈正相关。结论乳腺癌ColⅣ完整表达或局部断裂者比碎片缺如者生存期长(5年生存期)。因此,Ⅳ型胶原可作为肿瘤侵袭能力的参考指标。

转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原表达的改变（摘要）

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad 2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制.方法经磷酸钙介导将含有Smad 2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变.结果成功建立高表达Smad 2蛋白的阳性MsC克隆(T-12、T-31、T-35、T-40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调.阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2.4倍(P＜0.05),mRNA为对照组的2.7倍(P＜0.05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组的2.9倍(P＜0.01),mRNA为对照组的3.3倍(P＜0.01).结论TGF-β/Smad信号转异途径中Smad 2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子.