回回甘松饮含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖、周期及FN，Col1α1，Col4α1基因表达的影响

目的:探讨回回甘松饮(HGY)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖、细胞周期、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原α1多肽链(Col1α1)、Ⅳ型胶原α1多肽链(Col4α1)基因表达的影响。方法:采用中药血清药理学方法制备含药血清,将大鼠随机分为空白对照组(给予蒸馏水10 mL·kg-1)、格列喹酮(10 mg·kg-1)组、HGY(10,5 g·kg-1)组,每组各10只,每日灌胃给药2次,连续3 d后取大鼠血清。选取HBZY-1细胞株进行实验,共分为5组:10%空白血清组、高糖+10%空白血清组、高糖+10%格列喹酮含药血清组(10 mg·kg-1)、高糖+10%HGY含药血清组(10,5 g·kg-1)。细胞以2×104/mL接种于96孔细胞培养板上,分别于药物处理后24,48,72 h时,采用CCK-8法检测MCs增殖情况;细胞以2×104/mL接种于25 cm2细胞培养瓶中,于药物干预48 h时收集细胞,分别采用流式细胞术检测细胞周期变化,real-time PCR方法检测FN、Col1α1及Col4α1 mRNA的表达。结果:与10%空白血清组比较,高糖(30 mmol·L-1)能够诱导MCs增殖(P<0.01),并能使G0/G1期细胞比例减少(P<0.01),S期比例增加(P<0.01),能够使MCs中FN,Col1α1,Col4α1 mRNA表达量明显升高(P<0.01)。在上述含药血清干预的48,72 h时,各含药血清组MCs均受到一定程度抑制,发生G1/S期阻滞,并可降低高糖条件下MCs中FN,Col1α1,Col4α1 mRNA表达量,与高糖+10%空白血清组比较,具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:HGY含药血清可使大鼠MCs在高糖环境下发生G1/S期阻滞,抑制其增殖,其机制可能与调控FN,Col1α1及Col4α1 mRNA表达有关。

COL4A1基因多态性与230例健康男性体检人群骨密度关系研究

目的研究COL4A1基因多态性与健康男性骨密度关系。方法采用病例-对照研究方法。收集来自包头医学院第一附属医院进行健康体检的230例男性流行病学资料,用双能X线吸收仪对研究对象进行骨扫描。应用PCR-RFLP方法检测COL4A1基因型。采用Logistic回归法分析COL4A1多态性与骨密度间的关系。结果调整主要混杂因素后,COL4A1基因TT基因型与男性骨量流失及骨质疏松无显著相关性(P=0.785)。结论 COL4A1基因TT基因型与男性体检人群骨量流失和骨质疏松无显著相关性。

COL4A1基因SNPrs3783107多态性与女性骨密度的关系

目的研究COL4A1基因多态性与包头市区女性骨密度的关系。方法采用病例-对照研究方法,收集在包头医学院第一附属医院进行健康体检的596例女性流行病学资料,用双能X线吸收仪对研究对象进行骨扫描。应用PCR-RFLP方法检测COL4A1基因型。用广义线性模型分析此位点多态性与腰椎及股骨颈骨密度关系。结果在调整环境混杂因素前后,均显示COL4A1基因SNPrs3783107突变基因型与绝经前女性股骨颈和腰椎骨密度降低呈显著相关(P=0.011、0.004),但与绝经后的骨密度无显著相关性(P=0.090、0.093)。结论 COL4A1基因SNPrs3783107多态性与包头市区绝经前女性股骨颈及腰椎骨密度显著相关。

转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)促进缺氧诱导的肾小管间皮细胞转分化

目的研究长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)参与缺氧诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化(EMT)调控的机制。方法 HK-2肾小管上皮细胞缺氧处理0、12、24、48、72 h,实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平。HK-2细胞分别感染特异性lncRNA慢病毒和miRNA慢病毒下调MALAT1和miR-100-3p,采用实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平,免疫荧光细胞化学染色检测上皮钙黏素(ECD)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1)的表达。构建单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,设置单侧输尿管未结扎组(对照组)、结扎7 d组(UUO7 d组)、结扎3周组(UUO 3周组)、腺相关病毒(AAV)组。在UUO动物模型中,采用AAV感染下调MALAT1水平后,采用HE和Masson染色检测各组肾组织病变情况,采用免疫组织化学染色检测肾组织ECD和α-SMA的表达。结果在缺氧诱导的HK-2细胞中,随缺氧刺激时间延长,MALAT1表达逐渐升高,而miR-100-3p表达逐渐减低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,慢病毒感染下调MALAT1水平,miR-100-3p水平升高,同时ECD表达增加、COL4A1和α-SMA表达降低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,转染下调miR-100-3p水平,MALAT1水平无显著变化,miR-100-3p水平降低,ECD表达降低,COL4A1和α-SMA表达增加;体内实验:与对照组相比,UUO动物模型组MALAT1表达显著升高,而miR-100-3p表达明显降低; AAV组与3周组比较,ECD表达显著升高,而α-SMA表达显著降低。结论 MALAT1可通过负向调控miR-100-3p,进而促进COL4A1表达,促进缺氧诱导的HK-2细胞EMT,并且可以促进UUO肾病小鼠肾脏纤维化。