银杏叶提取物对大鼠冷应激引起的胃肠动力紊乱及NO含量变化的影响

目的探讨银杏叶提取物对冷束缚应激引起的胃肠动力紊乱及NO含量变化的影响。方法采用冷束缚应激的方法建立肠功能紊乱模型,应用葡聚糖蓝2000(DB2000)作为染料观察EGb和冷束缚应激状态对胃排空率、小肠推进率的影响,并利用比色法观察大鼠胃肠组织、血浆中NO含量的变化。结果冷束缚应激可抑制大鼠胃排空速度(P<0.05)及小肠推进率(P<0.01),EGb干预可明显拮抗冷束缚应激引起的胃排空速度及小肠推进率降低(P<0.05);EGb可以降低冷束缚应激引起的血浆中NO含量的升高(P<0.01)。结论EGb对冷束缚应激所诱发的肠道功能紊乱具有正向调解作用,NO可能在这一过程中发挥了作用。

肠道感染与应激对实验兔肠运动功能的影响

目的 研究肠道感染、应激对肠道运动功能的影响。方法 应用寒冷束缚应激或 (和 )E .Coli 0 15肠道感染兔模型研究应激、肠道感染对末端回肠、远端大肠动力指数、形态学和肠神经组织的影响。其中肠运动功能指标为肠壁埋置银电极记录肠肌电计算出的动力指数 ,以实验期平均指数 /对照期平均指数× 10 0来表示。肠肌间神经丛检查采用NADPH染色法。实验分组包括对照组、单纯应激组、单纯肠道感染组、感染加应激组和感染后应激组 (分别于感染停止后 1周、2周施加寒冷束缚应激 )。结果 应激可增强兔末端回肠和远端大肠的动力指数 ;单纯肠感染在感染停止 1周、2周时肠动力指数与对照期无差别。感染加应激组在肠道感染停止后 1周、2周时末端回肠和远端大肠的动力指数较单纯应激后 1周、2周时和单纯感染后 1周、2周时的动力指数要高 ;在感染停止后 1周、2周施加寒冷应激 ,可使兔末端回肠和远端大肠的动力反应更加强烈 (动力指数分别为对照期的 45 2 96(3 5 14 %、40 5 19(12 74% ,P <0 0 1)。光镜检查未发现各组实验动物肠黏膜或肌层结构受到损伤 ,黏膜固有层内未发现中性粒细胞浸润 ;感染后应激组在感染停止后 2周末端回肠、远端大肠NADPH染色显示其肠肌间神经丛神经纤维较对照组明显减少。结论 应激和?

以内脏高敏感为靶点的肠易激综合征大鼠模型评价研究

目的以内脏敏感性为靶点,评价比较慢性母婴分离和急性冷束缚应激肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)动物模型。方法分别采用慢性母婴分离和急性冷束缚应激方法建立动物模型,通过腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)、结肠黏膜超微特征、肥大细胞活化程度及结肠促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing factor,CRF)表达评价内脏敏感性及致敏因素。结果慢性母婴分离和急性冷束缚应激方法均能模拟IBS内脏高敏感和结肠动力特征,而慢性母婴分离应激组在高容量AWR评分、结肠黏膜超微特征改变、肥大细胞活化及结肠CRF表达中较急性冷束缚应激组更具有显著性差异。结论在以内脏敏感性为靶点研究的IBS动物模型中,慢性母婴分离造模方法更具有优势。

冷应激溃疡大鼠下丘脑和肾上腺一氧化氮合成酶2与内皮素-1表达及针刺保护机制的研究

目的观察针刺足三里穴对急性胃溃疡的保护效应 ,并探讨其作用机理。方法将SD雄性大鼠随机分为正常对照组、单纯应激组、针刺预防应激组 ,应用胃粘膜溃疡指数的计算和RT PCR的方法研究针刺足三里对大鼠的冷应激性溃疡的保护和下丘脑及肾上腺一氧化氮合成酶 (NOS) 2和内皮素 (ET) 1的表达情况 ,经图像分析系统照相并进行半定量。结果针刺足三里穴可以明显减少冷应激造成的溃疡指数。下丘脑NOS2和ET 1均参与了冷应激溃疡病理过程 ,针刺足三里穴可以下调其表达。在应激过程中 ,肾上腺中并无NOS2和ET 1的病理性表达。结论针刺对冷应激溃疡具有保护作用 ,该种保护作用是通过对抑制下丘脑NOS2和ET 1的病理性表达来实现的 ,NOS2和ET 1在肾上腺中不参与应激过程。

虎杖苷对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用

目的研究虎杖苷(polydatin,PD)对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用及其与抗氧化的关系。方法制备小鼠无水乙醇型、吲哚美辛(消炎痛)型、大鼠束缚-冷冻(restraint-cold stress,RCS)应激型胃黏膜损伤模型,测定胃黏膜损伤指数;测定大鼠血清SOD活性和MDA含量。结果PD可剂量依赖性地抑制实验性急性胃黏膜损伤。PD可使大鼠束缚-冷冻应激型胃黏膜损伤过程中血清中升高的MDA含量降低,可使降低的SOD水平回升。结论PD对实验性急性胃黏膜损伤具有保护作用,其作用机制与PD抗氧化有关。

冷束缚应激大鼠十二指肠电-机械活动变化

用双银球电极 应变片记录了冷束缚应激大鼠十二指肠的电 机械活动 ,发现冷束缚应激大鼠十二指肠慢波平均频率降低 ,平均振幅降低 (P <0 .0 0 1 ) ;十二指肠运动频率降低 ,振幅增加 (P <0 .0 0 1 ) ;十二指肠慢波及运动的频率和振幅变异系数都增加 ;移行性复合运动 (MMC)周期缩短。结合本室冷束缚应激大鼠肠道P物质 (SP)和血管活性物质 (VIP)含量的变化及其他研究结果 ,提示 :冷束缚应激大鼠十二指肠电 机械活动变化与十二指肠SP。

海洋平台导管架Y形节点焊接冷裂性评价

海洋平台结构的不均匀性与焊接技术的局限性导致焊接接头位置易产生焊接冷裂纹等缺陷进而导致开裂。针对该问题,文中基于SYSWELD软件对海洋平台E36高强钢材质的导管架典型Y形管节点位置处的焊缝进行建模并对其焊接过程进行了数值模拟。根据焊后应力场获得焊后拘束应力,从而实现对其冷裂性的定量评价。通过热源校核得到的热循环曲线实现热源模型的施加,进而分别对管内壁焊根处和管外壁焊趾处的轴向、周向及径向拘束应力沿着相贯线的变化进行了分析,并将各方向的危险点拘束应力与材料的临界拘束应力进行了对比。结果表明,导管架Y形管节点的焊后最大拘束应力为492 MPa,小于E36高强钢的临界拘束应力,即导管架Y形管节点的焊根和焊趾处均不会发生焊接延迟开裂。

脑室注射GABA对小鼠实验性胃溃疡及其粘液屏障的影响

报道小白鼠脑室注射ＧＡＢＡ（４ｍｌ）对无水乙醇（０．ｌｍｌ灌胃）、盐酸（０．２Ｎ，０．２ｍｌ灌胃）、消炎痛（３２ｍｇ·ｋｇ－１肌肉注射）和冷束缚应激（１℃）四种不同实验性胃溃疡及其粘液屏障的影响。实验结果表明：乙醇、盐酸和冷束缚诱导胃溃疡时，胃壁粘液量都显著减少，而消炎痛则无变化。脑室注射ＧＡＢＡ能加剧乙醇诱导型、消炎痛诱导型这两种胃溃疡，但对胃壁粘液量无明显影响。而脑室注射ＧＡＢＡ能抑制盐酸诱导型、冷束缚应激型胃溃疡，并使固壁粘液明显升高。本文对中枢ＧＡＢＡ能机制参与胃溃疡及胃粘液调节作了进一步探讨。

拘束冷应激对大鼠肾脏热休克蛋白表达和血清皮质醇含量的动态影响

目的:研究拘束冷应激对大鼠肾脏组织热休克蛋白(heat shock protein 70,HSP70)表达和血清中皮质醇(Cortisol,CORT)含量的动态影响及可能的机制。方法:选取50日龄清洁级大鼠77只,随机分为7组,即0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h。采用拘束冷应激法,应激相应时间后,用免疫组织化学方法观察大鼠肾脏组织HSP70的表达,并检测血清中CORT含量。结果:血清中的CORT浓度在1.5 h呈现最高值,其余各时点变化不明显。光镜下可见HSP70在肾小球毛细血管内皮细胞的胞核及肾小管上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达。肾脏中HSP70的表达首先呈增加的趋势,1.5～2.5 h HSP70持续高表达(P<0.01),之后下降(P<0.05)。结论:适当强度的拘束冷应激能诱导肾脏组织中HSP70的合成,并且随着时间的延长而增加,但过度的拘束冷应激则可能降低或阻断肾脏HSP70的表达。

瘦素对低温导致的大鼠胃黏膜应激性溃疡的预防作用研究

目的明确瘦素(Leptin)干预对胃黏膜中过氧化物和凋亡相关因子的影响,探讨瘦素对持续冷刺激导致的大鼠胃溃疡的作用。方法将腹腔内注射瘦素的大鼠置于4℃的环境下进行冷刺激,4h后取胃组织采用硫代巴比妥酸比色法(TBA法)检测胃黏膜中脂质过氧化主要产物丙二醛(MDA)的含量,双硫对硝基苯甲酸比色法测定谷胱甘肽(GSH)水平,通过免疫组织化学的方法检测Caspase-3的表达。结果与对照组相比,持续冷刺激组的胃MDA水平明显提高(P<0.01),GSH水平降低(P<0.01),Caspase-3表达增加(P<0.01)。Leptin干预阻止了冷刺激组动物MDA水平的提高(P<0.01)和胃黏膜中GSH含量的降低(P<0.01),Caspase-3表达也明显减少(P<0.01)。结论持续的冷刺激通过激活氧化剂降低了胃组织的抗氧化能力,通过提高Caspase免疫活性诱导凋亡。Leptin的存在逆转了这些机制并抑制凋亡,对胃黏膜具有保护作用。

冷水束缚应激对大鼠脊髓背根神经节、胃组织内TRPV1 mRNA及血清SOD、MDA的影响

目的探讨不同时间的冷水束缚应激(WIRS)对大鼠脊髓背根神经节(DRG)和胃内瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)mRNA及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法选取40只雄性Wistar大鼠,随机分成4组:正常组(NC组,n=10)、WIRS 2 h组(n=10)、WIRS 4 h组(n=10)和WIRS 6 h组(n=10),NC组不造模;WIRS 2 h组、WIRS 4 h组、WIRS 6 h组均用WIRS法复制急性胃黏膜病变模型,大鼠WIRS时间分别为2、4、6 h。于不同作用时间观察大体胃黏膜损伤变化,评定胃黏膜损伤指数;HE染色观察胃黏膜的损伤程度;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠胸段DRG和胃内的TRPV1 mRNA的表达情况;测定各组大鼠血清中SOD、MDA的活力。结果 WIRS各组大鼠胃黏膜损伤明显,溃疡指数明显升高(P<0.05)。与NC组比较,WIRS各组胃组织内TRPV1 mRNA的表达均降低(P<0.05);胸段DRG内TRPV1 mRNA在WIRS 6 h组的表达明显降低(P<0.05)。血清SOD活力先增高后降低,4 h时达到高峰;MDA随应激时间延长呈增高趋势,但在应激4 h时出现一下降过程。结论 TRPV1参与了急性胃黏膜病变的发生机制;血清中SOD、MDA的活力变化较好地反映出应激时机体氧化和抗氧化能力,有望在发现和评估应激性溃疡的发生中起重要作用。

氯甲基蛋氨酸对冷冻-束缚应激大鼠消化器官组织学结构的影响

为探讨氯甲基蛋氨酸对应激性胃溃疡的预防效果,制备了大鼠急性冷冻-束缚应激模型,通过观察冷冻-束缚应激所致大鼠消化系统器官的损伤性变化及氯甲基蛋氨酸对应激状态下大鼠消化器官组织结构的影响,判定氯甲基蛋氨酸对应激性胃溃疡的作用。结果表明,氯甲基蛋氨酸对大鼠冷冻-束缚应激性胃溃疡的消化系统器官具有明显的保护作用。

急性拘束冷应激对大鼠血清中几种生化指标含量的动态观察

目的研究拘束冷应激对大鼠血清中促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）、肌酸激酶（CK）和丙氨酸转氨酶（ALT）浓度的动态变化及可能的机制。方法50日龄清洁级大鼠56只，随机分为7组，即0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5和3．0h组。采用拘束冷应激法，在应激相应的时间后，检测大鼠血清中ACTH、CORT、CK、ALT浓度和胃溃疡指数的测定。结果①大鼠血清中的ACTH浓度随着应激时间的增加呈现迅速升高的趋势，0．5h达到最高值，之后又迅速下降，逐渐趋于平缓；②血清中的CORT浓度呈现逐渐升高的趋势。1．5h达到最高值，之后又迅速下降，逐渐趋于平缓；③血清中的CK和ALT活力显著升高，且随着冷应激时间的增加而递增；④大鼠胃溃疡指数在应激初期呈现迅速升高的趋势，2．5h时达到最高值。结论拘束冷应激可使大鼠血清中的ACTH和CORT的浓度上升，至最高值后迅速下降；而血清中CK和ALT的浓度则随着拘束冷应激时间的增加而递增。拘束冷应激导致大鼠发生急性胃溃疡，应激2．5h时最严重，提示拘束冷应激大鼠模型的造模时间以2．5h为最佳。

冷拘束应激对大鼠心脏和肝脏HSP70表达及血清中CK、ALT含量的影响

目的通过研究冷拘束应激中大鼠心脏和肝脏组织热休克蛋白(HSP70)表达量以及血清中肌酸激酶(CK)、谷丙转氨酶(ALT)含量的变化,探讨冷拘束应激对心脏和肝脏的影响和差异。方法选取50日龄清洁级大鼠77只,随机分为7组,即0h,0.5h,1.0h,1.5h,2.0h,2.5h,3.0h。采用拘束冷应激法,应激相应时间后,用免疫组织化学方法观察大鼠心脏和肝脏组织HSP70的表达,并检测血清中CK和ALT含量。结果 (1)心脏中HSP70表达量随着应激时间的延长而增加,1.5h组较0h组有明显的增加(P<0.05),而2.0h后有极明显的增加(P<0.01)。(2)肝脏中HSP70表达量随应激时间的延长呈缓慢增加,仅3.0h组有较明显的增加,与0h组、0.5h组及1.0h组比较有显著差异(P<0.05)。(3)应激开始阶段大鼠血清中的CK含量迅速上升,之后平缓升高;大鼠血清中的ALT含量呈现上升趋势,2.5h以前上升较平缓,2.5h以后急骤升高。结论冷拘束应激可使大鼠心脏中HSP70的表达量和血清中CK含量在较短的时间内显著上升,且随着时间的增加而递增,而肝脏中HSP70的表达量和血清中ALT含量在较短的时间内无明显变化,只有在3.0h时才显著增加,提示心脏对冷拘束应激较敏感,而肝脏对冷拘束应激有较强的耐受性。

马齿苋多糖对冷应激致小鼠胃肠功能紊乱及NO含量的影响

目的探讨马齿苋多糖对冷束缚应激致小鼠胃肠功能紊乱及NO含量变化的影响。方法采用冷束缚应激的方法建立肠功能紊乱模型,应用葡聚糖蓝2000(DB-2000)作为染料观察马齿苋和冷束缚应激状态对胃排空率、小肠推进率的影响,并利用硝酸还原酶法观察小鼠肠组织、血浆中NO含量的变化。结果冷束缚应激可抑制小鼠胃排空速度及小肠推进率(P<0.01),马齿苋多糖干预可明显拮抗冷束缚应激引起的胃排空速度及小肠推进率降低(P<0.05);马齿苋多糖可以降低冷束缚应激引起的血清及肠组织NO含量的升高(P<0.05)。结论马齿苋多糖对冷束缚所诱发的肠道功能紊乱有正向调节作用,NO可能在这一过程中发挥了作用。

冷束缚应激对大鼠胃微循环的影响

应用大鼠冷束缚应激性溃疡模型，选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠４８只，随机分成应激前组和应激３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ组。分别检测各时相点的溃疡指数、粘膜血流量和红细胞变形性等指标。结果显示：随应激时间延长，粘膜血流量有显著下降。溃疡指数和红细胞变形性则在应激６０ｍｉｎ后才有显著改变。提示：微循环障碍是大鼠冷束缚应激致胃粘膜损伤的一个重要因素，胃粘膜血流量下降和其他因素导致了应激性溃疡的形成。红细胞变形性下降加重了微循环功能的障碍。

束缚+温水(36±1)℃应激对大鼠延髓及下丘脑Fos蛋白表达的影响

为了探讨束缚+温水(36±1)℃应激是否能引起大鼠胃粘膜损伤、是否对延髓和下丘脑Fos蛋白表达有影响,本研究将雄性Wistar大鼠随机分两组:实验组,束缚+温水(36±1)℃应激1 h;对照组,室温下单纯束缚应激1 h。应激后处死,测直肠温度;取胃,观察胃粘膜损伤程度;取脑,应用免疫组化染色方法观察两组动物延髓、下丘脑神经元的Fos蛋白表达。结果显示:两组动物胃粘膜损伤程度均较轻或基本无胃粘膜损伤,延髓和下丘脑各核团Fos蛋白表达均无显著性差异,直肠温度也无显著性差异。这些结果提示,由于束缚+温水(36±1)℃应激不改变动物的体温,因而不引起延髓和下丘脑控制胃机能的核团神经元活动加强,从而也不诱发急性胃粘膜损伤。

针刺足三里穴对冷应激性溃疡大鼠下丘脑与肾上腺NOS表达的影响

目的研究针刺足三里穴对急性胃溃疡(由冷应激引起)的保护作用,以及冷应激对大鼠下丘脑及肾上腺一氧化氮合成酶(NOS)表达的影响。方法通过计算胃粘膜溃疡指数和应用RT-PCR技术,对大鼠下丘脑、肾上腺NOS的表达情况进行半定量研究。结果实验数据表明,针刺足三里穴可以明显减少溃疡(由冷应激导致)指数;同时发现下丘脑NOS1不参与冷应激溃疡病理过程,针刺足三里穴可在生理范围内上调下丘脑NOS1的表达水平;下丘脑NOS2参与了冷应激溃疡病理过程,针刺足三里穴可下调其表达,减轻病理损害程度;NOS3也参与了冷应激溃疡病理过程,针刺可以下调其表达水平,但下调程度较轻微;肾上腺NOS1及NOS3表达水平在应激过程中增高,针刺只能抑制NOS1表达,肾上腺NOS2不参与该应激过程。结论针刺对冷应激溃疡具有一定的保护作用,该保护作用是通过生理性上调下丘脑NOS1表达、下调NOS2及NOS3病理性高表达以及抑制肾上腺NOS1表达而实现的。

银杏叶提取物对大鼠不同状态胃动力的影响及其机制

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对正常状态和冷束缚应激引起的胃肠功能紊乱的情况下大鼠胃动力的影响及可能机制。方法采用冷束缚应激的方法建立胃肠功能紊乱模型,应用葡聚糖蓝2000(DB-2000)作为染料观察EGb在正常及应激状态对胃排空速率的影响;并利用比色法观察大鼠胃组织和血浆中一氧化氮(nitricoxide,NO)含量的变化。结果在正常状态下,EGb对胃排空速率无显著性影响。冷束缚应激可导致大鼠胃排空减慢(P<0.05)。EGb干预可明显拮抗应激引起的胃排空减慢(P<0.05)。EGb对正常大鼠胃组织和血浆中NO含量没有影响;冷束缚应激可导致胃内NO含量降低(P<0.01),而血浆中NO升高(P<0.01)。EGb可降低应激引起的血浆NO含量的升高(P<0.01)。结论EGb在不同状态下对大鼠胃动力的影响有所不同,具有正相调节作用。NO可能参与了EGb对大鼠胃动力的调节作用。

代谢组学在动物应激研究中的应用

代谢组学是生物机体在病理生理、遗传、环境或行为的不同刺激下,对机体所产生代谢产物变化的研究,是生物领域研究中一种重要的研究手段,已在植物学、营养学、中药学、微生物学、临床疾病诊断等研究领域得到广泛应用。动物应激一直是畜牧行业关注的热点,许多因素可导致动物应激,常见的应激类型有冷应激、热应激、氧化应激、束缚应激、噪音应激、运输应激,还有不可预知的慢性应激等,这些应激均可对动物机体产生一定危害。目前,代谢组学也已应用于动物应激领域的研究,本文对代谢组学在动物的冷应激、热应激、氧化应激及束缚应激研究中的应用作一综述。