携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌的多重耐药特征和体外致病性研究

【目的】探究携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌的分子流行特点。【方法】检测76株携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌的多重耐药谱、系统进化分群及毒力基因,并分析毒力基因与耐药特点、系统进化分群之间的关联性。【结果】药敏结果显示,携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌对氟苯尼考的耐药率最高,达85.53%(65/76);其次是恩诺沙星,为48.68%(37/76);最常见的多重耐药谱为氟苯尼考+恩诺沙星+乙酰甲喹,达10.53%(8/76)。系统进化分群结果显示,主要的亚群为C群和B1群;其中,C群检出率最高,达53.95%(41/76);其次是B1群,为30.26%(23/76);E群、A群、D群和F群的检出率分别为9.21%(7/76)、2.63%(2/76)、2.63%(2/76)和1.32%(1/76);未检测出B2群和分支I群。毒力基因检测结果显示,76株携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌均检出了至少4种毒力因子,且有11株菌同时携带至少11种毒力基因;其中,有13株菌同时检出禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的5个标志性毒力基因(iroN、iutA、hly、OmpT和iss),检出率为17.11%;有11株菌检出ColV质粒的标志基因(cva/cvi、iroN、iucD/iutA、etsAC、OmpT/hlyF和sitA),检出率为14.47%;有28株菌检出耶尔森菌强毒力岛(high pathogenitility island,HPI)的标志基因irp-2和fyuA,检出率为36.82%。【结论】携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌多为多重耐药菌,且多重耐药菌株携带ColV毒力质粒可能性更高;携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌的多重耐药与致病性有关联,即携带bla_(CTX-M)禽大肠杆菌具有多重耐药的同时,具有致病的可能性更高。

新生儿化脓性脑膜炎死亡病例的临床分析

目的探讨新生儿化脓性脑膜炎(NPM)导致死亡结局病例的临床特征,提高对该病死亡风险的认知。方法回顾性收集2019年6月至2023年6月湖南省儿童医院新生儿科收治的20例NPM死亡病例的资料,对其临床表现、检验结果、病原学及影像学特征等进行分析,按患儿起病年龄及胎龄分组,比较不同组新生儿NPM临床特点的差异。结果本研究期间共收治653例NPM患儿,其中出现死亡结局的患儿共20例(3.1%),其血感染指标如白细胞、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血小板、脑脊液(CSF)白细胞数、糖及蛋白均明显异常。其中血培养阳性14例,CSF培养阳性10例,病原菌以无乳链球菌(GBS)及大肠埃希菌(E-coli)为主。15例患儿完善颅脑MRI+增强+DWI,均有脑膜强化及脑水肿,5例合并脑疝。20例患儿均完善振幅整合脑电图(aEEG)检查,其中15例为重度改变。早发型组患儿的CSF白细胞数高于晚发型组,早产儿组起病年龄大于足月儿组。结论病原菌为GBS、E-coli的NPM死亡风险高,需早期识别、尽早使用有效抗生素,尽量避免不良结局的发生,并积极完善影像学及aEEG检查判断预后。

二溴海因对水中细菌杀灭效果观察

为了解二溴海因对水体中细菌的杀灭效果及其影响因素,采用微孔滤膜抽滤法进行了实验室和现场试验研究。结果,含有效溴1 mg/L的二溴海因消毒液作用30 m in,可完全杀灭自来水中大肠杆菌;水温、有机物、pH值对其杀菌效果均无明显影响。在游泳池水中加入有效溴1 mg/L作用1 h,可使水中细菌总数由1960 cfu/m l降为0cfu/m l。在海水中加入10 mg/L有效溴的二溴海因作用1 h,可使海水中大肠菌群和粪大肠菌群分别由29000 cfu/L和15720 cfu/L下降到10 cfu/L以下。在医院污水中加入有效溴25 mg/L作用1 h,可使污水中粪大肠菌群由消毒前的>23800 MPN/L下降至900 MPN/L以下。结论,二溴海因对水体中常见细菌均有较强杀灭作用,水温、有机物及pH值对其杀菌效果影响较轻。

2001～2003年深圳市学校食堂餐具消毒监测结果分析

目的全面了解深圳市学校食堂餐具的卫生质量情况,为今后学校师生食堂餐饮卫生监督提供科学依据.方法大肠菌群按GB 14934-94纸片法,致病菌按GB 4789.4.5-2003进行.结果深圳市学校2001～2003年餐具大肠菌群整体合格率分别为87.3%、92.5%、96.8%,致病菌均未检出.结论深圳市大中小学校使用的餐具卫生状况整体情况比较好,多数学校餐具卫生3 a保持良好状态,只有个别学校稍差.建议卫生监督机构除继续保持监测外,应着重加大对卫生状况和消毒效果稍差的学校的监督,指导学校做好消毒工作,以保护学校师生的饮食安全,避免引起食物中毒.

新疆某屠宰场羊屠宰中微生物污染状况的检测分析

【目的】羊的屠宰加工过程中卫生状况直接影响到肉品的卫生质量,了解新疆羊的传统屠宰与规范化屠宰各环节中的微生物污染现状。【方法】选择新疆羊屠宰过程中具有代表性的规范屠宰场和传统屠宰场,对羊胴体表面以及屠宰各工序、屠宰环境进行采样,测定其菌落总数和大肠菌群指标。规范屠宰羊胴体清洗前、清洗后共350个样,环境采样35个,刀具采样14个,屠宰工人手采样15个,按照GB/T4789.2-2010《食品微生物学检验菌落总数测定》、GB/T4789.3-2010《食品微生物学检验大肠菌群计数》方法测定。【结果】规范屠宰羊胴体清洗前、清洗后的表面平均菌落总数为3.36和3.13 Logcfu/cm2(P<0.05),而传统屠宰羊胴体表面平均菌落总数为3.54 Logcfu/cm2;规范屠宰羊胴体清洗前后的表面平均大肠菌群为2.60和2.47LogMPN/cm2(P>0.05),传统屠宰的平均大肠菌群为2.84 LogMPN/cm2。【结论】传统屠宰的羊胴体表面微生物污染程度比规范屠宰的胴体表面微生物程度高。

枇杷花茶抗氧化作用及其食品卫生指标检测

以贵妃枇杷花茶为原料,分析花茶水提取物的体外抗氧化能力,并检测其微生物学卫生指标。结果表明:贵妃枇杷花茶具有较强的抗氧化能力,总抗氧化能力达到1 126.4U·g-1,是茉莉花总抗氧化能力的2.18倍;清除羟自由基的能力为6.04×105 U·g-1,与绿茶清除羟自由基能力相当。研究还发现不同贮藏条件下贵妃枇杷花茶的抗氧化作用差异明显,其中低温条件下(4℃)60d内枇杷花茶维持较强的总抗氧化能力。贵妃枇杷花茶的菌落总数为500cfu·g-1,未检出大肠菌群,两者均达到目前已发布的行业和地方标准对代用茶微生物指标的要求。

不同品牌市售鲜鸡蛋贮存过程中微生物变化比较研究

鸡蛋是人类膳食的重要组成部分，其产出与贮运销售过程中均存在沙门氏菌等致病菌污染隐患，直接影响鸡蛋的消费安全。作者对北京市场德青源、留民营等4种品牌包装鲜鸡蛋及散装鸡蛋在贮存过程中细菌总数、大肠菌群数及沙门氏菌数量变化进行了测定，研究了贮存过程中各品牌鸡蛋蛋壳、蛋清及蛋黄中的细菌总数，大肠菌群数随时间的变化情况及沙门氏菌的检出情况。研究结果发现，不同品牌的鸡蛋蛋壳表面在贮存初期细菌总数介于9．315×10^2～1．367×10^4CFU／个，且随着贮存时间的延长呈上升趋势；品牌鸡蛋贮存初期蛋内容物均未检出污染细菌，而在贮存6d后检出污染细菌，细菌总数与大肠菌群存在随着贮存时间的延长而增加的变化。除A品牌鸡蛋外，市售鲜蛋均存在沙门氏菌污染，蛋壳表面污染率为1．67％～8．3％，内容物中污染率为1．67％～5％。其中散装鸡蛋的细菌总数，大肠菌群数及沙门氏菌检出率均高于其它几种品牌的鸡蛋。

^(60)Co-γ射线辐照对3种保健食品中维生素C,E含量的影响

目的:研究60Co-γ辐照灭菌对3种保健品中维生素C,E含量的影响.方法:对3种保健食品采用不同剂量的60Co-γ射线辐照处理,并对辐照前后样品中维生素C,E含量和细菌总数以及大肠菌群进行测定.结果:在5~20kGy剂量范围内,5,10kGy辐照前后维生素C,E含量变化均无显著性差异(P>0.05);15kGy辐照对保健产品中维生素C,E降低不明显;20kGy辐照对保健食品中维生素C,E含量均显著降低(P<0.05).经5kGy辐照后细菌总数和大肠肝菌均可达到国家卫生标准,经10,15,20kGy辐照后均可彻底杀灭细菌.结论:中小剂量(5,10kGy)辐照对保健食品中的维生素C,E无显著性影响,但高剂量(15,20kGy)辐照可使保健品中维生素C,E含量显著降低.

新疆传统牛羊屠宰过程中微生物污染状况的检测

对新疆某个具有代表性的传统屠宰场刚宰杀完毕的23头牛胴体和宰杀后1～2 h间的17头牛胴体及羊屠宰车间入口处、中间过道处、出口处三个区间的36头羊胴体表面进行采样。按照GB/T4789.2—2003和GB/T4789.3—2003分别进行了菌落总数和大肠菌群两项微生物指标的测定。同时,还调查了各个车间不同位置空气的污染状况。以NY 5044—2008《无公害食品牛肉》和NY 5147—2008《无公害食品羊肉》作为参考。结果表明,传统牛羊屠宰场屠宰的牛羊胴体表面微生物污染程度较高,屠宰车间空气质量状况较差,影响了牛羊肉肉品的卫生质量。

通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型

目的旨在建立同时检测stx2和intimin两个基因多个变型的双重PCR快速检测技术，更好满足实验室和临床检测的需求。方法以stx2主要的6个亚型和intimin主要的27个基因亚型为靶序列，设计引物，建立双重PCR方法，分析其敏感性、特异性，并检测模拟制备的阳性样品。结果stx2-intimin双重PCR扩增片段分别为388bp和609bp，检测大肠杆菌纯培养物最低限介于10～100cFu／mL，增菌样品最低检测限介于1～10CFU／g，特异性检测intimin和stx2的多个亚型。结论Stx2-Intimin二重PCR技术灵敏、特异、通用和高效。

河北省禽病原性大肠杆菌的血清型鉴定

从河北省的保定、石家庄等8个市（地）所属的78个发病鸡群中的183只病、死鸡的内脏、器官中分离出127株大肠杆菌，并对其进行了生化试验、致病性试验及血清学鉴定。127个分离株中，除32株未能定型外，共鉴定出95个分离株的O血清型，占分离菌株的74.8％，这些定型菌株覆盖了24个血清型，但以O78（2.32％），O2（13.68％），O111（9.47％），O1（8.42％）和O15（6.32％）等5个血清型的检出率为高，共61株，占定型菌株的64.21％，且前3种血清型在种类上仅占总量的12.5％，却拥有47个分离株，占定型菌株的49.47％，调查结果表明:O78，O2和O111等血清型为河北省禽病原性大肠杆菌的优势血清型。另外，血清型鉴定检出率较低的还有34个分离株，占定型菌株的35.8％。

蔓越莓制剂抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对红细胞黏附作用的研究

目的:利用蔓越莓抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对P血型红细胞黏附作用的体外模型,检测中国(国产1组和2组)和美国(美国组)3个不同产地蔓越莓制剂抑制细菌对红细胞的黏附作用。方法:以P菌毛阳性大肠埃希菌与人P血型红细胞结合引起的血凝现象为基础,辅助染色标本和显微镜镜下观察,分别检测蔓越莓在水制剂中和二甲基亚砜(DMSO)中的血凝抑制作用。结果:美国产蔓越莓水制剂和DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度分别为11.25g/L和5.11g/L;国产1组蔓越莓水制剂和DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度分别为9.38g/L和17.04g/L;国产2组蔓越莓DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度为20.45g/L,而其水制剂在体外实验中未见有效的血凝抑制作用。结论:不同产地的蔓越莓制剂对P菌毛阳性大肠埃希菌引起的血凝现象均有不同程度的抑制作用,提示蔓越莓制剂具有不同程度的抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对细胞的黏附及致病作用。

粪大肠菌群快检试纸的研制及其效果观察

目的研究污水粪大肠菌群快检试纸,检测其实用效果。方法将乳糖发酵培养基进行改良,制成快检试纸,进行了应用效果检验,并与试管发酵法作平行比较。结果快检试纸接种的10株大肠菌群反应均为阳性,8株非大肠菌群反应均为阴性,快检试纸检测阳性结果与发酵法完全一致。纸片法和发酵法检测出现阳性结果的最高稀释度完全相同,出现的阳性份数基本相近。抗干扰试验证明,变形杆菌和阴沟肠杆菌对纸片法和发酵法均有干扰作用,变形杆菌对纸片法有干扰作用,阴沟杆菌对试管法干扰较明显,其他菌种则均无明显干扰。现场试验显示,纸片法和发酵法共同检出阳性标本98份,阴性标本67份;共有15份标本两种方法检测结果不一致,但这15份标本均证明为粪大肠菌群阳性。结论纸片法检测污水中粪大肠菌群与试管发酵法检测结果符合率为97.2%,纸片法检测污水中粪大肠菌群具有特异性强、敏感性高、使用方便、操作简单的优点,可以用于医院污水和城市污水中粪大肠菌群的检测。

泰州市医疗机构污水监测结果

目的了解泰州市医疗机构排放污水淌毒质量，以便加强管理。方法用微生物检验和理化分析方法进行了随机抽样检验。结果2004～2007年泰州市12所医疗机构排放污水在消毒后粪大肠菌群指标合格率波动在80％～97．7％。消毒后污水中总余氯量最大值为500mg／L，远远超过了标准上限值（10mg／L），其中总余氯量≥10mg／L的医疗机构占42．3％。不同医院污水性质有明显差别，pH值最低为2．1，最大为11；氨氮含量最大64；色度最大150；COD最高1063mg／L，合格率普遍较低。结论泰州市医疗机构污水处理质量合格率较低，理化指标不稳定，主要是加氯量没有严格控制。

微波照射对豆腐皮的杀菌效果

检测表明，市售豆腐皮污染细菌总数＞６１４７００ｃｆｕ／ｇ，大肠菌群数达２４０００ｃｆｕ／１００ｇ。经２４５０ＭＨｚ、６５０Ｗ微波照射５分钟，细菌总数减至８５６８ｃｆｕ／ｇ，大肠菌群阴性。试验条件下贮存４５天，两种细菌的指标都符合出厂卫生标准。照射后，豆腐皮失水１２．１７％．

不同省区鸡源大肠杆菌耐药性调查与系统进化群分析

为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17.0软件进行差异显著性分析。结果显示:低致病群B1(38.13%)和非致病群A(34.02%)菌株分布相对较多,其次是高致病群D(21.23%)和B2(6.16%);鸡源大肠杆菌耐药严重,12种药物的耐药率在50%以上,多重耐药问题突出,多重耐药率高达98.86%;不同省区鸡源大肠杆菌菌株的耐药程度存在差异,个别药物(如奥格门丁、头孢噻呋等)差异显著;高致病群B2和D群菌株的耐药程度较B1和A群菌株严重,其中氧氟沙星、庆大霉素、大观霉素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、复方新诺明、奥格门丁等7种药物差异显著(P<0.05)。试验表明,我国鸡源大肠杆菌高致病菌株检出率高,且耐药程度相对严重,在适宜条件下更易导致鸡群发病且较难控制。

奶牛乳房炎大肠杆菌新疆分离株系统分群及其耐药特性与毒力因子分布研究

本研究利用PCR技术对奶牛乳房炎大肠杆菌新疆临床分离株进行种系分群、耐药基因和毒力基因检测,并测定大肠杆菌对16种抗菌药物的敏感性。从1 068份奶牛乳房炎样品中分离出124株大肠杆菌,分离率为11.6%,其中A群(占58.8%)分布较多,其次是B1群(占16.1%)和D群(占13.7%)及B2群(占11.3%)。药敏结果显示,分离株对常用抗生素表现出不同程度的耐药性,其中对多黏菌素B和氨苄西林的耐药率最高,分别为76.6%和75.8%;多重耐药株中以3~7耐药株较多,最多对15种抗菌药物耐药,药敏表型与基因型基本一致。在分离株中携带的主要毒力基因为irp2(29.8%),其次是ast A(21.7%)、iuc D(14.5%)、afa8E(9.6%)、ehx A(7.2%)、saa(5.6%)和tsh(1.6%),其中毒力基因Irp2在A群的出现频率要高于其他种群,而在A群中出现3种以上的毒力基因组合则少于其他种群。

尿路感染大肠埃希菌ST131克隆株的分子生物学特征分析

目的了解福州某医院尿路感染大肠埃希菌ST131克隆株分子生物学特征。方法收集该院2014年8月-2015年8月尿培养临床分离大肠埃希菌357株,采用多重PCR对其进行系统发育分型,采用纸片扩散法进行药敏试验,通过PCR和多位点序列分型(MLST)对大肠埃希菌B2型菌株筛选出ST131型别,对其进行毒力基因和耐药基因检测。分析ST131和非ST131克隆株在毒力基因分布和耐药性的差异。结果 357株大肠埃希菌系统发育分型B2型162株,占45.4%。55株(34.0%)ST131克隆株均属于B2型,其分为两种血清型:O25b-ST131(36株,65.5%)和O16-ST131(19株,34.5%)。毒力基因iutA、kpsMT K5和traT在ST131克隆株的流行率显著高于B2型非ST131克隆株(P<0.05)。ST131克隆株对头孢唑林、头孢噻肟、头孢吡肟、甲氧苄啶-磺胺甲唑、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率显著高于非ST131克隆株(P<0.05)。结论该院尿路感染的大肠埃希菌中存在强毒力和多重耐药的大肠埃希菌ST131克隆株,须高度重视。提示O16-ST131亚克隆可能是大肠埃希菌ST131的重要类型,未来的研究不该忽视O16-ST131亚克隆群。

黑龙江奶牛肠外致病大肠埃希菌种系分类群研究

研究黑龙江省奶牛主要肠外致病(奶牛乳房炎、子宫内膜炎)大肠埃希菌的种系分类群。用PCR扩增具有种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2 DNA片段的方法,对黑龙江省84株来源于奶牛乳房炎和41株来源于奶牛子宫内膜炎的大肠埃希菌进行种系进化群分类。奶牛乳房炎所检测菌株中A进化种系群占11.90%。B1种系进化群占88.10%。奶牛子宫内膜炎所检测菌株中A种系进化群占14.63%,B1种系进化亚群占85.37%。未检测到属于B2和D群的肠外强毒力株。大肠杆菌分离株接种小鼠剖检可见明显病变。通过遗传进化分析,引起黑龙江奶牛肠外致病大肠埃希菌主要属于B1种系进化群,为奶牛乳房炎和子宫内膜炎疫苗的研制提供理论依据。

改性PP非织造布的抗菌机理探讨

研究了含吡啶盐基团的改性聚丙烯 (PP)非织造布的抗菌机理 ,分析了大肠杆菌在改性聚丙烯非织造布上的粘附热力学过程 .发现对于不含吡啶盐基团的聚丙烯非织造布表面 ,粘附过程中的自由能变化越负 ,对粘附细菌越有利 ;改性聚丙烯非织造布对大肠杆菌 (E .coli)的滤除作用主要是其表面的吡啶盐功能基团与大肠杆菌之间的静电相互作用的结果 ;活性检测结果显示这种粘附作用是一种生态捕捉作用 .