单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤的方法及进展

单细胞凝胶电泳技术是一种常见的检测DNA损伤的技术,它具有灵敏度高、经济、简便、快速等优点。近30年来,这种技术被广泛地应用于遗传毒理、环境监测、医学诊断、营养研究上。单细胞凝胶电泳技术不单单能检测DNA断裂损伤,在加入断裂剂或者特异性内切酶后,可以检测到DNA交联和紫外线诱导的嘧啶二聚体,氧化碱基和烷基化损伤。近些年单细胞凝胶电泳与荧光原位杂交技术相结合后更是拓宽了它的应用范围,对常规和非常规的单细胞凝胶电泳技术及其操作方法进行了归纳总结,并讨论了它的发展前景。

不同粒径塑料微颗粒在斑马鱼腮组织中的积累及其对蒽毒性的影响

水环境微塑料颗粒污染非常严重,为了解其对水生动物的毒害效应和生态风险,应用荧光标记聚苯乙烯微球和激光扫描共聚焦荧光显微镜,研究不同粒径(10 nm-1μm)的聚苯乙烯塑料颗粒在斑马鱼(Danio rerio)腮部的积累差异,以及微塑料颗粒存在时对多环芳烃蒽的腮细胞毒性的影响.结果表明,20和50 nm的聚苯乙烯塑料易积累在鱼鳃上,而更大粒径(200,500,1 000 nm)的微塑料颗粒不会滞留在腮部.将染毒后的斑马鱼进行清水实验,鱼鳃上积累的微塑料颗粒也会被清除掉.单独暴露于各种粒径的聚苯乙烯颗粒48 h可导致腮细胞DNA轻微损伤,导致彗星拖尾长度、拖尾DNA比例等轻微增加,单独暴露于200μg/L蒽48 h可严重损伤腮细胞的DNA,彗星拖尾长度、尾DNA比例及尾矩分别从单独塑料颗粒处理的7.1、2.4%和0.65增加到了43.6、44.2%和12.9.当斑马鱼同时暴露于500 nm聚苯乙烯颗粒和蒽时,聚苯乙烯颗粒可以显著降低蒽对DNA的损伤.上述结果表明斑马鱼积累微塑料与粒径相关,但微塑料颗粒对有毒有机污染物毒性的影响较复杂,值得进一步深入研究.