Connexin 43-膜纳米管-Ca^(2+)信号途径参与房颤发生的机制研究

目的探讨膜纳米管(membrane nanotubes,MNTs)参与心房颤动(atrial fibrillation,AF)发生的作用机制。方法8周龄雄性SD大鼠随机分为电刺激组和假手术组,每组10只。电刺激组经食道高频心房起搏进行电刺激诱导建立大鼠AF模型,假手术组不予心房起搏电刺激。分离两组大鼠心房肌细胞建立细胞水平电刺激组与假手术组,在此基础上,给予电刺激组心房肌细胞MNTs结构抑制剂Cyto D建立细胞水平电刺激+Cyto D组。利用免疫荧光染色评估心房肌细胞之间的MNTs变化;应用细胞内钙离子(calcium ion,Ca^(2+))荧光钙探针标记心肌细胞中Ca^(2+),随后利用流式细胞术检测荧光探针标记的Ca^(2+)变化;采用蛋白免疫印迹法检测缝隙连接蛋白43(Connexin 43)的蛋白水平表达。结果应用经食道高频心房起搏电刺激成功建立大鼠AF模型。与假手术组相比,电刺激组心房肌细胞之间MNTs连接增多增粗,钙信号显著增强(P<0.01)。与电刺激组相比,电刺激+Cyto D组MNTs减少变细,钙信号显著减低(P<0.05),Connexin 43蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论Connexin 43参与MNTs诱发钙信号增加触发晚后除极诱发AF发生。

乌司他丁通过上调Cx43表达减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡的作用机制

目的探讨乌司他丁(UTI)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞铁死亡的影响,并分析其保护机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为对照组、H/R组、铁死亡诱导剂(Erastin)组、UTI组、UTI+Erastin组、UTI+小干扰RNA(siRNA)阴性对照(si-NC)组、UTI+连接蛋白43(Cx43)siRNA(si-Cx43)组,各组给予相应干预后,检测各组细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧、Fe^(2+)、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及Cx43、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)mRNA和蛋白水平。结果与对照组比较,H/R组细胞活力、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著降低,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.01)。与H/R组比较,UTI组细胞活力[(71.40±8.05)%vs(42.63±6.71)%]、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著升高,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05)。与UTI组比较,UTI+Erastin组和UTI+si-Cx43组细胞活力、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著降低,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论UTI可能通过上调Cx43抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡。

血清Cx43、Gal-9水平对老年急性脑梗死患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值

目的探讨血清间隙连接蛋白43(Cx43)、半乳糖凝集素-9(Gal-9)水平对老年急性脑梗死(ACI)患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值。方法选取2020年9月至2022年9月在该院行超早期静脉溶栓治疗的106例老年ACI患者作为研究组,另外选取同期来该院体检的100例体检健康者作为健康组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有研究对象的血清Cx43、Gal-9水平。治疗2周后参考美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分将106例老年ACI患者分为预后良好组(81例)与预后不良组(25例)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Cx43、Gal-9水平对老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值,采用多因素Logistic回归分析探讨老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后不良的影响因素。结果研究组血清Cx43、Gal-9水平高于健康组(P<0.05);预后不良组血清Cx43、Gal-9水平高于预后良好组(P<0.05);血清Cx43、Gal-9预测老年ACI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.721(95%CI:0.673~0.758)、0.837(95%CI:0.787~0.886),二者联合预测的AUC为0.901(95%CI:0.857~0.946)。预后不良组高血压占比高于预后良好组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,高血压(OR=3.487,95%CI:1.564~7.773),血清Cx43≥106.53 pg/mL(OR=4.586,95%CI:1.982~10.611),血清Gal-9≥11.84 ng/mL(OR=4.345,95%CI:1.957~9.648)是老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后不良的危险因素(P<0.05)。结论血清Cx43、Gal-9在老年ACI患者中均呈高表达,可用于评估老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗的预后,二者联合检测的评估价值更高。

外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病的预测价值分析

目的探讨外周血单个核细胞缝隙连接蛋白37(Cx37)、黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)、缝隙连接蛋白43(Cx43)对冠心病的预测价值。方法选取2019年1月至2023年10月该院收治的460例因“疑似冠心病或者胸闷、胸痛待查”而入院拟择期行冠状动脉造影(CAG)的患者作为研究对象,根据CAG检查结果分为冠心病组(212例)和非冠心病(248例)。比较两组临床特征及外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43,并予以多因素Logistic回归分析冠心病发生的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病的预测价值。结果冠心病组年龄、体质量指数大于非冠心病组(P<0.05),心率、血清糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)水平高于非冠心病组(P<0.05),吸烟、高血压、高脂血症、冠心病家族史的患者占比高于非冠心病组(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于非冠心病组(P<0.05)。冠心病组外周血单个核细胞Cx37、Cx43表达水平低于非冠心病组,外周血单个核细胞AIM2表达水平高于非冠心病组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟,高血压,高脂血症,冠心病家族史,外周血单个核细胞Cx37、Cx43表达水平降低,外周血单个核细胞AIM2表达水平升高是冠心病发生的独立危险因素(OR=2.568、2.375、3.313、2.713、0.647、0.464、2.995,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43及3项联合检测预测冠心病的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.732、0.708、0.922,灵敏度分别为66.51%、70.28%、71.70%、89.15%,特异度分别为69.76%、70.16%、69.35%、82.26%,其中联合检测的AUC最大(P<0.05)。结论外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病发生具有一定的预测价值,其中联合检测的预测价值最高。

柴胡疏肝散对胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝散对胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层缝隙连接蛋白43(CX43)表达的影响。方法:将8周龄SD大鼠100只随机分为对照(sham)组、模型(FGID)组、FGID+药物组及sham+药物组,每组25只。对于FGID组、FGID+药物组,利用腹腔注射利血平的方式建立胃肠功能紊乱大鼠模型;sham组及sham+药物组大鼠实施生理盐水腹腔注射;完成造模后,为sham+药物组及FGID+药物组大鼠实施柴胡疏肝散汤剂灌服,sham组与FGID组大鼠灌服灭菌注射用水;通过实时荧光定量聚合酶链反应、Westeron Blot及组织免疫荧光技术检测四组大鼠结肠肌层CX43 mRNA、CX43蛋白表达水平及CX43阳性表达率。结果:四组大鼠结肠肌层CX43 mRNA、CX43蛋白表达水平及CX43阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:柴胡疏肝散能够提高胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层CX43的表达水平,从而改善胃肠功能。

连接蛋白43半通道介导NLRP3炎症小体激活在脑缺血中的作用

缝隙连接蛋白在脑缺血后的神经炎症扩散中发挥重要作用。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为中枢神经系统中主要的连接蛋白,通常以寡聚形式形成六聚体的半通道,与相邻细胞上的半通道对接,形成缝隙连接通道。在正常生理条件下,细胞表面的半通道开放维持在正常生理水平;然而,在脑缺血的过程中,Cx43半通道的过度开放导致了大量的离子(Na^(+)、Cl^(−)、Ca^(2+)、K^(+))、谷氨酸、天冬氨酸和三磷酸腺苷(ATP)等物质的释放,引起相邻细胞功能紊乱,从而加重神经细胞的损伤。此外,Cx43半通道的开放还诱导炎症因子的释放,这与脑缺血后NLRP3炎症小体的激活密切相关。因此,通过调控Cx43半通道能够缓解脑缺血后神经炎症,进而减轻脑缺血损伤。本文重点综述了Cx43半通道蛋白与NLRP3炎症小体激活的关系,以及其在脑缺血中的作用,旨在为脑缺血的治疗提供新的思路和方法。

缝隙连接蛋白43经典与非经典作用在疾病治疗中的潜在价值

背景:缝隙连接蛋白43在维持组织代谢稳态平衡中发挥着重要作用,传统观点认为它参与了缝隙连接过程,为细胞与细胞之间建立直接的物质信号交换通道奠定结构基础。而近年来研究对于其独特的半通道作用提出了新的看法,并发现了其亚细胞定位、自身片段等对于细胞生理活动及病理过程的重要意义。目的:综述数据库中相关文献,系统性总结缝隙连接蛋白43分子特征及在多种细胞表达的研究进展,重点阐述通道依赖性与非通道依赖性缝隙连接蛋白43的生理与病理作用,并探讨其在疾病治疗中的潜在价值。方法:分别设置“gap junction,connexin 43(Cx43),hemichannel,channel-dependent Cx43,channel-independent Cx43,extracellular vesicles(EVs),mitochondria,GJA1-20k”为英文关键词,以“缝隙连接,缝隙连接蛋白43,半通道,通道依赖性Cx43,非通道依赖性Cx43,线粒体,细胞外囊泡,GJA1-20k”为中文关键词,分别在PubMed数据库及中国知网数据库进行文献检索,最终共入选81篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)缝隙连接蛋白43的经典作用即构成缝隙连接通道,通道依赖性缝隙连接蛋白43主要可通过直接构成缝隙连接通道参与组织器官的生理或病理过程,应充分关注其结构和功能的完整性,而黏附是缝隙连接的重要特性,与屏障障碍类疾病密切相关。(2)缝隙连接蛋白43的非经典作用即非缝隙连接通道依赖性作用,缝隙连接蛋白43六聚体目前被发现定位于质膜、线粒体内膜和细胞外囊泡表面等结构,参与炎性疾病的正向促炎机制、线粒体功能代谢和细胞外囊泡的靶向摄取等,选择性截短片段则参与全长连接蛋白43靶向转运至胞内各结构域过程,并且通过促使线粒体周围肌动蛋白聚合,调控线粒体稳态。(3)以上两种作用为开发靶向治疗药物及基于组织工程技术的治疗手段中种子细胞转化机制等问题的解决提供了新思路,但现存的一些原始研究常不能全面考虑不同形式缝隙连接蛋白43的相互作用,从而混杂地描述了其总体特征,使得研究结果产生偏差。(4)未来研究需要系统地构架不同形式存在的缝隙连接蛋白43的生理特性及在各疾病中的潜在机制,为缝隙连接蛋白43完整性机制探索及多疾病的诊断和治疗提供参考依据。

p53基因突变对胶质母细胞瘤细胞Connexin 43表达影响

目的探究p53基因突变对胶质母细胞瘤细胞连接蛋白43(Connexin 43)表达的影响。方法培养胶质母细胞瘤U87细胞(p53野生型)与U251细胞(p53突变型),采用Western blotting方法分别检测两种细胞中p53蛋白与Connexin 43蛋白的表达水平。结果胶质母细胞瘤U251细胞中p53基因发生突变,与U87细胞相比,p53蛋白表达水平降低(t=2.948,P<0.05);U251细胞中Connexin 43蛋白的表达水平显著高于U87细胞(t=2.771,P<0.05)。结论在胶质母细胞瘤细胞中,p53基因突变可能会提高Connexin 43蛋白的表达量。

缝隙连接蛋白43通过调控凋亡参与大鼠牙周炎相关肾损伤

目的本研究旨在探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在大鼠牙周炎诱导慢性肾损伤模型中的作用。方法按照完全随机数字表法将12只SPF级Wistar雄性大鼠分为对照组和牙周炎组,每组6只。对照组大鼠不做处理,牙周炎组大鼠采用钢丝结扎大鼠双侧上颌第一磨牙的颈部,构建牙周炎模型。建模8周后检查大鼠牙周临床指标。显微CT(micro‑CT)扫描大鼠上颌骨重建其三维结构并分析牙槽骨吸收情况;组织病理学检测牙周及肾组织的病理改变;MitoSOX red试剂检测肾组织中活性氧(ROS)含量;生化试剂盒检测血清氧化应激生物标志物;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织中Cx43、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织中Cx43、NF-κB、IL-1β、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果micro-CT三维重建结果显示,牙周炎组大鼠第一磨牙牙槽骨骨质吸收明显,牙槽嵴高度降低,且釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离显著大于对照组。组织病理学结果显示,牙周炎组大鼠牙周组织内可见大量炎症细胞浸润和牙槽骨明显吸收;牙周炎组大鼠肾组织中肾小球基底膜轻度增厚,鲍曼氏囊腔扩张,肾小管刷状缘破坏。MitoSOX red染色结果显示牙周炎组肾组织中ROS含量明显升高。生化检测结果显示,牙周炎组大鼠血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平降低,丙二醛水平升高。qRT-PCR和Western blot结果显示,牙周炎组肾组织中Cx43、IL-1β、IL-6、Bax和Caspase-3 mRNA及Cx43、IL-1β、NF-κB、Bax和Caspase-3蛋白表达水平较对照组上升,而Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平下降。结论牙周炎可能通过上调大鼠肾组织中Cx43的表达激活NF-κB信号分子,引起大鼠肾脏组织中炎症水平和凋亡水平升高,最终诱导肾脏损伤的发生。

Cx43对胆总管结扎大鼠心肌损伤的负向调控作用及其机制

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在胆总管结扎(CBDL)引起的大鼠心肌损伤中的作用及其分子机制。方法将18只SD大鼠随机分为假手术组、CBDL组及Cx43抑制剂组,每组6只。假手术组大鼠行胆总管游离术,CBDL组大鼠游离、结扎并切断胆总管,Cx43抑制剂组大鼠术前24 h通过尾静脉单次注射25 mg/kg的Gap 26后,游离、结扎并切断胆总管。三组大鼠饲养至术后第14天时采用心脏超声检查评估心脏射血分数(EF)、缩短分数(FS)和心率(HR);随后测定三组大鼠血清总胆红素(TBil)、苯丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)水平;取三组大鼠心脏组织行HE染色和Masson染色;采用免疫印迹实验检测心脏组织中Cx43、Wnt 3α、β-catenin蛋白的水平。结果心脏超声检查结果显示,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠心脏EF、FS、HR均显著低于假手术组(F=22.95~43.55,t=5.10~9.32,P<0.05)。血生化及氧化应激指标检测结果显示,与假手术组相比,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠血清中TBil、AST、ALT、LDH、CK-MB、MDA、GSH-PX水平显著升高,SOD的水平显著降低(F=19.29~100.60,t=3.67~13.72,P<0.05)。HE染色及Masson染色结果显示,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠发生心肌损伤及心肌间质纤维化。免疫印迹实验结果显示,与假手术组相比,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(F=28.50~70.07,t=4.32~11.79,P<0.05);与CBDL组相比,Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(t=4.95~5.20,P<0.05)。结论CBDL大鼠心脏组织中Cx43下调可负向调控激活Wnt 3α/β-catenin通路,导致大鼠心肌组织损伤加剧及心脏功能下降。

缝隙连接蛋白43在阿尔茨海默病中的研究进展

星型胶质细胞的功能异常与多种神经退行性疾病的发生发展关系密切,缝隙连接的异常是其中重要的机制之一。缝隙连接主要是由缝隙连接蛋白(connexin,Cx)构成,是相邻细胞间代谢和离子耦合以及电传递的主要结构。Cx43和Cx30是在脑中含量最多的Cx亚型,其中又以Cx43为主。Cx43在脑中含量或分布与阿尔兹海默病的发生发展关系密切。本文就以Cx43与阿尔兹海默病的关系进行综述。

尼古丁上调Cx43促发PASMCs炎性反应致小鼠肺动脉重构的机制

目的研究缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)介导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)炎性反应在尼古丁致小鼠肺动脉重构中的作用机制。方法5周龄雄性C57BL/6J小鼠、Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠各32只,分别随机分为对照组(灭菌注射水)、0.02、0.2和2.0 mg/(kg·d)尼古丁组,每组8只。小鼠按体重每天固定时间进行一次鼻腔滴注,持续8周。染毒结束后,通过HE染色观察各组小鼠肺动脉重构情况;采用磁性分离法培养C57BL/6J、Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠原代远端PASMCs;通过Western blot法检测小鼠PASMCs中Cx43、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)蛋白表达水平。结果与C57BL/6J小鼠对照组相比,尼古丁染毒组C57BL/6J小鼠体重总体呈现增长趋势,且随着尼古丁浓度增加,体重增长变缓。小鼠远端肺动脉出现管壁增厚、管腔狭窄等典型的动脉重构病理特征,Cx43表达上调且呈剂量依赖性关系。Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠HE染色结果显示其肺动脉管壁增厚和管腔狭窄现象有所缓解,且PASMCs中上述炎性反应因子表达减少。结论Cx43表达下调可缓解尼古丁诱导的小鼠远端PASMCs炎性反应,从而改善小鼠肺动脉重构。

间隙连接蛋白43与呼吸系统疾病相关性的研究进展

间隙连接蛋白43(Cx43)与各系统性疾病的相关性已成为近年研究的热点。Cx43一直是多学科交叉研究的核心,广泛参与疾病的病理生理过程。Cx43通过与不同通路中的不同受体产生关联影响疾病的发生、进展及结局。目前的研究主要集中于完善单个疾病中Cx43的具体作用机制,但其与呼吸系统疾病的相关性仍需进一步研究阐明。未来明确Cx43与新型冠状病毒肺炎、肺癌等呼吸系统疾病的关系,可以为相关疾病的治疗提供新思路。

抑制连接蛋白43介导半通道活性促进脂多糖诱导的人牙髓细胞成牙本质分化

目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成牙本质分化过程中的作用和机制。方法:建立SD大鼠上颌第一磨牙损伤模型,免疫荧光(im munofluorescence,IF)染色检测Cx43在牙髓组织损伤后修复中的表达模式变化。分别采用0、1、10、100和1 000 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,筛选最适浓度,随后抑制和过表达hDPCs中Cx43的表达。实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹法检测Cx43和成牙本质分化相关因子牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dental matrix protein-1,DMP-1)、成骨相关转录因子(osterix,Osx)表达及细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)活性变化。进一步对hDPCs施以特异性Cx43通道抑制剂,检测Cx43介导的通道活性在hDPCs成牙本质分化中的作用,初步探讨Cx43调节LPS诱导的hDPCs成牙本质分化的作用和机制。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学处理。结果:IF结果显示,在健康牙髓组织中,Cx43主要表达于成牙本质细胞层,牙损伤3~24 h,Cx43表达减弱,随后逐渐上调,直至正常水平;损伤后3天~2周,表达呈下调趋势,并且表达于成牙本质细胞层和固有牙髓中。以10 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,可显著上调DSPP的mRNA表达(P<0.01)。抑制Cx43,可显著上调hDPCs内LPS诱导的DSPP、DMP-1和Osx mRNA表达(P<0.05);过表达Cx43,则显著抑制LPS诱导的成牙本质分化相关因子表达(P<0.01)和DSPP荧光强度。以10 ng/mL LPS激活hDPCs内ERK信号,过表达Cx43可显著减弱LPS诱导的ERK信号活性(P<0.01)。抑制Cx43介导的半通道,促进LPS诱导的hDPCs成牙本质分化相关因子mRNA表达和ERK信号活性(P<0.05);而阻断Cx43介导的细胞间通道,则抑制成牙本质分化。结论:Cx43参与调控牙髓组织的损伤后修复,并且其表达整体呈下调趋势;抑制Cx43或阻断HC,可促进LPS诱导的ERK信号活性和hDPCs成牙本质分化。

牙周炎患者血清LTB4、Cx43水平及其临床意义

目的分析白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)、连接蛋白43(connexin43,Cx43)在牙周炎患者血清中的表达水平,并探究其临床意义。方法选择2020年1月至2022年1月我院口腔科收治的98例牙周炎患者为牙周炎组,根据其病情严重程度分为轻度组34例,中度组36例,重度组28例;同期牙周健康的口腔志愿者95例为对照组。采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中LTB4、Cx43的表达水平。采用Pearson相关性分析血清LTB4、Cx43表达水平相关性以及二者与牙周探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL)、菌斑指数(plaque index,PLI)的相关性;Logistic回归分析牙周炎发生的影响因素。ROC曲线分析血清LTB4、Cx43表达水平对牙周炎患者的预测价值。结果牙周炎组不正规刷牙方式、每日刷牙时间<3min、次数<2次、夜磨牙的人数显著多于对照组,PD、AL、PLI的水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,牙周炎组血清中LTB4、Cx43的表达水平显著升高(P<0.05);重度组牙周炎患者的LTB4、Cx43的表达水平高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,血清中LTB4与Cx43水平以及二者与PD、AL、PLI的值均呈正相关(P<0.05);Logistic回归分析显示,PD、AL、PLI、LTB4、Cx43为牙周炎发生的影响因素(P<0.05)。血清LTB4、Cx43预测牙周炎患者发生的曲线下面积均大于单一指标预测(Z=13.582,P<0.001;Z=8.103,P<0.001)。结论牙周炎患者血清中LTB4、Cx43表达水平显著增加,二者表达呈正相关,是牙周炎发生的影响因素。

连接蛋白43在常见心脏疾病中的作用研究进展

心脏疾病是心血管疾病中死亡和致残的主要原因。连接蛋白43(Cx43)是哺乳动物心室肌细胞中最主要的连接蛋白,其表达、分布及磷酸化水平的异常与心律失常、心肌梗死、心力衰竭和糖尿病心肌病等密切相关。本文就Cx43与常见心脏疾病的研究进展进行综述,为心脏疾病的进一步研究及开发相关治疗药物提供参考。

模拟失重下缝隙连接蛋白43对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的探究模拟失重下缝隙连接蛋白43(Cx43)对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响。方法将人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)作为研究对象,分为正常重力组(Con组)、模拟失重组(SMG组),并建立细胞模拟失重模型。两组细胞培养48 h后采用qRT-PCR和Western blotting检测HASMCs中Cx43的表达变化情况;加入缝隙连接蛋白抑制剂18-α-甘草次酸(18α-GA)后,两组再分成Con组、正常重力加抑制剂组、SMG组、模拟失重加抑制剂组(SMG+inhibitor组)。采用Western blotting检测模拟失重对HASMCs中的增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)等蛋白水平表达的影响,采用EdU检测HASMCs的增殖能力,采用流式检测HASMCs的凋亡情况。采用免疫荧光检测尾部悬吊大鼠颈动脉平滑肌细胞中Cx43的表达情况。结果SMG组HASMCs回转失重培养48 h后,与Con组相比,HASMCs中Cx43的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。SMG+inhibitor组中的PCNA蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),BAX水平显著增高(P<0.05);与SMG组相比,SMG+inhibitor组HASMCs中EdU阳性细胞比率显著下降(P<0.05);流式结果表明,SMG+inhibitor组中HASMCs中的凋亡率显著升高(P<0.05)。尾吊大鼠免疫荧光结果表明,尾吊大鼠与正常大鼠相比,颈动脉平滑肌细胞中Cx43表达显著增多。结论Cx43在模拟失重条件下促进HASMCs的增殖,抑制HASMCs的凋亡。

星形胶质细胞中缝隙连接蛋白connexin 43的表达及其功能调控

目的研究星形胶质细胞中缝隙连接蛋白connexin 43(Cx43)的表达及由其形成的缝隙连接通讯功能的药物调控。方法实验分为正常对照组、全反式维甲酸组(10μmol/L全反式维甲酸作用24 h)及油酸酰胺组(25μmol/L油酸酰胺作用2 h)。western blotting法检测各组星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测各组星形胶质细胞Cx43胞膜蛋白的表达;荧光示踪法检测各组星形胶质细胞的缝隙连接通讯功能。结果与正常对照组相比,全反式维甲酸能增强星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达(P<0.01),油酸酰胺则能减弱其表达(P<0.01);全反式维甲酸能增强Cx43胞膜蛋白表达,油酸酰胺能减弱其表达;全反式维甲酸能增强星形胶质细胞缝隙连接通讯功能(P<0.01),而油酸酰胺则可显著降低该功能(P<0.01)。结论药物全反式维甲酸及油酸酰胺可以对星形胶质细胞缝隙连接通讯功能进行调控,其机制可能与其影响星形胶质细胞Cx43总蛋白和胞膜蛋白的表达有关。

Connexin 43介导细胞缝隙连接的研究进展

对近几年缝隙连接中Connexin 43(Cx 43)的研究进展加以综述,以期为研究缝隙连接在参与各种生理过程和在多种疾病发生、发展过程中的作用提供新的思路.

Connexin 43和E-cadherin在非小细胞肺癌中表达及相关性研究

背景与目的 由连接蛋白(connexin,Cx)构成的细胞间隙连接(gap junction)对细胞的增殖和分化起着重要的调控作用,Cx表达下降将导致细胞恶化。上皮钙粘蛋白(E cadherin)为上皮细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质粘附的跨膜糖蛋白分子,其功能抑制或表达下降可使细胞间粘附能力下降,细胞易于分离。本研究旨在探讨连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)和E cadherin在非小细胞肺癌中的表达及两者的相互关系。方法 采用免疫组织化学S P法检测85例原发性非小细胞肺癌组织的Cx43和E cadherin蛋白表达,并进行两者的相关性分析。结果 Cx43和E cadherin蛋白在非小细胞肺癌中表达显著下降,其下降程度与肺癌的细胞分化程度、pTNM分期和有无淋巴结转移均有密切关系,而与组织学分型无明显关系。Cx43 和E cad herin蛋白表达之间存在明显的相关性。结论 Cx43和E cadherin蛋白在非小细胞肺癌中表达显著下降,且两者存在着明显的相关性,可能是肺癌发生和发展过程中的共同事件。