Cx43对乳腺癌细胞侵袭和迁移及细胞间隙通讯的影响

目的:探讨Cx43对乳腺癌侵袭、迁移以及细胞间隙通讯功能的影响。方法:用脂质体转染法将Cx43质粒、Cx43 siRNA及阴性对照转染入人乳腺癌细胞株MDA-MB-231。细胞黏附实验、Transwell试验检测细胞黏附、侵袭和迁移能力。分子生物学方法检测MMP-2、MMP-9、BRMS-1的表达。荧光染料传输实验检测不同Cx43表达的细胞间隙通讯的功能。结果:细胞黏附实验结果表明相较于野生型细胞,Cx43 siRNA组黏附能力(0.43±0.07)降低(t=20.801,P=0.002),Cx43质粒组黏附能力(1.63±0.26)增高(t=5.917,P=0.027)。Transwell实验表明相较野生组,Cx43质粒组侵出小室的细胞数增加(侵袭:1.25±0.04,t=16.339,P=0.004;迁移:1.33±0.02,t=22.770,P=0.002),而Cx43 siRNA组侵出小室的细胞数减少(迁移:0.84±0.04,t=11.139,P=0.008;侵袭:0.79±0.04,t=5.743,P=0.029)。分子生物学检测发现Cx43质粒组MMP-2、MMP-9表达增高,BRMS-1表达降低,而Cx43 siRNA组MMP-2、MMP-9表达降低,BRMS-1表达增高。染料传输实验证实相较野生组传输能力,Cx43质粒组传输作用增强;Cx43 siRNA组细胞间的传输作用减弱。结论:Cx43对乳腺癌细胞侵袭及迁移能力存在正调控。这一调控能力可能通过GJIC实现。

白藜芦醇上调心肌缝隙连接蛋白43的表达降低大鼠心肌梗死后心律失常

目的：探讨白藜芦醇对大鼠心肌梗死（ MI）后室性心律失常的影响。方法将造模成功的心肌梗死SD大鼠随机分为心肌梗死组（MI组，n＝8）和白藜芦醇组（Res组，n＝8），另设假手术组（Sham组，n＝8），其中Res组给予10 mg· kg－1· d－1剂量的灌胃（1次／d），MI组和sham组给予5％羧甲基纤维素钠灌胃。4周后，对大鼠行在体程序性电生理刺激实验；Masson ’ s染色观察心肌梗死面积变化；免疫组织化学法检测心肌缝隙连接蛋白43（connexin43，Cx43）和 Cx43的368位丝氨酸磷酸化（P368Cx43）分布水平；免疫印迹法检测心肌 Cx43、P368Cx43和蛋白激酶 Cβ2（PKCβ2）表达水平。结果与MI组相比，白藜芦醇能显著降低室性心律失常的诱发率（87．5％对37．5％，P＜0．05），增加心室颤动（室颤）阈值[（3．2±0．3）V对（5．2±0．8）V，P＜0．05]；与sham组相比，MI组的Cx43表达量显著降低（P＜0．05），然而P368Cx43和PKCβ2的表达量却显著升高（P＜0．05）。白藜芦醇能明显增加梗死心肌Cx43表达量（P＜0．05），降低P368Cx43表达和PKCβ2表达（P＜0．05）。结论白藜芦醇能有效改善大鼠MI心肌电生理学特性，提高心肌Cx43表达，减少室性心律失常的发生率。