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人Cot-1 DNA的制备 被引量:2
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作者 覃文新 万大方 +2 位作者 赵新泰 蒋惠秋 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期127-128,共2页
目的分离制备人Cot┐1DNA,用于肝癌相关基因的定位克隆研究。方法通过羟基磷灰石柱层析分离制备人Cot┐1DNA。结果分离得到Cot值等于1的人基因组DNA。结论采用羟基磷灰石柱层析法,可方便、快速、经济地分离得到... 目的分离制备人Cot┐1DNA,用于肝癌相关基因的定位克隆研究。方法通过羟基磷灰石柱层析分离制备人Cot┐1DNA。结果分离得到Cot值等于1的人基因组DNA。结论采用羟基磷灰石柱层析法,可方便、快速、经济地分离得到人Cot┐1DNA。 展开更多
关键词 cot-1 dna 制备 柱层析 羟基磷灰石 肝肿瘤
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植物Cot-1DNA的快速制备方法 被引量:1
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作者 魏文辉 王力军 《湖北民族学院学报(自然科学版)》 CAS 1999年第4期7-10,共4页
Cot-1DNA富含高度和中度重复序列,能封阻YAC和BAC中的重复序列,从而促进了大片段DNA在原位杂交技术(ISH)中的应用。植物Cot-1DNA尚未商品化,本文介绍了一种简捷的快速制备植物Cot-1DNA的方法。
关键词 cot-1dna 原位杂交 植物基因组 重复序列 水稻
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Comparative Analysis of Genomes in Oryza sativa, O. officinalis, and O. meyeriana with Cot- 1 DNA and Genomic DNA of Cultivated Rice 被引量:3
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作者 LAN Wei-zhen HE Guang-cun +2 位作者 WANG Chen-yi WU Shi-jun QIN Rui 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第9期1027-1034,共8页
Fluorescence in situ hybridization (FISH) and comparative genomic hybridization (CGH) were applied to somatic chromosomes preparations of Oryza sativa, O. officinalis, and O. meyeriana with labeled probes of Cot-1... Fluorescence in situ hybridization (FISH) and comparative genomic hybridization (CGH) were applied to somatic chromosomes preparations of Oryza sativa, O. officinalis, and O. meyeriana with labeled probes of Cot-1 DNA and genomic DNA'from the cultivated rice. The coverage percentage (%) and size (Mb) of Cot-1 DNA in O. sativa, O. officinalis, and O. meyeriana were 47.1 ±0.16, 38.61 ±0.13, 44.38+_0.13, and 212.33 ± 1.21,269.42 ± 0.89, 532.56± 1.68 Mb, respectively. The coverage percentage and size of genomic DNA from O. sativa in O. officinalis and O. meyeriana were 91.0, 93.6% and 634, 1 123 Mb, respectively, in which 365 and 591 Mb in O. officinalis and O. meyeriana were from O. sativa genomic DNA, but not from repetitive sequences of O. sativa, and the uncoverage genome size in O. officinalis and O. meyeriana were 64 and 78 Mb, respectively. In addition, karyotype analysis was conducted based on the signal bands of Cot-1 DNA in O. sativa, O. officinalis, and O. meyeriana. The results showed that highly and moderately repetitive sequences in Oryza genus were conserved as the functional genes during evolution. The repetitive sequences reduplication may be one of the important causes of the genome enlargement of O. officinalis and O. meyeriana, and O. officinalis genome enlarged more slowly when compared with O. meyeriana. Based on the above results, it is concluded that O. officinalis and O. meyeriana were formed by reduplication, rearrangement, and gene selective loss during the evolution process. 展开更多
关键词 cot-1 dna CGH KARYOTYPE O. officinalis O. meyeriana
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利用水稻C_0t-1DNA和基因组DNA对栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻基因组的比较分析 被引量:13
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作者 蓝伟侦 何光存 +1 位作者 吴士筠 覃瑞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1083-1090,共8页
目的研究中高度重复序列在稻属不同物种基因组进化中的作用。方法用栽培稻C0t-1DNA和基因组DNA(gDNA)作为探针,分别对栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻进行荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)。结果C0t-1DNA覆盖栽培稻、药用野生... 目的研究中高度重复序列在稻属不同物种基因组进化中的作用。方法用栽培稻C0t-1DNA和基因组DNA(gDNA)作为探针,分别对栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻进行荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)。结果C0t-1DNA覆盖栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻基因组比例(%)和大小(Mb)分别为47.10±0.16,38.61±0.13,44.38±0.13和212.33±1.21,269.42±0.89以及532.56±1.68。栽培稻gDNA在药用野生稻和疣粒野生稻基因组中的覆盖率约为91.0%和93.6%,含量分别约为634Mb和1123Mb,各有365Mb和591Mb不属于源自栽培稻基因组的中高度重复序列,未被栽培稻gDNA所覆盖的部分,分别为64Mb和78Mb左右。此外,以C0t-1DNA的组成为依据,对这3个种核型进行了同源性聚类。结论稻属中度和高度重复序列和功能基因一样,在不同种中也存在着高度同源性和保守性,并在进化过程中得以保存下来。药用野生稻和疣粒野生稻基因组增大的重要原因之一,可能是基因组中度和高度重复序列加倍的结果,药用野生稻这种序列扩增相对疣粒野生稻要缓和得多。另外,这两个野生种在长期进化过程中,由于存在加倍、重排和基因选择性丢失等现象,形成了具有自己种的特异性的基因组成分。 展开更多
关键词 C0T-1 dna CGH 核型 药用野生稻 疣粒野生稻
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大鼠类Alu重复序列的克隆及其在染色体DNA突变分析中的应用 被引量:1
5
作者 王瑛 Frederick CLeung +3 位作者 Fred Cross Marc Welt 谭声江 杨绍清 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2000年第1期48-51,共4页
从大鼠低Cot值DNA文库分离到一种类Alu的重复序列 ,命名为RALRS 1.对RALRS 1克隆并进行了测序 ,长度为 2 83bp ,发现其中含有单一的微卫星 (microsatellite)序列AG ,AGG和AGGG .RALRS 1DNA序列在大鼠单倍体基因组中的拷贝数为 15 0 0 0 ... 从大鼠低Cot值DNA文库分离到一种类Alu的重复序列 ,命名为RALRS 1.对RALRS 1克隆并进行了测序 ,长度为 2 83bp ,发现其中含有单一的微卫星 (microsatellite)序列AG ,AGG和AGGG .RALRS 1DNA序列在大鼠单倍体基因组中的拷贝数为 15 0 0 0 0~ 330 0 0 0 .依RALRS 1中的一段序列合成了一 2 8寡核苷酸探针 (AGGG) 7,对大鼠正常组织和肿瘤组织DNA指纹谱分析时 ,不但能显示活动清晰的指纹谱带型 ,并能显示与正常组织间所存在的区别 .本研究证明我们所发展的方法能够快速而方便地获得同源重复序列探针 ,用于DNA指纹谱分析 .这类分析对研究基因组的变化提供了有价值的途径 .图 3参 展开更多
关键词 大鼠 基因组 类Alu序列 肿瘤组织 染色体dna突变
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利用粳稻基因组DNA和C_ot-1 DNA探针对普通野生稻和亚洲栽培稻的比较分析
6
作者 覃瑞 李智 +3 位作者 刘虹 陈雁 蔡朝晖 李刚 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第2期24-28,41,F0003,共7页
以粳稻日本晴基因组DNA和Cot-1 DNA为探针,分别对日本晴、籼稻广陆矮4号和普通野生稻的染色体组进行了基因组原位杂交(GISH)和Cot-1 DNA荧光原位杂交(FISH)分析,并对3种染色体组进行了同源聚类和比较研究.结果表明:粳稻基因组DNA和Cot-1... 以粳稻日本晴基因组DNA和Cot-1 DNA为探针,分别对日本晴、籼稻广陆矮4号和普通野生稻的染色体组进行了基因组原位杂交(GISH)和Cot-1 DNA荧光原位杂交(FISH)分析,并对3种染色体组进行了同源聚类和比较研究.结果表明:粳稻基因组DNA和Cot-1 DNA探针信号在3种水稻染色体组中的分布状况和覆盖率相似,Cot-1 DNA的覆盖率分别为(47.13±0.18)%、(45.89±0.22)%、(44.24±0.21)%,3种水稻基因组同源性高,亲缘关系接近.Cot-1 DNA在3种水稻染色体上的杂交信号分布各有特点,中高度重复序列的变异在普通野生稻向栽培稻进化和亚洲栽培稻籼、粳分化过程中具有重要意义,中高度重复序列含量较低的2、5、8号染色体是水稻染色体组进化过程中相对活跃的成分. 展开更多
关键词 cot-1dna 基因组 核型 水稻 普通野生稻
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利用C_ot-1 DNA FISH对3种异源四倍体野生稻的比较分析
7
作者 覃瑞 吴绮 刘虹 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第2期42-45,共4页
利用来源于药用野生稻(CC基因组)的中高度重复序列C_ot-1 DNA作为探针,在相同的洗脱严谨度下,通过荧光原位杂交(FISH)对3种基因组同为CCDD的异源多倍体野生稻,宽叶野生稻(O.latifolia)、高杆野生稻(O.alta)、大颖野生稻(O.grandiglumis... 利用来源于药用野生稻(CC基因组)的中高度重复序列C_ot-1 DNA作为探针,在相同的洗脱严谨度下,通过荧光原位杂交(FISH)对3种基因组同为CCDD的异源多倍体野生稻,宽叶野生稻(O.latifolia)、高杆野生稻(O.alta)、大颖野生稻(O.grandiglumis)进行基因组比较分析.结果发现:在80%的洗脱严谨度下,杂交信号在宽叶野生稻的C、D基因组上的分布差异较为明显,可以区分24条来源于C基因组的染色体和24条来自于D基因组的染色体;相同洗脱度下的高杆野生稻和大颖野生稻的C、D基因组则区别不明显,表明此2种野生稻中的C、D基因组亲缘关系比宽叶野生稻中的C、D基因组关系要近.在此基础上,分别利用来源于栽培稻(AA基因组)和药用野生稻(CC基因组)的C_ot-1DNA作为探针,在不同洗脱严谨度下,对C、D基因组关系相对最远的宽叶野生稻进行FISH分析,进一步研究宽叶野生稻染色体中C、D基因组的进化关系.随着洗脱严谨度的调整,杂交信号呈现出较高的特异性,主要分布在着丝粒、近着丝粒及端粒区域.结果表明:以不同洗脱严谨度下的FISH结果为基础进行的基因组分析.可进一步提高野生稻染色体识别的准确性,为研究异源多倍体的起源及进化提供依据. 展开更多
关键词 中高度重复序列dna 荧光原位杂交 洗脱严谨度 异源多倍体野生稻
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莲C_0t-1 DNA的荧光原位杂交分析
8
作者 刁英 佘朝文 +1 位作者 胡中立 宋运淳 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期459-463,共5页
为分析中国莲C_0t-1 DNA在其中期染色体上的分布,从中国莲基因组DNA中分离出C_0t-1 DNA,将基因组和所分离的C_0t-1 DNA用生物素标记后作探针,对中国莲染色体进行原位杂交。杂交结果用耦联有荧光素Cy3的生物素抗体检测,发现在每对染色体... 为分析中国莲C_0t-1 DNA在其中期染色体上的分布,从中国莲基因组DNA中分离出C_0t-1 DNA,将基因组和所分离的C_0t-1 DNA用生物素标记后作探针,对中国莲染色体进行原位杂交。杂交结果用耦联有荧光素Cy3的生物素抗体检测,发现在每对染色体上均显示出特定的荧光原位杂交带。同时分析了FISH和GISH信号分布的异同。基于C_0t-1 DNA荧光原位杂交带型及染色体型,构建了中国莲核型。 展开更多
关键词 中国莲 cot-1 dna 荧光原位杂交 基因组荧光原位杂交 核型
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家驴基因组高度重复DNA序列的分离及其文库的构建
9
作者 赵英杰 吕品 +1 位作者 周祥山 张元兴 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期563-567,共5页
为研究家驴基因组重复序列,通过2次羟基磷灰石柱层析,分离纯化家驴Cot 0-Cot 0.1之间的基因组高度重复DNA序列,用于构建家驴基因组Cot文库,并向GenBank提交了18条重复序列,其中4条含有LINEs序列片段,4条含有SINEs序列片段,3条含有卫星... 为研究家驴基因组重复序列,通过2次羟基磷灰石柱层析,分离纯化家驴Cot 0-Cot 0.1之间的基因组高度重复DNA序列,用于构建家驴基因组Cot文库,并向GenBank提交了18条重复序列,其中4条含有LINEs序列片段,4条含有SINEs序列片段,3条含有卫星序列片段,4条含有简单重复序列片段,1条含有LTR-逆转录转座子片段,2条未知功能的重复序列。 展开更多
关键词 高度重复序列 分离 纯化 羟基磷灰石色谱 cot文库 家驴
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BACFISH在植物基因组研究中的应用 被引量:17
10
作者 覃瑞 魏文辉 宋运淳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期20-23,共4页
细菌人工染色体与荧光原位杂交合成技术(BACFISH)是90年代开始发展起来的一种新的定位技术.由于该技术较常规荧光原位杂交(FISH)技术的信号检出率高得多,近年来在植物基因组研究中得到了越来越多的应用.运用该技术已将一些重要的功能基... 细菌人工染色体与荧光原位杂交合成技术(BACFISH)是90年代开始发展起来的一种新的定位技术.由于该技术较常规荧光原位杂交(FISH)技术的信号检出率高得多,近年来在植物基因组研究中得到了越来越多的应用.运用该技术已将一些重要的功能基因定位到相应植物染色体上. 展开更多
关键词 植物基因组 原位杂交 基因定位 BAC-FISH
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玉米有丝分裂染色体上玉米BAC探针的FISH杂交体系的构建
11
作者 陶勇生 张祖新 +2 位作者 程友林 薛亚东 郑用琏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期682-687,共6页
本研究分别探讨了玉米和水稻基因组c0tDNA对探针的封阻、杂交后洗脱的严谨度、杂交液中FAD的浓度变化对BAC-FISH杂交的影响;探讨了玉米BAC探针中重复序列含量对FISH信号的影响.初步形成了一套以玉米BAC探针在玉米有丝分裂染色体上进行F... 本研究分别探讨了玉米和水稻基因组c0tDNA对探针的封阻、杂交后洗脱的严谨度、杂交液中FAD的浓度变化对BAC-FISH杂交的影响;探讨了玉米BAC探针中重复序列含量对FISH信号的影响.初步形成了一套以玉米BAC探针在玉米有丝分裂染色体上进行FISH杂交的优化技术体系.结果表明,玉米基因组c0tDNA对探针封阻的c0t值应小于50;而降低杂交液中FAD浓度和适度控制杂交后洗脱的严谨度,尤其是使用水稻基因组的c0t-100DNA封阻探针重复序列对BAC-FISH杂交信号特异性的改善具有明显的效果;同时,验证了选择重复序列含量较少的玉米BAC作为FISH杂交的探针也是获得特异性杂交信号的重要条件. 展开更多
关键词 玉米 BAC-FISH cot dna 基因组学
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赖草(Leymus secalinus(Georgi)Tzvel.)中一个染色体标记的克隆与鉴定
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作者 李媛 喻凤 +1 位作者 赵闫闫 窦全文 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期823-827,共5页
通过构建Cot-1 DNA文库以及利用荧光原位杂交技术,从赖草(Leymus secalinus(Georgi)Tzvel.)中克隆获得一个在染色体多个部位具有点状杂交信号的重复序列。进一步对该序列在赖草基因组进行克隆和分析表明该序列为一个具有90 bp的重复单元... 通过构建Cot-1 DNA文库以及利用荧光原位杂交技术,从赖草(Leymus secalinus(Georgi)Tzvel.)中克隆获得一个在染色体多个部位具有点状杂交信号的重复序列。进一步对该序列在赖草基因组进行克隆和分析表明该序列为一个具有90 bp的重复单元(p Ls-90),并在基因组中呈串联状排列。利用p Ls-90对赖草进行分子核型分析,结果表明:p Ls-90在染色体的着丝粒、近着丝粒、臂间以及近端粒区均有分布,而且在每对染色体上信号分布模式不尽相同,结合染色体臂比可以清楚地对赖草的14对(28条)染色体进行识别。p Ls-90不仅可作为赖草种质鉴定和利用中染色体识别的理想标记,也可作为研究小麦族不同物种染色体组进化的有力工具。 展开更多
关键词 赖草 cot-1 dna 荧光原位杂交 重复序列 染色体标记
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BAC-FISH技术在栽培稻与野生稻中的应用
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作者 覃瑞 李霞 赵琴 《湖北民族学院学报(自然科学版)》 CAS 1999年第4期1-6,共6页
BAC-FISH技术是90年代开始发展起来的一种新的定位技术。由于该技术较常规FISH技术的信号检出率高得多,运用该技术已将一些重要抗性基因定位到水稻染色体上。随着该技术的不断发展,将在栽培稻和野生稻比较作图研究中发挥更大的作用。
关键词 BAC-FISH 野生稻 定位技术 栽培稻 抗性基因
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Comparative analysis of A,B,C and D genomes in the genus Oryza with C_(0)t-1 DNA of C genome 被引量:6
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作者 LAN Weizhen QIN Rui +1 位作者 LI Gang HE Guangcun 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2006年第14期1710-1720,共11页
Fluorescence in situ hybridization (FISH)was applied to somatic chromosomes preparations of Oryza officinalis Wall. (CC), O. sativa L. (AA)×O. offi-cinalis F1 hybrid (AC), backcross progenies BC1 (AAC and ACC), O... Fluorescence in situ hybridization (FISH)was applied to somatic chromosomes preparations of Oryza officinalis Wall. (CC), O. sativa L. (AA)×O. offi-cinalis F1 hybrid (AC), backcross progenies BC1 (AAC and ACC), O. latifolia Desv. (CCDD), O. alta Swallen (CCDD) and O. punctata Kotschy (BBCC) with a labelled probe of C0t-1 DNA from O. officinalis. In O. officinalis, the homologous chromosomes showed similar signal bands probed by C0t-1 DNA and karyotype analysis was conducted based on the band patterns. Using no blocking DNA, the probe identified the chromosomes of C genome clearly, but detected few signals on chromosomes of A genome in the F1 hybrid and two backcross progenies of BC1. It is obvious that the highly and moderately repetitive DNA sequences were considerably different between C and A genomes. The chromosomes of C genome were also discriminated from the chromosomes of D- and B-genome in the tetraploid species O. latifolia, O. alta and O. punctata by C0t-1 DNA-FISH. Compari-son of the fluorescence intensity on the chromo-somes of B, C and D genomes in O. latifolia, O. alta, and O. punctata indicated that the differentiations between C and D genomes are less than that be-tween C and B genomes. The relationship between C and D genomes in O. alta is closer than that of C and D genomes in O. latifolia. This would be one of thecauses for the fact that both the genomes are of the same karyotype (CCDD) but belong to different spe-cies. The above results showed that the C0t-1 DNA had a high specificity of genome and species. In this paper, the origin of allotetraploid in genus Oryza is also discussed. 展开更多
关键词 cot-1 dna 染色体 基因组 原位杂交 水稻
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