木瓜环斑病毒外壳蛋白与核酸酶嵌合基因转化番木瓜胚状体的研究

以农杆菌ＬＢＡ４４０４介导木瓜环斑病毒外壳蛋白（ＰＲＳＶ－ＣＰ）与核酸酶（Ｎｕｃｌｃａｓｅ）嵌合基因，通过振动共培养法转化番木瓜子叶型胚状体，在选择培养基上筛选诱导再生转基因植株。ＮＰＴⅡ分析和ＳＯｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔＤＮＡ分子杂交结果表明，ＰＲＳＶ－Ｃｐ－Ｎｕｃｌｅａｓｃ嵌合基因已整合到番木瓜核基因组中。

甘蓝胚状体诱导成苗因素研究

以3个优良甘蓝品种为试材,进行了游离小孢子培养和胚状体植株再生技术研究,以期探讨不同甘蓝材料的基因型、胚状体类型、不定芽大小、烯效唑对不定芽诱导和生根的影响。结果表明:甘蓝子叶型胚容易发育单芽,鱼雷型胚和球型胚容易形成丛生芽;且单芽率和丛生芽率在不同基因型之间存在差异。高度大于2cm的不定芽转接到生根培养基上后生长速度先慢后快,生根数少且细长;小于2cm的不定芽生长速度先快后慢,生根数多且粗壮。小孢子不定芽在添加0.50mg/L烯效唑的MS+0.3mg/L NAA生根培养基中生根率最高且根系生长健壮,移栽成活率高达95.6%。

枇杷花药胚状体成苗条件的优化

以‘大五星’枇杷花药培养获得的子叶胚为材料,研究基本培养基、蔗糖浓度、4℃低温处理、饱和CaCl2脱水处理、"4℃低温+饱和CaCl2脱水"处理对胚状体成苗的影响,并优化枇杷花药培养及植株再生技术体系。结果表明:枇杷花药胚状体经"4℃低温+饱和CaCl2脱水"预处理7 d效果最佳;将预处理后的胚状体种于萌发培养基1/2MS+3%蔗糖,胚状体成苗率最高,为78.2%;将再生植株移栽入配比为腐熟有机肥∶园土∶锯末=1∶2∶1的基质中时,组培苗移栽成活率达85.25%。

博落回花药离体培养及植株再生研究

对8份不同产地的博落回花药进行了组织培养，通过对花药来源、4℃冷激时间、35℃热激时间、取蕾时期等因素的研究，建立了有效的博落回花药离体培养胚状体发生和植株再生体系。结果表明：有6个产地的博落回花药试材可以获得胚状体和再生植株；不同产地间出胚率差异显著，其中来自湖南高坊的材料出胚率最高，为11.8％；在4℃下冷激24~96 h有利于诱导出胚状体，冷激48 h的花药最容易产生胚状体；35℃热激处理对提高胚状体诱导率的作用不明显；花药培养的最佳取蕾时期为盛花期。