印度南瓜高效再生体系的优化

以10个基因型印度南瓜子叶节为外植体,研究了不同激素浓度配比、外植体处理方式、抑菌抗生素种类和浓度等对印度南瓜离体诱导再生的影响。结果表明:印度南瓜离体培养再生率受外源激素浓度配比和基因型的影响较大,较适宜的激素浓度配比为1.0~2.0mg·L^(-1)6-BA+0.5mg·L^(-1)ABA。外植体的切取时间、切割方式、接种方式等也是影响再生率的重要因素,播种后24~48h,切取1/2或1/4子叶节,采用斜插法接种的外植体再生率较高。外源添加100mg·L^(-1)头孢噻肟钠(Cef)能够有效抑制细菌污染。

ALS抑制类除草剂对西瓜子叶外植体分化的研究

以西瓜自交系D66的子叶为外植体,将外植体置于含有不同浓度乙酰乳酸合成酶(Acetolactate synthase,ALS)抑制剂类除草剂(SU除草剂、IMI除草剂)的筛选培养基上,根据外植体的分化率确定最适宜的除草剂浓度。探讨不同植物生长调节剂(6-BA、NAA)浓度配比对不定芽的增殖作用。结果表明,SU除草剂中苯磺隆和噻吩磺隆的最适宜浓度均为0.25 mg/L,苄嘧磺隆的最适宜浓度为0.50 mg/L;IMI除草剂中灭草喹和灭草烟的最适宜浓度均为1.50 mg/L;在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中不定芽的增殖率最高,为287.0%;根据西瓜自交系材料D66确定的除草剂最适宜浓度同样适用于西瓜杂交种(武农8号、黑美人、甜王1号、早佳8424)子叶外植体的筛选试验。

基因型和AgNO_3对甘蓝型油菜子叶外植体植株再生的影响

以甘蓝型油菜无菌苗子叶为外植体,接种于不同配比激素组合的培养基,研究AgNO_3 及基因型对油菜子叶外植体再生频率的影响。通过对芽苗分化率的方差分析表明,基因型、AgNO_3及基因型与AgNO_3 互作对植株再生的影响均达到极显著水平,其影响程度为基因型>AgNO_3>基因型×AgNO_3。诱导芽苗分化的最佳培养基为 MS+4mg/L BA+0.3mg/L NAA+5～10mg/L AgNO_3。

影响油菜子叶外植体不定芽高频率再生的因素

采用７个甘蓝型和２个白菜型油菜品种（系）研究了影响子叶外植体芽再生的一些因素和不同基因型的子叶外植体的离体培养反应和芽再生能力。结果表明，苗龄４ｄ的幼苗子叶于含２，４－Ｄ０．５－１．２ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基培养（称预培养）２或６ｄ后再转到分化培养基上培养，芽再生率提高３４％－４６％。分化培养基中附加ＡｇＮＯ３（６ｍｇ／Ｌ）可促进不定芽的形成和生长，而丝氨酸和谷氨酰胺则没有表现出有益效应。在同一培养条件下，甘蓝型油菜子叶比白菜型再生能力强。在甘蓝型油菜基因型间，子叶再生能力差异很大。

番茄子叶外植体转化系统的优化

目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆菌稀释倍数约 30倍、侵染时间为 1 0min、共培养时间为 2d的情况下 ,子叶存活时间最长 ,抗性芽产生频率达 2 5 %。结论 :获得了高效的番茄子叶外植体转化系统 。

AgNO_3对甘蓝型油菜子叶外植体植株再生的影响

以甘蓝型油菜无菌苗子叶为外植体 ,接种不同生长调节剂组合的培养基 ,研究AgNO3 对油菜子叶外植体植株再生频率的影响。结果表明 ,AgNO3 2 .5mg/L处理可明显提高子叶外植体的植株再生频率 ,芽再生频率和平均每外植体再生芽数分别达到 4 3 .3 0 %和 2 .77。苗龄与子叶外植体的芽再生频率有关 ,苗龄 4d的子叶芽再生频率较高。

5-氮胞苷对水曲柳合子胚外植体状态及体胚发生的影响

通过在培养基中添加5-氮胞苷,研究了其对水曲柳合子胚外植体状态和体胚发生的影响。在培养开始时加入不同浓度的5-氮胞苷会抑制水曲柳愈伤组织发生和水曲柳体胚发生。各浓度处理的愈伤组织诱导率均低于未添加5-氮胞苷的对照,且差异显著。除了50.0和100.0μmol/L处理的体胚发生率与未添加5-氮胞苷的对照差异不显著外,其余的处理均与对照存在显著差异,0.5μmol/L 5-氮胞苷完全抑制了体胚的发生。在不同的培养时间段加入20.0μmol/L 5-氮胞苷对水曲柳体胚发生状态有不同的影响,第1天加入明显抑制体胚发生,第15～21天加入显著促进体胚发生。以上结果的产生可能与5-氮胞苷处理后调节了外植体的DNA甲基化水平有关。添加5-氮胞苷对外植体褐化的作用趋势与对体胚发生的影响趋势几乎相同,再一次证明了水曲柳体胚发生必然伴随着外植体褐化这一结论。这种与现有关于外植体褐化与体胚发生关系相悖的现象值得进一步深入研究。

二步培养和AgNO_3对甘蓝型油菜子叶和下胚轴芽再生的影响

以甘蓝型油菜（Brassica napus L．）品种浙双758为材料，研究二步培养及添加AgNO3对甘蓝型油菜子叶和下胚轴外植体离体再生的影响。外植体先在含0．5—1．5mg／L2，4-D的MS培养基上预培养3d或7d诱导愈伤组织的产生，再转到含有3mg／LBA和0．15mg／LNAA及添加或不添加2．5mg／LAgNO3的分化培养基上诱导芽的分化。结果表明，外植体愈伤组织诱导率和芽再生率与2，4-D浓度、预培养时间和AgNO3密切相关；分化培养基中添加银离子可显著增加不定芽的再生频率；二步培养及添加AgNO3可使半子叶、完整子叶和下胚轴外植体芽再生频率分别达到了96．1％，96．7％和96．7％。

南瓜组织培养再生体系的研究

以黑籽南瓜和白籽南瓜为试材,研究了苗龄、激素配比、外植体、芽诱导时间以及基因型对再生频率的影响.结果表明,以3～5天苗龄的南瓜子叶为外植体,在MS+6-BA 1 mg/L+Ades 20 mg/L的诱导培养基上诱导10天后,转入MS+GA30.5 mg/L的芽伸长培养基,不同基因型南瓜均能获得较高的植株再生率,每个外植体成苗数在2.5个以上.从接种到再生苗移栽仅需4～5周时间.

番茄离体再生体系优化研究

为了获得番茄离体再生体系的优化方案,对离体再生体系中番茄无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验.结果显示,在浸泡、暗培养条件下,无菌苗生长快速、整齐;生芽培养基以 MS+2.0 mg/L BA+0.02 mg/L IAA 为宜;在再生芽个数方面,子叶要优于真叶、下胚轴,但由于下胚轴具有体积小、操作方便、形成愈伤组织和根的速率较快、根系发达等优点,因此外植体可选下胚轴.下胚轴生根培养基以 MS+0.3 mg/L IAA 为宜,子叶、真叶则使用 MS+0.1 mg/L BA+0.3 mg/L IAA 为宜.再生苗在无菌处理的移栽土中成活率较高,可达 90%.

三个不同基因型黄瓜再生体系的优化研究

以欧美型、华北型、华南型3个不同基因型的黄瓜为试材,比较了苗龄、激素配比、外植体类型、芽诱导时间的长短以及基因型对再生频率的影响。结果表明,以2天苗龄的黄瓜子叶为外植体,在MS＋6-BA1 mg/L＋ABA1 mg/L＋Ades 20 mg/L的诱导培养基上诱导15天左右,转入MS＋GA30.5 mg/L的芽伸长培养基,3种基因型黄瓜都能获得较高的植株再生率,每个外植体出苗数在1.8以上。从外植体接种到再生苗移栽仅需6-7周。

6BA和AgNO_3对甘蓝型油菜带柄子叶外植体不定芽再生的影响

通过研究两个甘蓝型油菜 (BrassicanapusL )亲本材料“宁A6”和“宁R1”带柄子叶外植体不定芽再生能力 ,探明了 6BA和AgNO3 浓度对外植体不定芽再生能力影响效果 ,并确定了促进两种不同基因型甘蓝型油菜不定芽再生的最适 6BA和AgNO3 浓度。组织学观察表明 。

新疆优质甜瓜高效离体再生体系的建立

对两个新疆优质甜瓜品种皇后和伽师瓜的离体培养 ,进行了培养基组成、取材时间、取材部位的研究 ,建立了甜瓜子叶外植体的高效再生体系 ,当选取 4d苗龄的甜瓜子叶近柄处为外植体 ,置于MS +6 BA 1.0mg·L-1+AgNO3 (3%蔗糖 ,0 .7%琼脂 ,pH =5 .8)的诱导培养基上时 ,获得最高的芽分化频率 ,伽师瓜达 97.5 % ,皇后达91%。不定芽经过伸长、生根最终获得了完整的再生植株。

诱变处理对甘蓝型油菜子叶外植体植株再生的影响

以甘蓝型油菜品种浙双758、浙双6号为材料,研究紫外线(UV)、甲基磺酸乙酯(EMS)和叠氮化钠(NaN3)对子叶外植体植株再生的影响。结果表明,UV处理子叶外植体后对植株再生有促进作用,当诱变时间达120和60 s时,两品种的愈伤组织诱导率和植株再生率分别达到最高值,显著高于对照。EMS不同浓度对长芽外植体数和植株再生数均有显著影响,且EMS处理浓度和处理时间存在互作效应。当EMS浓度达20mg/L,处理时间达6 h时,长芽外植体数和植株再生数达到最高。用浓度为500μmol/L NaN3,诱变时间为5,24h时处理子叶外植体所得到的再生植株数与浓度为100μmol/L,诱变时间为5,24 h所得到的结果差异显著,各处理因素间没有明显的互作效应。

MgO纳米颗粒对油菜子叶外植体的影响

MgO纳米颗粒(MgO NPs)是在药剂、污染修复、涂料及半导体等中得到广泛应用的无毒环保材料,以油菜(Brassica napusL.)品种‘宁油12’培养于MS培养基上4—5 d的子叶外植体为供体材料,在添加0—10.0 mmol∕L MgO NPs的油菜不定芽再生培养基(MS+4.5 mg∕L 6-BA)上培养21 d。结果表明:1.5 mmol∕L MgONPs处理的子叶外植体不定芽再生频率和单个外植体平均不定芽数均达最高值,分别为83.33%和19.33个,显著高于对照;0.5—1.5 mmol∕L MgO NPs处理显著提高了子叶不定根的再生频率;超过2.0 mmol∕L,对外植体有明显抑制效应;超过8.0 mmol∕L,外植体完全失去再生能力。但在4.0 mmol∕L时,从子叶不定根再生频率以及外植体质量上看,较2.0 mmol∕L时的活力有明显提高,可能存在纳米颗粒团聚效应降低了高浓度MgO NPs对外植体再生的抑制效应。以上结果表明:低浓度MgO NPs处理对油菜子叶外植体再生有显著促进作用,但超过2.0 mmol∕L表现出明显的毒害效应。低浓度MgO NPs亦可作为组培上值得尝试的价廉环保的添加剂。

青椒子叶培养及植株再生

本研究从‘中椒2号’、‘双丰’、‘早丰52’、‘中椒3号’、‘中椒4号’、‘茄门’、‘海花29’、‘塞花 2号’等8个青椒(Capsicum annuum L.)基因型中筛选出‘中椒 2号’、‘双丰’两个对离体反应较好的基因型,建立了我国栽培品种的高频率再生体系,外植体分化频率可达100％,每外植体芽数可达11.7个。研究了各种因素对离体再生,特别是芽伸长的影响,发现12天苗龄的子叶分化效果最佳。在MS+ZT2+GA_32mg/l培养基上芽伸长效果较好,有机添加物椰乳(CM)、酪蛋白水解物(CH)也有促进芽伸长的作用。从培养起至形成小植株约2～3个月,与以往文献报道的7个月相比,成苗周期大大缩短。

薄皮甜瓜‘花雷’再生体系的建立

为了研究创建薄皮甜瓜‘花雷’的再生体系,以薄皮甜瓜‘花雷’为试材,子叶、胚轴、真叶为外植体,观察其在含有不同种类和浓度生长调节剂的培养基中的再生频率。诱导愈伤组织的最佳外植体为子叶,最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)IAA,最佳分化培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.2 mg·L^(-1)IBA,最佳生根培养基为MS+0.2 mg·L^(-1)IBA。初步选出一套完整的适宜薄皮甜瓜‘花雷’再生体系建立的培养基。

五叶地锦离体培养及植株再生

以五叶地锦(Parthenocissus quinquefolia)子叶柄、下胚轴、叶片为外植体进行离体培养,以1/2 MS、B5和Heller为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA,KT,TDZ)及生长素(NAA)诱导下胚轴直接再生不定芽。实验结果表明,暗处理30 d,靠近下胚轴的子叶柄接种在1/2 MS+0.3 mg.L-16-BA培养基上,其不定芽分化率最高达64.67%;下胚轴接种在1/2 MS+2.0 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA和Heller+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-1NAA培养基上,其不定芽分化率接近,达到24%左右;无菌苗的叶片接种在B5+0.5 mg.L-1TDZ+0.05 mg.L-1NAA培养基上,其不定芽分化率达17.7%。芽增殖培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA增殖系数为3~5,1/2 MS+0.5 mg.L-1IBA+500 mg.L-1活性炭适于再生幼苗的生根,生根苗经移栽全部成活。

山西不同大豆品种再生体系的筛选

为探究品种对大豆再生体系的影响,试验选取山西省选育的10个大豆品种,对其子叶节再生体系和胚尖再生体系中不定芽诱导率、伸长率、生根率及再生苗成活率进行了研究。结果表明,在子叶节再生体系中,晋豆37号与中黄13号的各个参数值较其他品种高,且差异显著;而在胚尖再生体系中,晋豆36号各参数值均较高。同一大豆品种在不同的再生体系中表现也不同。邯豆5号、晋豆19号、晋豆36号在子叶节再生体系中的4个指标值均明显低于在胚尖再生体系中,而中黄13号与晋豆37号在子叶节再生体系中的各项数值均比在胚尖再生体系中高。初步认为,品种与大豆的再生能力有关,其中,邯豆5号、晋豆19号、晋豆36号较适合胚尖再生体系的研究,中黄13号与晋豆37号较适合子叶节再生体系的研究。这些结果可为进一步进行大豆遗传转化提供较好的受体材料作参考。

露薇花‘爱丽丝’系列外植体诱导及增殖试验分析

以露薇花种子无菌播种苗和穴盘播种苗为试验材料,比较两种条件下种子发芽情况,并将两种幼苗作为外植体,移入初代培养基内进行诱导培养和继代增殖。运用主成分分析法和相关性分析法,并通过建立拟合生长曲线,量化评价不同播种方式幼苗离体培养下生长情况。结果表明,穴盘播种发芽率较无菌播种发芽率高,幼苗根系发达,但苗离体培养污染率较高;离体无菌培养更有利于露薇花植株生长发育的进行,可将穴盘发芽幼苗灭菌后移植进培养基培养;继代培养穴盘播种和无菌播种苗之间无差异;继代培养3次,单瓶接种两株植株,植株长势最好,萌芽数,萌芽均高,增殖倍数高。通过本次实验,为露薇花高效生产繁殖提供理论依据,从而为西北地区新优特异花卉的引进,提供可行的途径方法。