MDP-Cyclic与CpG-ODN1826对小鼠膀胱瘤免疫治疗效应的初步研究

目的:研究卡介苗(BCG)有效成分MDP-Cyc lic和细菌细胞核有效成分CpG-ODN 1826免疫治疗小鼠膀胱瘤效应。方法:用小鼠膀胱肿瘤细胞(BTT739)在T739小鼠皮下接种,肿瘤形成后,于瘤内多点注射MDP-Cyc lic或CpG-ODN 1826共3次。ELISA检测IFN-γ和IL-4含量,3H-TdR掺入法和MTT法检测脾淋巴细胞增殖效应和对靶细胞杀伤效应。结果:(1)与生理盐水(NS)对照组相比,联合应用MDP-Cyc lic和CpG-ODN 1826组小鼠肿块重量明显减轻,优于单独使用CpG-ODN 1826组;(2)联合用药能明显促进IFN-γ分泌,而对IL-4没有显著影响;(3)脾淋巴细胞对联合用药或单用MDP-Cyc lic刺激均有增殖作用,与NS对照组相比差异有统计学意义;(4)脾淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤率联合用药组高于其它组。结论:联合应用免疫调节剂MDP-Cyc lic和CpG-ODN 1826能抑制小鼠膀胱肿瘤生长。

TLR9激动剂诱导建立小鼠子痫前期动物模型的研究

目的:明确TLR9激动剂能否诱导妊娠期小鼠发生子痫前期。方法:给妊娠期小鼠腹腔注射TLR9激动剂ODN1826,构建子痫前期小鼠模型,观察孕鼠血压、尿蛋白及胎鼠体重等变化情况,检测小鼠胎盘和肾脏TLR9表达水平。结果:实验组孕鼠的血压与尿蛋白均高于对照组,而胎鼠体重低于对照组。实验组小鼠胎盘和肾脏中TLR9表达升高。结论:TLR9激动剂能使TLR9表达升高并诱发妊娠期小鼠产生子痫前期样症状,提示TLR9可能参与子痫前期的发病机制。

CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗对小鼠的免疫效果

目的探讨CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗对C57/BL6小鼠的免疫效果。方法将C57/BL6小鼠随机分为3组:重组质粒(pc DNA3.1-L7/L12)+CpG ODN1826组(Vaccine+CpG组,每只注射20μg重组质粒和10μg CpG ODN1826)、重组质粒组(Vaccine组,每只注射20μg重组质粒)和对照组(注射生理盐水),注射部位均为后腿胫骨前肌。各组均于初次免疫后2周加强免疫1次。于加强免疫后2周,采用ELISA法检测各组小鼠血清中细胞因子水平;MTT掺入法检测小鼠脾细胞非特异性增殖效应;HE染色观察小鼠脾脏组织学变化。结果与Vaccine组和对照组相比,Vaccine+CpG组小鼠血清中Th1型细胞因子IL-2、IL-12、IFNγ含量均显著升高(P均<0.01);脾细胞增殖效应明显增强(P<0.05);脾脏生发中心明显变大,细胞增殖更活跃。结论 CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗能够明显诱导C57/BL6小鼠产生Th1型为主的免疫应答,增强脾脏淋巴细胞的增殖反应。

CpGODN增强人肺癌细胞株A549放射增敏作用的研究

目的初步探讨CpG ODN增强人肺腺上皮细胞株A549放射增敏作用。方法 ELISA法检测细胞TNF-α、IL-12和INF-γ的分泌水平,Griess检测细胞NO的含量并观察CpG ODN1826与β射线诱导A549细胞AP-1活化的抑制作用。结果 CpGODN增加了人肺癌细胞株A549TNF-α、IL-12、INF-γ和NO的分泌,在联合β射线照射后对A549细胞的杀伤作用更加显著,并显著抑制A549细胞AP-1的活化。结论 CpG ODN对A549有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN增强A549细胞分泌TNF-α、IL-12、INF-γ、NO和抑制A549细胞AP-1的活化有关。

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸1826对大鼠放射性肺纤维化的预防作用

目的 初步探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸（CpG ODN） 1826对大鼠放射性肺纤维化的防护作用.方法 采用6MVX射线单次左肺照射20 Gy,建立大鼠放射性肺纤维化模型.SD大鼠按完全随机法分为健康对照组、单纯照射组和药物干预组3组,每组30只.在照后0、1、3、5和7d,腹腔注射CpG ODN1826.照后5、15、30和90 d,取材,记录肺系数.照射肺石蜡切片HE染色、Masson染色,行肺纤维化评分.ELISA法检测血清TGF-β1浓度,碱化水解法检测肺组织羟脯氨酸（Hyp）浓度.结果 成功建立了放射性肺纤维大鼠模型.照后5d,健康对照组肺系数低于单纯照射组和药物干预组（t =3.046、2.252,P＜0.05）.照后15、30和90 d,药物干预组肺系数低于单纯照射组（t=4.120、5.226和5.719,P＜0.05）.单纯照射组及药物干预组照后30 d肺系数最高.药物干预组肺纤维化评分低于单纯照射组（t=3.212、4.959,P＜0.05）.药物干预组血清TGF-β1浓度低于照射组（t=4.138、5.924、5.294和4.076,P＜0.05）.单纯照射组照射肺Hyp含量高于药物干预组（t=7.527、8.416,P＜0.05）.结论 CpG ODN1826可以降低放射性肺纤维化大鼠血清TGF-β1浓度及Hyp含量,预防放射性肺纤维化.

TLR9激动剂对胰腺癌细胞增殖的影响

目的观察Toll样受体9(TLR9)激动剂CPG-寡核苷酸1826(CPG-ODN1826)对体外胰腺癌细胞株PANC-1增殖的影响。方法实验组用CPG-ODN1826干预PANC-1细胞,对照组单独培养PANC-1细胞。采用MTT法、结晶紫实验和软琼脂糖细胞克隆形成实验分析PANC-1细胞增殖能力,Western blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达。结果与对照组相比,实验组PANC-1细胞增殖能力提高(P<0.05),细胞克隆数增多[(35.60±2.70)个vs.(50.40±4.04)个](P<0.05),p-ERK和p-JNK的表达增强(0.455±0.057vs.0.665±0.121和0.301±0.028vs.0.656±0.051)(P<0.05)。结论 TLR9激动剂CPGODN1826能够促进胰腺癌细胞增殖。