HPLC法测定不同产地西红花中西红花苷-Ⅰ和西红苷-Ⅱ的含量

利用高效液相色谱法,同时测定不同产地西红花中的西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量;采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-水(45∶55,V/V)洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为440 nm,柱温为25℃。方法学考察表明:在上述色谱条件下,西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ能与杂质完全分离;标准曲线线性关系良好(R2>0.999 0),精密度和稳定性符合分析要求,平均加样回收率分别为99.42%、99.36%,RSD分别为1.48%、1.28%,表明所建立的方法重复性、耐用性、准确度良好。对10批不同产地的西红花药材进行分析,结果显示产自河南南阳、河南许昌、浙江湖州和河北定州的西红花的总苷含量高于其他产地,为西红花药材的质量评价和控制提供了一定的科学依据。

西红花甙-Ⅰ在大鼠体内的药代动力学

建立了在生物洋品中西红花甙-Ⅰ的HPLC测定法,并研究了其在大鼠体内药代动力学。杂质不干扰样品测定,回收率>80%,日间、日内RSD<5%。大鼠iv西红花甙-Ⅰ后,血药浓度-时间曲线符合二房室开放模型,在肺、肾组织中浓度较高,而脑和睾丸中浓度在检测限以下。药物自胆和粪的排泄甚少,24h尿排泄约占药剂量的1/3。

西红花甙-Ⅰ的高效液相色谱测定

报道了西红花甙的高效液相色谱的定量测定方法.Shim-pack CLCODS柱(150×6.0mm,ID,10 μm),前加一根预柱(Zorbax DIOL),流动相为甲醇-0.5%醋酸液(50∶50),检测波长440nm,柱温40℃。流速0.8/min,纸速1mm/min。加样回收率在99%以上,RSD小于1%。本法适用于番红花(Crocus satirusl)和栀子(Gardenia Jasminoieds Ellis)果实中西红花甙-Ⅰ的含量测定,亦适用其提取物和制剂的质量控制。

反相高效液相色谱法同时测定西红花苷Ⅰ和西红花酸

建立了反相高效液相色谱同时测定西红花苷Ⅰ和西红花酸的方法。采用C8色谱柱,流动相为甲醇水冰醋酸溶液,甲醇、水和冰醋酸比例为75∶24.5∶0.5,流速为0.6mL·min-1,检测波长为440nm,在该色谱条件下,西红花苷Ⅰ和西红花酸得到较好的分离,西红花苷Ⅰ和西红花酸浓度在0.625～40μg·mL-1范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,方法平均回收率为101.33%。该方法具有重复性好、准确、快速等优点,适用于西红花苷Ⅰ和西红花酸的同时测定。

栀子中西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的高效液相色谱法测定

目的建立了HPLC同时测定西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的方法。方法采用C8(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇水冰醋酸(75∶24.5∶0.5),流速为0.6 ml·min-1,检测波长为440 nm。结果在该色谱条件下,西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ得到较好的分离,西红花苷Ⅰ浓度在0.312μg·ml-1到10.000μg·ml-1范围内、西红花苷Ⅱ浓度在0.156μg·ml-1到5.000μg·ml-1范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,方法平均回收率为102.13%。结论该方法具有重复性好、准确、快速等优点,适用于西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的同时测定。

HPLC法测定红花益气养血胶囊中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量

目的建立HPLC法测定红花益气养血胶囊中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量。方法色谱柱：Hypersil ODS2C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：甲醇-水（48∶52）,检测波长：440 nm;流速：1.0 ml·min-1;柱温：室温。结果西红花苷-Ⅰ在12~45μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r=1.0000）,平均回收率为99.44%,RSD为1.19%（n=6）;西红花苷-Ⅱ在6.4~24μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.79%,RSD为1.38%（n=6）。结论本法简便、快速、准确,可用于红花益气养血胶囊中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量测定。

不同采收期水栀子果实中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ和栀子苷含量变化研究

建立水栀子药材中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ超高效液相色谱法(UPLC)含量测定的方法,研究不同采收期的水栀子药材中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ和栀子苷含量的变化趋势。西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ含量测定采用80%甲醇超声提取,通过UPLC-DAD法测定。色谱条件:Aglient Pro120 EC-C18(50 mm×4.6 mm,2.7μm)色谱柱,以水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,0~5 min,5%~20%B;5~17 min,20%~27%B;柱温15℃,流速0.8m L/min,检测波长440 nm。栀子苷含测采用《中国药典》2015年版一部栀子项下的含量测定方法检测。通过实验,红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ分别在49.5560~955.6000 ng、5.9045~1180.9000 ng线性范围内与各自峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996、r=0.9998),平均回收率分别为98.17%、99.67%(n=9)。表明建立的西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ含量测定方法简便,稳定性、重复性、分离度均好;随着采收期的延长,样本中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ的含量逐步增加,而栀子苷含量先降低后再逐步增加到一个平衡值。本研究为水栀子药材最佳采收期的确定提供了实验依据。

虫草保元胶囊中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ含量测定

目的 采用高效液相色谱法测定虫草保元胶囊中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量.方法 色谱柱为Hypersil ODS2 C18柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇：水（48：52）,检测波长：440 nm;柱温室温,流速：1.0 mL·min-1.结果 西红花苷-Ⅰ在6～45 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,r＝1.000 0,平均回收率98.73%,RSD为1.24%（n＝6）;西红花苷-Ⅱ在3.2～24.0 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,r＝1.000 0,平均回收率98.01 %,RSD为1.53 %（n＝6）.结论 该方法操作简便,测定结果准确,重复性好,可用于虫草保元胶囊的质量控制.

HPLC法测定浙江慈溪水稻田栽培的西红花中西红花苷Ⅰ、Ⅱ含量的研究

为了检测栽培于浙江慈溪水稻田中的西红花所含的西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的含量,采用高效液相色谱法,色谱条件为Intertsil ODS-SP C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(60∶40),检测波长440nm,流速1.0 m L/min,进样量为20μL,柱温为室温。结果表明:西红花花柱中西红花苷I的平均含量为8.85%,西红花苷Ⅱ的平均含量为3.72%;雄蕊中西红花苷I的平均含量为0.094%,西红花苷Ⅱ的平均含量为0.005%;而花瓣中西红花苷I和西红花苷Ⅱ的含量极少,未能检出。因此,栽培于浙江慈溪水稻田中的西红花花柱中西红花苷I和西红花苷Ⅱ两者含量之和为12.57%,符合2010版《中国药典》的质量标准,可以作为药用。

基于含量测定和指纹图谱评价电子束辐照灭菌对藏药小檗膏耳用散剂质量的影响

目的 评价电子束辐照灭菌对藏药小檗膏耳用散剂质量的影响。方法 分别采用0、2、4、6、8、10 kGy剂量的电子束辐照处理小檗膏耳用散剂,研究不同剂量电子束辐照对其性状、指纹图谱、生物负载及指标成分盐酸小檗碱、没食子酸和西红花苷-Ⅰ含量的影响。结果 电子束辐照剂量增加时,粉末颜色略有加深,各组之间无明显变化,均为棕黄色粉末;电子束辐照能够有效降低小檗膏耳用散剂中细菌和霉菌、酵母菌菌落总数,随着辐照剂量增大,其存活数显著降低(P<0.05);电子束辐照对小檗膏耳用散剂中主要成分盐酸小檗碱、没食子酸和西红花苷-Ⅰ 的含量无显著影响(P>0.05)。不同剂量电子束辐照处理的小檗膏耳用散剂指纹图谱的相似度均大于0.958,表明经电子束辐照处理的样品与未辐照样品相比无显著变化。结论 10 kGy以下电子束辐照灭菌对藏药小檗膏耳用散剂的多个指标成分的含量无明显影响,而6 kGy以下电子束辐照灭菌即可符合《中国药典》2020年版微生物限度标准的规定。电子束辐照适用于小檗膏耳用散剂的灭菌,为电子束辐照技术在小檗膏耳用散剂灭菌中的应用提供了科学依据。

番红花甙-Ⅰ的结构分析

番红花甙的谱学、文献均应用比较法予以归属 ,为了提供一个更为准确的归属 ,采用 HMBC、HMQC等新技术 ,用“从头开始”( ab initio)法对番红花甙 - ( crocin- )的氢和碳的核磁共振化学位移进行了从新归属 ,结果与比较法相近 ,但其数据准确 ,可靠。

一测多评法测定通滞苏润江胶囊中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ的含量

目的:建立测定通滞苏润江胶囊中的西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ含量的一测多评方法。方法:采用HPLC法,用相对较稳定的西红花苷-Ⅰ对照品替代西红花苷-Ⅱ对照品测定其含量。结果:西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ分别在0.0~108.52μg·L-1、0.0~53.41μg·L-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.09%、97.60%,RSD分别为0.01%、0.40%。52批样品测定结果表明一测多评法与常规外标法测得含量结果一致。结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于通滞苏润江胶囊的质量控制。

栀子不同部位栀子苷和西红花苷Ⅰ的提取工艺和含量测定

为优选栀子不同部位中栀子苷和西红花苷Ⅰ的提取工艺并测定期含量,利用正交实验,采用超声、回流、微波3种方法,同时建立栀子苷和西红花苷Ⅰ的HPLC同步测定方法。结果表明,微波法的提取效果较好。果皮最佳提取工艺为提取温度为80℃,时间为25 min,料液比为1:15,乙醇浓度为95%;果仁最佳提取工艺为提取时间为30 min,料液比为1:20,温度为80℃,乙醇浓度为75%。采用Waters WATO54275-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,流速为1 mL/min,进行梯度洗脱,栀子苷和西红花苷Ⅰ检测波长分别为238、440 nm。HPLC测定结果表明,‘林海1号’栀子果皮中栀子苷、西红花苷Ⅰ最高含量分别为13.53、3.3 mg/g;果仁中栀子苷、西红花苷Ⅰ最高含量分别为44.64、7.72 mg/g。上述结果为栀子种质评价和不同部位的开发利用提供科学参考和依据。

西红花苷-Ⅰ对阿尔茨海默病大鼠前额叶皮质Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察西红花苷-Ⅰ对阿尔茨海默病(AD)大鼠Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白Wnt3a、β-catenin表达的影响,探讨西红花苷-Ⅰ治疗AD的机制.方法:健康成年SD大鼠随机分为正常对照组,AD模型组,西红花苷-Ⅰ20 mg/kg、40 mg/kg剂量组,每组18只.侧脑室微量注射5μl Aβ25-35建立AD大鼠模型.利用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间记忆能力,免疫组织化学、免疫荧光和免疫印迹检测不同组别大鼠前额叶皮质Wnt3a、β-catenin蛋白的表达.结果:Morris水迷宫实验中,从第2实验日开始,模型组大鼠逃避水下平台的潜伏期时间较正常对照组显著延长,目标象限的停留时间均明显降低,穿越原平台位置的次数也明显减少;经西红花苷-Ⅰ干预治疗后,大鼠的学习记忆能力得到明显改善;与正常对照组相比,AD模型组Wnt3a、β-catenin蛋白的表达显著性减少,经西红花苷-Ⅰ干预治疗后,能够明显逆转上述蛋白的表达.结论:西红花苷-Ⅰ可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,增加Wnt3a、β-catenin的表达,对AD大鼠空间辨别性学习记忆能力有一定的改善作用.

UPLC波长切换法同时测定西红花中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和苦番红花素含量

目的:建立UPLC波长切换法同时测定西红花中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和苦番红花素的含量。方法:采用超高效液相色谱法,选用Waters ACQUITY UPLC~HSS T3(2.1mm×100mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈(B)-水溶液(A)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4mL/min,柱温25℃,进样量2μL;采用波长切换法检测:0～6min,254nm,苦番红花素;6～20min,440nm,西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ。结果:苦番红花素、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ分别在1.91～61.00μg/mL,1.48～47.36μg/mL和0.89～28.70μg/mL浓度范围内与峰面积积分线性关系良好,相关系数均为0.999 8;平均加样回收率(n=6)及相应的RSD分别为99.07%(2.30%)、102.74%(2.32%)和96.52%(1.39%)。结论:建立的UPLC波长切换法同时测定西红花各指标性成分的含量简便可靠、专属性良好、重复性好、精密度高,可为西红花的等级评价及质量控制提供一定的科学依据。

西红花中西红花苷-1和西红花苷-2含量测定方法的建立

目的:建立西红花中西红花苷-1和西红花苷-2的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,使用Zorbax C_(18)色谱柱,乙腈和水为流动相梯度洗脱,检测波长440nm,流速1.0mL·min^(-1);同时采用单因素分析的方法,对影响含量测定结果的主要因素如提取溶剂、超声处理时间、提取温度及是否避光等进行考察。结果:西红花苷-1在5.2～165μg·mL^(-1),西红花苷-2在2.7～85μg·mL^(-1)范围均呈良好线性关系,相关系数分别为0.9999和0.9998,平均回收率分别为102.5%和98.2%。西红花样品溶液的制备应在避光、室温条件下,以50%乙醇超声处理30min为宜。结论:按照本法进行西红花供试品溶液的制备和含量测定,结果稳定,重现性好,可用于西红花中西红花苷-1和西红花苷-2的含量测定。

不同产地栀子皮和栀子仁中有效成分的含量比较

目的对10个不同产地的栀子,不同药用部位(栀子果实、栀子皮、栀子仁)中有效成分栀子苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ的含量进行比较,为栀子皮、栀子仁分开使用寻找科学依据。方法采用变换波长RP-HPLC法同时测定栀子苷和西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ的含量。Thermo ODS色谱柱C1(8250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长分别为栀子苷238 nm、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ440 nm。结果被测定成分色谱峰与其他色谱峰可以达到完全分离。栀子苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ的进样量分别在0.420～5.252,0.199～2.495,0.023～0.288μg范围内与各自峰面积呈良好线性关系,r分别为0.9993,0.9998,0.9997;三者平均回收率分别为98.23%,97.88%,97.77%;RSD为0.52%,2.02%,1.47%。结论该方法简便、准确、重复性好,可同时测定多个产地栀子不同药用部位栀子有效成分的含量。为栀子皮、栀子仁分别使用提供了科学依据。

HPLC法同时测定七十味珍珠丸中6种成分

目的建立HPLC法同时测定藏药七十味珍珠丸(西红花、降香、甘草等)中6种成分的含有量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Inertsil■ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以0.2%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;检测波长254 nm。结果没食子酸、柯里拉京、沉香四醇、鞣花酸、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ分别在1.41~42.24、0.61~18.24、0.30~9.12、0.47~14.04、0.62~18.48、0.32~9.45μg/m L范围内线性关系良好(R2≥0.999 4),平均加样回收率(RSD)分别为93.41%(1.75%)、96.84%(1.75%)、97.45%(0.58%)、93.22%(0.56%)、97.01%(1.39%)、97.22%(1.11%)。2个厂家不同批次样品中各成分含有量有一定差异,尤其以柯里拉京和沉香四醇更明显。结论七十味珍珠丸质量不稳定,应引起关注。

炮制对栀子中色素类成分含量的影响

目的:研究炮制对栀子中色素类成分含量的影响。方法:以西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和西红花酸含量为指标,对3个产地的栀子、炒栀子与焦栀子中试饮片进行比较。结果:西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ的含量顺序为:栀子>炒栀子>焦栀子;西红花酸的含量顺序为:栀子<炒栀子<焦栀子。结论:加热炒制可使栀子中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ含量显著降低,栀子经炒黄、炒焦后可产生西红花酸。

HPLC测定西红花提取物及其片剂中各西红花苷含量

报道反相ＨＰＬＣ测定西红花提取物及其片剂中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ及西红花总苷的含量，Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ５ＯＤＳ柱（１５０ｍｍ×４６ｍｍ），配预柱的Ｗａｔｅｒｓ在线过滤器，流动相为甲醇—水（５５∶４５），检测波长为４４０ｎｍ，室温，流速１０ｍＬ／ｍｉｎ，纸速０５ｃｍ／ｍｉｎ。加样回收率：西红花提取物中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ及其总苷分别为１０３３％、９９３％、１００４％。各自的ＲＳＤ（％）顺次为３２、３７、１７（ｎ＝９）；西红花多苷片模拟片中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ及其总苷分别为９８４％、１０１７％、９９８％。其ＲＳＤ（％）分别为１５、１１、２０（ｎ＝６）。本法分离度好，精密准确，可用于控制西红花提取物及其制剂的质量。