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Studies on Rapid Quantitative Analysis of Bt Toxin by Using Envirologix Kits in Transgenic Rice
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作者 XIE Xiao-bo and SHU Qing-yao( Key Laboratory of Nuclear Agricultural Sciences , Ministry of Agriculture and Zhejiang Province ,Institute of Nuclear Agricultural Sciences , Zhejiang University, Hangzhou 310029 National Rice Improvement Center ,China National Rice Research Institute, Hangzhou 310006) 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2002年第2期121-124,共4页
Investigations were done on the usefulness of Envirologix CrylAb/CrylAc Plate kits for quantitative analysis of Bt toxin content in transgenic rice grains. Two transgenic rice lines: Kemingdao 1 (KMD1) and Kemingdao 2... Investigations were done on the usefulness of Envirologix CrylAb/CrylAc Plate kits for quantitative analysis of Bt toxin content in transgenic rice grains. Two transgenic rice lines: Kemingdao 1 (KMD1) and Kemingdao 2 (KMD2), transformed with a crylAb gene, and their parental variety, cv. Xiushui 11, were used as positive and negative samples. Results showed that the correlation coefficients as high as 0. 985 - 0. 998, significant at probability level of 0. 05 or 0.01, were obtained for linear regression equations by using the appended calibrators of the kits. No significant differences were detected for values of same rice sample obtained from different trials or by using different lots of the product (kit). The detectable Bt toxin content by this method could be as low as 0.5 ng/g. The Envirologix Kit could be useful for rapid quantitative detection of Bt toxin in rice grains because of its preciseness, simplicity and time saving. 展开更多
关键词 Envirologix crylab/CrylAc plate kit Bt toxin TRANSGENIC Rice
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Bt玉米杀虫蛋白含量的时空表达及对亚洲玉米螟的杀虫效果 被引量:35
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作者 王冬妍 王振营 +3 位作者 何康来 丛斌 白树雄 文丽萍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1155-1159,共5页
利用ELISA方法对2个转Cry1Ab基因抗虫玉米品种MON810和Bt11在不同生育期、不同组织器官中杀虫蛋白的表达量进行了分析,利用室内生测方法研究了不同组织器官对亚洲玉米螟初孵幼虫杀虫效果,并分析了杀虫蛋白表达量与杀虫效果的相关性。结... 利用ELISA方法对2个转Cry1Ab基因抗虫玉米品种MON810和Bt11在不同生育期、不同组织器官中杀虫蛋白的表达量进行了分析,利用室内生测方法研究了不同组织器官对亚洲玉米螟初孵幼虫杀虫效果,并分析了杀虫蛋白表达量与杀虫效果的相关性。结果表明,Cry1Ab杀虫蛋白在Bt玉米MON810和Bt11的不同生育期和组织中的表达量呈明显的时空动态变化,以营养生长阶段的心叶组织表达最高,分别为1880.6和1473.1ng·g-1,生殖生长阶段的花粉含量最低,分别为52.3和73.3ng·g-1。随着叶片的生长,叶片中的杀虫蛋白含量明显下降,生殖生长阶段的各组织器官的杀虫蛋白的含量因组织而异。不同Bt玉米品种间同一组织器官的杀虫蛋白表达量也存在一定差异。室内生测结果表明,2个Bt玉米各组织对亚洲玉米螟初孵幼虫具有很好的杀虫效果,心叶、苞叶、雌穗尖和籽粒中Bt杀虫蛋白表达量及取食的幼虫死亡率呈显著正相关,但Bt11花丝以及MON810和Bt11的雄穗中Bt杀虫蛋白的含量与杀虫效果不一致,说明Bt玉米杀虫活性的表达还会受到其它一些因素的影响。 展开更多
关键词 BT玉米 杀虫蛋白 含量 时空表达 亚洲玉米螟 杀虫效果
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转Bt基因抗虫玉米对亚洲玉米螟幼虫几种主要酶系活性的影响 被引量:40
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作者 徐艳聆 王振营 +1 位作者 何康来 白树雄 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期562-567,共6页
研究了表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因抗虫玉米对亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis(Guen啨e)幼虫解毒酶、保护酶和中肠蛋白酶活性的影响,测定比较了取食转Bt基因玉米后幼虫体内α乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽S转移酶、过氧化氢酶、... 研究了表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因抗虫玉米对亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis(Guen啨e)幼虫解毒酶、保护酶和中肠蛋白酶活性的影响,测定比较了取食转Bt基因玉米后幼虫体内α乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽S转移酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、中肠总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活力。结果表明,取食转Bt基因玉米48h后亚洲玉米螟幼虫体内的α乙酸萘酯酶、谷胱甘肽S转移酶活力明显低于对照;而乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照,在取食48h、60h和72h的活力分别是对照的2.00、1.50和2.50倍。保护酶系、中肠总蛋白酶、弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活性在取食48h后明显受到抑制;但强碱性类胰蛋白酶的活性显著高于对照,取食48h、60h和72h的活力分别是对照的4.00、1.67和1.33倍。乙酰胆碱酯酶和强碱性类胰蛋白酶可能与亚洲玉米螟对Bt的抗性有关。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 crylab杀虫蛋白 转BT基因玉米 解毒酶 保护酶 蛋白酶
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转Bt基因抗虫玉米对玉米蚜种群增长的影响 被引量:26
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作者 李丽莉 王振营 +2 位作者 何康来 白树雄 花蕾 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期1077-1080,共4页
在人工气候箱条件下研究了玉米蚜(Rhopalosiphum maidisFitch)取食表达cry1Ab杀虫蛋白Bt抗虫玉米的实验种群生命表.结果表明:两种不同Bt玉米杂交种DK647BTY(MON810转化事件)和NX4777(B t11转化事件)对玉米蚜的生长、发育、繁殖和存活均... 在人工气候箱条件下研究了玉米蚜(Rhopalosiphum maidisFitch)取食表达cry1Ab杀虫蛋白Bt抗虫玉米的实验种群生命表.结果表明:两种不同Bt玉米杂交种DK647BTY(MON810转化事件)和NX4777(B t11转化事件)对玉米蚜的生长、发育、繁殖和存活均无明显的不利影响,玉米蚜在DK647BTY和NX4777两种Bt玉米品种上的内禀增长率rm、周限增长率λ和种群净增殖率R0与各自对照之间没有显著差异;玉米蚜有翅蚜比率、各龄若虫的死亡率在Bt玉米和对照以及不同品种之间没有明显差异;Bt玉米对玉米蚜的寿命和繁殖历期也没有明显差异.表明表达cry1Ab杀虫蛋白的Bt玉米对玉米蚜的生长发育和繁殖没有明显影响. 展开更多
关键词 BT玉米 CRY1AB杀虫蛋白 玉米蚜 种群增长
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人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定 被引量:1
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作者 焦凌霞 徐茜茜 +3 位作者 刘媛 张宵 梁颖 刘贤金 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期268-273,共6页
以Cry1Ab毒素作为抗原,将扩增后的噬菌体单域抗体库与固相化包被的Cry1Ab毒素特异性结合,利用噬菌体展示技术从人源化噬菌体单域抗体库(DAB)中筛选抗Cry1Ab毒素的单域抗体。采用正负筛选方法,经4轮"吸附-洗脱-扩增"后,富集特... 以Cry1Ab毒素作为抗原,将扩增后的噬菌体单域抗体库与固相化包被的Cry1Ab毒素特异性结合,利用噬菌体展示技术从人源化噬菌体单域抗体库(DAB)中筛选抗Cry1Ab毒素的单域抗体。采用正负筛选方法,经4轮"吸附-洗脱-扩增"后,富集特异性识别Cry1Ab毒素的噬菌体单域抗体。第4轮筛选得到的单菌落经单克隆ELISA鉴定,获得6株对Cry1Ab毒素具有较强结合活性的阳性单域抗体菌株,经PCR鉴定和DNA测序,均有完整的单域抗体基因片段插入。对6株阳性克隆的氨基酸序列进行比对分析,其序列差异主要存在于单域抗体的CDR区。 展开更多
关键词 Cry1Ab毒素 单域抗体 噬菌体展示技术 正负筛选 ELISA
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