免疫浸润相关基因CSAG1对肾透明细胞癌进展作用的研究

目的研究在肾透明细胞癌(RCCC)中CSAG1表达水平与免疫细胞浸润的关系,分析浸润模式与生存预后的相关性,预测患者生存期及肿瘤进展情况。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获得mRNA表达谱和临床数据,根据CSAG1与肾癌中的共表达基因进行功能和信号通路富集分析。运用Timer 2.0数据库分析CSAG1与免疫细胞浸润的关系。我们进一步使用qRT-PCR实验验证了CSAG1在人RCCC标本中的mRNA表达水平。结果生物信息学分析表明CSAG1在RCCC组织中表达水平显著高于癌旁正常肾组织(P<0.05)。同时qRT-PCR实验验证CSAG1在人RCCC中基因表达水平与生物信息学分析结果相一致。功能和信号通道富集分析提示高表达CSAG1在RCCC中与跨膜转运、三羧酸循环及溶酶体有关。CSAG1的表达与pDC、aDC、CD^(+)8T细胞、Cytotoxic细胞、TFH、TH1细胞、Tem、NK CD56^(dm) cells、Treg、T细胞等免疫细胞浸润呈正相关关系,与巨噬细胞的浸润呈负相关关系。结论CSAG1在RCCC中可能与不良预后相关,并可能为RCCC的免疫治疗提供新分子靶点。

茶树花发育MADS-box转录因子CsGLO1、CsGLO2与CsAG之间的互作关系研究

利用酵母双杂交方法和双分子荧光互补技术(BiFC)研究了茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)花发育MADS-box的B类转录因子Cs GLO1、Cs GLO2与C类转录因子CsAG间的互作关系及其可能发生互作的亚细胞定位。通过构建5个酵母表达载体,利用酵母单杂交实验检测了3个蛋白的转录激活活性,并通过酵母双杂交实验分析了蛋白间的互作关系。结果显示,3个蛋白均无转录激活活性,且两两之间可发生相互作用。进一步构建6个BiFC表达载体,采用压力注射法瞬时浸染烟草(Nicotiana benthamiana L.)叶表皮细胞,并利用激光共聚焦显微镜观察荧光信号,结果表明茶树B类CsGLO与C类CsAG蛋白可在植物活细胞内形成同源和异源二聚体,并具有在细胞质中发生互作的特定模式。本研究可为利用分子生物学技术抑制茶树"花果同现"现象提供理论依据。

肝癌组织CT抗原基因CSAG1表达及体外对肝癌细胞生长的影响

目的:探讨CSAG1(chondrosar-coma associated gene 1)基因在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长增殖的影响,为了解肝癌发生的分子机制奠定理论基础。方法:利用半定量RT-PCR技术检测CSAG1基因在12例肝癌和癌旁组织中的表达差异;RNA干扰技术沉默肝癌细胞株(Focus)内CSAG1基因的表达;利用CCK-8、克隆形成实验以及流式细胞仪分别定量分析内源性CSAG1基因被沉默前后的Focus细胞生长曲线、克隆形成能力以及细胞周期的变化。结果:与癌旁组织相比较,CSAG1基因在75%(9/12)肝癌组织中的表达量明显上调;沉默肝癌细胞株Focus中内源性CSAG1基因表达后,Focus细胞的生长明显减慢,克隆形成能力明显降低,S期细胞明显减少。结论:CSAG1可能是一个新的肝癌相关的促进基因,对其进行深入的研究有可能发现肝癌发病的新机制,也有可能发现肝癌治疗的新靶点。

应用猪囊尾蚴囊液、头节和囊壁抗原斑点ELISA诊断脑囊虫病的比较研究

应用猪囊尾蚴囊液、头节和囊壁抗原斑点 ELISA 检测脑囊虫病患者血清.当血清稀释度为1:20～1:320时,囊液、头节和囊壁抗原对脑囊虫病患者血清的检出阳性率分别为95:7%～82.9%,95.7%～71.4%和97.1%～30%。3种抗原与正常人、肺吸虫病人、华支睾吸虫病人及脑血管病人血清均无假阳性反应或交叉反应。与细胞粒棘球蚴病人血清的交叉反应率分别是22.5%～47.5%,10%～42.5%和10%～17.5%,以囊壁抗原的交叉反应为最低。