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东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的克隆及表达分析 被引量:14
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作者 李玉坤 王学敏 +3 位作者 高洪文 仁爱琴 王赞 孙桂枝 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期95-101,共7页
超氧化物歧化酶是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类,在植物的抗逆性中起到重要的作用。文章采用RACE方法,从东方山羊豆中克隆了Cu/ZnSOD基因,并对其进行了初步分析。该基因cDNA序列全长935 bp,开放阅读框600 bp,编码199个氨基酸,蛋... 超氧化物歧化酶是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类,在植物的抗逆性中起到重要的作用。文章采用RACE方法,从东方山羊豆中克隆了Cu/ZnSOD基因,并对其进行了初步分析。该基因cDNA序列全长935 bp,开放阅读框600 bp,编码199个氨基酸,蛋白质分子量为20.35 kDa。通过实时荧光定量PCR结果分析,该基因在东方山羊豆叶中表达量最多,茎中次之,根中最少。在NaCl和PEG诱导下,Cu/ZnSOD基因表达量先上调后下降。NaCl诱导24 h后,该基因的表达量显著低于对照。ABA胁迫抑制了该基因的表达。亚细胞定位结果表明,Cu/ZnSOD蛋白定位于叶绿体中。实验结果证明,Cu/ZnSOD基因主要在东方山羊豆的绿色组织中表达,在抵抗渗透性胁迫方面起到一定作用。 展开更多
关键词 东方山羊豆 cu/znsod基因 基因克隆 实时荧光定量PCR 亚细胞定位
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甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因的克隆及菌核病菌诱导表达 被引量:17
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作者 杨鸯鸯 李云 +4 位作者 丁勇 徐春雷 张成桂 刘英 甘莉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期71-78,共8页
依据拟南芥、芥菜型油菜和白菜已知超氧化物歧化酶(SOD)保守序列设计引物,用同源序列法和RT-RACE技术克隆甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因,经序列分析和基因片段拼接,得到Cu/ZnSOD和FeSOD基因的全长cDNA,分别为756 bp(GenBank登录号AY970... 依据拟南芥、芥菜型油菜和白菜已知超氧化物歧化酶(SOD)保守序列设计引物,用同源序列法和RT-RACE技术克隆甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因,经序列分析和基因片段拼接,得到Cu/ZnSOD和FeSOD基因的全长cDNA,分别为756 bp(GenBank登录号AY970822)和1 037 bp(GenBank登录号EF634058)。以cDNA序列设计引物,获得1 322 bp的Cu/ZnSOD基因组DNA(GenBank登录号DQ431853)和1 659 bp的FeSOD基因组DNA(GenBank登录号EF634057)。生物信息学分析表明,Cu/ZnSOD基因ORF框长459 bp,编码152个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有7个外显子和6个内含子。而FeSOD基因ORF框长792 bp,编码263个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有8个外显子和7个内含子。二者外显子和内含子交接处完全符合GT/AG规则。利用获得的Cu/ZnSOD的cDNA片段作探针,对菌核病菌诱导甘蓝型油菜叶片的mRNA进行Northern blot分析,结果显示在同一品种(系)中菌核病菌诱导后Cu/ZnSOD mRNA表达量比诱导前升高,抗(耐)型油菜Cu/ZnSOD mRNA表达量明显高于感病型。油菜叶片SOD酶活性分析结果也获得了完全一致的结果。以上结果表明,甘蓝型油菜SOD基因与菌核病抗性相关。 展开更多
关键词 cu/Zn-超氧化物歧化酶 Fe-超氧化物歧化酶 甘蓝型油菜 菌核病菌 基因表达分析
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日粮纳米锌水平对公羊睾丸和附睾Cu-ZnSOD表达的影响 被引量:7
3
作者 任有蛇 秦小伟 +4 位作者 郭丽娜 赵辉 刘文忠 张建新 张春香 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1622-1630,共9页
旨在研究日粮纳米锌对公羊睾丸和附睾铜锌超氧化物歧化酶基因(Cu-ZnSOD)mRNA和蛋白表达的影响。将16只9月龄体重相近、健康状况良好的晋中绵羊公羊随机分成4组,分别喂给基础日粮(对照组),基础日粮+纳米锌(50、100和150mg·kg-1 DM)... 旨在研究日粮纳米锌对公羊睾丸和附睾铜锌超氧化物歧化酶基因(Cu-ZnSOD)mRNA和蛋白表达的影响。将16只9月龄体重相近、健康状况良好的晋中绵羊公羊随机分成4组,分别喂给基础日粮(对照组),基础日粮+纳米锌(50、100和150mg·kg-1 DM)。预饲期10d,正试期80d。试验结束时采集绵羊睾丸和附睾组织。采用RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术检测其Cu-ZnSOD mRNA、Cu-ZnSOD蛋白表达及在睾丸中定位情况。结果显示:绵羊睾丸和附睾组织Cu-ZnSOD mRNA表达量顺序是附睾头≥睾丸>附睾体>附睾尾。日粮添加50~100mg·kg-1纳米锌可增加其睾丸和附睾组织Cu-ZnSOD mRNA和蛋白表达量。免疫组化结果显示CuZnSOD在睾丸的生精细胞中有强阳性信号,间质细胞有弱阳性信号。综上表明,绵羊睾丸和附睾不同区段CuZnSOD mRNA和蛋白表达有差异。日粮添加适量锌可提高睾丸和附睾中Cu-ZnSOD mRNA和蛋白表达量,其作用机制仍需进一步研究。 展开更多
关键词 cu-znsod RT-PCR WESTERN BLOTTING 睾丸 附睾 公羊
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纳米锌水平对公羊精液品质、抗氧化酶活性及附睾Cu-ZnSOD表达的影响 被引量:12
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作者 张春香 秦小伟 +3 位作者 郭丽娜 张国林 张建新 任有蛇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期154-164,共11页
【目的】微量元素锌是动物正常繁殖所必需的元素,研究旨在了解日粮纳米锌对公羊精液品质、抗氧化酶和附睾Cu-Zn SOD蛋白表达的影响,分析公羊精液品质参数与精浆抗氧化酶活性的相关性。【方法】将16只9月龄健康状况良好体重相近的晋中绵... 【目的】微量元素锌是动物正常繁殖所必需的元素,研究旨在了解日粮纳米锌对公羊精液品质、抗氧化酶和附睾Cu-Zn SOD蛋白表达的影响,分析公羊精液品质参数与精浆抗氧化酶活性的相关性。【方法】将16只9月龄健康状况良好体重相近的晋中绵羊公羊,随机分成4组,分别喂给基础日粮(对照组),基础日粮+50 mg·kg-1、100 mg·kg-1和150 mg·kg-1DM纳米锌。试验期90 d。在试验78 d和79 d连续两天采集精液,每次采集精液取出100μL评价精液品质参数,剩余精液离心分离精浆,测定精浆Cu-Zn SOD、GPxs活性及总抗氧化能力;试验结束时,用手术去势法采集附睾头、附睾体和附睾尾组织,采用免疫组化技术对附睾头、附睾体和附睾尾中Cu-Zn SOD进行定位,并用Image Pro Plus 7.0软件分析的平均光密度值进行Cu-Zn SOD蛋白定量。【结果】日粮纳米锌对公羊射精量影响差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,添加50 mg·kg-1或100 mg·kg-1纳米锌组公羊的精子密度、精子活力和精子质膜完整性显著增加(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05);添加150 mg·kg-1组精子质膜的完整度显著增加(P<0.05),其精子活力和精子密度与对照组的差异不显著(P>0.05)。日粮添加50 mg·kg-1或100 mg·kg-1纳米锌组公羊精浆Cu-Zn SOD活性、GPxs活性和总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05),精浆MDA含量显著低于对照组(P<0.05);添加150 mg·kg-1组公羊精浆总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05),其精浆Cu-Zn SOD活性、GPxs活性和MDA含量与对照组差异不显著(P>0.05)。免疫组化定位结果显示Cu-Zn SOD在附睾头和附睾体假复层上皮、结缔组织和附睾尾的单层柱状上皮中均检测到阳性信号,试验处理组公羊附睾中Cu-Zn SOD表达量由高到低顺序是:附睾体>附睾头>附睾尾;然而对照组的顺序为:附睾头>附睾体>附睾尾。50 mg·kg-1或100 mg·kg-1纳米锌组公羊附睾头和附睾体阳性信号的平均光密度显著高于对照组和150 mg·kg-1纳米锌(P<0.05)。精浆Cu-Zn SOD活性与精子密度、精子活力和精子质膜完整性呈正相关,与精子畸形率呈负相关。【结论】日粮添加50 mg·kg-1或100 mg·kg-1纳米锌可改善精液品质,提高精浆抗氧化能力,增加附睾中Cu-Zn SOD蛋白表达量。精浆Cu-Zn SOD活性可以作为检测精液品质优劣的指标在羊生产中应用。微量元素锌对精液品质影响调控的分子机理还需进一步深入研究。 展开更多
关键词 cu-znsod表达 精液品质参数 抗氧化酶 附睾 公羊
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Cu/ZnSOD基因敲除小鼠——研究耳蜗氧化损伤的理想模型 被引量:1
5
作者 张欣欣 韩东一 +4 位作者 丁大连 戴朴 杨伟炎 姜泗长 Richard J.Salvi 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2001年第4期209-212,共4页
目的 确定一个理想的耳蜗氧化损伤模型。方法 对 5只Cu/ZnSOD基因敲除纯合突变 (Cu/ZnSOD无活性 ,Sod1- / - )小鼠和 10只Cu/ZnSOD杂合突变 (5 0 %Cu/ZnSOD失活 ,Sod1+/ - )小鼠及 5只野生小鼠 (Cu/Zn SOD活性正常 ,Sod1+/ +)进行ABR... 目的 确定一个理想的耳蜗氧化损伤模型。方法 对 5只Cu/ZnSOD基因敲除纯合突变 (Cu/ZnSOD无活性 ,Sod1- / - )小鼠和 10只Cu/ZnSOD杂合突变 (5 0 %Cu/ZnSOD失活 ,Sod1+/ - )小鼠及 5只野生小鼠 (Cu/Zn SOD活性正常 ,Sod1+/ +)进行ABR检测及内、外毛细胞计数。应用PCR技术检测Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗mtDNA缺失情况。结果 Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗内外毛细胞大量缺失 (P <0 .0 0 1) ,ABR检测 ,Sod1- / -小鼠ABR阈值在 8,16 ,32kHz及Sod1+/ -小鼠ABR阈值在 16 ,32kHz明显增大 (P <0 .0 0 1)。Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗mtDNA有三种缺失 ,分别为mtDNA 386 7bp、mtDNA 372 6bp及mtDNA 432 6bp缺失。结论 Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗在细胞及分子水平上均表现出受到ROS损伤的改变 ,是一个理想的耳蜗氧化损伤模型。 展开更多
关键词 cu/znsod基因敲除 活性氧 模型 耳蜗氧化损伤
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超氧阴离子自由基诱导皮层神经细胞Cu/ZnSOD基因表达的研究 被引量:5
6
作者 姜招峰 何湘平 +1 位作者 刘传缋 杨翰仪 《北京联合大学学报》 CAS 2003年第3期9-11,共3页
 目的:探讨超氧阴离子自由基对神经细胞Cu ZnSOD基因表达的影响。方法:以产超氧阴离子自由基系统(XO X)作用于原代培养的新生大鼠大脑皮层神经元,分析SOD含量、SOD活性和SODmRNA丰度。结果:SOD含量随超氧阴离子自由基作用时间的延长显...  目的:探讨超氧阴离子自由基对神经细胞Cu ZnSOD基因表达的影响。方法:以产超氧阴离子自由基系统(XO X)作用于原代培养的新生大鼠大脑皮层神经元,分析SOD含量、SOD活性和SODmRNA丰度。结果:SOD含量随超氧阴离子自由基作用时间的延长显著增加,第5天后增加的变化趋于稳定,第7天达每毫克蛋白质(1 24±0 23)μg;SOD活性在开始的1~5d呈上升状态,第5天为每毫克蛋白质(5 30±0 44)U,第6天开始显著下降为每毫克蛋白质(2 15±0 32)U,且稳定至第7天的每毫克蛋白质(2 08±0 73)U;SODmRNA的相对丰度显著高于对照组。结论:超氧阴离子自由基可诱导培养的神经细胞Cu ZnSOD基因表达;SOD活性变化和SOD含量变化并不平行,可能是在超氧阴离子自由基作用一定时间后,细胞内出现了无活性或 和低活性的SOD。 展开更多
关键词 超氧阴离子自由基 诱导 皮层神经细胞 cu/znsod 基因表达 活性 老年性痴呆 氧化修饰
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林蛙油灌胃对小鼠肝组织中Cu/ZnSOD基因表达的影响
7
作者 杜智恒 王慰慰 白秀娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期58-63,共6页
以小鼠为动物模型,通过直接灌胃的方法,验证不同剂量林蛙油抗氧化、抗衰老的作用;利用Realtime PCR的方法分析小鼠肝脏组织中与抗氧化相关基因Cu/ZnSOD的时空表达规律。结果表明,5周龄组和15月龄组小鼠灌胃林蛙油后,肝组织中Cu/ZnSOD基... 以小鼠为动物模型,通过直接灌胃的方法,验证不同剂量林蛙油抗氧化、抗衰老的作用;利用Realtime PCR的方法分析小鼠肝脏组织中与抗氧化相关基因Cu/ZnSOD的时空表达规律。结果表明,5周龄组和15月龄组小鼠灌胃林蛙油后,肝组织中Cu/ZnSOD基因表达量显著增加,但总体上看,5周龄鼠0.45 g·kg-1剂量组Cu/ZnSOD基因表达增加量要普遍高于2.25 g·kg-1剂量组,但与1.35 g·kg-1剂量组差异不显著;而15月龄鼠1.35 g·kg-1剂量组Cu/ZnSOD基因表达增加量要显著高于0.45和2.25 g·kg-1剂量组,但0.45和2.25 g·kg-1剂量组差异不显著;而且15月龄组Cu/ZnSOD基因表达量升高的速度较慢,一般在灌胃第30天或第45天才出现显著差异。 展开更多
关键词 林蛙油 cu znsod基因 表达 肝脏
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饮食和运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSOD mRNA表达的影响 被引量:3
8
作者 王磊 江钟立 招少枫 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期388-392,共5页
目的:探讨饮食和运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞Cu/ZnSODmRNA表达及其血浆酶活性的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠24只采用高糖高脂饮食后腹腔注射小剂量链脲霉素,建立糖尿病模型,随机分为4组:糖尿病高脂饲料非运动组(DFN,n=6),糖尿病... 目的:探讨饮食和运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞Cu/ZnSODmRNA表达及其血浆酶活性的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠24只采用高糖高脂饮食后腹腔注射小剂量链脲霉素,建立糖尿病模型,随机分为4组:糖尿病高脂饲料非运动组(DFN,n=6),糖尿病常规饲料非运动组(DRN,n=6),糖尿病常规饲料低强度运动组(DRL,n=6),糖尿病常规饲料高强度运动组(DRH,n=6)。活动平板进行耐力训练8周,测定骨骼肌Cu/ZnSODmRNA和血浆Cu/ZnSOD活性的变化。结果:两运动组骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达显著高于DFN组和DRN组,两运动组之间无显著差异。两运动组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组和DRN组,DRN组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组。结论:饮食调整加运动训练可以促进糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达,提高Cu/ZnSOD酶活性,而运动强度对此无显著影响。 展开更多
关键词 运动 饮食 2型糖尿病 铜锌超氧化物歧化酶 基因表达
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猪囊尾蚴铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的克隆和表达 被引量:3
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作者 李爱华 Tong Soo Kim 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1124-1128,共5页
目的克隆猪囊尾蚴胞质含铜/锌的超氧化物歧化酶基因(Cu/ZnSOD),并比较其与其它寄生蠕虫相应基因结构的相似性。方法通过获取其它生物Cu/ZnSOD基因的保守区域,设计保守引物,用于扩增该寄生虫的Cu/ZnSOD基因。结果Cu/ZnSOD基因编码一15.6... 目的克隆猪囊尾蚴胞质含铜/锌的超氧化物歧化酶基因(Cu/ZnSOD),并比较其与其它寄生蠕虫相应基因结构的相似性。方法通过获取其它生物Cu/ZnSOD基因的保守区域,设计保守引物,用于扩增该寄生虫的Cu/ZnSOD基因。结果Cu/ZnSOD基因编码一15.6kDa的蛋白,该蛋白的推导序列中含有这类酶的活性和二级结构所需要的所有保守的氨基酸残基,并且与其它寄生虫的相应序列有高达70.6%的相似度。抑制剂研究试验表明所克隆的SOD属于Cu/ZnSOD,该蛋白在大肠杆菌中得以成功表达,表达产物具有SOD活性。免疫印迹试验发现猪囊尾蚴Cu/ZnSOD对人不仅具有抗原性,而且与其它几种蠕虫的Cu/ZnSOD有广泛的交叉免疫反应。结论克隆并表达出猪囊尾蚴Cu/ZnSOD,它与其它寄生吸虫和绦虫的Cu/ZnSOD在氨基酸水平具有很高的相似度,因此是理想的广谱抗寄生虫药物和疫苗的靶蛋白,值得进一步研究。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 超氧化物歧化酶 克隆 CDNA
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CU/ZnSOD试验在矽肺诊断中的应用
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作者 林艺芬 《同煤科技》 1994年第1期26-26,共1页
1 材料与方法 血样:采矽肺患者Ⅱ~Ⅲ期血清51例,患者年龄40~70岁。 SOD测定方法:用沈阳市劳动卫生职业病研究所提供的酶联免疫试剂盆(ELISA法)
关键词 cu/znsod试验 矽肺 诊断
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Glutathione S-Transferase(GST)Identified from Giant Kelp Macrocystis pyrifera Increases the Copper Tolerance of Synechococcus elongatus PCC 7942
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作者 GU Zipeng REN Yudong +4 位作者 LIANG Chengwei ZHANG Xiaowen GENG Yilin XU Dong YE Naihao 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期777-789,共13页
The glutathione S-transferases gene family plays an important regulatory role in growth and development,and responses to environmental change.In this study,six complete GST genes(Mp GST1,Mp GST2,Mp GST3,MpGST4,Mp GST5... The glutathione S-transferases gene family plays an important regulatory role in growth and development,and responses to environmental change.In this study,six complete GST genes(Mp GST1,Mp GST2,Mp GST3,MpGST4,Mp GST5,and Mp GST6)were cloned from the gametophytes of brown alga Macrocystis pyrifera.Subsequent bioinformatics analysis showed that these six genes encoded proteins with 202,216,288,201,205,and 201 aa,respectively.Moreover,Mp GST3 differs from the other GST genes.Phylogenetic analysis suggested that MpGST3 belongs to the Ure2p type GST.Domain analysis suggested that the other GSTs from M.pyrifera belong to the soluble GST family and form an independent branch with the GSTs found in the other macroalgae,suggesting that a new GST type was formed during macroalgal evolution.GST genes were upregulated in M.pyrifera when 2.5 mg L^(-1)Cu ions were added to the medium.Six GST genes were integrated into the genome of Synechococcus elongatus PCC 7942,and their functions were verified by measuring light absorbance,photosynthetic pigment content,and photosynthetic parameters of the transformed strains under 0.3 mg L^(-1)Cu ion stress.The results showed much higher levels of various parameters in the transformed strains than in the wild strain.The transformed strains(with the MpGST genes)showed significantly enhanced resistance to Cu ion stress,while the wild strain almost died.The results of this study lay a theoretical foundation for further research on the Cu ion stress resistance function of GSTs in M.pyrifera. 展开更多
关键词 glutathione S-transferase genes gene cloning cu ion stress Macrocystis pyrifera Synechococcus elongatus PCC 7942
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杨梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因(MrSOD1)cDNA的克隆及表达分析 被引量:12
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作者 王芳 董乐 +2 位作者 戴聪杰 林娈 林静 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第22期27-33,共7页
以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/... 以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/ZnSOD的特征信号序列;序列同源性分析表明,其与GenBank中注册的Cu/ZnSOD序列的同源性均在77%以上。该基因命名为MrSOD1(GenBank登录号:GQ404510)。半定量RT-PCR分析显示,MrSOD1在4种组织中表达量为:果>叶>花>枝条。本试验为进一步研究MrSOD1的时空表达特性、调控途径及杨梅抗氧化伤害的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 杨梅 cu/Zn超氧化物歧化酶 基因克隆 组织表达
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Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建及其在烟草中的表达 被引量:11
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作者 姚冉 李轶女 +2 位作者 张志芳 沈桂芳 潘沈元 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期78-82,共5页
为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已... 为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已获得转Cu/Zn-SOD基因的烟草。进而测定转基因烟草的SOD活力,结果表明Cu/Zn-SOD基因在烟草中高效表达。对转基因烟草进行耐盐性检测,证明Cu/Zn-SOD基因确实能够提高烟草对盐胁迫的耐受性。 展开更多
关键词 cu Zn-SOD基因 植物表达载体 转基因烟草
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脑梗塞患者外周红细胞Cu/Zn SOD水平变化的观察 被引量:2
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作者 吴怀志 王洛夫 赵明敏 《微循环学杂志》 1993年第1期16-17,共2页
本文报告18例脑梗塞患者及50例正常人外周RBC胞液及其胞膜SOD—1(Cu/Zn—SOD)放免测定值,结果表明94.44%的脑梗塞患者红细胞液SOD—1呈极显著性降低(P<0.001),提示脑梗塞病理过程中红细胞内氧自由基(O_2^-)产生异常。胞外O_2^-可通... 本文报告18例脑梗塞患者及50例正常人外周RBC胞液及其胞膜SOD—1(Cu/Zn—SOD)放免测定值,结果表明94.44%的脑梗塞患者红细胞液SOD—1呈极显著性降低(P<0.001),提示脑梗塞病理过程中红细胞内氧自由基(O_2^-)产生异常。胞外O_2^-可通过RBC膜阴离子通道进入胞内增多,引起胞内SOD—1歧化作用而耗损增加,导致RBC胞液SOD—1降低。本文还观察10例脑梗塞患者RBC膜SOD—1含量未见明显变化,并就RBC内O_2^-产生异常的机理作简要论述。 展开更多
关键词 脑梗塞 红细胞 cu/znsod 放免测定
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人Cu,Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性 被引量:3
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作者 迟春萍 隋红 +9 位作者 李雨桐 薛向光 王志武 牛灵 刘畅 王艳芳 吴晓娟 郭立君 盛军 李校堃 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期374-377,共4页
目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产... 目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。优化表达条件,并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Western blot检测,表达的目的蛋白相对分子质量为18000左右;最佳表达条件为pH6.0,甲醇浓度1.5%,持续培养96h;目的蛋白占分泌蛋白总量的27%,最高表达量为91mg/L;最佳条件下培养液上清的酶活性最高达334U/ml,粗酶对氯仿和乙醇稳定,对H2O2不稳定,对温度有一定的耐受性,pH在6和8时较稳定。结论在毕赤酵母GS115中成功表达了具备酶活性的人Cu,Zn-SOD基因。 展开更多
关键词 cu Zn-SOD基因 真核表达 毕赤酵母 稳定性
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Cu^(2+)胁迫对罗氏沼虾血细胞毒性及caspase-3、α-2M基因表达的影响 被引量:4
16
作者 郭慧 朱晓闻 +4 位作者 欧荣华 卢芷程 谭翠婷 申玉春 朱春华 《四川动物》 北大核心 2017年第3期293-299,共7页
本研究以Cu^(2+)(0、100μg·L^(-1))对罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii进行处理,分别在胁迫后的0 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h收集血淋巴,检测血细胞中的细胞凋亡率、活性氧(ROS)含量、酯酶活性、一氧化氮(NO)含量以及细胞... 本研究以Cu^(2+)(0、100μg·L^(-1))对罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii进行处理,分别在胁迫后的0 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h收集血淋巴,检测血细胞中的细胞凋亡率、活性氧(ROS)含量、酯酶活性、一氧化氮(NO)含量以及细胞凋亡执行分子caspase-3和免疫因子α-2M基因的表达。结果显示,血细胞凋亡率和ROS含量的变化趋势一致,在胁迫后的6~48 h显著升高(P<0.05)。酯酶活性在胁迫后的3~48 h均显著下降(P<0.05),最低值出现在48 h。在胁迫后的6~48 h,NO含量持续增加,并与对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。caspase-3的相对基因表达量在胁迫后的6~48 h均显著升高(P<0.05),并在24 h达到最高值。在胁迫后的12 h,α-2M基因的表达量显著升高(P<0.05)并达到峰值,在24 h有短暂降低,但与对照组相比仍显著增加(P<0.05),在48 hα-2M基因的表达量显著降低(P<0.05)。相关性分析显示,血细胞凋亡率和NO以及ROS都呈显著的正相关(P<0.001)。实验表明,Cu^(2+)胁迫显著抑制了机体的酯酶活性,诱导NO和ROS的产生以及免疫相关基因α-2M的表达来对抗Cu^(2+)胁迫带来的损伤。随着胁迫时间的延长,过高浓度的NO和ROS对机体自身造成了伤害,并诱导凋亡相关基因caspase-3的表达,最终导致细胞凋亡,说明Cu^(2+)对虾类具有免疫抑制性和毒性。NO和ROS的升高可能是细胞凋亡的主要诱因。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 cu^2+ 血细胞毒性 基因表达 细胞凋亡
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碱茅(Puccinellia tenuifolra)Put-Cu/Zn-SOD基因的克隆及在酵母中的表达 被引量:4
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作者 吴建慧 高野哲夫 柳参奎 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-14,共5页
从碱茅根cDNA文库分离得到Put-Cu/Zn-SOD全长cDNA,其序列全长为2700bp,该基因的开放读码框为长615bp,所编码的蛋白由204个氨基酸组成,其预测分子量约为20.6kD、理论等电点约为5.63。Put-Cu/Zn-SOD氨基酸序列与水稻Cu/Zn-SOD序列有较高... 从碱茅根cDNA文库分离得到Put-Cu/Zn-SOD全长cDNA,其序列全长为2700bp,该基因的开放读码框为长615bp,所编码的蛋白由204个氨基酸组成,其预测分子量约为20.6kD、理论等电点约为5.63。Put-Cu/Zn-SOD氨基酸序列与水稻Cu/Zn-SOD序列有较高的同源性为87%。将Put-Cu/Zn-SOD基因构建到酵母表达载体pYES2,并转化至酵母(INVSc1)。对pYES2-Put-Cu/Zn-SOD转化酵母进行盐碱、氧化胁迫实验。结果表明:重组酵母的抗盐碱、氧化能力明显高于对照(pYES2转化酵母),结果显示了碱茅的Cu/Zn-SOD基因在酵母表达中,具有提高酵母抗盐碱和耐氧化能力。 展开更多
关键词 碱茅 cu/Zn—SOD基因 酵母 抗逆性
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Cu^(2+)、Cd^(2+)胁迫对小麦幼根SOD活性及其基因表达的影响 被引量:8
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作者 李春喜 张志娟 +3 位作者 张黛静 邵云 姜丽娜 李婷婷 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2011年第4期92-98,共7页
采用水培试验探索不同浓度(0 mg/L、5 mg/L、30 mg/L和60 mg/L)Cu2+或Cd2+胁迫(24 h、48 h、72 h和96 h)后对小麦幼根超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-timefluorescence quantitative PCR,Real-ti... 采用水培试验探索不同浓度(0 mg/L、5 mg/L、30 mg/L和60 mg/L)Cu2+或Cd2+胁迫(24 h、48 h、72 h和96 h)后对小麦幼根超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-timefluorescence quantitative PCR,Real-time Q-PCR)检测Cu/ZnSOD基因表达。结果表明,Cu2+胁迫处理72 h后,各处理SOD活性均较对照极显著提高(P<0.01),且30 mg/L浓度下SOD酶活性最高,是对照的3.67倍;而Cd2+胁迫处理后,幼根SOD活性整体呈现"升-降-升"的趋势,胁迫前期酶活性的降低程度与Cd2+浓度成正比,至72 h酶活性最低。Cd2+胁迫条件下Cu/ZnSOD的表达量明显高于Cu2+胁迫。不同时间Cu2+胁迫下,Cu/ZnSOD基因表达均呈现5 mg/L浓度处理高于60 mg/L和30 mg/L,表明低浓度促进而高浓度抑制该基因表达;而对于Cd2+胁迫,Cu/ZnSOD基因随浓度的升高和时间的延长呈现明显下降趋势,至96 h最低。本实验结果表明,Cu2+、Cd2+胁迫处理后浓度对基因表达的影响较大。该结果为深入探讨重金属胁迫下小麦幼根中SOD特性的研究提供理论参考和技术支持。 展开更多
关键词 小麦 cu2+和Cd2+胁迫 超氧化物歧化酶 Real-timeQ-PCR 基因表达
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白菜型冬油菜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的克隆及其在低温条件下的表达 被引量:26
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作者 曾秀存 刘自刚 +7 位作者 史鹏辉 许耀照 孙佳 方彦 杨刚 武军艳 孔德晶 孙万仓 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期636-643,共8页
超氧化物歧化酶(SOD)是一种逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)是该酶系中最主要的活性氧清除剂,与植物的抗逆性关系密切。本研究根据已发表的十字花科植物Cu/Zn-SOD基因的编码区设计引物,采用RT-PCR... 超氧化物歧化酶(SOD)是一种逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)是该酶系中最主要的活性氧清除剂,与植物的抗逆性关系密切。本研究根据已发表的十字花科植物Cu/Zn-SOD基因的编码区设计引物,采用RT-PCR克隆超强抗寒冬油菜陇油7号Cu/Zn-SOD的cDNA序列,该基因全长459 bp。生物信息学分析表明,该基因与甘蓝型油菜(Brassica napus)Cu/Zn-SOD基因同源性高达99%,编码1个亲水性稳定蛋白,无跨膜结构域和信号肽,具有胞质Cu/Zn-SOD超基因家族特有的序列特征和保守结构区域。半定量RT-PCR以及SOD酶活性分析表明,低温诱导条件下Cu/Zn-SOD基因差异表达,在白菜型冬油菜适应低温胁迫过程中发挥重要作用。超强抗寒冬油菜陇油6号品种低温诱导蛋白的SDS-PAGE分析以及蛋白串联质谱技术鉴定表明,Cu/Zn-SOD是受低温诱导表达的抗逆基因。 展开更多
关键词 白菜型冬油菜 cu Zn—SOD基因克隆 低温 表达分析 SOD活性 低温诱导蛋白
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转棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因烟草的获得及其功能的初步验证 被引量:7
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作者 马淑娟 喻树迅 +1 位作者 范术丽 宋美珍 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第3期319-323,共5页
构建了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因的植物表达载体,利用农杆菌介导法将其导入NC89烟草,PCR、Southern blotting检测结果显示有4个烟草株系中整合了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因,SOD酶活性测定结果显示4株转基因烟草植株SOD酶活性都明显高于非... 构建了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因的植物表达载体,利用农杆菌介导法将其导入NC89烟草,PCR、Southern blotting检测结果显示有4个烟草株系中整合了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因,SOD酶活性测定结果显示4株转基因烟草植株SOD酶活性都明显高于非转基因烟草,离体叶片暗处理试验结果也证明四株转基因烟草比非转基因烟草SOD酶活下降速度明显减慢,百草枯喷施试验表明,转基因烟草都比非转基因烟草对百草枯的耐性增强,这一系列试验间接地说明外源基因的导入增强了烟草的耐衰老能力,本研究为今后利用SOD基因研究作物的早衰性状奠定了基础。 展开更多
关键词 烟草 棉花叶绿体cu/Zn—SOD基因 农杆菌介导法 SOD酶活性 早衰
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