基于CX3CL1/CX3CR1信号通路探讨加味补阳还五汤对卒中后抑郁大鼠神经可塑性的影响

目的探究加味补阳还五汤对卒中后抑郁(PSD)大鼠神经可塑性的影响。方法60只大鼠随机分为假手术组、模型组、氟西汀组及加味补阳还五汤低、中、高剂量组,采用复合方法制备PSD模型,加味补阳还五汤低、中、高剂量组给予不同剂量加味补阳还五汤(6.7、13.4、26.8 g/kg)灌胃,氟西汀组给予氟西汀(1.8 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续21 d。给药结束后,进行神经功能、行为学评分,HE、尼氏染色观察脑组织病理变化,免疫荧光染色观察神经元(Neun)和小胶质细胞(Iba1)之间相互作用,Western blot法检测神经趋化因子(CX3CL1)、CX3CR1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、苏氨酸激酶(Akt)蛋白表达。结果与模型组比较,各给药组神经功能缺损评分降低(P<0.05,P<0.01),旷场活动总距离和进入中央区域频次增加(P<0.05,P<0.01),不动时间缩短(P<0.05);加味补阳还五汤中、高剂量组和氟西汀组新奇摄食潜伏期缩短(P<0.01),缺血侧海马细胞排列整齐,细胞水肿减轻,细胞基本正常,尼氏小体增多,CX3CL1/Neun、CX3CR1/Iba1荧光强度增强(P<0.05),CX3CL1、CX3CR1、PI3K、p-Akt蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论加味补阳还五汤对PSD大鼠具有抗抑郁、神经保护作用,其机制可能与调控CX3CL1/CX3CR1信号通路关键因子、增强神经可塑性有关。

基于胶质细胞GR/CX3CR1双信号探讨柴金解郁安神片含药血清减轻体外抑郁模型大鼠ACC神经元突触损伤的机制

目的:基于胶质细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)/CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)双信号探讨柴金解郁安神片(CJJY)含药血清对体外抑郁模型中大鼠前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)神经元突触损伤的保护机制。方法:原代培养SD大鼠ACC脑区星形胶质细胞、小胶质细胞和神经元,并分别进行鉴定;采用200μmol/L皮质酮(corticosterone,CORT)联合1 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立模拟抑郁环境的体外细胞模型,实验设正常组、模型组(CORT+LPS)、GR阻断剂(GR-)组(CORT+LPS+RU486)、GR激动剂(GR+)组(CORT+LPS+dexamethasone)、CX3CR1阻断剂(CX3-)组(CORT+LPS+AZD8797)、CX3CR1激动剂(CX3+)组(CORT+LPS+fractalkine)、CJJY组(CORT+LPS+CJJY含药血清)、CJJY联合GR激动剂(CJJY/GR+)组(CORT+LPS+CJJY含药血清+dexamethasone)组和CJJY联合CX3CR1激动剂(CJJY/CX3+)组(CORT+LPS+CJJY含药血清+fractalkine);高内涵细胞成像分析技术观察星形胶质细胞、小胶质细胞和ACC神经元形态学变化;ELISA法检测细胞上清液中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)、CORT、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和谷氨酸(glutamate,Glu)水平;免疫荧光染色检测星形胶质细胞中GR和囊泡谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1,VGluT1)表达水平,以及小胶质细胞中CX3CR1和腺苷A2A受体(adenosine A2A receptor,A2AR)表达水平;Nissl染色和β-tubulin染色观察神经元突触损伤情况。结果:CJJY含药血清能减轻体外抑郁模型中大鼠星形胶质细胞损伤,抑制小胶质细胞激活,同时抑制细胞上清液中ACTH、CRH、CORT、TNF-α、IL-1β、IL-6和Glu水平异常增高(P<0.05或P<0.01),有效调控GR、VGluT1、CX3CR1和A2AR表达异常(P<0.05或P<0.01),并减轻大鼠ACC神经元树突和树突棘损伤。结论:CJJY含药血清通过调控胶质细胞GR/CX3CR1双信号而减轻体外抑郁模型中大鼠ACC神经元突触损伤。

迈瑞CX-9000全自动凝血分析仪性能评估

目的:对迈瑞CX-9000全自动凝血分析仪的性能进行验证评估。方法:参照行业标准和国家标准,通过凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、D-二聚体5个凝血常规检查项目对迈瑞CX-9000全自动凝血分析仪进行性能验证,评估该仪器的精密度、准确度、线性范围、携带污染率及参考区间能否满足临床需求。结果:5个凝血常规检查项目的批内精密度变异系数(coefficient of variation,CV)均<3%,日间精密度CV均<5%,准确度相对偏差在±10%以内。FIB的线性回归方程斜率k为1.0060,相关系数r为0.9993,D-二聚体的线性回归方程k为1.0132,r为0.9975,线性良好。样本浓度携带污染率CR1为4.6%,项目携带污染率CR2均<2%,参考区间R值均为100%,均符合行业标准要求,验证通过。结论:迈瑞CX-9000全自动凝血分析仪是一款精密度好、准确度高、线性范围宽、携带污染率低的检测系统,能够满足临床需求。

创伤性膝骨关节炎患者血清CX3CL1、Apelin-13与炎症指标的相关性及预后价值

目的 探索创伤性膝骨关节炎(PTOA)患者血清趋化因子CX3CL1及脂肪细胞因子-13(Apelin-13)的表达水平,并分析二者与炎症指标的相关性及预后价值。方法 选取2020年1月至2022年2月在该院确诊的65例PTOA患者作为试验组,选取同期来该院体检的55例体检健康者作为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CX3CL1与Apelin-13的表达水平。Pearson法相关性分析血清CX3CL1与Apelin-13与炎症指标的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CX3CL1与Apelin-13对PTOA患者预后的诊断价值。多因素Logistic回归分析PTOA患者预后不良的影响因素。结果 与对照组相比,试验组中白细胞介素-6(IL-6)、瘦素、降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CX3CL1的表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),Apelin-13的表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson法相关性分析显示,CX3CL1与IL-6、瘦素、TNF-α呈正相关(r=0.528、0.602、0.511,P<0.001)。Apelin-13与IL-6呈负相关(r=-0.541,P<0.001);多因素Logistic回归分析显示IL-6、瘦素、TNF-α、CX3CL1与Apelin-13是PTOA患者预后不良的影响因素(P<0.05);ROC曲线下面积(AUC)分析显示,与血清CX3CL1和Apelin-13单独指标相比,CX3CL1联合Apelin-13预测预后不良的AUC更大(Z_(联合)-CX3CL1=2.010,P=0.044;Z_(联合)-Apelin-13=2.091,P=0.036)。结论 PTOA患者血清CX3CL1表达水平显著升高,Apelin-13表达水平显著降低,CX3CL1与Apelin-13是PTOA预后不良的影响因素,二者联合检测对于PTOA的预后提供帮助。

鸭疫里氏杆菌LC1和CX1株的分离鉴定及致病性分析

旨在对福建莆田某养殖场疑似感染鸭传染性浆膜炎患病番鸭病料进行菌株的分离、纯化、鉴定和致病性分析。采集10日龄患病番鸭的脑、肝组织进行菌株分离纯化、16S rDNA PCR鉴定和血清型鉴定,并检测分离纯化菌株的致病性。结果得到2株11型鸭疫里氏杆菌,分别将其命名为LC1和CX1。对2株分离株进行16S rDNA序列测序,开展遗传进化分析和MLST分型,发现LC1和CX1分离株16S rDNA遗传进化上与鸭疫里氏杆菌福建分离株RAf115和上海分离株Yb2处在同一进化分支上,相似性为99.9%。测定其耐药性发现,分离株对β-内酰胺类、氯霉素类及四环素敏感,对大环内酯类和氨基糖苷类等抗菌素不敏感。进一步检测该分离株对雏番鸭致病性,结果发现两株菌株(1.3×10^(6)CFU·mL^(-1))的致死率为100%,且病死鸭表现典型心包炎、肝周炎、气囊炎和脾肿大的鸭疫里氏杆菌病。病理结果发现,致死鸭脾红白髓界线消失,呈现大量坏死灶。此外,两分离株致死鸭的心肌纤维呈撕裂状病变。综上,本研究分离并鉴定2株11型鸭疫里氏杆菌LC1和CX1,MLST分型分别为ST111、ST114,为鸭疫里氏杆菌病的防控及后续研究提供参考依据。

母代孕期应激在损伤成年子代认知功能中对CX3CL1/CX3CR1轴的影响

背景孕期应激可损害子代发育过程中中枢神经系统之间的交流,而CX3CL1/CX3CR1轴在神经元-小胶质细胞间建立了一个独特的通讯系统。目的明确孕期应激在损伤子代认知功能中是否对CX3CL1/CX3CR1轴产生影响并探究其作用机制。方法将12只SD孕鼠随机分为应激组和对照组,每组6只,应激组在孕15~21 d进行限制性应激,对照组正常饲养。用旷场、高架十字迷宫、新物体识别及Y迷宫四种行为学实验评估成年子代认知功能,ELISA检测母代及子代糖皮质激素,免疫荧光染色、Western blot检测子代海马CX3CL1、CX3CR1、Iba-1表达情况。结果母代孕期应激组及子代糖皮质激素升高(P<0.05)。母代孕期应激组子代在旷场实验中,中央区滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05);在高架十字迷宫中进入开放臂次数和滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05),表现出焦虑样行为;在新物体识别实验中识别指数降低(P<0.05),表现出学习记忆能力下降;在Y迷宫实验中对新异臂的识别减少(P<0.05),表现出空间记忆能力下降。母代孕期应激组子代小胶质细胞激活Iba-1表达升高,CX3CR1表达升高,CX3CL1表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论孕期应激损害成年子代认知功能可能与CX3CL1/CX3CR1通讯障碍有关。

Cx43、β-catenin、Smo在第二生心区的表达规律及意义

背景:第二生心区对于胚胎心脏发育具有重要意义,其发育异常会导致多种心脏畸形,Cx43基因敲除后第二生心区细胞的形成和增殖减少,但具体原因尚未明确。目的:①明确β-catenin、Smo以及Cx43在内胚层与第二生心区的表达模式,观察其有无共表达;②探究Cx43与Wnt/β-catenin通路或Shh通路之间是否存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。方法:选取胚龄10-12 d的ICR小鼠胚胎石蜡包埋连续切片,进行免疫组织化学染色、苏木精-伊红染色、免疫荧光染色;剥离胚龄11 d小鼠胚胎的原始消化管用于蛋白印迹实验和免疫共沉淀。结果与结论:①胚龄10-12 d,Cx43与Isl1在前肠腹侧和心包腔背侧壁的部分间充质细胞呈共表达,Isl1阳性细胞增多的同时Cx43阳性细胞也增多;②胚龄10-12 d,Cx43与β-catenin在内胚层腹侧共表达;③胚龄10-12 d,Cx43与Smo在内胚层上共表达;④免疫共沉淀结果表明Cx43与β-catenin之间存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。

CX3CL1/CX3CR1调控小胶质细胞功能的研究进展

随着社会老龄化的增加,神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病等)和脑血管疾病(如脑出血、脑梗死等)对人类的生活产生了极大的影响。神经炎症被认为在神经退行性疾病和脑血管疾病的发生发展中起着主要作用,是一个具有潜在价值的治疗靶点^([1])。神经炎症在人体中具有双重作用,它本身是一种防御机制,可以去除病原体进而保护机体;然而,持续的炎症反应可诱发神经毒性与神经变性,不利于机体的恢复^([2])。小胶质细胞是大脑中释放炎症因子的主要细胞,被认为是神经炎症主要的病理特征^([3])。小胶质细胞广泛分布于大脑和脊髓,是中枢神经系统(central nervous system,CNS)中唯一具有单核巨噬细胞功能的固有免疫细胞,因而是CNS最主要的一道免疫防线^([4])。在正常生理条件下,小胶质细胞通过伸展和收缩突起连续监测周围环境和脑内稳态的改变,发挥着免疫监视的作用^([5])。

苹果砧木CX5组织培养体系的建立

以苹果半矮化砧CX5的休眠枝条茎段和4月底至6月初的新生枝条茎段为试验材料,采用离体组织培养方法,研究了适宜CX5组培快繁的外植体类型、灭菌方式、灭菌时间,以及不同植物生长调节剂浓度对增殖培养的影响。结果表明:适合用作灭菌的CX5外植体类型为新生枝条茎段,其外植体褐化率和污染率都相对较低;外植体0.1%HgCl2灭菌时间控制在6min左右,伤害最小;CX5茎段腋芽诱导培养基为MS+0.75mg/L6-BA+0.3mg/LIBA,适宜组培苗增殖继代的培养基为MS+0.7mg/L6-BA+0.5mg/LIBA,生根培养基为1/2MS+0.2mg/LIAA。初步构建了CX5组培快繁技术体系。

淫羊藿苷通过Cx32-Nox4信号通路改善高血压肾纤维化和损伤

目的:探讨淫羊藿苷通过Cx32-Nox4信号通路对高血压肾纤维化和损伤的影响。方法:在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHRs)上建立高血压肾病(hypertensive nephropathy,HN)大鼠模型。实验分为4组:正常对照组(WKY大鼠)、模型组(SHR)、淫羊藿苷10 mg·kg^(-1)·d^(-1)组(每天灌胃淫羊藿苷一次)、淫羊藿苷30 mg·kg^(-1)·d^(-1)组(每天灌胃淫羊藿苷一次),每组10只。在体内检测纤维化相关蛋白的表达。选择暴露于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的NRK-52E细胞来观察淫羊藿苷对肾损伤的影响。用蛋白质免疫印迹法和免疫组化检测细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的水平,包括α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Col-Ⅰ)和纤连蛋白(fibronectin,FN)的表达。试剂盒检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)表达的变化。结果:淫羊藿苷在体内显著降低SHR大鼠的肾脏纤维化。淫羊藿苷下调α-SMA、FN和Col-Ⅰ的表达(P<0.05),并保护高血压损伤的肾组织免受进行性纤维化的影响。淫羊藿苷可以显著提高SHR大鼠肾脏和血清中的总SOD活性,显著降低MDA水平(P<0.05)。此外,淫羊藿苷显著提高SHR大鼠肾脏中Cx32的表达,并显著减少Nox4的表达(P<0.05)。淫羊藿苷对AngⅡ介导的NRK-52E细胞损伤和纤维化具有保护作用。结论:淫羊藿苷可以改善肾小管间质纤维化并延缓HN的进展。肾脏保护可能归因于Cx32-Nox4信号通路介导的氧化应激的调节来实现。

调肝理脾益胃降逆方联合针刺治疗胃癌术后胃食管反流病的疗效及对血清LTB4和CX3CL1水平的影响

目的:评估调肝理脾益胃降逆方联合针刺对胃癌术后胃食管反流病的治疗效果及对血清LTB4和CX3CL1水平的影响。方法:本研究选取了在我院收治的120例胃癌手术后出现胃食管反流病的患者,随机分为对照组和观察组,每组60例。对照组接受奥美拉唑肠溶胶囊和多潘立酮片治疗,观察组在对照组基础上,采用调肝理脾益胃降逆方联合针刺治疗。通过比较两组的临床疗效、中医证候积分、胃肠激素、炎症因子以及血清LTB4和CX3CL1水平来评估治疗效果。结果:观察组在治疗后表现出了更高的有效率(91.67%vs 78.33%,P<0.05)。此外,观察组的中医证候积分较对照组低(P<0.001)。观察组在治疗后GAS和MTL水平较高于对照组(P<0.001)。同时,观察组在治疗后的IL-1β、IL-6和TNF-α水平较对照组低(P<0.001)。治疗后,观察组的LTB4和CX3CL1水平较对照组高(P<0.001)。结论:调肝理脾益胃降逆方联合针刺治疗可以显著提高胃食管反流患者的临床疗效,减轻反酸、烧心等症状,改善胃肠道运动,抑制炎症反应,并降低血清中LTB4和CX3CL1水平。因此,该疗法在临床上具有重要价值。

RgpB通过抑制自噬小体与溶酶体融合避免Cx43降解参与食管癌化疗耐药

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)的毒力因子RgpB在食管鳞癌化疗耐药中的作用机制。方法采用免疫沉淀-质谱联用技术筛选与Pg的毒力因子RgpB互作的自噬调节因子;运用免疫共沉淀实验探索RgpB和自噬调节因子TBC1D5之间的相互作用;采用蛋白免疫印迹法测定Pg感染对食管癌细胞膜受体分子Cx43表达的影响;使用细胞免疫荧光检测Lamp1、Cx43与TBC1D5的关系;利用自噬双荧光观察Pg感染对自噬小体与溶酶体融合的影响;使用平板克隆及CCK-8法检测Pg感染及Cx43抑制剂在使用化疗药后对食管癌细胞系增殖作用的影响。结果免疫沉淀-质谱联用技术筛选出与RgpB互作的自噬调节因子TBC1D5;免疫共沉淀结果显示,Pg分泌的毒力因子RgpB可与自噬调节因子TBC1D5直接结合并相互作用;蛋白免疫印迹法结果显示,感染Pg后食管癌细胞膜Cx43表达量高于未感染组(P<0.05);细胞免疫荧光结果显示,在感染Pg后,Cx43在细胞膜表面的表达量增加(P<0.05);stubRFP-sensGFP-LC3自噬双荧光结果显示,在Pg感染时,自噬体与溶酶体融合受到阻断;平板克隆及CCK-8法结果显示,使用化疗药后,Cx43抑制剂能够逆转Pg感染对食管癌细胞系的促进作用。结论Pg入侵食管癌,其毒力因子RgpB阻碍自噬小体与溶酶体融合,从而使膜受体分子Cx43免受溶酶体降解,导致食管癌化疗耐药。

基于CX3CL1/NF-κB信号通路探讨补肾强督方抑制M1巨噬细胞极化治疗强直性脊柱炎的机制研究

目的:观察补肾强督方对CX3CL1/NF-κB信号通路介导的M1型巨噬细胞极化的影响,从而阐明其治疗强直性脊柱炎的分子机制。方法:采用脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清和CX3CL1抑制剂AZD8797进行干预。采用酶联免疫吸附试验检测细胞炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17)的含量;采用流式细胞术检测CD86的表达;采用蛋白印迹检测iNOS、破骨分化标记蛋白(TRAP、Calcitonin和p-NFATC1β)及CX3CL1/NF-κB信号通路中相关蛋白的表达;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测iNOS mRNA的表达。结果:与模型组相比,与空白组相比,模型组巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17的含量和CD86+巨噬细胞的比例显著增加,iNOS、CX3CL1、p-P65、p-IKKα/β、p-IkBα、TRAP、Calcitonin和p-NFATC1β蛋白和iNOS mRNA的表达显著上调,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,补肾强督方能够显著降低巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17的含量和CD86+巨噬细胞的比例,下调iNOS、CX3CL1、p-P65、p-IKKα/β、p-IkBα、TRAP、Calcitonin和p-NFATC1β蛋白和iNOS mRNA的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾强督方通过抑制CX3CL1/NF-κB信号通路的激活,从而抑制巨噬细胞M1型极化,实现抑制炎症和破骨细胞的分化的作用。

CX3 CR1^(GFP)报告基因小鼠的构建、鉴定及效率检测

目的 基于Cre/Loxp系统构建CX3CR1^(GFP)基因小鼠,并分析CX3CR1^(GFP)表达效率。方法 通过以限制酶为基础的克隆技术设计靶向载体,用线性化的靶向载体转染胚胎干细胞(embryonic stem,ES),将筛出缺失新霉素抗性基因(neomycin resistance gene,neo)的重组ES细胞克隆注入囊胚中产生嵌合CX3CR1^(+/GFP)小鼠,与野生型小鼠(wild type mice,WT)交配,反复回交得到CX3CR1^(GFP/GFP)小鼠。分别提取WT和CX3CR1^(GFP)小鼠DNA及mRNA,使用琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型,RT-qPCR检测小鼠不同组织中CX3CR1的表达水平;Western blot分析GFP蛋白对外周血中的单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)及不同组织中CX3CR1的表达;流式细胞术检测骨髓中免疫细胞的标记效率;免疫荧光观察小鼠不同组织中GFP的表达情况。结果琼脂糖凝胶电泳结果表明,转基因小鼠基因型为CX3CR1^(GFP/GFP)纯合子。RT-qPCR和Western blot结果表明,增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)已靶向取代CX3CR1基因,因此在CX3CR1^(GFP)小鼠中CX3CR1表达极低,而GFP表达明显上调;流式细胞术和免疫荧光显示,GFP有效标记CX3CR1^(GFP)小鼠,在不同组织及不同细胞均有表达且表达具有差异。结论 本研究构建并鉴定CX3CR1^(GFP)基因报告小鼠,且GFP在小鼠体内稳定表达。为进一步揭示CX3CR1在免疫调节中的潜在机制研究提供动物模型基础。

乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者血清CXCL1、CXCL16与肝衰竭分期及短期预后的关系研究

目的探讨乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清C-X-C基序趋化因子配体(CXCL)1、CXCL16与肝衰竭分期及短期预后的关系。方法选取2018年1月—2023年6月达州市中心医院肝病科收治的HBV-ACLF患者170例纳入病例组,再根据肝衰竭分期分为早期亚组(71例)、中期亚组(54例)、晚期亚组(45例),根据患者90 d预后分为死亡亚组(60例)和存活亚组(110例),另选取同期健康体检者100例纳入健康对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL1、CXCL16水平;单因素及多因素Logistic回归分析HBV-ACLF患者死亡的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CXCL1、CXCL16和终末期肝病模型(MELD)评分对HBV-ACLF患者死亡的预测效能。结果与健康对照组比较,病例组患者血清CXCL1、CXCL16水平显著升高(t/P=30.816/<0.001,29.811/<0.001);早期亚组、中期亚组、晚期亚组血清CXCL1、CXCL16水平依次升高(F/P=317.656/<0.001,211.391/<0.001);与存活亚组比较,死亡亚组患者血清CXCL1、CXCL16水平显著升高(t/P=7.775/<0.001,7.137/<0.001);肝衰竭分期晚期和MELD评分高、CXCL1升高、CXCL16升高为HBV-ACLF患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=5.069(1.322~19.441)、1.548(1.174~2.042)、1.914(1.162~3.153)、3.423(1.468~7.980)];血清CXCL1、CXCL16联合MELD评分预测HBV-ACLF患者死亡的ROC曲线下面积为0.927,大于血清CXCL1、CXCL16和MELD评分单独预测的0.786、0.781、0.784(Z=4.594、4.261、4.288,P均<0.001)。结论HBV-ACLF患者血清CXCL1、CXCL16水平升高,与肝衰竭分期及短期不良预后有关,在MELD评分基础上联合血清CXCL1、CXCL16对HBV-ACLF患者短期预后进行预测具有较高的价值。

Cx43在基质刚度调控骨髓间充质干细胞分化中的作用机制研究

目的骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有力学敏感性,对周围力学微环境高度敏感。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为骨组织细胞中组成半通道和间隙连接的主要蛋白,在力学信号传导中发挥重要作用。然而关于Cx43是否参与基质刚度对BMSCs分化的调节仍有待研究。方法本实验制备了模拟骨髓力学微环境不同位置处基质刚度(1、10、34 k Pa)的聚丙烯酰胺水凝胶培养基底;培养间充质干细胞细胞系C3H10T1/2,利用18α-GA抑制C3H10T1/2中Cx43功能;提取BMSCs条件性敲除(c KO)Cx43小鼠(Prx1-Cre;Cx43 flox/flox)和同窝对照flox小鼠(Cx43 flox/flox)原代BMSCs进一步验证。结果抑制Cx43均会导致BMSCs在10、34 k Pa基质刚度上的成脂能力显著下降,而对1 k Pa上BMSCs成脂能力无影响。相比于1 k Pa和34 k Pa,在10 k Pa基质刚度上抑制Cx43导致了BMSCs成骨能力显著下降。在不同基质刚度上抑制BMSCs上Cx43均会导致糖酵解和线粒体融合裂变相关基因表达显著变化,以及成脂和成骨分化过程中ATP的生成。结论BMSCs响应骨髓力学微环境,较软的基质刚度可能对成脂能力有一定程度的恢复作用,而Cx43可能通过代谢途径参与了基质刚度对BMSCs分化的调节。

血清CX3C基序趋化因子配体1及Ⅰ型纤溶酶原激活抑制物水平与慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭患者病情严重程度及预后的关系研究

目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3C基序趋化因子配体1(CX3CL1)、Ⅰ型纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)水平与病情严重程度及预后的关系。方法 选取2019年1月至2021年1月重庆医科大学附属永川医院收治的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者96例为研究对象(呼吸衰竭组)、同期诊治的单纯COPD患者60例为单纯COPD组、同期健康体检的健康人群60例为健康对照组。检测受试者血清CX3CL1、PAI-1水平。比较不同健康状况受试者、不同病情严重程度呼吸衰竭组患者血清CX3CL1、PAI-1水平差异。分析影响COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后的因素以及血清CX3CL1、PAI-1对不良预后的预测价值。结果 呼吸衰竭组、单纯COPD组CX3CL1、PAI-1水平均高于健康对照组[(266±29)、(219±35)ng/L比(156±23)ng/L,(15.2±2.3)、(12.3±2.2)μg/L比(8.2±1.8)μg/L],且呼吸衰竭组高于单纯COPD组(均P<0.05)。呼吸衰竭组中轻度组、中度组、重度组血清CX3CL1、PAI-1水平随疾病严重程度加重呈上升趋势(均P<0.05)。COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3CL1、PAI-1水平与第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC比值)呈负相关(均P<0.001)。呼吸衰竭组中预后不良组血清CX3CL1、PAI-1水平均高于预后良好组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清CX3CL1、PAI-1升高是COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后的独立危险因素(均P<0.001)。血清CX3CL1、PAI-1联合检测对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后预测的曲线下面积大于CX3CL1、PAI-1单独诊断(均P<0.001)。结论 COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3CL1、PAI-1水平升高,二者与病情严重程度有关,联合检测有助于评估COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的临床预后。

免除硅除固复染剂CX-4651工艺探讨

采用免除硅除固复染剂CX-4651对织物进行修色或改色,无需进行除硅除固。采用CX-4651回修织物,可以一浴修色或改色,相对于常规先除固或除硅再复染的工艺,减少了对织物的损伤,省水4~5缸,省时3~4 h,从而大幅度降低了生产综合成本,且问题少,不沾缸、无硅油斑、复染得色均匀,提高了回修效率。

CX3CL1促进三阴性乳腺癌细胞株多柔比星/紫杉醇化疗的耐药机制观察

目的探究CX3CL1基因对于三阴性乳腺癌对多柔比星和紫杉醇化疗药物耐药性的促进机制。方法通过CX3CL1基因过表达慢病毒载体构建、Western Blot检测乳腺癌细胞中CX3CL1的表达、Q-PCR检测细胞中基因表达、CCK-8实验检测细胞活力、EdU检测细胞增殖、Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡、Transwell检测细胞迁移率、Elisa试剂盒检测细胞内和培养上清液中CX3CL1表达、应用SPSS 19.0统计学软件,应用Pearson卡方检验分析三阴性乳腺癌中CX3CL1的表达。累计生存率的计算采用Kaplan-Meier方法。结果构建的CX3CL1过表达慢病毒感染MDA-MB-231细胞载体结果发现CX3CL1具有促进细胞活力、促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进细胞迁移等作用。通过人单核白血病细胞结合发现CX3CL1具有诱导巨噬细胞向M2型极化,促进细胞迁移的作用。结论CX3CL1通过促进巨噬细胞向M2型极化,抑制细胞凋亡以及促进细胞迁移来降低乳腺癌细胞对多柔比星/紫杉醇化疗药物的敏感性从而导致耐药性产生的机制。

参附汤调控Cx43分布和表达逆转心肌重塑所致心律失常实验研究

目的:评估参附汤(SF)是否能预防梗死边界区(IBZ)重塑和减少心肌梗死(MI)后阶段发生的室性心律失常。方法:通过对左冠状动脉前降支进行结扎的方法制作MI模型,MI后第一天开始进行SF治疗2周,观察SF对MI的影响。结果:SF治疗可显著降低MI后大鼠快速心律失常诱导率和心律失常评分。在超声心动图中,SF改善了左室收缩和舒张功能。组织学评估显示,SF显著减少了IBZ的纤维区和肌细胞区,增加间隙连接蛋白43(Cx43)阳性区。免疫印迹表明,SF处理显著增加了Cx43的总蛋白和磷酸化蛋白水平。结论:SF干预通过Cx43表达和重新分布抑制左室重塑,降低了MI后快速心律失常的易感性。证明了新的抗心律失常药物能够通过逆转IBZ重塑降低MI后室性心律失常的易感性。