芽孢杆菌CY1-3株碱性纤维素酶基因celC的克隆及其在大肠杆菌中的表达

芽孢杆菌CY1-3株基因组DNA经Sau3A Ⅰ部分消化后回收2～7 kb片段,构建了部分文库.通过刚果红染色鉴定,筛选出6个纤维素酶基因的阳性克隆子,经酶切鉴定为同一克隆子,命名为pGJc-1.经测序分析,该片段包含一个由1 593个核苷酸组成的开放阅读框（ORF）,命名为celC.经推导,celC基因编码由一531个氨基酸残基组成的CelC蛋白.氨基酸序列分析表明,CelC蛋白的氨基酸序列与多种细菌的β-1,4-内切葡聚糖酶具有很高的同源性.粗酶液的SDSPAGE分析表明,celC基因在大肠杆菌中所表达的CelC蛋白具有纤维素酶活力,其分子质量约为58 ku.

Cys C、PAI-1与急性心肌梗死的早期诊断及疾病严重程度的相关性分析

目的 探讨血清胱抑素C(Cys C)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)在急性心肌梗死早期诊断中的价值及其与疾病严重程度的相关性。方法 选取2020年8月至2021年12月商丘市第一人民医院心内科收治的152例急性心肌梗死(AMI)作为观察组,并选取同期健康体检者152名作为对照组。按照疾病危险程度评价标准将观察组患者分为低危组(n=82)、中危组(n=48)以及高危组(n=22)。比较观察组和对照组患者的Cys C、PAI-1水平。比较低危组、中危组以及高危组的Cys C、PAI-1水平。采用Spearman分析分析Cys C、PAI-1与AMI疾病严重程度的相关性。采用多因素Logistic回归分析AMI的独立危险因素,并采用受试者工作(ROC)曲线分析Cys C、PAI-1在AMI早期诊断中的价值。结果 观察组的Cys C、PAI-1水平显著高于对照组,差异有统计学意义(t=9.649,22.649,P<0.05);Cys C、PAI-1在不同疾病严重程度的患者中的水平:低危组<中危组<高危组(F=26.227,81.652,P<0.05),具有吸烟史、高血压的患者比例:低危组<中危组<高危组,差异均有统计学意义(P<0.05);Cys C、PAI-1水平均与AMI疾病严重程度呈正相关(r=0.527、0.601,P<0.05);Cys C、PAI-1为AMI的独立危险因素(P<0.05),且Cys C、PAI-1以及两者联合检测的AUC为0.721、0.782、0.912。结论 Cys C、PAI-1水平与AMI的疾病严重程度具有一定的相关性,并且Cys C、PAI-1在AMI的早期诊断中具有诊断价值,且两者联合检测的诊断价值高于单独检测的诊断价值,两者联合检测可以作为AMI早期诊断的新途径。

血清Cys C、β_2-MG联合尿α_1-MG、β_2-MG在亚临床肝肾综合征诊断中的意义

目的探讨肾功能正常肝硬化患者血清Cys C、血清β_2-MG;尿α_1-MG、尿β_2-MG的变化在亚临床肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)诊断中的意义。方法选取2011年8月-2013年8月符合标准的秦皇岛市第一医院住院肝硬化患者90例,根据不同表现及病因分组,采用生化仪检测血清β_2-MG、血清Cys C,尿α_1-MG、尿β_2-MG。结果肝硬化腹水组与肝硬化无腹水组、对照组比较,血清Cys C、血清β_2-MG、尿β_2-MG、尿α_1-MG明显升高(P<0.05);肝硬化无腹水组与对照组比较,血清Cys C、尿β_2-MG、尿α_1-MG轻度升高,差异无统计学意义(P>0.05);血清β_2-MG显著升高(P<0.05);不同病因肝硬化腹水患者之间血清Cys C、血清β_2-MG、尿β_2-MG、尿α_1-MG差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清Cys C、β_2-MG联合尿α_1-MG、β_2-MG可及早识别亚临床HRS,为HRS的早期预防和治疗提供依据。

糖尿病肾病患者HbA1c、Cys-C和β_2-MG早期联合检测的临床意义

目的研究HbA1c、Cys-C和β2-MG联合检测在2型糖尿病肾病早期的诊断价值。方法将94例糖尿病肾病患者随机分为无白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和临床白蛋白尿组,对照组选取同期门诊健康体检者40例,比较4组间HbA1c、Cys-C和β2-MG水平变化。结果糖尿病肾病组患者HbA1c、Cys-C和β2-MG水平显著升高(P<0.05),其中微量白蛋白尿组和临床白蛋白尿组与对照组有显著性差异(P<0.01);HbA1c与Cys-C和β2-MG水平呈正相关(r=0.2763、0.4518,P<0.05);对照组HbA1c、Cys-C和β2-MG的综合阳性检出率为5.0%,而微量白蛋白尿组和临床白蛋白尿组的联合检测阳性率分别为88.6%和93.1%,联合检测的阳性率明显高于对照组(χ2=9.26,P<0.05),表明三项联合检测可提高2型早期糖尿病的检出率。结论 HbA1c、Cys-C与β2-MG与早期肾脏损伤程度密切相关,三者联合检测对DN的早期诊断、早期治疗及监测有着重要意义。

苏云金芽胞杆菌CY1菌株的cry基因分析

通过醋酸钠-抗生素筛选法从河北省土壤中筛选得到了苏云金芽孢杆菌新菌株CY1。镜检可观察到伴孢晶体呈小菱形。SDS-PAGE分析结果表明菌株CY1表达的晶体蛋白分子量为130 kDa。利用25对通用引物检测cry1,cry1I,cry7,cry2,cry3,cry4/cry10,cry5,cry6,cry7,cry8,cry9,cry11,cry13/14,cry16/17,cry18,cry19,cry21,cry22,cry24/25,cry26/28,cry27/29,cry30,cry32,cry34/35,cry40基因,仅从CY1菌株中检测出cry7基因,该cry7基因N末端的1 215 bp片段所编码的氨基酸序列与已发表的Cry7Ab1(Acc No.:U04367)序列同源性达99%,仅有2个氨基酸的差异。用3对cry7Ab特异引物检测,进一步证实该菌株携带有cry7Ab基因。

血必净注射液对脓毒症患者MYO、Cys C及KIM-1的影响

目的观察血必净注射液对脓毒症患者肌红蛋白(MYO)、胱抑素C(Cys C)及尿肾损伤分子1(KIM-1)的影响。方法选取2015年1月至2016年7月收住重症医学科脓毒症患者为研究对象,按简单随机法将患者分为对照组和血必净组各45例。对照组给予脓毒症基础治疗;治疗组同时予血必净注射液治疗(血必净注射液100 m L静脉滴注,每日1次),疗程为7 d。观察两组患者治疗前和治疗后1、3、7 d急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分;检测两组治疗前及治疗3 d和7 d血中肌酐(SCr)、MYO、Cys C、KIM-1等。结果两组各45例患者中,48 h内每组死亡2例,均予以剔除,最终纳入资料完整且符合观察要求的患者各43例。两组治疗前APACHEⅡ评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗3 d、7 d均较治疗前明显降低,且治疗7 d时血必净组较对照组下降更为显著(P<0.05)。两组治疗前SCr、MYO、Cys C、KIM-1水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);血必净组治疗后上述指标的改善程度均明显优于对照组,以治疗3 d时改善更为显著(P<0.05)。结论血必净注射液减少脓毒症患者MYO及Cys-C分泌,下调KIM-1表达以保护肾功能。

新型醚酸捕收剂CY-1对绿泥石的浮选作用机理及在铁矿反浮选中的应用

首次确定太钢袁家村铁矿中绿泥石的类型和化学式,针对该绿泥石中金属离子种类和含量及其碎解暴露面特点,设计并合成出新型醚酸捕收剂CY-1。通过绿泥石、赤铁矿单矿物浮选试验、微细粒富绿泥石赤磁混合铁矿实际入浮矿石浮选试验、FT-IR光谱分析、Zeta电位测试、吸附量试验、DFT计算和XPS分析研究CY-1对绿泥石矿物的浮选性能及作用机理。单矿物浮选试验结果表明,捕收剂CY-1对绿泥石的捕收能力显著强于NaOL的。碱性条件下反浮选袁家村微细粒赤磁混合铁矿时与使用NaOL捕收剂相比较:30℃时,CY-1所取得的粗精矿中铁品位和回收率分别提高2.27%和1.22%;20℃时,CY-1所取得的粗精矿中铁品位和回收率分别提高11.11%和11.84%。DFT计算表明,CY-1分子的羧基O是作用于矿物的主要位点,亲固基中的其他O也是活性供电子中心。CY-1浮选绿泥石的作用机理研究表明,分子中特有的“冠醚”结构使CY-1与绿泥石表面的Mg和Al产生化学键合反应,提高捕收剂对绿泥石的浮选捕收能力。

清瘟败毒饮对脓毒症急性肾损伤患者Cys-C、KIM-1与NGAL表达的影响

目的观察清瘟败毒饮对脓毒症急性肾损伤(AKI)患者肾功能的影响。方法将脓毒症AKI患者随机分为治疗组与对照组,并给予常规西药治疗;治疗组同时予清瘟败毒饮口服或鼻饲治疗,疗程7天。治疗前后进行APACHEⅡ评分,测定血清C反应蛋白(CRP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)、尿肾损伤分子1(KIM-1)、人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平变化情况。结果治疗后两组APACHEⅡ评分、CRP水平显著下降(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后两组BUN、Scr水平均升高(P<0.05),但治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后两组KIM-1、NGAL显著下降(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);治疗后两组Cys-C上升(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。结论清瘟败毒饮能减少脓毒症AKI患者Cys-C分泌,下调KIM-1、NGAL表达以保护肾功能。

稻曲病病菌Zn_(2)(Ⅱ)Cys6型转录因子UvZC1基因的克隆及功能分析

为明确Zn_(2)(Ⅱ)Cys6型转录因子UvZC1在稻曲病病菌中的功能,利用CRISPR-Cas9结合同源片段双交换的方法,诱导野生型菌株Jt209发生UvZC1基因缺失突变。结果显示,与Jt209相比,UvZC1基因缺失突变体的生长速率和分生孢子量均显著下降,且突变体中部分与稻曲病病菌其他产分生孢子相关基因表达量发生变化;此外,该基因的缺失导致突变体对十二烷基硫酸钠(SDS)更敏感,而对氧化胁迫的耐受性增强;在稻曲病病菌接种水稻后24 h、48 h的侵染早期,UvZC1基因的表达量明显上升,但基因缺失突变体接种水稻后形成的稻曲球数量与野生型之间没有差异。综上所述,UvZC1基因参与稻曲病病菌营养生长、分生孢子产生和侵染水稻过程,还与稻曲病病菌细胞壁的完整性和响应氧化胁迫相关。

血清Cys-C及尿KIM-1评价老年患者使用万古霉素致急性肾损伤的回顾性研究

目的:利用血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)、肌酐(Cr),尿液肾损伤因子1(KIM-1)评价使用万古霉素老年患者致急性肾损伤,为临床药师协助临床医师制定个体化给药方案提供理论依据。方法:回顾性收集2016年7月~2017年5月入住我院ICU使用万古霉素治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)血流感染的老年患者48例,统计万古霉素治疗前和用药后6,12,24,48h患者血清Cys-C、Cr,尿KIM-1检测数据。根据AKI诊断标准将患者分为AKI组和对照组。比较两组患者用药后血清Cr、Cys-C、尿KIM-1水平差异,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价Cys-C、KIM-1的临床诊断价值。结果:使用万古霉素48 h后,有32例(66.67%)患者发生AKI。与对照组相比,AKI组患者血清Cr于用药后48 h、Cys-C于用药后24h、尿KIM-1于用药后12 h开始显著上升(P<0.05)。利用血清Cys-C、Cr及尿KIM-1分别进行AKI诊断时,在用药后12 h诊断发生AKI的人数差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:尿KIM-1曲线下面积(AUC 0.797,95%可信区间:0.647~0.947),血清Cys-C曲线下面积(AUC 0.582,95%可信区间:0.364~0.799)。结论:与传统肾损标志物Cr相比,血清Cys-C及尿KIM-1可更早地预判老年患者肾功能情况,为肾功能的早期评估提供可靠依据,有助于临床药师利用有效指标协助临床医师及时调整老年患者万古霉素给药方案。

三子养亲汤对哮喘小鼠支气管平滑肌细胞CysLTR1mRNA表达的影响

目的:观察三子养亲汤对哮喘小鼠支气管平滑肌细胞Cys LTR1mRNA表达的影响。方法:培养小鼠平滑肌细胞至3~5代,进行分组。空白组为正常小鼠平滑肌,试验组分别为三子养亲汤高、中、低剂量组,孟鲁司特钠组,哮喘模型组。哮喘模型组为造模成功的哮喘小鼠支气管平滑肌细胞,各药物组分别取不同药量灌胃下的小鼠支气管平滑肌细胞,药量分别为10.8 g/kg·d、5.4 g/kg·d、2.7 g/kg·d的三子养亲汤中药汤剂,孟鲁司特钠0.004 g/kg·d。以1∶9的比例配置含药血清及培养基,加入细胞培养液,空白组用常规培养基。培养结束后,取上清液,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR法)进行Cys LTR1mRNA的检测,每组均检测7孔。比较各组小鼠支气管平滑肌细胞Cys LTR1mRNA表达。结果:哮喘模型组Cys LTR1mRNA表达明显升高,中药高剂量组Cys LTR1mRNA表达下降显著,与哮喘模型组相比,具有显著的统计学差异(P<0.01),中药中剂量组、孟鲁司特组与哮喘模型组相比,具有统计学差异(P<0.05),"三子养亲汤"低剂量组与哮喘模型组相比,Cys LTR1mRNA表达下降不显著(P>0.05),无统计学差异。结论:Cys LTR1为哮喘的重要炎性通路,抑制Cys LTR1炎性通路是三子养亲汤的作用机制之一。

血清CEA、CY21-1、CA15-3联合检测对肺癌诊断与预后的临床意义

目的分析血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CY21-1)、糖类抗原15-3(CA15-3)联合检测在肺癌诊断和预后中的应用价值。方法对43例肺癌患者、31例良性肺病疾病患者和28例健康志愿者取血清,分别采用放射免疫法和酶联免疫法检测CEA、CA15-3和CY21-1的水平。结果肺癌组3项指标的水平均高于良性组和健康组,差异有统计学意义(P<0.05),且3项指标的水平在不同的病理分型和临床分期中也有差异;3项联合检测较单项检测有更高的灵敏度和准确度(P<0.05)。结论联合检测能够提高肺癌诊断的灵敏性和特异性,并且可以用于预后手术疗效的判定及复发或转移的监测。

NSE、Cy-fra21-1、CA199、CA125及CEA联合检测在肺癌诊断中的应用

目的:探讨神经元特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)、细胞角蛋白片段19(Cy-fra21-1)、糖类癌抗原199(carcinoma antigen,CA199)、糖类癌抗原125(carcinoma antigen,CA125)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)联合检测在肺癌诊断中的应用价值。方法:回顾性分析2015年1月至2017年1月80例肺癌患者的临床资料(观察组),选取同期80例肺部良性病变患者(对照组),两组患者均行血清NSE、Cy-fra21-1、CA199、CA125、CEA检测。结果:观察组患者NSE、Cy-fra21-1、CA199、CA125及CEA均高于对照组(P<0.05);腺癌CA125的阳性率高于鳞癌(P<0.05),鳞癌Cy-fra21-1的阳性率高于腺癌(P<0.05),小细胞癌CA125的阳性率低于腺癌及鳞癌(P<0.05);NSE、Cy-fra21-1、CA199、CA125及CEA联合检测的准确度、灵敏度优于各单独检测(P<0.05)。结论:NSE、Cy-fra21-1、CA199、CA125及CEA联合检测可有效提高肺癌诊断准确率,确定其病理类型,为临床治疗提供参考,具有重要的临床应用价值。

脓毒症急性肾损伤NGAL、KIM-1、Cys-C联检对肾脏替代治疗预后的预测价值研究

目的探讨脓毒症急性肾损伤(AKI)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)、肾损伤分子1(KIM-1)联检对持续性肾脏替代治疗(CRRT)预后的预测价值。方法回顾性选择2017年7月至2018年7月潍坊市中医院肾内科收治的需行CRRT的脓毒症合并AKI患者68例作为研究对象。从CRRT起随访30 d,记录患者在此期间生存情况,根据生存情况分为存活组(n=32)与死亡组(n=36)。比较两组患者NGAL、KIM-1、Cys-C水平,采用Pearson相关分析检验NGAL与KIM-1、Cys-C的相关性,多因素Logistic回归分析法分析68例患者30 d死亡率的危险因素,ROC曲线分析比较NGAL、KIM-1、Cys-C对脓毒症合并AKI患者30 d内肾功能转归及病死率的预测价值。结果死亡组患者NGAL、KIM-1、Cys-C水平显著高于存活组,有统计学差异(P <0. 05); NGAL与KIM-1、Cys-C均呈正相关(P <0. 05); NGAL、KIM-1、Cys-C为AKI患者30 d死亡率的危险因素(P <0. 05); NGAL、KIM-1、Cys-C联合检测对行CRRT的脓毒症合并AKI患者近期肾功能转归的预测价值明显优于单独检测NGAL、KIM-1、Cys-C(P <0. 05); NGAL、KIM-1、Cys-C联合检测对行CRRT的脓毒症合并AKI患者近期病死率的预测价值明显优于单独检测NGAL、KIM-1、Cys-C(P <0. 05)。结论 NGAL、KIM-1、Cys-C是预测脓毒症合并AKI患者预后的敏感指标,三者联合检测可进一步提高对脓毒症合并AKI患者CRRT短期预后的预测能力。

比较KIM-1 Cys-C对单侧梗阻性肾病不同程度肾损伤的预测价值

目的:比较尿肾损伤分子-1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)、血清胱抑素C(Cys-C)对单侧梗阻性肾病患者不同程度肾损伤的预测价值。方法:选择明确诊断单侧梗阻性肾病患者92例为研究对象,根据肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)分为轻度损伤组、中度损伤组、重度损伤组,健康人作为对照组。清晨空腹采集血液及尿液标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)集中检测尿KIM-1,化验室检测Cys-C、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),将结果进行对比并与GFR进行相关性分析。结果:尿KIM-1在对照组的表达低于患者各组(P<0.05),在轻度损伤组中表达低于中度、重度损伤组(P<0.05),但在中度、重度损伤组间的表达未见显著性差异(P>0.05),尿KIM-1与患肾GFR呈负相关;Cys-C、Scr、BUN在各组之间比较未见明显变化,Cys-C、Scr、BUN与患肾GFR未见明显相关。结论:尿KIM-1在单侧梗阻性肾病肾损伤及损伤程度预测方面相比Cys-C、Scr、BUN具有潜在临床应用价值。

探讨ApoA-1、同型半胱氨酸、Cys-C与帕金森病认知功能的关系

目的 探讨ApoA-1、同型半胱氨酸、Cys-C与帕金森病认知功能之间的关系。方法 选取2020年1月—2021年12月于泰州市第二人民医院神经内科就诊的帕金森病患者60例为研究对象,根据患者认知功能状态分为认知正常组和认知障碍组,各30例,选取同一时间健康体检人员30名为对照组。评价3组认知功能,检测ApoA-1、同型半胱氨酸、Cys-C水平,并分析帕金森综合征认知功能障碍与ApoA-1、同型半胱氨酸、Cys-C的相关性,分析帕金森综合征患者认知功能障碍的影响因素。结果 认知正常组患者和认知障碍组患者UPDRS评分为(13.20±2.21)分、(18.02±2.05)分,均高于对照组,MMSE为(22.28±2.13)分、(17.85±2.11)分,MoCA评分为(21.30±2.18)分、(16.35±2.16)分,均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);认知正常组、认知障碍组患者ApoA-1水平为(1.78±0.29)、(1.27±0.27)g/L,均低于对照组,同型半胱氨酸为(18.70±4.59)、(30.18±5.98)μmol/L,Cys-C水平为(4.20±0.81)、(5.98±0.69)mg/L,均高于对照组,差异有统计学意义(t=5.455、10.711、10.716、18.524、4.948、16.969,P<0.05)。二元回归和线性相关性分析,UPDRS评分≥5分,MMSE评分<27分,MoCA评分<26分、ApoA-1水平低、同型半胱氨酸水平高、Cys-C水平高为帕金森综合征患者发生认知功能障碍的危险因素(P<0.001);帕金森综合征患者MMSE评分与ApoA-1水平呈正相关、与同型半胱氨酸水平呈负相关,与Cys-C水平呈负相关(P<0.001)。结论 ApoA-1、同型半胱氨酸、Cys-C与帕金森病患者认知功能之间的关系密切,可预估帕金森病者认知功能。

慢性肾衰竭患者血清Cys C、β2-MG、MCP-1及ANGⅡ水平变化及临床意义

目的探讨慢性肾功能衰竭(CRF)患者血清膀胱抑素C(Cys C)、β2-微球蛋白(β2-MG)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平变化,分析其与CRF患者预后的关系。方法选择2017年1月至2019年1月深圳市南山区蛇口人民医院肾内科收治的68例CRF患者(CRF组)和50例健康体检者(对照组),检测血清Cys C、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ水平,比较组间差异。以CRF患者随访期间发生全因死亡为终点事件,分析Cys C、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ与CRF患者预后的关系。结果随访中位时间18(13~25)个月,23例死亡(死亡组),50例存活(存活组)。死亡组血清CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ水平均高于存活组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRF患者血清CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ水平随着慢性肾脏疾病(CKD)分级增加而升高,差异有统计学意义(P<0.05),血清CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ水平与肾小球滤过率(eGFR)均呈负相关(r=−0.435、−0.406、−0.621、−0.594,P<0.05),与尿白蛋白/肌酐比值(ACR)呈正相关(r=0.406、0.435、0.562、0.503,P<0.05)。ROC分析结果显示CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ预测CRF患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.681(95%CI:0.551~0.811)、0.649(95%CI:0.510~0.789)、0.917(95%CI:0.852~0.981)、0.838(95%CI:0.733~0.942)。Kaplan-Meier生存分析结果显示高水平CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ组患者生存时间短于低水平CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素COX风险回归分析高水平CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ是CRF全因死亡的独立危险因素(P<0.001)。结论血清CysC、β2-MG、MCP-1、ANGⅡ水平与CRF患者肾损伤程度和不良预后密切相关,可作为CRF预后评估的辅助指标。

藏药佐太对药物代谢酶CYP2C11和CYP2D1的活性及蛋白和mRNA表达的影响

目的探讨佐太对药物代谢酶CYP2C11和CYP2D1活性,以及蛋白和mRNA表达的影响。方法 140只SD大鼠,雌雄各半,随机分为CYP2C11(给予探针药物苯妥英)和CYP2D1(给予探针药物右美沙芬)两大组,每大组设7个小组,为对照组、小剂量单次给药组、小剂量多次给药组、中剂量单次给药组、中剂量多次给药组、大剂量单次给药组、大剂量多次给药组,每小组10只。采用探针药物法测定大鼠给予佐太后药物代谢酶活性的变化;ELISA法测定大鼠给予佐太后药物代谢酶蛋白表达的变化;实时定量PCR法测定大鼠给予佐太后药物代谢酶mRNA表达的变化。结果与对照组比较,单次给予佐太12.0 mg·kg^(-1)后,CYP2C11的活性显著升高105.3%;单次给予佐太3.8 mg·kg^(-1)后,CYP2D1的活性显著升高193.5%;CYP2D1的蛋白表达显著升高84.3%;CYP2D1的mRNA表达显著升高76.4%,其他组无显著性变化。多次给予佐太1.2、3.8、12.0 mg·kg^(-1)后,CYP2C11的活性分别显著升高436.8%、131.6%、226.3%;CYP2C11的蛋白表达分别显著升高88.1%、38.7%、54.2%;CYP2C11的mRNA表达分别显著升高126.8%、135.2%、100.0%;CYP2D1的活性分别显著升高145.2%、71.0%、58.1%;CYP2D1的蛋白表达分别显著升高84.5%、73.7%、33.4%;CYP2D1的mRNA表达分别显著升高118.2%、67.3%、36.4%,其他组无显著性变化。结论藏药佐太对CYP2C11和CYP2D1的活性,蛋白质及mRNA表达均具有显著升高效果,显示佐太在作为合剂时可诱导肝药酶代谢加快。

猴金属硫蛋白MT1 α-结构域中Cys33和Cys34的突变对蛋白质稳定性的影响

重组猴金属硫蛋白 MT1及其 C3 3 M,C3 4S和 C3 3 M/ C3 4S突变体蛋白的蛋白质快速液相色谱( FPLC)分析表明 ,突变体蛋白 C3 4S和 C3 3 M/ C3 4S存在着两个稳定的流分 f1和 f2 .CD光谱和重金属离子分析表明 ,突变体蛋白多流分不仅与半胱氨酸和 Cd2 + 离子结合方式和构型有关 ,还与金属结合量有关 .突变体蛋白多流分的结果表明 ,在把猴金属硫蛋白 α-结构域中的 Cys3 3和 Cys3 4突变为非半胱氨酸残基以建立 β-β结构域的金属硫蛋白时 ,可导致蛋白形成多种结构形式 .这表明 α-结构域在稳定金属硫蛋白的结构中起着重要的作用 。