吲哚类菁染料Cy3嵌入的核壳荧光纳米颗粒的制备及其性质研究

以蛋白质或多肽修饰的吲哚类菁染料Cy3为内核,采用实验条件简单的油包水反相微乳液方法成核,通过正硅酸乙酯水解形成的网状二氧化硅包壳的方法制备吲哚类菁染料Cy3嵌入的核壳荧光纳米颗粒.考察了以不同等电点的蛋白质和多肽修饰的Cy3为内核材料对吲哚类菁染料Cy3嵌入的核壳荧光纳米颗粒制备的影响.结果表明,分别采用人免疫球蛋白(IgG)或多聚赖氨酸修饰的Cy3为内核材料,都能制备荧光强度高、荧光稳定性强和染料泄漏极少的Cy3嵌入的核壳荧光纳米颗粒.进一步对Cy3嵌入的核壳荧光纳米颗粒进行了表征,并将基于这一新型的荧光纳米颗粒建立起来的生物标记方法初步应用于流感病毒DNA的检测,其检测线性范围为3.18×10-10～1.27×10-9mol/L,检测下限为3.51×10-10mol/L,相关系数r为0.9865.

CY3菌株代谢中间产物的氧化产物的分析与鉴定

实验通过研究发现CY3菌株不但能代谢原始的多环芳烃,还可以在很短的时间内将中间产物代谢掉,从而使这些中间产物不易积累。通过GC-MS来鉴定CY3菌株将1-羟基-2-萘甲酸降解为1-羟基萘,1,2-二羟基萘等。

棉蚜P450 CYP6CY3的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

【目的】克隆得到棉蚜(Aphis gossypii)P450 CYP6CY3,将其开放阅读框(ORF)在原核细胞中进行表达,纯化融合蛋白,多次免疫小鼠获得CYP6CY3多克隆抗体,为进一步分析CYP6CY3在棉蚜不同组织部位的分布及其在抗性中的作用打下基础。【方法】利用RT-PCR及3′-RACE技术克隆获得CYP6CY3的ORF,并对其进行生物信息学及系统进化分析。构建重组质粒pET32a-CYP6CY3,转化大肠杆菌transetta(DE3)进行原核表达,利用切胶回收法获得纯化的融合蛋白,继而用纯化得到的融合蛋白免疫昆明白小鼠制备鼠抗棉蚜CYP6CY3多克隆抗体;ELISA检测鼠抗CYP6CY3蛋白多克隆抗体的效价,并通过Western blot及免疫组化检测该抗体特异性。【结果】棉蚜CYP6CY3 ORF长1 266 bp,编码421个氨基酸,预测蛋白分子量为48.8 k D,理论等电点为8.99,不含有信号肽序列,属亲水性蛋白;氨基酸序列包括W×××R、AG××T、E××R、P××F×PE/DRT和F××G×××C×G 5个P450家族的特征基序。通过NCBI Blastx进行同源序列的比对分析,棉蚜CYP6CY3氨基酸序列与豌豆长管蚜(Acyrthosiphon pisum)(XP_001948581.1)氨基酸一致性最高,达到81%,与麦双尾蚜(Diuraphis noxia)(XP_015379193.1)一致性为79%,与桃蚜(myzus persicae)(AHB52749.1)氨基酸序列一致性为76%,4种蚜虫的氨基酸序列都含有位于螺旋K中参与稳定核心结构的E××R完全保守序列及P450基因标志性的F××G×××C×G(358—367)血红素结合位点的共有序列。使用MEGA5软件构建系统进化树,显示棉蚜、豌豆长管蚜、麦双尾蚜及桃蚜聚为一类,亲缘关系较近。通过原核表达得到的CYP6CY3融合蛋白的相对分子量约为66 k D,基于纯化的CYP6CY3重组蛋白多次免疫昆明白小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测获得的鼠抗CYP6CY3抗体效价达到1﹕409 600。Western blot和免疫组化进一步证实,该抗体既能与异源表达的CYP6CY3蛋白特异性结合,也能与棉蚜组织中存在的天然CYP6CY3蛋白特异性结合,具有较好的免疫反应特异性。【结论】利用3′-RACE技术克隆获得CYP6CY3的开放阅读框,并用异源表达的蛋白免疫昆明白小鼠制备了高滴度、特异性强的鼠抗棉蚜CYP6CY3的多克隆抗体,可用于进一步研究CYP6CY3功能及其在棉蚜抗药性方面的作用。

水稻总RNA反转录出Cy3-dUTP标记cDNA的研究

以提取的水稻叶总RNA为模板,Cy3-dUTP为标记,进行反转录,得出Cy3-dUTP标记的cDNA,对影响本实验结果的因素进行了探究。

PLC在CY3型液压式分相操作机构的断路器控制信号系统中的应用

利用日本OMRON (立石 )公司的C系列P型PLC实现了CY3型液压式分相操作机构的断路器控制信号系统。文中给出PLC的接线原理图和梯形图 ,并介绍了其工作原理和相关技术。

壳聚糖偶联Cy3复合探针制备条件优化及光谱特性分析

将壳聚糖(CTS)与Cy3偶联得到一种复合探针分子CTS-Cy3,通过紫外标准曲线法计算出CTS-Cy3的偶联比.研究了不同条件下CTS与Cy3的偶联规律以及光谱特性.实验结果表明:在70,℃以下,壳聚糖(相对分子质量3,000)与Cy3比例为1∶2,反应20 h得到的产品有较好的偶联比;光谱特性研究发现,复合探针分子与菁染料Cy3有相同的紫外最大吸收波长,荧光stocks位移不变,而荧光量子产率有明显提高,具有一定的荧光加合效应.

CY3液压机构故障的原因分析和处理

110 kV以上高压少油断路器,一般都配置CY3型液压操作机构.该液压机构具有体积小、功率大等优点,但是其故障率也明显高于弹簧和电磁操作机构.……

高压断路器(CY3-Ⅲ型)液压机构维护中遇到的问题及解决措施

介绍了高压断路器ＣＹ３ —Ⅲ型液压机构在维护中经常遇到的问题（ 工作压力、箱保温、带电补油、密封）

CY3菌株代谢1-羟基-2-萘甲酸产物为水杨酸的研究

本实验通过研究发现CY3菌株可以在很短的时间内将多环芳烃中间产物代谢掉,从而使这些中间产物不易积累。通过GC-MS来鉴定CY3菌株将1-羟基-2-萘甲酸降解为水杨酸等。

CY3型液压操作机构的故障分析与检修

我公司部分110,220 kV变电站的少油断路器均采用C Y3型液压操作机构,由于断路器运行时间较长,大多为10年以上,其液压操作机构的部分部件老化,导致运行中出现很多故障现象,有些还比较突出,严重影响公司的可靠性指标.

CY3型液压机构油泵长时间不上油故障

新疆拜城发电厂有5台110kVSW6—110型少油断路器，均为西安高压开关厂制造。断路器采用CY3型液压操作机构，有储能和充气装置，还有油泵、操作缸、阀系统、电磁铁及辅助元件。

浅析CY3液压机构故障处理方法

本文详细介绍了CY3液压机构油堵塞、泵不上油、储压筒内进空气、打不上压力、二级阀体不能够伸缩、弹簧无弹力、钢球破裂等故障,针对故障产生的原因进行了详细分析,并针对CY3型液压机构存在的问题给出了科学的解决对策,可确保实施后及时发现故障,在事前降低故障发生率,保证系统的安全稳定运作。

CY3_A液压操作机构的使用和维护

我厂的110kV SF6气体封闭式组合电器的断路器采用了CY3A液压操作机构，经过了3年的现场运行，多次对断路器进行分、合闸操作，此操作机构动作可靠，同时具有失压后再建立压力时不慢分或慢合的优点，保证了需要用手操作装在分、合闸电磁铁上的省力机构的手柄便可实现分、合闸操作。 二级阀采用差动原理。利用锥面密封的管状阀芯来实现差动。其特点是管状阀芯运动质量轻、动作快、控制阀口大而操作时用力少。最主要的优点是管……

CY3A型液压操动机构超压事故原因分析

1.前言 断路器的液压操动机构已有一二十年的应用历史。其优点是油的压力高,可用小体积获得大出力;液体有不可压缩性,因此动作速度快;出力均匀,阻尼性好;可动部件浸在油中,免受大气腐蚀,寿命长。其缺点是速度特性受工作温度影响大,容易漏油,尤其是超压事故严重影响着设备的安全正常运行。

CY3A液压操动机构故障分析及维修处理

文章通过对CY3A液压操动机构故障的分析,找出维修处理方案。

CY3A型液压操动机构超压事故

断路器的液压操动机构已有多年历史。其优点是油的压力高，可用小体积获得大出力；液体有不可压缩性，因此动作速度快；出力均匀，阻尼性好；可动部件浸在油中，免受大气腐蚀，寿命长。其缺点是速度特性受工作温度影响大，容易漏油，尤其是超压事故将会严重影响设备的安全运行。

浅谈SW6-110型少油断路器及CY3-V型液压操动机构的安装与调试

本文简要介绍了江苏如皋高压电器厂生产的SW6-110型少油断路器以及CY3-V型液压操动机构安装与调试的方法、程序以及注意事项等,对于牵引变电所的施工有一定的借鉴意义。

兔宫颈固相转染靶向HPV16 siRNA抑制荷宫颈癌SCID小鼠HPV的复制

目的:(1)探讨在体细胞固相转染siRNA的可行性、安全性及有效性。(2)探讨改变宫颈表面黏膜通透性提高转染效果的可能性。方法:(1)设计针对HPV16 siRNA,长度为21nt,采用Cy3荧光标记,制备siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶。(2)选新西兰雌性未孕兔12只,随机分为实验组及对照组,实验组在转染前使用200mmol/L高渗盐水处理兔宫颈表面10min,对照组则使用生理盐水处理兔宫颈,将siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶1.5mL涂于兔宫颈表面,进行siRNA转染,持续24h。24h后将兔处死,取其宫颈组织。(3)肉眼观察宫颈局部有无红肿、破溃等改变,取部分作快速冰冻切片,荧光显微镜检测转染siRNA的转染效果;部分组织进行石蜡包埋切片,普通显微镜观察宫颈局部组织细胞形态,评估siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶的副反应。(4)将12只荷HPV宫颈癌SCID小鼠随机分为siRNA转染组及对照组,转染组使用siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶进行基因治疗,对照组仅使用Lipo2000-卡波姆凝胶,转染后取瘤体,采用PCR检测治疗前后瘤体中HPV16-DNA滴度,鉴定siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶疗效。结果:(1)高渗氯化钠预处理组及对照组兔宫颈局部上皮组织内均可见红色的荧光;被转染组织局部无红肿、破溃等不良反应。宫颈局部组织结果正常,细胞形态完整,局部无炎性细胞浸润。(2)使用siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶治疗后小鼠瘤体中HPV-DNA的滴度较前明显下降(P<0.05)。结论:(1)siRNA可通过Lipo2000成功转染入在体宫颈局部组织细胞中,siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶对宫颈局部组织无明显毒、副反应。(2)siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶可有效降低荷SiHa细胞宫颈癌瘤体中HPV16-DNA滴度,具有抑制HPV复制的作用。(3)目前没有足够的证据表明转染前增加宫颈黏膜的通透性可以提高siRNA的转染效果。