用Cy5-ddNTP结合修饰引物延伸测定人类3种SNP(英文)

目的:建立一种简便快速的分析方法检测人类基因中的单核苷酸多态性(SNP)。方法:在适当的dNTPs和Cy5荧光染色标记的ddNTPs存在的情况下,利用修饰引物从SNP位点进行特异性碱基延伸,延伸产物通过芯片电泳来检测。修饰引物的3′端第三个碱基处人为导入一个错配碱基来改善引物延伸反应的开关特性。结果:测定了人类p53、CK20、CK30基因上3种SNP的可能形态(野生型、突变型和杂合型),所有样本在芯片电泳中100 s左右被准确检测。结论:该方法简便易行,可用于快速检测已知的SNP。

用芯片电泳快速检测人p53基因外显子8上的突变点

目的 :建立简单快速的分析方法检测基因突变。方法 :利用修饰引物进行特异性单碱基延伸 ,采用Cy5荧光染色标记的ddNTP ,并通过芯片电泳来检测。结果 :实测了合成人p5 3基因外显子 8上突变点的 3种可能形态 (野生型 ,突变型和杂合型 ) ,并测定了一系列不同比例突变率的混合样本 ,最低至 5 %突变率。所有样本分别于芯片电泳中在 10 0s之内被检测出来。结论 :该方法操作简单易行 ,可用于快速检测已知的基因突变。