仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体，成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织，胚性愈伤组织的形态有两种：微棕红色松软愈伤和松脆愈伤．显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团，而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个．细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞，进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现，大多数体胚60～90d可发育成完整的小植株．

激素、光照对仙客来叶片愈伤组织诱导、分化及试管苗生长的影响

激素、光照对仙客来叶片愈伤组织诱导、分化及试管苗生长的影响庞基良，林波，梁海曼（杭州市农业科学研究所，３１０００８）（杭州大学生物系，３１００１２）关键词仙客来；叶片；植物激素；光照ＥｆｆｅｃｔｏｆＰｈｙｔｏｈｏｒｍｏｎｅａｎｄＬｉｇｈｔｏｎＣａｌｌ...

仙客来愈伤组织的超低温保存

为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异,对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究。以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料,首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间,转至不同的冰冻保护剂中直接液氮冷冻或?20oC预冷冻2h,然后液氮超冷冻保存,37oC水浴迅速解冻,并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤,以中性红染色测定细胞的存活率,SPSS13.0软件进行统计学分析。结果表明:预培养基中蔗糖浓度、预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响,筛选出4%蔗糖浓度预培养3d、9号保护剂、0oC停留30min后直接冷冻为超低温保存的最佳方案,通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果。

仙客来组织培养中再生器官类型及增殖稳定性比较

对‘胜利女神’(Cyclamen persicum cv. ‘Victoria’)和‘大红’(C. persicum cv. ‘Dahong’)两个仙客来品种成苗叶片诱导的愈伤组织,在6-BA与NAA配合的12个分化培养基上继代培养,第一次继代主要产生大量的不定芽芽点,从第二次继代后会得到5种类型的再生器官,分别为不定芽芽点、多芽球茎、多芽新梢、单芽球茎和叶片状芽丛。通过对不同再生器官增殖稳定性的试验表明,‘大红’品种的多芽球茎和多芽新梢在继代培养中再生相同器官的稳定性比较强,由于多芽球茎的增殖率大于多芽新梢,在继代中选择多芽球茎为再生体系较理想;不定芽芽点在以后的继代中会分散产生各种再生器官,不宜作为增殖器官;单芽球茎和叶片状芽丛继代分散性强,为不正常再生器官。‘胜利女神’品种多芽球茎和多芽新梢继代的稳定性比‘大红’品种差,易于产生多种不正常器官。

UV-B辐射对仙客来的生理效应

通过室内模拟试验,研究了不同强度UV-B辐射(10μW/cm2和20μW/cm2)对仙客来(Cyclamen persicum Mill)生理的影响。结果表明:(1)UV-B辐射的增加对仙客来叶片光合色素的含量具有影响;(2)叶片质膜透性随UV-B辐射强度的增加而增加,随UV-B辐射时间的延长而增加;(3)叶片类黄酮含量随UV-B辐射强度的增加而增加,且在40d时达到最大值;(4)增强UV-B辐射下,仙客来花瓣中的花青素含量增加。

太空环境对仙客来诱变效应的研究

以仙客来干种子为试材,利用"神舟八号"飞船搭载进行太空诱变处理,以此探究太空环境对仙客来造成的诱变效应。结果表明:太空诱变产生的M1代仙客来植株在花色和花形上与对照株相比表现出明显的表观性状差异;对突变株进行的RAPD(Random amplified polymorphic DNA)试验分析中,28条随机引物中有27条引物扩增出现多态性,总共扩增出156条条带,其中91条呈现出多态性,多态性比率达到58.33%。所有突变株的DNA分子均发生了显著变化,变异率从23.08%到33.97%不等。综合分析显示,太空环境对当代植株造成了显著的诱变效应,经辐照后的植株在分子水平上均发生了明显的变异,而基因组的改变进一步导致了植株表观性状的变异。

仙客来体细胞胚胎发生的研究进展

综述了近年来国内外对仙客来体细胞胚胎发生的研究,表明品种的基因型、外植体的类型、外源激素、外界条件以及附加成分等对胚性愈伤的产生都有重要的影响,另外综述了仙客来胚性愈伤和体细胞胚胎的保存方法。

仙客来愈伤组织的诱导及其抗褐变的研究

该试验以仙客来的叶片、叶柄、花梗为外植体,分别以MS为基本培养基,并添加了不同种类和浓度的植物生长激素,对其进行愈伤组织的诱导。另外,还初步研究了活性炭(AC)、VC、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和黑暗培养对仙客来外植体抗褐变的作用。结果表明,以叶片为外植体诱导效率最高,叶柄、花梗次之。叶片愈伤组织诱导的最适培养基为1/2MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L+KT0.25mg/L;叶柄愈伤组织诱导的最适培养基是MS+6-BA0.2mg/L+NAA2.5mg/L;花梗愈伤组织诱导的最适培养基是MS+6-BA0.2mg/L+2,4-D0.5mg/L。5种抗褐化处理方法中黑暗培养抗褐化效果最好。

不同基质对仙客来生长开花的影响

通过对仙客来在4种基质上生长开花状况的观察研究结果表明，以“泥炭50％＋砻糠灰50％”为最佳基质，其次为“山泥50％＋砻糠灰50％”基质。

仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的1/2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明:球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1/2MS+6-BA0.2mg/L+2,4-D2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1/2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2-3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考.

仙客来新品种特异性、一致性和稳定性测试指南的研制

植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南是开展DUS测试工作的重要技术手册,同时也是审查机构审查新品种DUS的技术标准。通过阐述仙客来DUS测试指南研制的主要过程和制订的主要方式,结合田间观测实验,最终确定了40个性状,包括38个基本性状和2个选测性状,以及6个分组性状和4个标准品种,同时对数量性状进行分级研究。仙客来DUS测试指南的制订有助于加强新品种的保护,切实维护育种者的利益,提高育种积极性。

仙客来组织培养研究进展

对仙客来愈伤组织培养、继代生根培养、体细胞胚胎发生和抗褐化方面的研究做了较为详细的综述,并提出其进一步的研究方向,旨在为以后的相关工作提供参考。

仙客来分子育种研究进展

在花色、抗病、花型、香味等方面对仙客来分子育种进展及其育种的主要技术策略进行了综述,为仙客来分子育种提供了参考。

仙客来叶与患仙客来病毒病叶的比较解剖学研究

运有比较解剖学方法对仙客来的正常植株和患仙客来病毒病植株的叶片及叶柄进行了解剖、观察、研究 .结果表明 ,患病毒病仙客来的叶片及叶柄与正常植株的叶片及叶柄的解剖结构均有一定的差异 ,其中叶片的解剖结构差异较为明显 .患病植株叶的部分细胞遭到破坏 ,导致皱缩、卷曲等现象产生 。

低能离子注入对仙客来幼苗生长发育的影响

以仙客来种子为材料,研究了不同剂量的N+注入对仙客来种子发芽势、发芽率、成苗率的影响。结果表明:随着N+注入剂量的增加发芽势和发芽率的变化趋势为先降低后升高再降低,表现为"马鞍型"曲线,成苗率在低剂量时与发芽率相接近,在高剂量时成苗率明显降低。

温度对仙客来生理生化指标及生长特性的影响

以9种仙客来(Cyclamen persicum Mill.)幼苗为试验材料,分析了温度对幼苗生理生化指标和生长特性的影响,研究了不同品种仙客来植株的耐高温性,并尝试通过引入外源抗氧化剂来提升幼苗的耐热性。结果表明,仙客来幼苗在短时间内有一定的忍耐高温能力,幼苗叶片厚度、叶片数量等均可作为其耐热性研究的形态指标;同时,叶片细胞膜透性、超氧阴离子和丙二醛含量与温度显著相关。高温胁迫会导致仙客来幼苗膜脂过氧化加剧,细胞膜受损光合作用下降。其中,荷兰品种的耐热性最差,日本和法国品种的耐热性较强;施加抗氧化物质能够缓解植株的高温伤害,其中以100 mg/L半胱氨酸的处理效果最佳,研究结果能为仙客来的耐热鉴定提供更科学的依据。

仙客兰组织培养快繁技术的研究

目的:建立仙客来组织培养快速繁殖体系。方法:以仙客来叶片为外植体,消毒后将其置于富含不同激素配比的培养基中培养,筛选各阶段合适的培养基。结果:在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基组合中,诱导愈伤率达到80%,增殖培养以MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.5 mg/L为最好,可达到10倍以上。MS+NAA3.0 mg/L培养基为最佳诱导生根培养基,生根苗移栽成活达到90%。结论:实验初步建立了仙客来的组培快繁体系。

忻州地区三种盆栽花卉抗寒性研究

以杜鹃花、仙客来、长寿花三种盆栽花卉叶片为材料,模拟忻州地区冬春季节降温过程,在低温胁迫环境下,通过电导率法、蒽酮法、酸性茚三酮法、愈创木酚法研究相应抗寒指标含量变化,结合主成分分析及其相关性,利用隶属函数法初步进行抗寒性评估,在盆栽花卉抗寒性研究中有一定参考价值。结果表明:低温胁迫下,根据花卉叶片相对电导率、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量及过氧化物酶活性变化分析发现,长寿花相对电导率与其他3个指标一致反映出其抗寒性最弱,杜鹃花、仙客来的各抗寒性指标不完全一致,结合平均隶属函数值(0. 863、0. 876)、综合指数(0. 983、0. 833)进行抗寒性综合评价,强弱顺序:杜鹃花>仙客来。研究表明相对电导率、过氧化物酶活性可作为抗寒性综合指数评价指标。

仙客来播种育苗试验

将仙客来种子用高锰酸钾质量分数1000×10 6液浸泡26h左右,进行种皮软化和消毒处理,然后播种在泥炭基质内,深度为(0 6±0 1)cm。在无光条件下保持温度(20±5)℃,湿度90%左右,在50～60d后即可发芽。发芽后应注意增加光照和施肥,也可以用稀释的肥料代替喷水,成苗率达89 9%。

仙客来组织培养技术

将仙客来的叶片、叶柄、茎段等作外植体,采用不同消毒剂种类和不同消毒时间,研究了仙客来外植体的消毒。分别从外植体种类、基本培养基类型、NAA与6-BA激素配比3方面对仙客来愈伤组织诱导效果做了研究。采用多因子正交试验筛选仙客来丛生芽增殖最佳条件,以及活性炭对仙客来生根所起的作用做了研究。结果表明,次氯酸钠的消毒比氯化汞效果更好,用2%的次氯酸钠浸泡外植体10min为最佳消毒时间;叶片作为外植体更易于诱导愈伤组织;愈伤组织诱导的基本培养基以MS为宜,诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,继代增殖培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,适合生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+3%蔗糖+7g/L琼脂+活性炭0.5g/L。