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CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究 被引量:20
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作者 高维娟 许顺江 +5 位作者 丛斌 李淑瑾 马春玲 徐锦荣 姚玉霞 谷振勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1891-1895,共5页
目的:用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89,探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞(PIM s)核因子-κB(NF-κB)活性的cAMP-PKA信号通路机制。方法:分离纯化大鼠PIM s。用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测大鼠PIM s... 目的:用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89,探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞(PIM s)核因子-κB(NF-κB)活性的cAMP-PKA信号通路机制。方法:分离纯化大鼠PIM s。用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测大鼠PIM s中NF-κB活性,用W estern b lotting分析IκB-α蛋白水平。结果:正常对照组大鼠PIM s核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF-κB,LPS组细胞内NF-κB活性明显高于正常对照组(P<0.01),胞浆中IκB-α水平显著低于正常对照组(P<0.01)。CCK组和Fsk组细胞内NF-κB活性和胞浆中IκB-α含量均无明显差异(P>0.05)。CCK+LPS组和Fsk+LPS组,细胞内NF-κB活性均低于LPS组(P<0.05),IκB-α含量均高于LPS组(P<0.01)。LPS+CCK+H-89组NF-κB活性高于CCK+LPS组(P<0.01),而IκB-α蛋白水平低于CCK+LPS组(P<0.01)。结论:cAMP-PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的大鼠PIM s细胞内NF-κB活性升高和IκB-α蛋白水平的降低,CCK-8的抗炎作用是通过激活cAMP-PKA信号通路进而抑制NF-κB活性来实现的。 展开更多
关键词 环AMP依赖性蛋白激酶类 胆囊收缩素 巨噬细胞 肺间质 NF-ΚB 脂多糖类
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PKA参与脊髓背角C-纤维诱发电位LTP的诱导和早期维持 被引量:16
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作者 杨红卫 张红梅 +4 位作者 胡晓东 信文君 张彤 周利君 刘先国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期513-517,共5页
目的 :探讨环一磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 (PKA)在脊髓背角C -纤维诱发电位长时程增强 (LTP)的诱导和维持中的作用。方法 :细胞外记录技术在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C -纤维诱发电位。结果 :(1) 8-Br-cAMP诱发脊髓背角C -纤维诱发... 目的 :探讨环一磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 (PKA)在脊髓背角C -纤维诱发电位长时程增强 (LTP)的诱导和维持中的作用。方法 :细胞外记录技术在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C -纤维诱发电位。结果 :(1) 8-Br-cAMP诱发脊髓背角C -纤维诱发电位LTP ,且 8-Br-cAMP -诱导的LTP遮蔽强直刺激诱导的LTP。 (2 )PKA的选择性抑制剂Rp -CPT -cAMPS阻断C -纤维诱发电位LTP的诱导和时间依赖性翻转C -纤维诱发电位LTP。(3)蛋白质合成抑制剂茴香霉素彻底阻断 8-Br -cAMP诱发的LTP。 (4)MAPK选择性抑制剂PD980 5 9阻断 8-Br-cAMP诱发的LTP。结论 :脊髓背角神经元存在PKA信号途径 ,并参与脊髓背角C -纤维诱发LTP的诱导和早期维持。 展开更多
关键词 -磷酸腺苷 环AMP依赖性蛋白激酶类 有丝分裂素激活蛋白激酶类 长时程增强 脊髓背角
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cAMP-PKA信号通路对L02细胞药物代谢酶CYP3A的调控作用 被引量:3
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作者 李敏 张冰 刘小青 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期354-357,共4页
目的探讨cAMP-PKA信号通路对细胞色素P4503A(CYP3A)在正常肝细胞L02表达中的作用。方法 L02细胞中分别加入8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)10μmol.L-1及抑制剂H-89 10μmol.L-1,培养48 h,分别采用完整细胞免疫组化法、Western印迹法和红霉素... 目的探讨cAMP-PKA信号通路对细胞色素P4503A(CYP3A)在正常肝细胞L02表达中的作用。方法 L02细胞中分别加入8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)10μmol.L-1及抑制剂H-89 10μmol.L-1,培养48 h,分别采用完整细胞免疫组化法、Western印迹法和红霉素-N-脱甲基法检测细胞中PKA、孕烷X受体(PXR)及CYP3A的表达。结果与正常对照组PKA蛋白表达(211±20)、PXR蛋白表达(0.45±0.14)及CYP3A的活性〔(0.38±0.02)μmol.min-1.g-1蛋白〕相比,8-Br-cAMP 10μmol.L-1处理后,细胞PKA蛋白表达(296±18)升高、PXR蛋白表达(0.69±0.21)升高、CYP3A的活性〔(0.43±0.01)μmol.min-1.g-1蛋白〕增强;H-89 10μmol.L-1处理后细胞中PKA蛋白表达(176±14)降低,PXR蛋白表达(0.47±0.13)及CYP3A的活性〔(0.39±0.05)μmol.min-1.g-1〕减弱,无统计学差异。结论 cAMP-PKA信号通路可能是药物代谢酶CYP3A的调控途径之一。 展开更多
关键词 环AMP依赖性蛋白激酶类 L02细胞 细胞色素P-450 CYP3A
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颗粒细胞增殖分化中卵泡刺激素的cAMP-PKA通路 被引量:8
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作者 陈悦群 黄荷凤 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2011年第1期65-68,共4页
卵泡刺激素(FSH)是一种重要的女性生殖激素,是由垂体前叶合成和分泌的一种糖蛋白激素。FSH与卵巢颗粒细胞膜上的特异性受体结合发挥生物学效应。卵泡刺激素受体(FSHR)属于G蛋白耦联受体超家族,与FSH结合后激活环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶... 卵泡刺激素(FSH)是一种重要的女性生殖激素,是由垂体前叶合成和分泌的一种糖蛋白激素。FSH与卵巢颗粒细胞膜上的特异性受体结合发挥生物学效应。卵泡刺激素受体(FSHR)属于G蛋白耦联受体超家族,与FSH结合后激活环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路下游区信号级联放大,促进颗粒细胞增殖分化和卵巢性激素的合成。 展开更多
关键词 卵泡刺激素 cAMP-PKA通路 颗粒细胞 环AMP依赖性蛋白激酶类
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IL-2对垂体瘤细胞系RC-4B/C细胞分泌ACTH的影响
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作者 王高峰 卢春蓉 +4 位作者 钟延清 陈健康 周华 胡玉珍 朱运龙 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第6期499-501,共3页
目的 :探讨白细胞介素 2 (IL 2 )对垂体瘤细胞系RC 4B/C细胞ACTH分泌的调控作用及其影响因素 .方法 :以放射免疫方法测定培养的垂体瘤细胞系RC 4B/C细胞的培养液中的ACTH浓度 .结果 :IL 2 (1× 10 4~ 5× 10 5U·L-1)促进R... 目的 :探讨白细胞介素 2 (IL 2 )对垂体瘤细胞系RC 4B/C细胞ACTH分泌的调控作用及其影响因素 .方法 :以放射免疫方法测定培养的垂体瘤细胞系RC 4B/C细胞的培养液中的ACTH浓度 .结果 :IL 2 (1× 10 4~ 5× 10 5U·L-1)促进RC 4B/C细胞分泌ACTH ;蛋白激酶A的抑制剂H 9(1μmol·L-1)和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂tyrphostin2 3 (1μmol·L-1)均可显著性抑制IL 2的促ACTH分泌作用 .结论 :IL 2可促进RC 4B/C细胞分泌ACTH 。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 促肾上腺皮质激素 垂体肿瘤 放射免疫测定 环AMP依赖性蛋白激酶类 蛋白质酪氨酪激酶
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VASP磷酸化对PDGF-BB诱导细胞迁移的影响 被引量:1
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作者 别婧华 欧阳静萍 张德玲 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2006年第6期687-690,715,共5页
目的:探讨血管扩张刺激磷蛋白(VASP)对血小板源性生长因子B(PDGF-BB)诱导的细胞迁移的影响及其机制。方法:通过细胞划痕损伤实验检测ECV304细胞迁移速度,用非放射性酶法检测该细胞中蛋白激酶A(PKA)的活性,用Western blot检测细胞中磷酸... 目的:探讨血管扩张刺激磷蛋白(VASP)对血小板源性生长因子B(PDGF-BB)诱导的细胞迁移的影响及其机制。方法:通过细胞划痕损伤实验检测ECV304细胞迁移速度,用非放射性酶法检测该细胞中蛋白激酶A(PKA)的活性,用Western blot检测细胞中磷酸化VASP(P-VASP)表达的变化。结果:经PDGF-BB作用后,ECV304细胞向划痕内迁移的距离较对照组明显增加(P<0.05),胞内PKA活性明显增加(P<0.05),细胞内磷酸化VASP的表达显著增强(P<0.05);而预先给予PKA抑制剂H89处理能显著地抑制PDGF-BB介导的ECV304的迁移效应(P<0.01),明显降低PDGF引起的胞内PKA活性升高(P<0.01),抑制PDGF-BB对VASP的磷酸化作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB通过PKA信号传导通路,使其下游底物VASP磷酸化,磷酸化的VASP介导细胞移动。 展开更多
关键词 血管扩张刺激磷蛋白 蛋白激酶A 血小板源性生长因子B 细胞迁移 ECV304
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CaMKⅡδ基因沉默对破骨细胞分化功能及c-fos/c-jun/CREB基因的影响 被引量:1
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作者 张誉泓 戚孟春 +1 位作者 董伟 孙红 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期420-425,共6页
目的探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fos、c-jun、CREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7... 目的探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fos、c-jun、CREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7细胞,确定干扰效率。病毒转染细胞后,用50 ng·mL^-1核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,5 d后收获,通过耐酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测、牛骨吸收陷窝检测沉默CaMKⅡδ基因对破骨细胞分化、骨吸收功能的影响;48 h后收获,利用实时聚合酶链式反应(PCR)、Westernblot等方法检测c-fos、c-jun、CREB的表达情况。结果 CaMKⅡδ RNA干扰在mRNA和蛋白质水平的干扰效率分别为70.6%和72.2%。 CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低 c-fos、c-jun和CREB的mRNA水平,下调幅度分别为74%、49%和24%,CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低c-Fos、c-Jun和CREB的水平,下调幅度分别为74.3%、61.3%和59.2%。结论 CaMKⅡδ RNA干扰可在mRNA和蛋白质水平显著抑制c-fos、c-jun、CREB的表达,其共同参与CaMKⅡδ对破骨细胞分化的调控。 展开更多
关键词 破骨细胞 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ C-FOS C-JUN 环腺苷酸反应原件结合蛋白
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Role of β-Adrenergic Signal Transduction Pathway on Myocardial Ischemic Preconditioning of Rats
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作者 兰晓莉 王军 张永学 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2005年第6期709-711,714,共4页
To study the changes in every part of the β-adrenergic signal transduction pathway and their effects on ischemic preconditioning of rat myocardium in vivo. SD rats were divided into three groups: IP group, I/R group... To study the changes in every part of the β-adrenergic signal transduction pathway and their effects on ischemic preconditioning of rat myocardium in vivo. SD rats were divided into three groups: IP group, I/R group and CON group. The IP group was further divided into PC1-, 2-, 3-, and PC1+, 2+, 3+ groups according to preconditioning procedure. The rats received surgical procedure and underwent left coronary artery occlusion and reperfusion. We analyzed the infarct size by TTC staining, measured serum myocardial enzymes, studied the β-AR Bmax and Kd by radioligand binding assay of receptors, checked the activity of AC and PKA by the method of biochemistry and examined the content of cAMP by radioimmunoassay. The infarct area was much smaller in the IP group than in the I/R group (P〈0. 001), while the enzymes were significantly higher in I/R (P〈0. 001). The Bmax of β-AR in IP was much higher than that in I/R (P〈0. 001), but no difference in Kd could be seen between IP and I/R groups. In IP, the activity of AC and PKA and the content of cAMP were higher than those in I/R (P〈0.05, 0. 002 and 0. 001, respectively). In the procedure of preconditioning, the content of cAMP and the activity of PKA showed the characteristic of cyclic fluctuation. Ischemic preconditioning can protect the heart from necrosis and reduce endo-enzyme leakage. The system of β-adrenergic signal transduction pathway probably takes part in the protection effect of the IP, which might be elicited by the PKA . 展开更多
关键词 ischemic preconditioning myocardial receptors adrenergic beta cyclic AMP cyclic AMP-dependent protein kinase RAT
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艾司氯胺酮对发育期大鼠慢性应激后学习记忆功能及海马NMDAR-CaMKⅡ-CREB信号通路的影响
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作者 徐桂萍 张学雪 +1 位作者 王洋 张宇轩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期353-357,共5页
目的评价艾司氯胺酮对发育期大鼠慢性应激后学习记忆功能及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)-钙-钙调素依赖性蛋白激酶2型(CaMKⅡ)-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法清洁级健康SD大鼠60只,雌雄不拘,7日龄,体质量1... 目的评价艾司氯胺酮对发育期大鼠慢性应激后学习记忆功能及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)-钙-钙调素依赖性蛋白激酶2型(CaMKⅡ)-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法清洁级健康SD大鼠60只,雌雄不拘,7日龄,体质量10~15 g,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照+生理盐水组(CN组)、慢性应激+生理盐水组(NS组)和慢性应激+艾司氯胺酮组(ES组)。采用慢性不可预知性应激方法建立慢性应激模型。应激刺激结束后,ES组腹腔注射艾司氯胺酮10 mg/kg,NS组腹腔注射等容量生理盐水,连续7 d,1次/d。腹腔给药结束后,行Y迷宫实验和Morris水迷宫实验测定学习记忆功能;取静脉血样,采用ELISA法检测血清皮质醇和ROS浓度;随后麻醉断头取脑,分离海马组织,观察海马CA1区神经元病理学结果,采用Western blot法确定磷酸化NMDAR(p-NMDAR)/NMDAR、磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)/CaMKⅡ、磷酸化CREB(p-CREB)/CREB表达水平的比值。结果与CN组比较,NS组新臂停留时间缩短,进入新臂次数减少,逃避潜伏期延长,穿越原平台位置次数减少,血清皮质醇和ROS浓度升高,p-NMDAR/NMDAR比值、p-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值和p-CREB/CREB比值降低(P<0.05),神经元发生明显病理学损伤;与NS组比较,ES组新臂停留时间延长,进入新臂次数增多,逃避潜伏期缩短,穿越原平台位置次数增多,血清皮质醇和ROS浓度下降,p-NMDAR/NMDAR比值、p-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值和p-CREB/CREB比值升高(P<0.05),神经元病理学损伤减轻。结论艾司氯胺酮可改善发育期大鼠慢性应激后学习记忆功能,机制可能与降低氧化应激水平,增强海马NMDAR-CaMKⅡ-CREB信号通路活性有关。 展开更多
关键词 认知 受体 N-甲基-D-天冬氨酸 -钙调素依赖性蛋白激酶2型 CAMP反应元件结合蛋白质 慢性应激 艾司氯胺酮
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恩格列净调节AMP依赖蛋白激酶/蛋白激酶B/环磷腺苷效应元件结合蛋白信号通路对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响 被引量:2
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作者 童凯 罗红兰 《临床内科杂志》 CAS 2023年第5期338-342,共5页
目的探讨恩格列净调节AMP依赖蛋白激酶(AMPK)/蛋白激酶B(AKT)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路对肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构的影响。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、PH组、恩格列净低、中、高剂量组、恩格列净+Compound C... 目的探讨恩格列净调节AMP依赖蛋白激酶(AMPK)/蛋白激酶B(AKT)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路对肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构的影响。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、PH组、恩格列净低、中、高剂量组、恩格列净+Compound C组,每组各10只。除对照组外,其余5组大鼠均采用低氧处理构建PH模型。低氧处理前,恩格列净低、中、高剂量组分别以7.5 mg/kg、15.0 mg/kg、30.0 mg/kg恩格列净灌胃,恩格列净+Compound C组以30.0 mg/kg恩格列净灌胃同时腹腔注射10 mg/kg Compound C,PH组和对照组予同体积生理盐水灌胃。6组大鼠均每天灌胃1次,连续4周。检测6组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI);采用HE染色观察肺小动脉组织病理学变化并计算肺小动脉管壁厚度在血管外径中的占比(WT%)、肺小动脉管壁面积在血管总面积中的占比(WA%);采用ELISA检测大鼠血清低氧诱导因子(HIF)-1α及内皮素(ET)-1水平;采用Western blot检测大鼠肺动脉组织AMPK/AKT/CREB信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,PH组大鼠mPAP、RVHI、肺小动脉WT%、WA%及血清HIF-1α、ET-1水平均明显升高,肺动脉组织磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK、磷酸化AKT(p-AKT)/AKT、磷酸化CREB(p-CREB)/CREB表达水平均明显降低;与PH组比较,恩格列净低、中、高剂量组大鼠mPAP、RVHI、肺小动脉WT%、WA%及血清HIF-1α、ET-1水平均依次降低,肺动脉组织p-AMPK/AMPK、p-AKT/AKT、p-CREB/CREB表达水平均依次升高;与恩格列净高剂量组比较,恩格列净+Compound C组大鼠mPAP、RVHI、肺小动脉WT%、WA%及血清HIF-1α、ET-1水平均明显升高,肺动脉组织p-AMPK/AMPK、p-AKT/AKT、p-CREB/CREB表达水平均明显降低(P<0.05)。结论恩格列净能够减轻PH大鼠肺血管重构,可能是通过调节AMPK/AKT/CREB信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 恩格列净 AMP依赖蛋白激酶 蛋白激酶B 环磷腺苷效应元件结合蛋白 肺动脉高压 肺血管重构
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Developmental- and food-dependent foraging transcript levels in the desert locust 被引量:1
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作者 Julie Tobback Heleen Verlinden Kristel Vuerinckx Rut Vleugels Jozef Vanden Broeck Roger Huybrechts 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期679-688,共10页
Drastic changes in the environment during a lifetime require developmental and physiological flexibility to ensure animal survival. Desert locusts, Schistocerca gregaria, live in an extremely changeable environment, w... Drastic changes in the environment during a lifetime require developmental and physiological flexibility to ensure animal survival. Desert locusts, Schistocerca gregaria, live in an extremely changeable environment, which alternates between periods of rainfall and abundant food and periods of drought and starvation. In order to survive, locusts display an extreme form ofphenotypic plasticity that allows them to rapidly cope with these changing conditions by converting from a cryptic solitarious phase to a swarming, voracious gregarious phase. To accomplish this, locusts possess different conserved mediators of phenotypic plasticity. Recently, attention has been drawn to the possible roles of protein kinases in this process. In addition to cyclic AMP-dependent protein kinase (PKA), also cyclic GMP-dependent protein kinase (PKG), which was shown to be involved in changes of food-related behavior in a variety of insects, has been associated with locust phenotypic plasticity. In this article, we study the transcript levels of the S. gregaria orthologue of the foraging gene that encodes a PKG in different food-related, developmental and crowding conditions. Transcript levels of the S. gregariaforaging orthologue are highest in different parts of the gut and differ between isolated and crowd-reared locusts. They change when the availability of food is altered, display a distinct pattern with higher levels after a moult and decrease with age during postembryonic development. 展开更多
关键词 cyclic GMP-dependent protein kinase FEEDING neuronal plasticity nutri- tional state Schistocerca gregaria
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NO/cGMP信号通路在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用 被引量:8
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作者 胡军 张野 +2 位作者 陆姚 蒋玲玲 何淑芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期829-833,共5页
目的探讨NO/cGMP信号通路在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用。方法大鼠建立鞘内置管的模型。随机分为9组,每组6只:SHAM组(假手术组)、CON组(对照组,生理盐水)、ITMP组(鞘内吗啡预处理,3μg·kg-1)、L-NAME+ITMP... 目的探讨NO/cGMP信号通路在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用。方法大鼠建立鞘内置管的模型。随机分为9组,每组6只:SHAM组(假手术组)、CON组(对照组,生理盐水)、ITMP组(鞘内吗啡预处理,3μg·kg-1)、L-NAME+ITMP组(一氧化氮合酶阻断剂+鞘内吗啡预处理)、ODQ+ITMP组(鸟苷酸环化酶阻断剂+鞘内吗啡预处理)、KT5823+ITMP组(蛋白激酶G阻断剂+鞘内吗啡预处理)、L-NAME组、ODQ组、KT5823组。ITMP组于心脏缺血前,鞘内注射吗啡10μl 5 min,间断5 min,重复3次;CON组以相同的方式注射生理盐水;L-NAME+ITMP组、ODQ+ITMP组、KT5823+ITMP组分别于吗啡预处理前10 min鞘内注射L-NAME(30 nmol,10μl)、ODQ(11nmol,10μl)、KT5823(20 pmol,10μl);L-NAME组、ODQ组、KT5823组为阻断剂自身对照组。除SHAM组行假手术操作不做其他处理,其余各组大鼠均行左冠状动脉缺血30 min,再灌注120 min诱导心肌缺血/再灌注损伤。观察指标包括:血流动力学指标;心肌缺血危险区(AAR)、梗死区(IS)的体积、心肌梗死面积以IS/AAR表示。结果与CON组相比,ITMP组的IS和IS/AAR均明显下降(P<0.01);与ITMP组比较,L-NAME+ITMP组、ODQ+ITMP组、KT5823+ITMP组的IS和IS/AAR均升高(P<0.01)。与SHAM组比较各组MAP和RPP在缺血30 min降低(P<0.05),与基础值比较,除SHAM组外,其余各组MAP和RPP在缺血30 min降低(P<0.05)。结论 NO/cGMP的信号通路可能参与介导鞘内吗啡预处理,对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。 展开更多
关键词 吗啡 鞘内注射 缺血 再灌注损伤 阿片样受体 一氧化氮 环GMP 环GMP依赖性蛋白激酶类
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一氧化氮抑制AngⅡ介导的心肌肥大反应的信号机制 被引量:13
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作者 刘培庆 鲁伟 潘敬运 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期213-218,共6页
本文主要利用培养的新生大鼠心肌细胞 ,从细胞学及分子生物学角度研究一氧化氮 (NO)信号系统在AngⅡ介导的心肌肥大反应中的作用及机制。实验以心肌细胞蛋白合成速率、心房钠尿肽 (ANP)的表达作为心肌肥大反应的指标 ,以硝酸盐及亚硝酸... 本文主要利用培养的新生大鼠心肌细胞 ,从细胞学及分子生物学角度研究一氧化氮 (NO)信号系统在AngⅡ介导的心肌肥大反应中的作用及机制。实验以心肌细胞蛋白合成速率、心房钠尿肽 (ANP)的表达作为心肌肥大反应的指标 ,以硝酸盐及亚硝酸盐含量反映心肌细胞NO水平 ,以免疫印迹法测定MKP 1蛋白表达 ,以RT PCR测定eNOSmRNA水平。结果发现 :(1)L 精氨酸 (L Arg) 10、10 0 μmol/L分别增加心肌细胞NO水平 16 %及 31%,L Arg (10 0 μmol/L)还可增加心肌细胞eNOSmRNA表达 ,其作用可被NOS抑制剂 L NAME所抑制 ;(2 )L Arg (10 0 μmol/L)可降低AngⅡ (0 1μmol/L)诱导的心肌细胞ANPmRNA表达水平和蛋白合成速率 ,而在L Arg处理之前用针对MKP 1的反义寡核苷酸转染心肌细胞 ,蛋白合成速率明显增加 ,可取消L Arg的抑制作用 ,甚至超过AngⅡ组 ;(3)L Arg (10 0 μmol/L)明显增加MKP 1蛋白表达 ,比对照组增加 2 2 5 %,NOS抑制剂L NAME及蛋白激酶G(PKG)抑制剂KT 5 82 3皆可抑制L Arg诱导的MKP 1蛋白表达 ,分别抑制 88%、83%,而AngⅡ能增加L Arg诱导的MKP 1的表达 ,较对照组增加 36 5 %,增强了L Arg的作用。以上结果表明 ,NO抑制AngⅡ介导心肌肥大反应的机制可能是通过激活PKG ,促进MKP 1的表达 。 展开更多
关键词 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 蛋白激酶K 心肌细胞 肥大反应 血管紧张素Ⅱ 一氧化氮 精氨酸
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高脂饮食对大鼠肝脏组织AMPK表达及其活性的影响 被引量:11
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作者 丁晓洁 王佑民 王丽萍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第6期680-683,共4页
目的研究不同饮食模式对大鼠肝脏组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达及其活性的影响。方法28只雄性SD大鼠适应性喂养1周后随机分为2组:普通对照组(NC组,n=15),高脂饮食组(HF组,n=13)。NC组给予普通饲料,HF组给予高脂饲料。16周后分别测... 目的研究不同饮食模式对大鼠肝脏组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达及其活性的影响。方法28只雄性SD大鼠适应性喂养1周后随机分为2组:普通对照组(NC组,n=15),高脂饮食组(HF组,n=13)。NC组给予普通饲料,HF组给予高脂饲料。16周后分别测定体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标。采用Western blot方法检测两组大鼠肝脏组织中AMPKα和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α亚基(p-AMPKα)蛋白的水平。结果与NC组相比,HF组大鼠的体重、FFA、TG、FPG、FINS增高(均P<0.05)。两组肝脏组织中AMPKα的蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但HF组肝脏组织中p-AMPKα的蛋白表达水平及AMPK活性降低(均P<0.05)。结论长期高脂饮食减少肝脏组织AMPKα蛋白的磷酸化和AMPK的活性。 展开更多
关键词 环AMP依赖性蛋白激酶类 肥胖症 胰岛素抗药性
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Wnt5a,Frizzled2及cGMP依赖性蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中的表达 被引量:4
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作者 李政霄 涂晨 +3 位作者 张燕飞 肖生祥 王娟 郑焱 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期654-656,669,共4页
目的通过检测寻常性银屑病皮损及正常皮肤中Wnt5a,Frizzled2及cGMP依赖性蛋白激酶的表达,探讨寻常性银屑病新的发病机制。方法用免疫组织化学的方法检测寻常性银屑病及正常组织中Wnt5a,Frizzled2及cGMP依赖性蛋白激酶的表达。结果 Wnt5a... 目的通过检测寻常性银屑病皮损及正常皮肤中Wnt5a,Frizzled2及cGMP依赖性蛋白激酶的表达,探讨寻常性银屑病新的发病机制。方法用免疫组织化学的方法检测寻常性银屑病及正常组织中Wnt5a,Frizzled2及cGMP依赖性蛋白激酶的表达。结果 Wnt5a及Frizzled2在寻常性银屑病皮损中表达量增加,与正常组织相比差异有统计学意义(P<0.05);而cGMP依赖性蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中表达降低,与正常组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。cGMP依赖性蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中与Wnt5a,Frizzled2的异常表达呈负相关(P<0.05)。结论 Wnt5a及其相关受体Frizzled2参与了银屑病的发病,其下游因子cGMP依赖性蛋白激酶表达被抑制可能是引起角质形成细胞的异常增殖与凋亡,导致银屑病形成的原因。 展开更多
关键词 WNT5A Frizzled2 cGMP依赖性蛋白激酶 免疫组织化学 寻常性银屑病
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肥胖大鼠骨骼肌AMPK表达及其与糖脂代谢的关系 被引量:10
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作者 程媛 王佑民 丁晓洁 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第2期180-183,共4页
目的探讨肥胖大鼠骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达及其对糖脂代谢的影响。方法将28只6周龄雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组,15只)和高脂饮食组(HF组,13只),分别测体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(T... 目的探讨肥胖大鼠骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达及其对糖脂代谢的影响。方法将28只6周龄雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组,15只)和高脂饮食组(HF组,13只),分别测体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标。采用免疫印迹法测定各组大鼠骨骼肌中AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)的水平。以p-AMPK/AMPK代表AMPK的活性。结果与NC组大鼠相比,HF组大鼠的BW、FFA、TG、FPG、FINS均明显升高(P<0.05),骨骼肌中AMPK表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05),p-AMPK表达及AMPK活性(p-AMPK/AMPK)降低显著(均P<0.05)。骨骼肌组织p-AMPK表达水平与FPG、FFA呈负相关(P<0.05),AMPK活性与FPG、FFA、TG呈负相关(P<0.05),与FINS无相关性。结论高脂饮食诱导大鼠营养性肥胖,降低AMPK的活性,从而导致TG和TCH的合成增加,血糖升高,脂质在外周组织沉积增加。 展开更多
关键词 环AMP依赖性蛋白激酶类 肥胖症
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舍曲林对肠易激综合征大鼠cAMP/PKA通路及肠道炎症反应的影响 被引量:5
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作者 范红云 段志英 +6 位作者 赵亚男 杨春春 杨明月 张梅 霍晓辉 白云 王竞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期525-530,共6页
目的:探讨舍曲林对肠易激综合征(IBS)大鼠环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A(PKA)通路及肠道炎症反应的影响。方法:采用母婴分离加醋酸灌肠联合结直肠扩张刺激法制备IBS大鼠模型,并将造模成功大鼠随机分为模型组、舍曲林低(10... 目的:探讨舍曲林对肠易激综合征(IBS)大鼠环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A(PKA)通路及肠道炎症反应的影响。方法:采用母婴分离加醋酸灌肠联合结直肠扩张刺激法制备IBS大鼠模型,并将造模成功大鼠随机分为模型组、舍曲林低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组和阳性对照组(匹维溴铵,2 mg/kg),每组15只,另取15只正常大鼠作为对照组,大鼠发育至9周龄时开始灌胃给药,对照组和模型组给予等体积生理盐水,其他各组给予相应药物,2次/d,连续10 d,10 ml/kg。末次给药结束后,观察记录各组大鼠一般情况、粪便含水量和排便时间;腹部撤回反射(AWF)评分法检测大鼠内脏敏感性;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理学变化;ELISA检测各组大鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和cAMP含量;Western blot检测各组大鼠结肠组织cAMP和PKA蛋白表达及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平。结果:对照组大鼠精神状态良好,发育正常,皮毛光亮,结肠组织肠黏膜屏障结构完整,无炎症因子浸润。与对照组相比,模型组大鼠状态较差,情绪烦躁易怒,活动较少,结肠组织出现明显水肿,肠黏膜完整性受损,出现大量炎症细胞浸润,排便时间、cAMP含量、cAMP、PKA蛋白表达及CREB磷酸化水平显著降低(P<0.05),粪便含水量、内脏敏感性、TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著升高(P<0.05);与模型组相比,舍曲林低、中、高剂量组大鼠不良症状逐渐缓解,排便时间、cAMP含量、cAMP、PKA蛋白表达及CREB磷酸化水平依次升高(P<0.05),粪便含水量、内脏敏感性、TNF-α、IL-1β和IL-6含量依次降低(P<0.05);舍曲林高剂量组与阳性对照组各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舍曲林可剂量依赖性改善IBS大鼠肠道炎症反应,可能与上调cAMP/PKA通路有关。 展开更多
关键词 舍曲林 肠易激综合征 环磷酸腺苷/环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A 肠道炎症反应
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磷酸化细胞周期素依赖性激酶在局灶性脑缺血大鼠神经细胞中的表达 被引量:1
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作者 解翠红 王伟 +1 位作者 喻志源 杜晓萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期588-590,594,共4页
目的:观察磷酸化细胞周期素依赖激酶在大鼠局灶性脑缺血后神经元和星形胶质细胞的表达。方法:采用大脑中动脉阻塞(MCAO)方法制作大鼠局灶性脑缺血模型,应用免疫荧光技术检测缺血后1d、3d、7d、14d大鼠缺血侧病灶周围神经元和星形胶质细... 目的:观察磷酸化细胞周期素依赖激酶在大鼠局灶性脑缺血后神经元和星形胶质细胞的表达。方法:采用大脑中动脉阻塞(MCAO)方法制作大鼠局灶性脑缺血模型,应用免疫荧光技术检测缺血后1d、3d、7d、14d大鼠缺血侧病灶周围神经元和星形胶质细胞中磷酸化周期素依赖激酶2(CDK2)、磷酸化细胞分裂周期激酶2(CDC2)的表达。结果:在神经元中,与正常对照组相比,缺血后1d、3d组磷酸化CDK2的表达量明显增加(P<0.05),磷酸化CDC2在正常组及缺血组均无明显表达;在星形胶质细胞中,缺血后1d、3d、7d均出现明显的磷酸化CDK2、CDC2的表达,与对照组相比有显著差异(P<0.05)。结论:大鼠局灶性脑缺血后早期部分神经元再次进入细胞周期,细胞周期调控机制可能参与了大鼠局灶性脑缺血后神经元的凋亡及星形胶质细胞的分裂增殖。 展开更多
关键词 脑缺血 细胞周期蛋白质依赖激酶类 神经元 星形细胞
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阿司匹林联合氟西汀对CUMS抑郁模型大鼠行为学及海马PKA表达的影响 被引量:2
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作者 周冉 徐维平 +1 位作者 王伟迪 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第1期40-43,共4页
目的通过观察阿司匹林联合氟西汀对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠行为学及海马蛋白激酶A(PKA)表达的影响,探讨阿司匹林联合氟西汀的抗抑郁效果。方法 56只SD大鼠,随机分为7组:正常组(A组)、模型组(B组)、大剂量氟西汀联合阿司匹林... 目的通过观察阿司匹林联合氟西汀对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠行为学及海马蛋白激酶A(PKA)表达的影响,探讨阿司匹林联合氟西汀的抗抑郁效果。方法 56只SD大鼠,随机分为7组:正常组(A组)、模型组(B组)、大剂量氟西汀联合阿司匹林用药组(C组)、大剂量氟西汀组(D组)、小剂量氟西汀联合阿司匹林用药组(E组)、小剂量氟西汀组(F组)、阿司匹林组(G组)。采用不同应激因子交替持续应激21d,复制大鼠CUMS抑郁模型,观察大鼠行为学和学习记忆能力的变化,用免疫组化法测定海马PKA的表达。结果 C组较之D组,体重增长值及海马PKA表达均增加,学习记忆能力增强;减少氟西汀剂量,联合阿司匹林用药,其抗抑郁效果与大剂量氟西汀相当,体重增长值及糖水摄入量差异均无统计学意义。结论阿司匹林与氟西汀联合应用,减少了氟西汀的毒副反应,抑制了抑郁症中的炎症反应,具有较好的抗抑郁效应。 展开更多
关键词 抑郁症/药物疗法 阿司匹林/治疗应用 氟西汀/治疗应用 环AMP依赖性蛋白激酶类
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钙调神经磷酸酶对血管平滑肌细胞增殖中蛋白激酶G表达的影响 被引量:1
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作者 马旃 孙宁玲 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期595-598,共4页
目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中蛋白激酶G(PKG Iα)表达的影响。方法对大鼠VSMCs培养并行细胞鉴定,分为对照组、低浓度环孢菌素A(CsA,0.5mg/L)干预组、高浓度CsA(5mg/L)干预组以及苯肾上腺素(PE)刺激组(5mg/... 目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中蛋白激酶G(PKG Iα)表达的影响。方法对大鼠VSMCs培养并行细胞鉴定,分为对照组、低浓度环孢菌素A(CsA,0.5mg/L)干预组、高浓度CsA(5mg/L)干预组以及苯肾上腺素(PE)刺激组(5mg/L CsA+10μmol/L PE)。其中CsA为CaN特异性抑制剂,PE为已知的CaN激活剂,能够刺激细胞增殖。应用RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot法定性及定量测定VSMCs增殖中PKG IαmRNA以及蛋白的表达水平。结果0.5mg/L CsA组PKG IαmRNA以及蛋白的表达水平与对照组相比差异无统计学意义,而5mg/L CsA组PKG IαmRNA及蛋白的表达明显高于对照组,5mg/L CsA+10μmol/L PE组中PKG IαmRNA的表达比5mg/L CsA组减少了32.2%,蛋白的表达减少了36.7%,但仍明显高于对照组。结论CaN能够调节培养VSMCs中PKG Iα的表达,增殖细胞用CaN特异性抑制剂CsA灭活CaN后,PKG Iα的表达明显增加,给予PE再次激活CaN后,PKG Iα的表达明显减少。 展开更多
关键词 钙神经素 环GMP依赖性蛋白激酶类 平滑 血管
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