电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs相关HCN亚型及钙离子震荡特性的影响

目的观察电针对逼尿肌过度活动(detrusor overactivity,DO)大鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channels,HCN)相关亚型表达水平及细胞内钙离子震荡特性的影响。方法40只Wistar雌性大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和药物组,每组10只。除对照组外,其余大鼠均采用环磷酰胺腹腔注射制备DO模型,电针组在模型基础上给予电针次髎和会阳,每日1次,每次20 min,连续3 d;药物组予甲磺酸伊马替尼灌胃,每日1次,连续3 d。对照组、模型组和药物组大鼠同电针组予以对照捆绑固定20 min,对照、模型和电针组同药物组予以同等体质量计量的饮用水灌胃处理,均每日1次,连续3 d。采用Western Blot和RT-PCR检测HCN1-44种亚型的表达,运用钙离子成像技术检测电针对ICCs内钙离子震荡特性的影响。结果与对照组比较,模型组大鼠膀胱ICCs相关HCN1和HCN2的蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和药物组HCN1和HCN2的蛋白和mRNA表达均降低(P<0.05);4组HCN3、HCN4比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠膀胱ICCs内钙离子震荡幅度、频率和宽度明显升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和药物组膀胱ICCs内钙离子震荡频率和幅度均下降(P<0.05),而钙离子震荡宽度无明显变化(P>0.05)。结论电针可能通过抑制DO大鼠膀胱ICCs起搏通道相关HCN1和HCN2的表达,及降低ICCs内钙离子震荡的幅度和频率,达到调控DO的作用。

肠润方对功能性便秘大鼠结肠运动调控的机制研究

目的:探讨中药复方肠润方影响功能性便秘大鼠结肠运动的作用机制。方法:选取健康SD大鼠72只,随机分为空白组、模型组、麻仁丸组、肠润方高剂量组、肠润方中剂量组、肠润方低剂量组,每组12只。除空白组外,其余各组均采用复方地芬诺脂灌胃建立功能性便秘大鼠肠动力障碍模型。采用多导生理记录仪检测肠润方水提液对大鼠离体结肠张力、收缩波振幅的影响;通过Western-Blot检测大鼠结肠酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(Tyrosine Kinase Growth Factor Receptor,C-Kit)、干细胞因子(Stem Cell Factor,SCF)、超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道1(Hyperpolarization-activated Cyclic nucleotide-gated Cation Channel 1,HCN1)、超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道2(Hyperpolarization-activated Cyclic nucleotide-gated Cation Channel 2,HCN2)的蛋白表达水平;通过RT-PCR实验检测大鼠结肠C-Kit、SCF、HCN1、HCN2的mRNA表达水平。结果:①离体肠管运动实验结果显示,不同浓度肠润方水提液均可改善地芬诺酯所致的大鼠离体结肠张力的下降,同时提高收缩波振幅;②与空白组比较,模型组C-Kit、SCF、HCN1、HCN2在结肠的蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01)。肠润方高剂量组和肠润方中剂量组可显著升高C-Kit、SCF、HCN1、HCN2的蛋白表达及mRNA表达(P<0.01)。结论:肠润方能够显著改善功能性便秘临床症状,其作用机制可能与上调C-Kit、SCF以及HCN通道表达水平,维持Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)胃肠慢波起搏与传导功能,加强结肠平滑肌收缩,促进结肠运动有关。

超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4在大鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞中的表达

目的:探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)在大鼠体内和体外心肌成纤维细胞、心肌细胞中的表达分布及其增龄变化。方法:SD大鼠分为新生组(1~3 d),成年组(17个月)和老年组(22个月),每组8只,其中4只用于冰冻切片,另4只用于PCR;取新生SD大鼠心,酶消化法分离培养原代心肌成纤维细胞和原代心肌细胞。用免疫荧光、免疫组织化学检测原代心肌成纤维细胞和原代心肌细胞HCN4的表达;免疫印迹、实时荧光定量PCR检测原代心肌成纤维细胞HCN4的表达,用实时荧光定量PCR检测不同月龄大鼠心肌组织HCN4的表达。结果:体外细胞培养显示,成纤维细胞和原代心肌细胞中均表达HCN4。组织切片显示,新生、成年和老年大鼠心肌成纤维细胞和部分心肌细胞表达HCN4。P1~P4代成纤维细胞的免疫印迹和实时荧光定量PCR结果显示HCN4随着成纤维细胞代次增加,表达量逐渐降低;不同月龄大鼠左心室的实时荧光定量PCR结果显示随着大鼠月龄增加,HCN4的表达量逐渐降低,其结果与培养的细胞表达一致。结论:HCN4在心肌成纤维细胞和部分心肌细胞中表达。随增龄变化,心肌细胞和成纤维细胞HCN4的表达量逐渐下降。

XIRP2和HCN4在心肌脂肪浸润致猝死者心脏传导系统表达研究

目的:研究心肌脂肪浸润致猝死的法医病理学特征及传导组织中含心肌动蛋白重复序列蛋白2(XIRP2)和超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)蛋白含量表达变化情况,探讨XIRP2和HCN4蛋白作为心肌脂肪浸润致猝死的潜在分子标记物的可能性。方法:收集某司法鉴定中心2015~2022年死因为心肌脂肪浸润致猝死者8例为猝死组,选取死因为外伤致死者10例为对照组进行统计、归纳和分析。通过大体检查、HE染色和Masson三色染色观察组织病理学改变,免疫组织化学染色(IHC)观察XIRP2和HCN4蛋白表达情况。结果:组织病理学检查示心肌脂肪浸润主要侵犯右心室、窦房结、房室结;IHC结果示猝死组较对照组的XIRP2和HCN4蛋白在窦房结、房室结表达升高,在左右束支表达降低(P<0.05)。心肌脂肪浸润猝死者窦房结和房室结XIRP2和HCN4蛋白表达水平高于左右束支(P<0.05),表达趋势与对照组相反。心肌脂肪浸润猝死者HCN4、XIRP2蛋白表达在窦房结与房室结之间差异有统计学意义。传导系统XIRP2与HCN4蛋白表达相关(P<0.05)。结论:心肌脂肪浸润主要表现为右心室合并窦房结、房室结内大量脂肪浸润,可能通过影响传导系统离子通道蛋白表达致心律失常引起猝死,XIRP2和HCN4蛋白在传导系统的表达差异可为该类案件的法医学鉴定提供参考。

大鼠不稳定膀胱中ICCs细胞中HCN蛋白表达的变化

目的研究HCN离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel,HCN)蛋白在膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)中的表达及在不稳定膀胱ICCs细胞中表达的变化,探讨ICCs细胞兴奋性变化与逼尿肌不稳定(detrusor instability,DI)的关系。方法①将30只大鼠随机分为正常对照(10例),逼尿肌稳定组(DS,n=12),逼尿肌不稳定组(DI,n=8):大鼠尿道近端结扎,建立膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)模型。②对各组进行HCN和c-kit免疫荧光双标,确定HCN蛋白是否在ICCs细胞上存在及HCN表达的变化。③以Western blot法检测HCN蛋白表达量的变化。结果①免疫荧光双标显示,在c-kit阳性的ICCs细胞膜上,有HCN抗原的表达,c-kit阴性细胞未见HCN表达;与正常组相比,DI组、DS组HCN蛋白表达增加。②Western blot检测显示,与正常组相比,DI组、DS组的HCN表达增高,DI组增高显著(P<0.01)。结论大鼠膀胱ICCs细胞可表达HCN通道蛋白,且DI膀胱ICCs细胞HCN通道明显增多,由此导致的ICCs细胞兴奋性增高可能在DI发生中起重要作用。

心功能不同的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4的表达水平研究

目的：探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（HCN4）基因在风湿性心脏瓣膜病心房颤动伴心力衰竭患者与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者心房肌中的表达水平。方法选取2008—2011年新疆医科大学第一附属医院因心脏瓣膜病需接受开胸换瓣手术患者45例，根据其心功能分级，将美国纽约心脏病协会（ NYHA）分级为Ⅱ~Ⅲ级者27例作为试验组，将心功能正常者18例作为对照组。采用实时荧光定量PCR（ Real-time PCR）和蛋白质免疫印迹法（ Western-blotting）分别测定两组患者HCN4 mRNA及蛋白表达水平。结果对照组HCN4 mRNA表达水平为（1.12±0.69），低于试验组的（4.91±1.51）（t =0.021，P 〈0.05）。对照组 HCN4蛋白表达水平为（1.02±0.15），低于试验组的（2.01±0.92）（t=0.031，P〈0.001）。结论 HCN4在心力衰竭与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者的心房肌中均有表达，且随着心功能不全的加重，HCN4表达水平上调。

蛛网膜下腔注射ZD7288对神经病理痛大鼠机械性痛敏的影响

目的:观察蛛网膜下腔注射(i.t.)ZD7288对模型大鼠痛行为的影响。方法:采用L5/L6脊神经紧结扎的方法制备大鼠神经病理痛模型,通过蛛网膜下腔插管给药。结果:ZD7288 30 g明显升高50%缩足阈值(P<0.05),表现出明显的镇痛作用,而更低剂量的15μg和7.5μg的镇痛效果不明显。在神经损伤后的5 d和14 d给予ZD7288,其镇痛效果明显好于损伤后第28 d给药(P<0.05)。这三个剂量的ZD7288并不影响大鼠的运动功能。结论:ZD7288对脊神经结扎大鼠的机械性痛敏有缓解作用,这种作用在结扎后早期比晚期更强。从行为药理学的角度证明脊髓背角超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)可能参与了神经病理痛的形成。

ZD7288抑制大鼠穿通纤维—海马CA3区通路的突触传递(英文)

目的观察HCN通道特异性阻滞剂ZD7288对大鼠海马CA3区突触传递的影响。方法应用在体电生理细胞外记录技术记录大鼠海马CA3区场电位,用HPLC荧光检测技术测定海马组织氨基酸含量,观察CA3区局部微量给予ZD7288和CsCl后对低频(0·5 Hz)刺激穿通通路(perforant pathway,PP)诱发的海马CA3区群峰电位(population spike,PS)幅度及海马组织氨基酸含量的影响。结果海马CA3区分别注射ZD7288(20,100和200nmol)和CsCl(1,5和10μmol)可引起PS幅度剂量依赖性下降;药物效应于给药后5 min开始,作用维持时间90 min以上。给予ZD7288(100 nmol)大鼠海马组织谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量显著降低,与生理盐水对照组比较,差异有显著性意义(P<0·01或P<0·05)。结论 ZD7288可显著抑制大鼠穿通纤维—海马CA3区突触传递,并可降低海马组织氨基酸含量。

急性疼痛早期治疗的必要性

神经病理痛是指由中枢或外周神经系统损伤或疾病引起的疼痛综合征。近年来的研究证明,外周神经损伤后早期的异位放电不仅是早期急性痛的重要原因,而且这些异位放电不断轰击脊髓背角等中枢部位,诱发中枢敏化,成为神经病理痛后期维持的重要机制。早期阻断异位放电,可以阻断神经病理痛急性期向慢性期的转变,有效阻止神经病理痛的发生。因此,临床医生应尽早治疗神经损伤后的急性痛,越早治疗,病人越早康复,无需忍受慢性神经病理痛的折磨。

起搏通道基因亚型HCN4重组腺病毒载体的构建及通道电流检测

目的旨在构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4(HCN4)重组腺病毒载体并鉴定其离子通道功能。方法全长人HCN4基因酶切后亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,形成含目的基因和绿色荧光蛋白基因的穿梭载体。穿梭载体和病毒骨架载体pAdEasy-1经电穿孔法在BJ5183大肠杆菌中同源重组,重组后的腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化后,利用脂质体介导转染到HEK293细胞进行病毒的包装和扩增。用多聚酶链反应(PCR)方法对病毒上清中的HCN4进行检测,并将重组腺病毒感染COS-7细胞,用免疫荧光染色检测HCN4蛋白质的表达,利用全细胞膜片钳方法测定转HCN4基因细胞的电生理功能。结果通过酶切、测序、PCR等证实HCN4通道基因重组腺病毒载体构建正确,免疫荧光检测证实转染AdHCN4的COS-7细胞中HCN4通道基因的表达,膜片钳实验也在转基因细胞中检测到超极化激活的非选择性内向阳离子电流(If)。结论HCN4通道基因重组腺病毒载体的构建成功为进一步研究该离子通道的电生理功能及在心律失常疾病基因治疗方面的潜在应用价值奠定了基础。

HCN2在胃的分布及与递质共存的关系

目的研究超极化激活的环化核苷酸门控通道亚型2(HCN2)在胃中存在的状况以及与神经递质的共存情况,为探讨胃肠动力的调节提供理论依据。方法采用免疫荧光组织化学双标记的方法,在大鼠胃中对PGP9.5与HCN2进行双标记、对HCN2分别与SP、CGRP以及VIP进行双标记。结果HCN2是以串珠样结构分布于胃黏膜间神经纤维末梢。HCN2与SP、CGRP和VIP在胃黏膜和平滑肌间隙中存在双标记。结论发现HCN2在胃黏膜和平滑肌间隙中存在,并与神经递质共存,提示HCN2可能在胃肠道的动力调节方面起着较为重要的作用。

Mink相关肽1对超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道4电生理特性的调节

目的:评价Mink相关肽1(KCNE2或MiRP1)对异源转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上的超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道(HCN)4电生理特性的影响。方法:将成功转染HCN4的CHO细胞(n=12)及共转染HCN4+KCNE2的CHO细胞(n=13),即将KCNE2质粒脱氧核糖核酸(DNA)单独转染或和HCN4质粒DNA共转染CHO-K1细胞,用标准微电极全细胞膜片钳记录细胞膜上的HCN4电流。结果:KCNE2对HCN4电流大小的影响:无论是在单独转染HCN4,还是HCN4和KCNE2共转染的CHO细胞中,均能检测到电流的表达。HCN4和KCNE2共转染的细胞中所检测到的电流密度,显著大于单独的HCN4转染细胞中的电流密度,差异有统计学意义(P<0.01)。KCNE2对HCN4激活动力学的影响:KCNE2和HCN4共转染后,其代表通道激活动力学的指标:激活时间常数(Tau)较单独转染HCN4时明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。KCNE2对HCN4激活的电压依赖性的影响:从稳态激活曲线中发现,无论是通道激活50时的脉冲电压(V1/2)还是倾斜因子(S),在HCN4与HCN4+KCNE2两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:KCNE2对HCN4通道有明显的调控作用。

HCN1在胃肠道的分布及特点

目的研究超极化激活的环化核苷酸门控通道亚型1(HCN1)在胃肠道中的分布状况及特点。方法采用免疫荧光双标记技术的方法,在大鼠食管、胃肠中对HCN1与c-kit进行免疫荧光双标记。结果 HCN1在食管、胃以及空回肠的ICC-MY、ICC-SM广泛分布,以胃底体交界处分布最为密集,后依次为食管、十二指肠、回盲部、空肠、回肠。结论 HCN1存在于胃肠道ICC细胞上,在胃肠道上呈不均匀分布。

起搏通道HCN2基因稳定转染HEK293细胞的电生理特点

目的了解超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型HCN2(hHCN2)稳定转染人胚肾细胞(HEK293)的离子通道电生理特点。方法采用全细胞膜片钳技术测定hHCN2稳定转染HEK293细胞的通道电流(IhHCN2)电生理特点。结果人全长起搏通道HCN2(hHCN2)基因稳定转染HEK293,记录到一系列超极化内向离子流,该电流激活缓慢,呈电压、时间依赖性,没有明显失活过程,激活电位、半最大激活电位分别为-87±8mV(P>0.05)、-98±2mV(n=20),激活时间常数为196±36ms。起搏电流阻断剂ZD7288和Cs+灌流,IhHCN2峰值幅度均降低,半效抑制浓度分别为23.9±5.9μmol/L、126.8±27.1μmol/L,ZD7288的作用冲洗后抑制作用不能恢复,Cs+的作用在冲洗后基本恢复。结论稳定转染HEK293细胞的克隆起搏通道hHCN基因具有起搏电流的特点。

采用荧光定量RT-PCR法检测超极化激活环核苷酸门控阳离子通道

目的建立用SYBR Green荧光染料检测超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)的实时定量RT-PCR方法。方法提取窦房结细胞的总RNA,反转录成cDNA后,应用RT-PCR法检测HCN4的表达,通过琼脂糖凝胶回收PCR产物并构建重组质粒,用梯度稀释的质粒模板建立荧光定量RT-PCR法检测HCN4的标准曲线,并检测心脏组织中HCN4的表达水平。结果成功构建了质粒重组子,并建立用SYBR Green荧光染料在RNA水平检测HCN4通道的标准曲线,相关系数为0.997重复6次实验组内和组间变异系数均<1.0%。心脏组织中窦房结HCN4表达量最高,心室表达量最低。结论基于SYBR Green荧光染料建立的定量RT-PCR体系敏感性高,线性范围广,重复性好,可快速准确地检测HCN4的表达。

参仙升脉口服液对病态窦房结综合征小鼠ROS表达的影响和对HCN4离子通道的调控作用

目的:探讨参仙升脉口服液对病态窦房结综合征(SSS)小鼠窦房结线粒体活性氧(ROS)释放的影响及其对环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4(HCN4)离子通道的调控作用,探讨参仙升脉口服液改善SSS的作用机制。方法:30只C57B6小鼠随机分为假手术组、SSS组和参仙升脉口服液治疗组(SXSM组),每组10只。通过Alzet渗透压泵泵入血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)建立SSS小鼠模型,SXSM组小鼠给予0.2 mL·d-1参仙升脉口服液灌胃,持续28 d。观察各组小鼠心电图并分析心率,HE和Masson染色观察各组小鼠窦房结组织病理形态表现,免疫荧光法检测各组小鼠窦房结组织中ROS和HCN4水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠窦房结组织中电压门控Na+通道α亚单位SCN5A、L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNα1C)蛋白和电压依赖性钙通道α1G亚基蛋白(CACNα1G)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠窦房结组织中SCN5A、CACNα1C、CACNα1G和HCN4蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,SSS组小鼠心率明显降低(P<0.05),窦房结组织中细胞出现溶解坏死,未见细胞核,结缔纤维组织大量增生,窦房结组织中ROS水平升高(P<0.05),HCN4水平降低(P<0.05),SCN5A mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),CACNα1C和CACNα1G mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),HCN4蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与SSS组比较,SXSM组小鼠心率明显升高(P<0.05),窦房结组织中结缔纤维组织少量增生,细胞部分坏死溶解,ROS水平降低(P<0.05),HCN4水平升高(P<0.05),SCN5A mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),CACNα1C和CACNα1G mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),HCN4蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:参仙升脉口服液能够提高心率,抑制SSS小鼠窦房结组织中ROS的释放,抑制窦房结纤维化,其机制与调控HCN4离子通道有关。

流式细胞术检测风湿性心脏病合并心房颤动患者HCN2蛋白的表达

目的对风湿性心脏病合并心房颤动患者右心耳组织超级化激活环核苷酸门控阳离子通道-2(HCN2)蛋白的表达进行分析和研究。方法风湿性心脏病患者84例分为研究组(心房颤动)和对照组(窦性心律),每组42例,对两组临床资料进行回顾性分析。结果研究组患者的左心房内径(LAD)、右心房内径(RAD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)明显高于对照组,右心室内径(RVD)明显小于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);且研究组HCN2蛋白表达水平高于对照组。结论风湿性心脏病合并心房颤动患者HCN2蛋白的表达与患者的心房颤动具有相关性。

超极化激活环核苷酸门控通道在人肺组织中的表达及功能

目的探讨超极化激活环核苷酸门控(HCN)通道在人肺组织标本及人肺上皮细胞系中的表达情况,并进行相关功能学研究。方法收集临床肺癌手术患者癌旁正常肺组织标本,体外培养人肺上皮H441。采用聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹技术检测人肺组织标本和人肺上皮细胞中HCN通道的表达水平。应用尤斯灌流室实验装置测定H441单层细胞的短路电流,检测HCN通道的相关功能。结果聚合酶链反应结果显示,HCN 4和HCN 1通道扩增产物经琼脂糖凝胶电泳出现116 bp和91 bp的目的条带,HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有mRNA水平的表达,而HCN 2和HCN 3亚型未见表达。用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,在99 000和130 000分别出现HCN 4和HCN 1的目的条带,HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有表达,HCN 2和HCN 3亚型未见表达。尤斯灌流室系统测定短路电流的变化,3、10、30、100、300μmol/L的ZD7288能够剂量依赖性抑制人H441单层细胞的短路电流,根据Boltzmann方程拟合后的半数抑制率为85.8μmol/L。结论 HCN 4/1通道亚型在人肺组织中具有组织和功能学表达,为临床寻求合适药物治疗肺脏相关疾病提供了理论基础。

大鼠心室肌HCN4质粒在HEK293细胞的表达及电流特征

目的研究大鼠心室肌细胞超极化环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)基因瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293)表达和通道电流特征。方法利用脂质体介导大鼠HCN4基因pTracer-CMV-GFP穿梭载体,转染HEK293细胞进行扩增,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCN4 mRNA表达,采用全细胞膜片钳技术记录HEK293细胞上HCN4电流。结果大鼠起搏通道基因瞬时转染HEK293细胞,记录到一系列超极化内向离子流,该电流呈电压、时间依赖性,没有明显的失活,在-150 mV时电流幅值为(540±24.1)pA,电流密度为(9.6±0.7)pA/pF(n=12),半激活电压(V1/2)为(-105.7±12.0)mV,稳态激活曲线斜率(k)为-15.7mV,HCN4电流翻转电位为(-84.0±7.9)mV。结论应用脂质体转染方法成功进行了起搏通道HCN4基因的异源性表达。

特布他林对肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞钠水转运机制的影响

目的探讨特布他林对肺泡Ⅰ型细胞(ATⅠ)和Ⅱ型细胞(ATⅡ)上Na+转运机制的影响。方法分离ATⅡ,采用膜片钳全细胞记录模式,应用全细胞钠通道(ENaC)阻断剂amiloride和环核苷酸门控阳离子通道(CNG)阻断剂ZnCl2观察ATⅡENaC和CNG电流及特布他林对两者的影响。结果 ATⅡ全细胞电流主要为amiloride敏感电流和Zn2+敏感电流,两者比例无差别(P>0.05);特布他林可使amiloride敏感电流和Zn2+敏感电流明显增加(P<0.05),amiloride敏感电流所占比例约为Zn2+敏感电流的1.7倍(P<0.05)。结论急性分离ATⅡ上存在功能性ENaC和CNG,并且Na+转运以两者为主。特布他林增强肺水吸收主要通过增加ATⅠ和ATⅡ上ENaC和CNG通道的Na+转运实现。