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香港牡蛎cyclin B基因组织表达特征及其多克隆抗体制备
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作者 邱衡通 许贵林 +3 位作者 李宛怡 周齐家 刘小宁 朱俊霖 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期909-919,共11页
【目的】明确香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)B型细胞周期蛋白基因(cyclin B)组织表达特征,并通过原核表达融合蛋白制备多克隆抗体,为探究香港牡蛎cyclin B基因在环境胁迫下的表达特征及揭示cyclin B调控贝类细胞周期的作用机制提... 【目的】明确香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)B型细胞周期蛋白基因(cyclin B)组织表达特征,并通过原核表达融合蛋白制备多克隆抗体,为探究香港牡蛎cyclin B基因在环境胁迫下的表达特征及揭示cyclin B调控贝类细胞周期的作用机制提供理论依据。【方法】克隆香港牡蛎cyclinB基因c DNA序列,通过SignalP-5.0、ProtParam、TMHMM2.0、NetSurfP2.0及Bioedit7.0等软件进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR检测cyclinB基因在香港牡蛎不同组织中的表达情况;构建重组质粒pET32a-cyclin B并运用原核表达系统诱导表达融合蛋白,经Ni-NTA镍离子亲和层析柱纯化后免疫BALB/c小鼠制备鼠源多克隆抗体,然后以间接ELISA检测多克隆抗体效价、Western blotting检测多克隆抗体特异性。【结果】香港牡蛎cyclinB基因cDNA序列全长2353bp,包括1299bp的开放阅读框(ORF)、103 bp的5’非编码区(5’-UTR)和951 bp的3’非编码区(3’-UTR),共编码432个氨基酸残基。香港牡蛎cyclin B蛋白相对分子量为49.13 kD,理论等电点为7.16,不含信号肽和跨膜结构域。香港牡蛎cyclin B氨基酸序列包含2个保守的周期蛋白框,与来自同属的长牡蛎cyclin B氨基酸序列相似性最高(98.8%),基于cyclin B氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示香港牡蛎与长牡蛎的亲缘关系最近。cyclin B基因在香港牡蛎的闭壳肌、外套膜、性腺、鳃、唇瓣、消化腺等组织中均有表达,以性腺中的相对表达量最高,显著高于其他组织中的相对表达量(P<0.05)。通过原核表达获得的融合蛋白cyclin B具备良好免疫原性,且主要以包涵体形式存在;以其免疫BALB/c小鼠制备出的鼠源多克隆抗体效价大于1∶64000,能特异识别香港牡蛎性腺中的cyclin B蛋白。【结论】香港牡蛎cyclin B基因具有较高的保守性,其氨基酸序列包含2个保守的周期蛋白框;香港牡蛎cyclin B基因表达具有广谱性和组织差异性,在调控生殖细胞减数分裂过程中发挥作用。通过原核表达体系及免疫注射BALB/c小鼠制备获得的cyclin B鼠源多克隆抗体具有高效价,能特异识别香港牡蛎性腺中的cyclin B蛋白,为进一步探究香港牡蛎cyclin B的生物学功能与表达调控机理提供了技术支持。 展开更多
关键词 香港牡蛎 cyclin B基因 表达特征 多克隆抗体 减数分裂
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LncRNA RUNX1-IT1对恶性多形性腺瘤miR-195/CyclinD1的调控作用探讨 被引量:1
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作者 魏军水 孙鑫 +1 位作者 徐金标 陈逸达 《上海口腔医学》 CAS 北大核心 2023年第1期85-90,共6页
目的 :探讨恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma, MPA)细胞中长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)RUNX1-IT1对微小RNA-195(microRNA-195, miR-195)/细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控作用。方法:收集手术切除的MPA组织... 目的 :探讨恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma, MPA)细胞中长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)RUNX1-IT1对微小RNA-195(microRNA-195, miR-195)/细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控作用。方法:收集手术切除的MPA组织及癌旁组织,检测LncRNA RUNX1-IT1、miR-195、CyclinD1 mRNA的表达水平,分析三者与MPA临床病理的关系。培养MPA细胞系SM-AP1,转染阴性对照(NC)siRNA、LncRNA RUNX1-IT1 siRNA、miRNC、miR-195抑制物,检测细胞增殖水平A490及miR-195、CyclinD1的表达水平,分析LncRNA RUNX1-IT1靶向miR-195、miR-195靶向CyclinD1的关系。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :MPA中LncRNA RUNX1-IT1、CyclinD1的表达水平显著高于癌旁组织,miR-195的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。LncRNA RUNX1-IT1与miR-195呈负相关、与CyclinD1呈正相关,miR-195与CyclinD1呈负相关。肿瘤直径≥3 cm、复发、远处转移的MPA癌组织中,LncRNA RUNX1-IT1、CyclinD1表达更高(P<0.05),miR-195表达更低(P<0.05)。敲低LncRNA RUNX1-IT1后,SM-AP1细胞的A490水平、CyclinD1表达水平降低,miR-195表达水平增加(P<0.05)。LncRNA RUNX1-IT1通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的miR-195,miR-195通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的CyclinD1。抑制miR-195后,敲低LncRNA RUNX1-IT1降低A490水平及CyclinD1表达水平的作用减弱(P<0.05)。结论:LncRNA RUNX1-IT1可能通过调控miR-195/CyclinD1表达,参与MPA的发生、发展。 展开更多
关键词 恶性多形性腺瘤 LncRNA RUNX1-IT1 miR-195 cyclinD1 增殖 靶基因
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cyclin D2、Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达意义
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作者 胡晓婧 姚灼新 +1 位作者 姜义荣 姚淑仪 《临床和实验医学杂志》 2023年第2期137-140,共4页
目的研究细胞周期蛋白D2(cyclin D2)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达意义。方法采用回顾性分析,观察对象为2017年3月至2022年3月入东莞市人民医院就诊的80例DLBCL患者与20例淋巴组织反应性增生(RLH)患者... 目的研究细胞周期蛋白D2(cyclin D2)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达意义。方法采用回顾性分析,观察对象为2017年3月至2022年3月入东莞市人民医院就诊的80例DLBCL患者与20例淋巴组织反应性增生(RLH)患者,分别设定为研究组与对照组,两组患者均经术后病理检查确诊,术前未行任何治疗。选取免疫组织化学法测定两组cyclin D2、Bcl-2蛋白表达情况,对cyclin D2、Bcl-2表达之间的相互关系及与DLBCL患者病理特征相关性进行分析。结果研究组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率分别为33.75%(27/80)、62.50%(50/80),对照组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率分别为5.00%(1/20)、10.00%(2/20);研究组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率较对照组更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。cyclin D2蛋白表达、Bcl-2蛋白表达与DLBCL患者的免疫分型、Ann Arbor分期有明显相关性(P<0.05),与组织类型、肿瘤部位、性别及年龄无明显相关性(P>0.05)。DLBCL中cyclin D2与Bcl-2的表达呈正相关(r=1.000,P<0.05)。结论cyclin D2、Bcl-2在DLBCL中呈高表达,可能参与了DLBCL的发生及发展,两者具有协同作用,可辅助评价生物恶性程度。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 细胞周期蛋白D2 B淋巴细胞瘤-2基因 淋巴组织反应性增生 相关性
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Prognostic value of MET, cyclin D1 and MET gene copy number in non-small cell lung cancer 被引量:3
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作者 Wenze Sun Liping Song +3 位作者 Ting Ai Yingbing Zhang Ying Gao Jie Cui 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2013年第3期220-230,共11页
The aim of this study was to analyze the correlation of the expression of MET and cyclin D1 and MET gene copy number in non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues and patient clinicopathologic characteristics and su... The aim of this study was to analyze the correlation of the expression of MET and cyclin D1 and MET gene copy number in non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues and patient clinicopathologic characteristics and sur- vival. Sixty-one NSCLC tissue specimens were included in the study. The expression of MET and cyclin D1 was evaluated by immunohistochemistry and MET gene copy number was assessed by quantitative real-time polymer- ase chain reaction (Q-PCR). Positive expression of MET and cyclin D1 protein and increased MET gene copy number occurred in 59.0%, 59.0% and 18.0% of 61 NSCLC tissues, respectively. MET-positivity correlated with poor differentiation (P = 0.009). Increased MET gene copy number was significantly associated with lymph node metastasis (P = 0.004) and advanced tumor stage (P = 0.048), while the expression of cyclin D1 was not associ- ated with any clinicopathologic parameters. There was a significant correlation between the expression of MET and MET gene copy number (P = 0.002). Additionally, the expression of cyclin D1 had a significant association with the expression of MET as well as MET gene copy number (P = 0.002 and P = 0.017, respectively). MET- positivity and increased MET gene copy number were significantly associated with poor overall survival (P = 0.003 and P 〈 0.001, respectively) in univariate analysis. Multivariate Cox proportional hazard analysis confirmed that the expression of MET and MET gene copy number were prognostic indicators of NSCLC (P = 0.003 and P = 0.001, respectively). The overexpression of MET and the increased MET gene copy number might be adverse prognostic factors for NSCLC patients. The activation of the MET/cyclin D1 signaling pathway may contribute to carcino- genesis and the development of NSCLC, and may represent a target for therapy. 展开更多
关键词 MET cyclin D1 MET gene copy number PROGNOSIS non-small cell lung cancer (NSCLC)
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Gene Product Expression of Cyclin D_2 and p16 During the Transition from Cardiac Myocyte Hyperplasia to Hypertrophy
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作者 Zhang Yu xia 1 , Yu Lun yin 2 , Liu Ming qiu 1 , Tang Zhi jiao 1 , Xia Dong 1 ,Wang Ming 1 1. Department of Pathology, School of Medicine, Wuhan University, Wuhan 430071, Hubei China 2. Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston, Massachusetts 02215, USA 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS 2002年第4期493-498,共6页
The current study was to investigate mRNA expression of cyclin D 2 and p16 during the transition from cardiac myocyte hyperplasia to hypertrophy. Cultured cardiac myocytes (CM) and fibroblasts (FC) obtained from... The current study was to investigate mRNA expression of cyclin D 2 and p16 during the transition from cardiac myocyte hyperplasia to hypertrophy. Cultured cardiac myocytes (CM) and fibroblasts (FC) obtained from 1 day old Sparague Dawley rats were used in this study. We have determined (1) hyperplasia by cell growth curve and fluorescence activated cell sorting (FACS); and (2) ultrastructure by electron microscope observation; and (3) expressions of cyclin D 2 mRNA and p16 mRNA by using in situ hybridization and image analysis. The results were shown (1) Results of cell growth curve and FACS analysis showed CM could proliferate in the first 3 cultured days (4 days in postnatal development). But the ability decreased quickly, concomitant with the differentiation. (2) The ultrastructure of CM showed the large amount of myofilaments and mitochondrion and FC showed moderate amount of rough endoplasmic reticulum. (3) The expression of cyclin D 2 mRNA in 3 , 4 , 5 day CM group was 0.89 times(p<0.05), 0.80 times (p<0.05)and 0.56 times (p<0.01)of that in 1 day group respectively. P16 mRNA in 2 , 3 , 4 , 5 day CM group were 1.63 times(p<0.01),1.72 times(p<0.01),1.99 times (p<0.01)and 2.84 times (p<0.01) of that in 1 day group respectively. It can be concluded that cultured neonatal rat cardiac myocytes could proliferate during the first 3 cultured days, but the ability of proliferation decreased, from the fourth day, concomitant with differentiation. Cyclin D 2 and p16 have the key roles during the transition from myocyte hyperplasia to hypertrophy. 展开更多
关键词 cyclinS gene p16 HYPERPLASIA cardiac myocytes rat
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贲门腺癌中RASSF1A基因甲基化与cyclin D1表达的关系 被引量:9
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作者 郭炜 杨植彬 +2 位作者 范立侨 邝钢 董稚明 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期164-167,共4页
目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中RASSF1A基因的甲基化状态及其与cyclinD1蛋白表达之间的相关性。方法:分别应用甲基化特异性PCR(mothylation-specific PCR,MSP)方法和免疫组织化学SP法检测贲门腺癌组织及相应... 目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中RASSF1A基因的甲基化状态及其与cyclinD1蛋白表达之间的相关性。方法:分别应用甲基化特异性PCR(mothylation-specific PCR,MSP)方法和免疫组织化学SP法检测贲门腺癌组织及相应癌旁组织的RASSF1A基因甲基化情况和cyclin D1蛋白表达情况。结果:92例贲门腺癌组织中有54例RASSF1A发生了甲基化,甲基化率为58.7%,显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。Ⅲ期和Ⅳ期贲门腺癌患者中RASSF1A基因发生甲基化的比率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05)。92例贲门腺癌组织中有72例(78.3%)cyclin D1蛋白表达阳性,与相应癌旁正常组织比较,cyclin D1在贲门癌组织中的表达显著升高(P<0.001);且随肿瘤分化程度的降低,cyclin D1的阳性表达率明显升高(P<0.05)。RASSF1A基因在贲门腺癌中的高甲基化与cyclinD1蛋白表达之间有明显的相关性(P<0.05)。结论:RASSF1A基因启动子区的高甲基化以及cyclin D1蛋白的过表达可能参与了贲门腺癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 胃肿瘤 贲门 DNA甲基化 基因 肿瘤抑制 细胞周期蛋白D1 基因 RASSF1A
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STAT3、cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义 被引量:9
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作者 李敏 周颖 +4 位作者 彭程 冯定庆 李彩荣 凌斌 肖卫华 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第10期745-747,共3页
目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵... 目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵巢组织的蛋白表达阳性率分别为90.6%(29/32)和16.7%(2/12)。卵巢癌组STAT3表达明显高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.01);STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1mRNA在卵巢癌组织的阳性表达率分别为93.75%、87.5%、71.88%,与正常卵巢组阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中STAT3表达升高及活化可能促进了抗凋亡基因cyclinD1、cyclinB1表达,刺激细胞持续异常增殖,导致肿瘤发生。 展开更多
关键词 信号转导和转录激活因子3 卵巢上皮性癌 基因 细胞周期蛋白D1 基因 细胞周期蛋白B1
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肾透明细胞癌VHL基因突变与CyclinD1过度表达的相关性 被引量:7
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作者 任勇亚 杜丽坚 +1 位作者 冯振卿 冷静 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期175-178,共4页
背景与目的:VHL基因突变与肾透明细胞癌发生关系密切,而CyclinD1基因通过促进细胞过度增殖,对肾透明细胞癌发生和发展起重要作用。本研究拟初步探讨肾透明细胞癌中VHL基因突变的状况及其与CyclinD1表达上升的相关性。方法:取50例肾透明... 背景与目的:VHL基因突变与肾透明细胞癌发生关系密切,而CyclinD1基因通过促进细胞过度增殖,对肾透明细胞癌发生和发展起重要作用。本研究拟初步探讨肾透明细胞癌中VHL基因突变的状况及其与CyclinD1表达上升的相关性。方法:取50例肾透明细胞癌手术标本,抽提病变组织和癌周正常组织中的基因组DNA和总RNA。通过PCR扩增VHL基因各外显子序列并测序以及内切酶鉴定的方法,确定肿瘤组织中VHL基因突变的比率和具体位点。通过RT-PCR和Westernblot方法,检测相应肿瘤组织中CyclinD1的表达水平是否发生改变。结果:VHL基因序列检测结果表明,有42例(84.0%)肾透明细胞癌标本的VHL基因发生各种形式的突变,有12(24.0%)例甚至发生2种以上的基因突变。在57例VHL基因外显子突变中,1号外显子突变有17例(29.8%);2号外显子突变有26例(45.6%);3号外显子突变有14例(24.6%)。CyclinD1的表达水平在42例VHL基因发生突变的组织中均有不同程度的上升,达到正常对照组的2~10倍(3.91±1.54倍)(P<0.01),另8例表现为正常。结论:在肾透明细胞癌中存在各种VHL基因突变,导致CyclinD1过度表达。 展开更多
关键词 肾肿瘤 肾透明细胞 VHL基因 细胞周期素D1 基因突变
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应用间期FISH技术探讨 cyclin D1基因在鼻咽癌中的扩增 被引量:11
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作者 黄贻学 方嬿 +3 位作者 郭颖 郝亚萍 李辉梅 曾益新 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期20-22,30,共4页
目的:检测cyclin D1基因在鼻咽癌(asopharyngeal carcinoma, NPC)细胞中的扩增情况,探讨cyclinD1基因在NPC发生及发展中的作用。方法:应用间期Micro-FISH技术。结果: ... 目的:检测cyclin D1基因在鼻咽癌(asopharyngeal carcinoma, NPC)细胞中的扩增情况,探讨cyclinD1基因在NPC发生及发展中的作用。方法:应用间期Micro-FISH技术。结果: 83例NPC病例可见23例(占 27.71%)出现cyclin D1扩增;其中 I、Ⅱ期病例扩增的有5例,Ⅲ、Ⅳ期病例扩增的有18例; 23例扩增中16例(69.56%)伴有颈淋巴结转移。结论:cyclin D1扩增与 NPC的中晚期发展可能有一定关系,并与颈淋巴结转移呈正相关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 FISH 细胞周期蛋白 基因扩增
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LncRNA PVT1对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞活性的影响及其机制
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作者 路晓辉 李文永 +1 位作者 王孟林 陈香莉 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第3期381-387,共7页
目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878... 目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878和人DLBCL细胞(OCI-Ly3、U2932、TMD8),对TMD8细胞进行转染,将其分为control组(只转染Lipofectamine-2000)、si-NC组(转染si-NC)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、si-PVT1组(转染si-PVT1)、miR-145-5p inhibitor组(转染miR-145-5p inhibitor)、si-PVT1+miR-145-5p inhibitor组(转染si-PVT1和miR-145-5p inhibitor)。应用qRT-PCR方法检测各组细胞PVT1 mRNA和miR-145-5p表达,Western Blot方法检测CDK6蛋白表达,CCK-8法检测TMD8细胞增殖,流式细胞术检测TMD8细胞周期变化,Transwell实验检测TMD8细胞迁移和侵袭能力,RNA pull down和双荧光素酶报告基因法验证PVT1、miR-145-5p与细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的靶向关系。结果 DLBCL组织PVT1 mRNA、CDK6蛋白的表达水平高于RLH组织,miR-145-5p表达低于RLH组织(t=14.264~24.445,P<0.05)。与GM12878细胞比较,OCI-Ly3、U2932、TMD8细胞中PVT1 mRNA、CDK6蛋白表达均增加,miR-145-5p表达均减少(F=69.557~234.718,P<0.05)。6组细胞PVT1 mRNA、miR-145-5p、CDK6蛋白表达及增殖率、G0/G1期细胞比例、S期细胞比例、迁移和侵袭细胞数差异有统计学意义(F=25.589~319.150,P<0.05);与control组比较,si-PVT1组细胞PVT1 mRNA、CDK6蛋白、增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量降低,miR-145-5p表达、G0/G1期细胞比例升高(P<0.05),miR-145-5p inhibitor组呈相反变化(P<0.05);下调miR-145-5p表达可减弱敲低PVT1对TMD8细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。过表达PVT1 mRNA增高CDK6蛋白表达、细胞增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量,降低miR-145-5p表达、G0/G1期的细胞比例(F=38.025~327.887,P<0.05)。miR-145-5p是PVT1的靶基因,且miR-145-5p可靶向下调CDK6表达。结论 敲低PVT1可抑制DLBCL细胞恶性生物学行为,其作用机制可能与调控miR-145-5p/CDK6轴有关。 展开更多
关键词 淋巴瘤 大B细胞 弥漫性 RNA 长链非编码 浆细胞瘤变体异位基因1 miR-145-5p 细胞周期蛋白依赖激酶6
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siRNA-CyclinE对家蚕细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 刘丽华 沈卫德 +1 位作者 李兵 王文兵 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第4期21-25,共5页
【目的】研究小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞CyclinE基因表达及细胞周期的影响。【方法】合成针对CyclinE基因1 252和568位点的siRNA片段,并利用脂质体法转染家蚕BmN细胞,于共聚焦荧光显微镜下观察... 【目的】研究小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞CyclinE基因表达及细胞周期的影响。【方法】合成针对CyclinE基因1 252和568位点的siRNA片段,并利用脂质体法转染家蚕BmN细胞,于共聚焦荧光显微镜下观察转染情况;应用实时荧光定量PCR法检测CyclinE mRNA的表达情况,流式细胞仪检测细胞周期。【结果】siRNA对家蚕BmN细胞的转染效率达80%左右。转染1252-siRNA-CyclinE和568-siRNA-CyclinE 48h后,分别使家蚕BmN细胞CyclinE mRNA表达量降低了68%和90%;流式细胞仪检测结果显示,2个转染组G0/G1期细胞比例显著增大,S期和G2/M期细胞比例显著减小。【结论】在家蚕BmN细胞中导入针对CyclinE的siRNA,可有效抑制CyclinE基因的表达,使细胞周期阻滞于G1期,进而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 家蚕BmN细胞 cyclinE基因 RNA干扰 细胞增殖 细胞周期
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中国人肺癌易感性与Cyclin D1(A870G)遗传多态性的研究 被引量:4
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作者 王瑞 张健慧 +2 位作者 李琰 温登瑰 魏丽珍 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期364-366,共3页
目的 研究中国北方人对肺癌的易感性与CyclinD1基因第 870位核苷酸A/G(A870G)多态性的关系。 方法 应用PCR SSCP方法 ,检测 93例肺癌及 12 2例健康对照外周血白细胞CyclinD1(A870G)的遗传多态性。结果 肺癌组与对照组CyclinD1(A870G)... 目的 研究中国北方人对肺癌的易感性与CyclinD1基因第 870位核苷酸A/G(A870G)多态性的关系。 方法 应用PCR SSCP方法 ,检测 93例肺癌及 12 2例健康对照外周血白细胞CyclinD1(A870G)的遗传多态性。结果 肺癌组与对照组CyclinD1(A870G)A/G的等位基因频率分别为 6 0 .75 %、39.2 5 %及 5 1.6 4 %、4 8.36 % ,两组间分布无显著性差异 (P =0 .0 6 )。肺癌组与对照组的A/A、A/G及G/G基因型频率分别为 38.71%、4 4 .0 9%、17.2 0 %及 2 3.77%、5 5 .74 %、2 0 .4 9%。两组间A/G及G/G基因型频率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而肺癌组A/A基因型频率明显高于对照组 (P =0 .0 18)。肺癌组与对照组A/A基因型频率的分布差异与肺癌的病理类型有关。肺鳞癌组的A/A基因型频率与对照组无显著性差异 (P =0 .4 0 3) ,而肺腺癌组的A/A基因型频率明显高于对照组 (P =0 .0 17)。与A/G及G/G基因型携带者之和相比 ,A/A基因型携带者患肺腺癌的校正相对风险度 (OR)为 2 .4 3,95 %CI =1.74~ 4 .77。结论 CyclinD1(A870G)A/A基因型是中国北方人患肺腺癌的危险因素 ,而肺鳞癌的易感性与CyclinD1(A870G)多态性无关。 展开更多
关键词 中国人 肺癌 易感性 cyclinD1 遗传多态性 研究
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BP1基因和Cyclin D1基因在乳腺癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 宋永春 傅四东 +2 位作者 温小鹏 马振华 党诚学 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期709-714,共6页
背景与目的:BP1基因是新近发现的转录因子,属于同源盒基因的DLX家族。近年来的国内外研究显示BP1基因与人乳腺癌的发病密切相关。目前BP1基因与细胞周期控制因子之间的关系未见进一步的研究报道。本研究拟观察人乳腺癌组织中BP1的表达... 背景与目的:BP1基因是新近发现的转录因子,属于同源盒基因的DLX家族。近年来的国内外研究显示BP1基因与人乳腺癌的发病密切相关。目前BP1基因与细胞周期控制因子之间的关系未见进一步的研究报道。本研究拟观察人乳腺癌组织中BP1的表达情况以及BP1与Cyclin D1表达的关系。方法:收集86例乳腺癌组织和20例癌旁组织,用RT-PCR的方法检测乳腺癌组织和癌旁组织中BP1 mRNA表达的情况。合成BP1多抗,用Western blot方法验证BP1多抗的效果,并检测86例乳腺癌组织中BP1和Cyclin D1免疫组化的情况及BP1蛋白和Cyclin D1蛋白有无共表达。结果:86例乳腺癌组织中,60例呈BP1 mRNA阳性(69.8%)。20例癌旁组织中BP1 mRNA均为阴性。乳腺癌组织中BP1 mRNA表达明显高于癌旁组织(P=0.000)。在86例乳腺癌组织中,Cyclin D1 mRNA表达率为64.0%(55/86),与BP1 mRNA共阳性的有52例,共阴性的有23例,BP1 mRNA和Cyclin D1 mRNA存在共表达(P=0.277)。另外,在86例乳腺癌组织免疫组化检测中,43例呈BP1和Cyclin D1共阳性表达,31例呈BP1和Cyclin D1共阴性。经配对χ2检验显示,Cyclin D1与BP1也存在共表达(P=0.146)。结论:BP1基因在人乳腺癌组织中有较高的表达率,BP1基因和Cyclin D1基因在人乳腺癌组织中有共表达。BP1基因可能是通过调节细胞周期控制因子Cyclin D1导致乳腺癌发生的。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 BPl基因 cyclin D1基因 基因表达 逆转录聚合酶链反应 免疫组化
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猪冠状动脉球囊损伤后管壁cyclin D_1和Rb蛋白表达的变化 被引量:2
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作者 岳欣 潘其兴 +7 位作者 张薇 李继福 李贵双 陈玉国 许复郁 于爱琴 马玉林 杨凯 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期84-84,96,共2页
目的 :探讨原癌基因cyclinD1和抑癌基因Rb的表达与猪冠状动脉球囊损伤后内膜增殖的关系。方法 :应用免疫组化法检测猪冠状动脉球囊损伤后壁内cyclinD1和Rb蛋白的表达。结果 :增生的内膜和中膜内cyclinD1和Rb蛋白表达阳性 ,阳性细胞呈点... 目的 :探讨原癌基因cyclinD1和抑癌基因Rb的表达与猪冠状动脉球囊损伤后内膜增殖的关系。方法 :应用免疫组化法检测猪冠状动脉球囊损伤后壁内cyclinD1和Rb蛋白的表达。结果 :增生的内膜和中膜内cyclinD1和Rb蛋白表达阳性 ,阳性细胞呈点片状分布 ,阳性强度与内膜增生程度有关 ,两个基因的表达具有相关性。结论 :CyclinD1和Rb基因与猪冠状动脉球囊损伤后内膜增殖密切相关。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白类 基因 视网膜母细胞瘤 血管成形术 经腔 经皮冠状动脉 免疫组织化学
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乳腺浸润性导管癌组织激素受体和Cyclin D1及Bcl-2表达的研究 被引量:4
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作者 王湛博 赵坡 +1 位作者 刘梅 李向红 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第17期1306-1309,共4页
目的:研究生物标志ER、PR、Cyclin D1、Bcl-2和Bax在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其与乳腺癌患者无瘤生存时间和总体生存时间的关系,探寻这些生物标志对化疗患者预后的提示作用。方法:用HE及SP免疫组化染色法对100例乳腺浸润性导管... 目的:研究生物标志ER、PR、Cyclin D1、Bcl-2和Bax在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其与乳腺癌患者无瘤生存时间和总体生存时间的关系,探寻这些生物标志对化疗患者预后的提示作用。方法:用HE及SP免疫组化染色法对100例乳腺浸润性导管癌作回顾性分析。结果:各生物标志的阳性率分别为ER60%,PR58%,Cyclin D1 55%,Bcl-250%,Bax34%。其中ER的阳性率与患者的绝经与否有关,ER、PR和Bcl-2的表达均与组织学分级负相关。Cyclin D1阴性的患者总体生存时间要短于Cyclin D1阳性的患者,χ2=7.77,P=0.0053。ER、PR阳性者与阴性者无瘤生存时间差异有统计学意义(χ2=4.59,PER=0.0322;χ2=6.19,PPR=0.0129),ER、PR阳性者无瘤生存时间更长。Bcl-2阳性者平均无瘤生存时和平均总体生存时间均长于Bcl-2阴性者。ER为阳性表达者,化疗后平均无瘤生存时间(55.4个月)长于ER阴性者(35.8个月),χ2=6.10,P=0.0135;Bcl-2为阳性表达者,化疗后平均无瘤生存时间(54.8个月)长于Bcl-2阴性者(41.6个月),χ2=10.11,P=0.0015。结论:ER、PR和Bcl-2的表达与患者的无瘤生存时间相关,Bcl-2和Cyclin D1的表达和患者的总体生存时间相关。ER和Bcl-2阳性表达患者化疗后无瘤生存时间较长。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 导管 乳腺 细胞周期蛋白D1 基因 BCL-2 免疫组织化学
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树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用及对CyclinE基因mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 于水澜 于英君 +1 位作者 赵阳 宋高臣 《中医药学报》 CAS 2013年第4期52-54,共3页
目的:探明树舌多糖GF(Ganoderma appanatum polysaccharides GF,GAPSGF)对SMMC7721肝癌细胞增殖及CyclinE基因mRNA表达的影响。方法:用80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/mL树舌多糖GF分别处理肝癌细胞SMMC7721,48h后MTT法检测树... 目的:探明树舌多糖GF(Ganoderma appanatum polysaccharides GF,GAPSGF)对SMMC7721肝癌细胞增殖及CyclinE基因mRNA表达的影响。方法:用80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/mL树舌多糖GF分别处理肝癌细胞SMMC7721,48h后MTT法检测树舌多糖GF对SMMC7721细胞增殖的抑制情况;实时定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)检测CyclinE mRNA表达。结果:树舌多糖GF对SMMC7721细胞具有增殖抑制作用。Real-time PCR结果显示,CyclinE mRNA的表达量明显低于模型组。结论:树舌多糖GF可下调CyclinE mRNA的表达,从而抑制SMMC7721肝癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 SMMC7721肝癌细胞 树舌多糖GF cyclinE 基因
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Cyclin D1、p16在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及意义 被引量:5
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作者 王安英 郑英 耿正惠 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期51-53,共3页
目的 :探讨细胞周期素D1(CyclinD1)、p16在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展及估计预后中的作用。方法 :采用免疫组化S -P法检测CyclinD1、p16在正常绒毛和妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果 :妊娠滋养细胞肿瘤组与正常绒毛、葡萄胎组比较 ,Cyc... 目的 :探讨细胞周期素D1(CyclinD1)、p16在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展及估计预后中的作用。方法 :采用免疫组化S -P法检测CyclinD1、p16在正常绒毛和妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果 :妊娠滋养细胞肿瘤组与正常绒毛、葡萄胎组比较 ,CyclinD1的表达率明显增高 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1) ;p16的表达率明显降低 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1)。在妊娠滋养细胞肿瘤中 ,CyclinD1与p16的表达呈负相关 (r=- 0 5 5 3,P <0 0 1)。随肿瘤临床期别的增加 ,CyclinD1的表达率逐渐升高 ;p16的表达率逐渐降低。结论 :CyclinD1的过度积累或p16的突变或丢失 ,可促使滋养细胞异常增生和恶性转化 。 展开更多
关键词 妊娠滋养细胞肿瘤 细胞周期素D1 P16基因 免疫组织化学
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Cyclins非时相性表达和MDR1与胃肠道恶性肿瘤分期的研究 被引量:1
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作者 郭勇 覃吉超 +4 位作者 周毅 何小军 李伟华 谢大兴 龚建平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第2期114-117,共4页
目的:研究胃肠道恶性肿瘤的4种主要Cyclins的表达规律,以此为依据对恶性肿瘤进行分型,并结合肿瘤标本中MDR1(多药耐药基因)的表达情况,与肿瘤TNM分期进行相关性研究。方法:使用流式细胞术分析新鲜手术获取的肿瘤标本的CyclinD1,... 目的:研究胃肠道恶性肿瘤的4种主要Cyclins的表达规律,以此为依据对恶性肿瘤进行分型,并结合肿瘤标本中MDR1(多药耐药基因)的表达情况,与肿瘤TNM分期进行相关性研究。方法:使用流式细胞术分析新鲜手术获取的肿瘤标本的CyclinD1,E,A,B1及与MDR1表达情况,再记录术后病理报告进行TNM分期。结果:根据4种主要Cyclins的表达情况对恶性消化道肿瘤分为Ⅰ~Ⅳ型cyclin非时相性表达类型,此Ⅰ~Ⅳ型细胞周期类型与TNM分期有一致性(Kappa值为0.599,P〈0.01),Ⅰ~Ⅳ型细胞周期类型中MDR1的表达水平逐渐增高(Spearman相关系数0.495,P〈0.01)。结论:根据4种主要Cyclins(Cyclin D1,E,A,B1)的表达情况对胃肠肿瘤进行的分型具有与TNM分期相同的意义,可以说是对“分子分期”的一种探索。在消化道肿瘤中,MDR1与肿瘤细胞周期破坏类型有关,对治疗具有指导意义。 展开更多
关键词 胃肠肿瘤 细胞周期蛋白类 基因 MDR 肿瘤分期 流式细胞术
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原发性肝细胞癌中cyclin D1基因表达与P16及CDK4蛋白表达的关系 被引量:6
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作者 孙宝华 王涛 +2 位作者 武忠弼 阮幼冰 杨木兰 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第3期307-309,共3页
目的 研究cyclin D1基因在原发性肝细胞癌中的表达,并探讨其与P16及CDK4蛋白表达的关系。 方法 用原位杂交检测cyclin D1基因mRNA表达,免疫组化检测Cyclin D1蛋白表达。 结果 6例(14.3%)HCC可检测到cyclin D1基因过表达,5例属Ⅲ—Ⅳ级,... 目的 研究cyclin D1基因在原发性肝细胞癌中的表达,并探讨其与P16及CDK4蛋白表达的关系。 方法 用原位杂交检测cyclin D1基因mRNA表达,免疫组化检测Cyclin D1蛋白表达。 结果 6例(14.3%)HCC可检测到cyclin D1基因过表达,5例属Ⅲ—Ⅳ级,1例属Ⅱ级。6例HCC均有CDK4蛋白表达,其中3例为P16蛋白阳性。 结论 ①cyclin D1表达增加只在小部分恶性程度高的HCC中起作用,可能与肿瘤侵袭有关。②在HCC中,cyclin D1基因过表达和(或)P16蛋白丢失均起重要作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 cyclinD1基因 基因表达
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玉米cyclin Ⅲ基因的染色体原位杂交物理定位 被引量:5
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作者 任南 宋运淳 +1 位作者 毕学知 刘立华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期1-4,共4页
本文首次报道了玉米低拷贝基因cyclinⅢ(B-类)生物素标记的染色体原位杂交定位结果。供试探针为该基因的cDNA克隆,其长度仅为16kb。结果表明,探针的信号分布在第6染色体短臂和第9染色体长臂,与着丝粒的百分距... 本文首次报道了玉米低拷贝基因cyclinⅢ(B-类)生物素标记的染色体原位杂交定位结果。供试探针为该基因的cDNA克隆,其长度仅为16kb。结果表明,探针的信号分布在第6染色体短臂和第9染色体长臂,与着丝粒的百分距离分别为7005±331和8686±164,检出率分别为829%和683%。文中对基因的物理位置与功能间的关系等作了讨论。 展开更多
关键词 玉米 cyclinⅢ基因 染色体 原位杂交 物理定位
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