芒果苷对白血病HL-60细胞周期及CDC2/CyclinB1表达的影响

目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测芒果苷对细胞周期的影响;用RT-PCR技术检测CyclinB1及CDC2 mRNA表达水平。结果:芒果苷呈剂量及时间依赖性抑制HL-60细胞的生长,作用24 h后,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞;CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达随药物质量浓度的增加而逐渐增强,在芒果苷质量浓度80μmol/L时表达达到峰值。结论:芒果苷可抑制HL-60细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,显著上调HL-60细胞CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达水平。芒果苷诱导HL-60细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。

散发性乳腺癌中BRCA1和cyclinB1的表达

目的 探讨BRCA1和cyclinB1在散发性乳腺癌的表达及意义。方法 应用免疫组化S P法检测 2 0例乳腺腺病和 5 2例散发性乳腺癌中BRCA1和cyclinB1的表达。结果 所有乳腺腺病中BRCA1均呈阳性表达 ,散发性乳腺癌中BRCA1表达率和强度均下降 (P <0 0 1) ,BRCA1表达下降或丧失与散发性乳腺癌组织学分级有关 (P <0 0 5 )。cyclinB1在乳腺腺病和散发性乳腺癌中表达阳性率分别为 35 0 % (7/ 2 0 )和 6 9 2 % (36 / 5 2 ) ,差别有统计学意义 (P <0 0 1) ,cyclinB1过表达与组织学分级和肿块大小有关 (分别P <0 0 1,P <0 0 5 )。在散发性乳腺癌中BRCA1与cyclinB1的表达呈负相关 (P <0 0 1)。

组织芯片/免疫组化检测CDC2/CyclinB1在胶质瘤中的联合表达及意义

目的:探讨CDC2/CyclinB1在胶质瘤组织芯片中的表达及意义。方法:构建布有各级别人脑胶质瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞和相应的对照标本共118例的组织芯片,进行CDC2、CyclinB1的EnVision法免疫组化染色,分析其表达率、表达强度及联合表达情况。结果:CDC2、CyclinB1表达阳性率在71例人脑胶质瘤组织中分别为54.9%和52.1%。11例正常成人脑组织中分别为18.2%和9.0%,两者比较P<0.05。CDC2和CyclinB1的联合表达率为89.7%,两者表达呈正相关(r=0.90,P<0.01)。CDC2、CyclinB1的表达在不同级别人脑胶质瘤中也有差异(P<0.05),与病理级别分别呈正相关(r=0.982,P=0.018;r=0.959,P=0.041)。在体外培养的胶质瘤细胞球体、裸鼠皮下移植瘤、人胚胎脑和裸小鼠骨髓中均高表达,而脑肿瘤干细胞和神经干细胞球体未见表达。结论:CDC2和CyclinB1,随着脑胶质瘤恶性度增高而表达量增加;在神经干细胞、脑肿瘤干细胞低表达,而在SHG44和GBM细胞球体中高表达,表明其在肿瘤细胞分化抑制中起作用。这对进一步研究胶质瘤分子病因有重要价值。

白屈菜碱对SGC-7901细胞Cdk1、cyclinB1表达影响

研究白屈菜碱对人胃癌SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达,探讨白屈菜碱诱导人胃癌SGC-7901细胞G2/M期阻滞的机制.采用Western blotting法测定白屈菜碱对SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达的影响.不同质量浓度的白屈菜碱可显著下调人胃癌SGC-7901细胞内Cdk1与cyclinB1蛋白表达水平,同时显著上调p-Cdk1(Thr14)蛋白的表达水平,并呈一定的剂量依赖性.白屈菜碱可下调SGC-7901细胞内Cdk1和cyclinB1蛋白的表达,上调p-Cdk1(Thr14)蛋白的表达,这可能是白屈菜碱诱导SGC-7901细胞G2/M期阻滞的主要机制之一.

莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G_2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响

目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1(Thr14)和CyclinB1蛋白表达的影响。结果:SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),同时p-Cdk1(Thr14)的表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。

山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响

目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。

CyclinB1、CDK1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期蛋白CyclinB1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法对52例食管鳞癌(组织学Ⅰ级8例,Ⅱ级20例,Ⅲ级24例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移32例;原位癌16例,侵袭性癌36例包括浸润至黏膜下层、肌层、全层)及其配对的癌旁正常组织进行CyclinB1、CDK1的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系.结果:食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的阳性表达高于癌旁正常食管黏膜组织,2组差异都有统计学意义(71.2%vs2.0%,65.4%vs3.9%,均P<0.05).食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的表达都与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(均P<0.05).CyclinB1阳性表达强度与CDK1的阳性表达强度之间呈正相关(r=0.697,P<0.05).结论:CyclinB1、CDK1的高表达会促进食管鳞癌的发生与发展.而且食管鳞癌中CyclinB1与CDK1的表达密切相关,可作为食管鳞癌生物学行为预测的参考指标.

Claudin-1与cyclinB1在下咽鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究Claudin-1与cyclinB1在下咽鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达情况,分析它们与下咽鳞状细胞癌各临床因素及患者预后之间的关系。方法 (1)选取97例下咽鳞状细胞癌组织学标本及90例癌旁正常黏膜组织标本,采用免疫组化的方法比较Claudin-1和cyclinB1在下咽鳞状细胞癌及正常黏膜组织中表达的差异,分析两者在下咽鳞状细胞癌中的表达与临床因素及患者预后之间的关系;(2)选取30位下咽鳞状细胞癌患者术后的癌组织及癌旁正常黏膜,采用RT-PCR方法,检测Claudin-1和cyclinB1的表达并定量分析,探讨两者的相关性。结果 (1)Claudin-1与cyclinB1在下咽鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.05);(2)Claudin-1蛋白表达与肿瘤的分化程度(P=0.004)和淋巴结转移(P=0.026)有关,与患者的生存率相关(P=0.003);(3)CyclinB1蛋白表达与肿瘤的分化程度(P<0.001)有关;(4)Claudin-1与cyclinB1呈明显正相关关系(r=0.482,P<0.001)。结论 Claudin-l和cyclinB1具有协同作用,二者的高表达可能促进了下咽癌的发生与发展。

VX-680对T24细胞增殖的抑制作用及对CyclinD1和CyclinB1表达的影响

目的：探讨AuroraA激酶抑制剂VX一680对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用及对CyclinB1和CyclinB1mRNA表达的影响及意义。方法：体外培养T24细胞．分别给予不同浓度及不同作用时间的VX-680．采用MTT法检测细胞增殖能力：RT—PCR检测T24细胞Cyclin B1和Cyclin B1mRNA的表达水平，结果：MTT结果显示：100～500nmol／LVX-680作用24、72h均对T24细胞有明显抑制作用．呈浓度依赖性且72h时抑制效果更显著：100～500nmol／LVX-680作用72h后，各组T24细胞CyclinB1和CyclinB mRNA的表达水平下调，呈浓度依赖性。结论：Aurora激酶抑制剂VX-680可能通过下调CyclinB1和CyclinB1mRNA表达显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖，且具有浓度依赖性。

siRNA诱导CyclinB1沉默增加HePG2细胞对柔红霉素的敏感性(英文)

探讨了CyclinB1在肝癌药物耐受形成中的作用.用siRNA技术沉默CyclinB1在细胞中的表达,使用流式细胞仪技术分析细胞的凋亡和周期分布,用细胞克隆形成能力分析和细胞毒性实验分析细胞的增殖能力.由siRNA诱导的CyclinB1下调导致40%～50%肝癌细胞阻滞在G2/M期,并显著抑制肝癌细胞的单克隆形成能力;柔红霉素联合CyclinB1 siRNA较单独使用柔红霉素能更加有效地导致肝癌细胞凋亡,而在人正常肝细胞HL-7702中这种现象不明显.实验结果表明针对于CyclinB1的靶向性下调与肝癌药物的联合使用将有可能成为肝癌治疗的新策略.

不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34^(cdc2)表达的差异

旨在探究不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2的表达情况。本试验选取发育正常、体重相似的5~6d荷斯坦哺乳公犊18头,随机分为3组,每组6头,饲喂相同的基础日粮,分别在30(断奶)、60和90d时从各组分别随机抽取2头,采集其睾丸备用;通过qRT-PCR技术检测不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达规律,免疫组化技术对睾丸CyclinB1和p34cdc2进行定位分析。结果表明:90d时CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达量显著高于30与60d(P<0.05),但30与60d两种基因mRNA表达量均差异不显著(P>0.05);p34cdc2蛋白在不同日龄犊牛表达差异显著(P<0.05);CyclinB1蛋白在60、90d的表达量显著高于30d(P<0.05),但60和90d差异不显著(P>0.05)。综上表明,CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白在睾丸的表达量随着犊牛日龄的增加而增加,且不同的日龄CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白表达量存在一定的差异。

CyclinB1在非霍奇金淋巴瘤中的表达及诊断价值

目的:探讨CyclinB1在良、恶性淋巴疾病表达差异以及在恶性淋巴瘤中表达与多种预后因素的相互关系,并分析其表达的临床意义。方法:采用免疫组织化学ABC法,检测CyclinB1在83例非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织及20例淋巴结反应性增生(RH)组织中的表达情况。结果:CyclinB1在NHL中的表达显著高于RH组织中的表达(P<0.01);NHL中CyclinB1在Ⅲ+Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05),在有结外受侵的NHL患者中明显高于无结外受侵的患者(P<0.05),在侵袭性NHL显著高于惰性NHL(P<0.05)。结论:CyclinB1可能参与NHL的进展。检测CyclinB1的表达情况,有助于NHL和RH的鉴别诊断,对判断NHL的恶性程度有一定的临床价值。

Stat5与CyclinB1在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性

目的探讨信号转导与转录激活因子5(Stat5)与细胞周期素CyclinB1在非小细胞肺癌和正常肺组织中的表达及关系,进一步探讨Stat5、CyclinB1与非小细胞肺癌发生发展的关系。方法利用SABC免疫组织化学技术检测35例非小细胞肺癌(NSCLC)组织及10例肺正常组织中Stat5和CyclinB1的表达。结果Stat5、CyclinB1在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于肺正常组织(P<0.01)。Stat5蛋白和CyclinB1蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的性别、年龄、组织分化程度无关。Stat5蛋白与组织学类型有关,在腺癌组织中的表达强度明显高于鳞癌,差异有统计学意义(P<0.01)。CyclinB1蛋白与TNM分期有关,在Ⅲ、Ⅳ期癌组织中的表达强度明显高于Ⅰ、Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。Stat5与CyclinB1的表达呈显著相关性(P<0.01)。结论Stat5、CyclinB1可能在肺癌的发生发展中发挥重要作用,CyclinB1的表达可能由Stat5调控。

膀胱移行细胞癌中14-3-3σ和CyclinB1表达的临床意义

目的探讨14-3-3σ和细胞周期蛋白B1(CyclinB1)在膀胱移行细胞癌组织中的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系。方法用免疫组化S-P方法检测10例正常膀胱组织,48例膀胱移行细胞癌患者肿瘤组织中14-3-3σ和CyclinB1的表达;分析14-3-3σ和CyclinB1的表达与膀胱移行细胞癌分期、分级、术后生存率的相关性及14-3-3σ和CyclinB1在膀胱移行细胞癌组织中表达的相关性。结果正常对照组10例14-3-3σ中9例阳性(90%),膀胱移行细胞癌组48例14-3-3σ8例阳性(16.6%);正常对照组中CyclinB1 2例阳性(20%),而膀胱移行细胞癌组48例CyclinB1 38例阳性(79.2%)。结论 14-3-3σ低表达和CyclinB1的高表达与膀胱移行细胞癌分级、病理分期显著相关;14-3-3σ高表达和CyclinB1低表达可抑制膀胱移行细胞癌的发生。二者的协同作用可能促进肿瘤的演进,检测14-3-3σ和CyclinB1可作为评价膀胱移行细胞癌的新的参考指标。

鼻咽良恶性病变中EBV-LMP1、CyclinB1、P34^(cdc2)和Survivin的表达及意义

目的 :探讨P34cdc2 、CyclinB1和Survivin在鼻咽粘膜慢性炎、鼻咽癌和颈部淋巴结转移灶中的表达及意义 ,并分析与EBV LMP1表达的相互关系。方法 :应用免疫组化检测 30例鼻咽粘膜慢性炎、30例鼻咽癌和 30例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中LMP1、P34cdc2 、CyclinB1和Survivin的表达。结果 :LMP1、P34cdc2 、CyclinB1和Survivin在鼻咽粘膜慢性炎中的阳性率分别为 2 0 .0 % (6 /30 )、10 .0 % (3/30 )、10 .0 % (3/30 )和 3.3% (1/30 ) ;在鼻咽癌中的阳性率分别为 6 3.3% (19/30 )、73.3% (2 2 /30 )、5 0 .0 % (15 /30 )和 36 .7(11/30 ) ,与鼻咽粘膜慢性炎比较差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;在鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中的阳性率分别为 70 0 % (2 1/30 )、80 .0 % (2 4 /30 )、76 .7% (2 3/30 )和 4 3.3% (13/30 ) ,与鼻咽粘膜慢性炎比较差异均有显著性 (P <0 .0 1) ,与鼻咽癌相比较均有所增高 ,但仅CyclinB1有统计学意义(P <0 .0 5 )。在鼻咽癌及其颈部淋巴结转移灶中 ,LMP1与P34cdc2 和CyclinB1的表达均有显著相关性 (分别P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :鼻咽癌中存在P34cdc2 、CyclinB1和Survivin蛋白过表达 ,LMP1与P34cdc2 和CyclinB1可能协同致病。

构建重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1及在胃癌细胞SGC-7901中的表达

目的:构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并观察其在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及对SGC-7901活性的影响。方法:通过RT-PCR法扩增不可降解CyclinB1(NDCyclinB1),将其插入到pEGFP-N1载体的XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点,构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并以PCR、双酶切、测序鉴定。通过脂质体法转染胃癌细胞SGC-7901,进行荧光检测、Western blotting分析和流式细胞仪分析。结果:PCR、酶切及测序证明重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1构建成功。转染胃癌细胞SGC-7901 24 h后,荧光显微镜下观察到绿色荧光。West-ern blotting检测到CyclinB1的表达明显增加。流式细胞仪检测重组质粒细胞组凋亡指数高于对照组,差异有显著性。结论:成功构建pEGFP-N1-ND CyclinB1荧光真核表达载体,并可在SGC-7901细胞中有效表达。

DADS活化HL-60细胞G_2/M检查点与cyclinB1亚细胞分布的关系

目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人急性髓性白血病细胞系HL-60细胞G2/M期生长阻滞的分子机制。方法采用MTT法检测DADS对细胞增殖活性的影响、流式细胞术检定细胞增殖周期、蛋白印迹法检测细胞内cyclinB1表达水平。结果DADS呈浓度依赖性抑制HL-60细胞增殖活性,且DADS(20μmol/L)与ATRA(10-6mol/L)对HL-60细胞增殖活性影响相近(P<0.01),DADS(20μmol/L)作用12 h后能引起G2/M期细胞百分数增高并达到最大值,上调cyclinB1的表达水平并诱导cy-clinB1细胞质定位。结论DADS能启动HL-60细胞G2/M检查点,它的激活与cyclinB1细胞质定位有关。

CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和胎盘蜕膜组织中的表达及与血清雌孕激素的相关性研究

目的探讨细胞周期调节蛋白CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达水平及与血清雌孕激素的相关关系。方法选择早期自然流产患者30例,采用反转录-聚合酶链反应法检测绒毛和蜕膜组织中CyclniB1的表达情况,同时采用化学发光法检测流产日患者血清中雌孕激素的水平,采用线性回归法分析CyclniB1的表达与雌孕激素之间的相关关系。结果 CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的水平与血清中雌孕激素均呈正相关关系。结论雌孕激素可通过下调CyclinB1表达参与早期自然流产的发生。

黄芩苷下调CyclinB1基因表达对SMMC-7721裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:本研究通过对肝癌细胞株SMC-7721的裸鼠移植瘤模型使用不同剂量的黄芩苷处理,观察裸鼠移植瘤组织中Cyclin B1基因表达及裸鼠血清AFP蛋白含量的变化,初步探讨黄芩苷对肝癌的抑制作用,为中药黄芩的抗肿瘤应用提供理论基础.方法:使用传代后的人肝癌SMMC-7721细胞悬液建立裸鼠肝癌移植瘤模型,使用随机数字法分组.使用不同剂量的黄芩苷进行腹腔注射,2周后处死裸鼠解剖瘤体,使用免疫组化法测定肝癌组织中CyclinB1基因的表达水平、酶联免疫法测定各组裸鼠血清中AFP(甲胎蛋白)含量.结果:各黄芩苷组裸鼠的瘤荷显著低于对照组,黄芩苷组裸鼠抑制瘤肝癌组织中CyclinB1基因与对照组均有显著差异,并呈剂量负相关性(P<0.01);黄芩苷组裸鼠血清AFP阳性例数显著小于对照组,具有统计学意义(P<0.01).结论:黄芩苷对肝癌裸鼠移植瘤肝癌组织中CyclinB1基因有明显抑制作用,且其抑制强度与黄芩苷计量呈正相关关系;黄芩苷对肝癌裸鼠移植瘤外周血中AFP含量有明显抑制作用,其具体机制值得进一步研究.