CyclinD2及ER-α基因DNA甲基化在乳腺癌早期诊断中的意义

目的探讨CyclinD2及ERα基因的DNA甲基化,在乳腺癌早期诊断中的意义。方法采用RT-PCR方法和特异性MSP方法,检测乳腺癌及正常乳腺组织中cyclin-D2及ERα基因的mRNA及甲基化状态。结果⑴cyclinD2和ERαmRNA在乳腺癌中的表达明显低于正常乳腺组织;⑵cyclinD2和ERα在正常乳腺组织中无一例甲基化,在乳腺癌中的甲基化率分别为46.7%和32.4%;⑶cyclinD2、ERα的mRNA表达及甲基化状态无相关性。结论将检测cyclinD2和ERα的甲基化状态应用于乳腺癌的诊断,可以提高其早期诊断率。

乳腺癌中cyclinD2、CDK4的表达及其临床意义

目的研究乳腺癌组织中细胞周期蛋白D2(cyclinD2)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-de-pendentkinase4,CDK4)的表达,探讨它们与p27kip1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法应用免疫组化SP法,检测96例乳腺癌、18例癌旁正常乳腺组织石蜡切片中cyclinD2、CDK4的表达,比较它们与p27kip1蛋白表达、与临床病理学指标之间的关系。结果①96例乳腺癌组织中cy-clinD2、CDK4和p27kip1的表达率分别为41.7%、54.2%和38.5%,与正常乳腺组织相比有显著性差异(P<0.001)。②cyclinD2、CDK4的表达与乳腺癌的组织学分级,核分裂数有关(P<0.001),和局部复发有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤大小、组织类型无关(P>0.05),CDK4的表达与乳腺癌的淋巴结转移,雌激素受体状态也有密切关系(P<0.01)。③p27kip1的表达缺失,与肿瘤大小、组织学分级,核分裂数,有无淋巴结转移以及局部复发均有关系(P<0.05),而且p27kip1的表达与cyclinD2、CDK4的表达呈显著负相关(P<0.01)。结论cyclinD2和CDK4的表达与乳腺癌的发生、发展有关,而p27kip1的表达缺失和CDK4的异常表达与乳腺癌的侵袭、转移及复发有关,可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。

miR-375靶向cyclinD2调节口腔鳞癌细胞株增殖及凋亡的研究

目的:探讨miR-375靶向细胞周期蛋白D2(cyclin D2)调节口腔鳞癌细胞株CAL27增殖及凋亡的作用。方法:培养CAL27细胞并转染阴性对照(NC)mimic、miR-375 mimic、NC siRNA、cyclinD2 siRNA、表达cyclinD的pcDNA3.1质粒及空白的pcDNA3.1质粒;检测细胞增殖活力OD490水平、细胞凋亡率、miR-375及cyclinD2的表达水平,验证miR-375靶向cyclinD2基因mRNA 3’UTR的作用。结果:转染miR-375 mimic后,CAL27细胞的OD490水平、cyclinD2表达水平、含有cyclinD2 mRNA 3’UTR的双荧光素酶报告基因的荧光活性降低,凋亡率增加(P<0.05);转染cyclinD2 siRNA后,CAL27细胞的OD490水平、cyclinD2表达水平降低,凋亡率增加;转染表达cyclinD的pcDNA3.1质粒后,miR-375 mimic降低OD490水平及cyclinD2表达水平、增加凋亡率的作用被逆转。结论:miR-375对口腔鳞癌细胞的增殖具有抑制作用、凋亡具有促进作用且靶向抑制cyclinD2是介导该作用的分子机制之一。

CyclinD2、BCL-2、Survivin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白D2(CyclinD2)、BCL-2、Survivin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及意义。方法选择同期89例弥漫大B细胞淋巴瘤及25例反应性增生淋巴组织作为对照。以免疫组织化学法检测CyclinD2、BCL-2、Survivin表达情况,比较弥漫大B细胞淋巴瘤及反应性增生淋巴组织中CyclinD2、BCL-2、Survivin的阳性表达率,并分析弥漫大B细胞淋巴瘤的临床病理特征。结果弥漫大B细胞淋巴瘤中CyclinD2、BCL-2、Survivin阳性表达率均高于反应性增生淋巴组织,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。CyclinD2、BCL-2、Survivin表达在弥漫大B细胞淋巴瘤患者不同年龄、性别、部位、组织类型、分化程度中比较,差异无统计学意义(P>0.05);在不同Ann Arbor分期、免疫分型、IPI指数及首次治疗不同疗效中的比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CyclinD2、BCL-2、Survivin在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中呈高表达,可作为生物恶性程度、疗效评价的参考指标。

The Expression and Significance of CyclinD2 and Bcl-2 in Diffuse Large B-cell Lymphoma

Objective:To study the expression and significance of cyclinD2 and Bcl-2 in diffuse large B-cell lymphoma.Methods:This project used immunohistochemical methods to detect the expression of cyclinD2 and Bcl-2 in 120 cases of diffuse large B-cell lymphoma and 80 cases of reactive hyperplasia of lymphoid tissue.The materials were collected from the hospital from January 2018 to 2020.In March 2015,120 patients had lymphoma tissue removed during the month of surgery.The postoperative pathological diagnosis was DLBCL.Another 80 cases of lymphoid hyperplasia(RLH)tissues were selected as controls.Results:CyclinD2 and BCL-2 expression were not statistically different in patients with diffuse large B-cell lymphoma in different ages,genders,locations,tissue types,and degree of differentiation;but statistically significant in different Ann Arbor stages,immunotypes,IPI index and first treatment efficacy.Conclusion:This research not only has important theoretical value,but also important economic value and social significance.

The Expression and Significance of CyclinD2,MPGES-1,Bcl2 in Diffuse Large B-cell Lymphoma

Objective:To study the expression and significance of cell cycle proteins CyclinD2,mPGES-1,Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma.Methods:Choose lymphoma and sexually hyper-plastic lymphoid tissues as control.Immunohistoc-hemical methods were used to detect the expression of CyclinD2,mPGES-1,and Bcl2,and to compare the positive expression rates of CyclinD2,MPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma and reactive proliferative lymphoid tissues to compare their diffusion formation.B-cell lymphoma was analyzed for its clinicopathological features.Results:The positive expression rate of CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma is higher than that in reactive proliferative lymphoid tissue,and the difference between the two is statistically significant.There was no statistical difference in CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma between patients according to the age,sex,location,tissue type and degree of differentiation.Conclusion:CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 are highly expressed in patients with diffuse large B-cell lymphoma,and can be used as reference indicators for evaluating the malignant degree and efficacy of dysplasia.

乳腺导管上皮内瘤变组织中Survivin和CyclinD2的表达及意义

目的:探讨Survivin和CyclinD2在乳腺导管上皮内瘤变(DIN)中的表达情况,寻求有助于乳腺导管上皮内瘤变诊断的分子标记。方法:通过免疫组化SP法检测20例普通型导管增生(UDH)、15例DIN1A、30例DIN1B、21例DIN1C-3组织中的Survivin和CyclinD2表达情况,并以正常乳腺组织作为对照。结果:Survivin在UDH/DIN1A、DIN1B和DIN1C-3组中的阳性率分别为0、36.6%和81.0%。DIN1B和DIN1C-3两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。CyclinD2在UDH、DIN1A、DIN1B和DIN1C-3组中的表达率分别为10%、13.3%、41.9%和76.2%,UDH、DIN1A与DIN1B和DIN1C-3比较差异有统计学意义(P<0.001),DIN1A与DIN1C-3两组比较差异亦有统计学意义(P<0.001),UDH与DIN1A比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:从正常乳腺组织到UDH、DIN1A、DIN1B及DIN1C-3的恶性转化过程中伴有Survivin和CyclinD2表达的逐渐增高,其过度表达可能是某些乳腺癌发生过程中的早期事件,Survivin和CyclinD2可作为乳腺UDH、DIN1A与DIN1B和DIN1C-3鉴别诊断的标记物。

胃癌中cyclinD_2和p27^(kipl)的表达及其意义

目的 探讨cyclinD2 、p2 7kipl的表达与胃癌发生发展的关系。方法 用免疫组化方法检测cy clinD2 和p2 7kipl在 12 0例胃癌、2 0例胃粘膜非典型增生、3 0例正常胃粘膜中的表达。结果 cyclinD2 在正常胃粘膜、非典型增生、胃癌中阳性表达率分别是 3 .3 %、10 %、和 3 4 .2 % ,胃癌与正常胃粘膜及非典型增生相比有显著性差异 (P <0 .0 1) ,p2 7kipl在正常胃粘膜、非典型增生、胃癌中表达分别是 10 0 %、90 %、和 52 .5%。胃癌与其他两组比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,p2 7kipl表达缺失和cyclinD2 胞浆阳性者与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关 (P <0 .0 1)。cyclinD2 和p2 7kipl表达呈负相关。结论 cy clinD2 和 p2 7kipl与胃癌的发生有密切关系 ,p2 7kipl的表达缺失及cyclinD2 胞浆阳性者与胃癌的进展有关 ,p2

乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征

目的研究乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征。方法采用甲基化特异性PCR(MSP),对MCF-7细胞进行Stratifin和CyclinD2基因甲基化检测;采用RT-PCR法,检测Stratifin、CyclinD2和Dnmt3b基因的mRNA表达。结果乳腺癌MCF-7细胞系中,Stratifin基因是非甲基化的,mRNA表达水平较高;CyclinD2基因完全甲基化,mRNA表达缺失;Dnmt3b基因呈明显表达。结论 Stratifin和CyclinD2基因的甲基化发生,可能下调其mRNA的转录表达,MCF-7细胞的这些分子生物学特性可为乳腺癌的表观遗传学研究提供一定的参考价值。

吴茱萸碱调节JAK2/STAT3/CyclinD1对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用

目的 探讨吴茱萸碱(EVO)调节Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)/细胞周期蛋白D1(CyclinD1)信号通路对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。方法 所有大鼠随机分为假手术组及造模组,造模组大鼠通过改良线栓法进行制备缺血性脑卒中大鼠模型,假手术组仅分离,但不插入线栓;将造模组造模成功的大鼠随机分为模型组,EVO低、中和高剂量组(分别为10、20、40 mg/kg EVO)(EVO-L、M、H组),EVO-H+AG490组(40 mg/kg EVO+5 mg/kg AG490)。干预结束后,Zea Longa评分检测神经功能缺损;干湿法测定脑水肿;TCC检测脑梗死体积百分比;TUNEL检测细胞凋亡;尼氏染色检测神经元损伤;Western blot检测JAK2/STAT3/CyclinD1信号通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组尼氏体染色较浅,数目减少,神经元形态不一,Zea Longa评分、脑水肿、脑梗死体积百分比、神经元凋亡显著增加,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、CyclinD1表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,EVO-L组、EVO-M组、EVO-H组神经元损伤逐渐恢复,Zea Longa评分、脑水肿、脑梗死体积百分比、神经元凋亡显著降低,p-JAK2/JAK2、pSTAT3/STAT3、CyclinD1表达明显增加,呈剂量依赖性(P<0.05);AG490逆转了EVO-H对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。结论 EVO对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用,可能与JAK2/STAT3/CyclinD1信号通路激活有关。

骨髓间充质干细胞移植对胃癌模型大鼠肿瘤细胞的影响

背景：近年来研究发现,骨髓间充质干细胞对肿瘤组织具有靶向性迁移的特性。目的：探讨骨髓间充质干细胞移植对大鼠胃癌细胞趋向性及增殖分化的影响。方法：SD大鼠皮下注射胃癌细胞株SGC-7901建立胃癌模型,建模成功后细胞移植组腹腔注射荧光标记培养的骨髓间充质干细胞（1×10~7个/只）,移植后10 d采用荧光Di I标记检测骨髓间充质干细胞的靶向性,荧光实时PCR和Western blot检测胃癌组织中细胞周期素D2 mRNA和蛋白的表达,原位末端标记法染色观察胃癌细胞凋亡情况。结果与结论：（1）骨髓间充质干细胞成功靶向到大鼠胃癌组织;（2）细胞移植组的细胞周期素D2 mRNA及其蛋白的表达水平均显著高于模型组（P〈0.05）;（3）与模型组比较,细胞移植组阳性凋亡细胞明显减少（P〈0.05）;（4）结果表明,骨髓间充质干细胞具有靶向迁移到胃癌组织的能力,骨髓间充质干细胞移植可促进胃癌肿瘤细胞的增殖。

p57^(kip2)和cyclin D2在人脑胶质瘤中的表达和临床意义

目的:探讨p57kip2蛋白和CyclinD2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测p57kip2,CyclinD2在55例人脑胶质瘤和10例正常脑组织中的表达.结果:在55例胶质瘤中,p57kip2蛋白阳性率为38.2%(21/55),低于正常脑组织(80%,P<0.05).低度恶性(I～II级)与高度恶性(III～IV级)间及不同生存时间组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05).CyclinD2蛋白阳性率为52.7%(29/55),高于正常脑组织(0%,P<0.01).脑胶质瘤不同恶性程度组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05),不同生存时间组间差异无统计学意义(P>0.05).p57kip2蛋白的表达与CyclinD2蛋白的表达无相关(P>0.05).结论:p57kip2蛋白和CyclinD2蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用.且与肿瘤的分化程度,预后相关.

人脑胶质瘤中cyclin D2的表达及其与细胞增殖的关系

目的 :研究人脑胶质瘤中cyclinD2蛋白的表达与肿瘤恶性程度的关系及其对细胞增殖活性的影响 .方法 :采用免疫组化方法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常人脑组织标本中cyclinD2和PCNA的表达水平 ,计算两者标记指数 ,统计分析两者之间及其与胶质瘤病理分级之间的关系 .结果 :正常脑组织中无cyclinD2或PCNA表达 .随着人脑胶质瘤病理分级的增高 ,cyclinD2平均标记指数明显升高 .在WHO分级Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤中 ,Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ级与Ⅳ级、Ⅰ级与Ⅲ级以及低度恶性胶质瘤 (Ⅰ～Ⅱ )与高度恶性胶质瘤 (Ⅲ～Ⅳ )之间标记指数存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) .类似cyclinD2 ,PCNA标记指数随脑胶质瘤恶性程度增高而升高 .cyclinD2与PCNA的平均标记指数呈明显正相关 (r =0 .6 5 4 ,P <0 .0 1 ) .结论 :人脑胶质瘤中cyclinD2的表达与细胞增殖活性和病理学分级密切相关 ,很可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化 .

Flavopiridol诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的分子机制

目的探讨flavopiridol诱导多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡的分子机制。方法以TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot测定Mcl-1、CyclinD2、Bcl-XL、Bag-1和XIAP等。结果在临床剂量的flavopiridol浓度下,MM细胞系在加药后3 h内出现快速凋亡。不同剂量的flavopiridol均可快速诱导Mcl-1表达下调和CTD磷酸化的抑制,flavopiridol抑制CTD磷酸化的剂量与其抑制Mcl-1表达的剂量密切相关。该剂量也是其诱导MM细胞凋亡的剂量。转录抑制因子放线菌素D及flavopiridol均能抑制Mcl-1表达,并可诱导原代MM细胞凋亡。结论转录抑制因子放线菌素D和CDK抑制剂flavopiridol诱导MM细胞凋亡可能与其抑制CTD磷酸化,从而抑制Mcl-1的mRNA以及蛋白质水平有关。

细胞周期素D2和p27在BCR/ABL调节细胞周期中的作用

BCR/ABL在慢性粒细胞白血病 (CML)的发病中有重要作用 ,现在认为细胞周期的失控与癌症的发生密切相关。本文综述了BCR/ABL对细胞周期调控的影响 ,细胞周期素D2 (cyclinD2 )和p2 7在其中发挥的重要作用和机制及可能在治疗方面的应用前景。

一种对白血病和多发性骨髓瘤表现出显著治疗活性的新型细胞周期素D反向激活抑制剂

细胞周期素D（含Cyclin D1，D2，D3）是细胞周期的早期调控因子，几乎在所有的多发性骨髓瘤细胞中高度表达（Hurtetal，CancerCell，2004）。这种异常表达与病人的耐药性和不良预后有很大的关系。而对细胞周期素D的抑制能有效地控制肿瘤细胞的增殖。为了寻找新的cyclinD小分子抑制剂，我们设计了以CyclinD2启动子驱动的荧光素酶为报告基因的筛选系统并用该系统对Maybridge（Cornwall，UK）化学文库进行了筛选，

雄激素对卵巢颗粒细胞cyclin D2 mRNA表达的影响

目的 :探讨是否过量雄激素可阻断FSH调节卵巢颗粒细胞cyclinD2mRNA表达的功能 ,来抑制颗粒细胞增殖。方法 :未发育成熟小鼠的颗粒细胞 ,被DHT(dihydrotesterone) ,forskolin和DMSO处理。Northernblot ,测定细胞中CyclinD2mRNA的表达。结果 :颗粒细胞单独被forskolin处理后 ,cyclinD2mRNA的表达显著高于对照组。DHT处理后 ,cyclinD2mRNA的表达明显被抑制 ,并随浓度的增加 ,其抑制作用也增强。细胞被DHT和forskolin共同处理后显示 ,DHT可明显抑制forskolin的作用。结论 :过量的雄激素可影响颗粒细胞的正常增殖通道 ,即cAMP/PKA/cyclinD2的通道 ,使细胞内cyclinD2的表达降低 ,颗粒细胞的增殖速度减慢 。

幽门螺杆菌对肝细胞系HepG2 cyclinD1,PCNA mRNA表达的影响

目的:研究幽门螺杆菌(H pylori)处理对肝细胞系HepG2 cyclinD1,PCNA mRNA表达的影响. 方法:将H pylori与HepG2共同培养1 h、3 h、6 h、12 h 和24 h,采用半定量RT-PCR方法分析共培养不同时间后HepG2 cyclinD1,PCNA mRNA的表达水平. 结果:CagA+ H pylori与HepG2细胞共同孵育1 h后,即可见cyclinD1 mRNA表达升高,3h达高峰,约为对照的4.0倍(P<0.01);共同孵育3 h后即可见PCNA mRNA表达升高,6 h达高峰,约为对照的2.0倍(P<0.05).而CagA- H pylori 和HepG2细胞共同孵育后,未见两基因的表达升高. 结论:CagA+ H pylori能诱导HepG2 cyclinD1,PCNA mRNA表达升高,提示其在肝癌的发生中起一定作用.

miR-206对三阴性乳腺癌细胞的增殖抑制作用及初步机制研究

目的探讨miR-206对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响及其作用机制。方法转染miR-206mimic和miR-NC至乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-206相对表达水平;应用MTT法、克隆形成实验检测miR-206对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测miR-206对细胞周期的影响;Western blotting进一步验证miR-206对周期相关蛋白CyclinD2的影响。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-206 mimic转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞48h后miR-206的相对表达水平为10.2±1.5。MTT法检测结果显示,miR-206 mimic转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞6、24、48、72、96h后的增殖抑制率分别为(0±0.01)%、(0.12±0.03)%、(0.21±0.08)%、(0.28±0.11)%和(0.39±0.16)%;克隆形成实验结果显示,miR-206 mimic和miR-NC转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞2周后的克隆数目分别为106±35和843±143,差异具有统计学意义(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,miR-206 mimic转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞48h后,明显地阻滞细胞周期于G1期;Western blotting检测显示miR-206表达下调了细胞周期蛋白CyclinD2的表达。结论 miR-206明显抑制了三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖,其机制可能与下调细胞周期蛋白CyclinD2的表达有关,这将成为乳腺癌临床治疗一个新的靶点。

p57^(kip2)和cyclinD1在皮肤鳞癌中的表达及意义

目的检测p57kip2和cyclinD1在皮肤鳞癌中的表达,探讨p57kip2和cyclinD1的表达水平在皮肤鳞癌发生发展中所起的作用。方法用免疫组化PV-9000法检测p57kip2和cyclinD1在皮肤鳞癌和正常皮肤中的表达。结果p57kip2在皮肤鳞癌中的表达水平显著低于正常皮肤(P<0.05);cyclinD1在皮肤鳞癌中的表达显著高于正常皮肤(P<0.01);在皮肤鳞癌中,p57kip2和cyclinD1的表达呈负相关(P<0.05)。结论p57kip2的低表达及cyclinD1的高表达可能在皮肤鳞癌的发生发展中起重要作用。