miR-375靶向cyclinD2调节口腔鳞癌细胞株增殖及凋亡的研究

目的:探讨miR-375靶向细胞周期蛋白D2(cyclin D2)调节口腔鳞癌细胞株CAL27增殖及凋亡的作用。方法:培养CAL27细胞并转染阴性对照(NC)mimic、miR-375 mimic、NC siRNA、cyclinD2 siRNA、表达cyclinD的pcDNA3.1质粒及空白的pcDNA3.1质粒;检测细胞增殖活力OD490水平、细胞凋亡率、miR-375及cyclinD2的表达水平,验证miR-375靶向cyclinD2基因mRNA 3’UTR的作用。结果:转染miR-375 mimic后,CAL27细胞的OD490水平、cyclinD2表达水平、含有cyclinD2 mRNA 3’UTR的双荧光素酶报告基因的荧光活性降低,凋亡率增加(P<0.05);转染cyclinD2 siRNA后,CAL27细胞的OD490水平、cyclinD2表达水平降低,凋亡率增加;转染表达cyclinD的pcDNA3.1质粒后,miR-375 mimic降低OD490水平及cyclinD2表达水平、增加凋亡率的作用被逆转。结论:miR-375对口腔鳞癌细胞的增殖具有抑制作用、凋亡具有促进作用且靶向抑制cyclinD2是介导该作用的分子机制之一。

乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征

目的研究乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征。方法采用甲基化特异性PCR(MSP),对MCF-7细胞进行Stratifin和CyclinD2基因甲基化检测;采用RT-PCR法,检测Stratifin、CyclinD2和Dnmt3b基因的mRNA表达。结果乳腺癌MCF-7细胞系中,Stratifin基因是非甲基化的,mRNA表达水平较高;CyclinD2基因完全甲基化,mRNA表达缺失;Dnmt3b基因呈明显表达。结论 Stratifin和CyclinD2基因的甲基化发生,可能下调其mRNA的转录表达,MCF-7细胞的这些分子生物学特性可为乳腺癌的表观遗传学研究提供一定的参考价值。