蛴螬提取物诱导人肺癌A549细胞凋亡的机制研究

目的:观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:采用MTT法检测蛴螬提取物对人肺癌A549细胞的生长抑制率;用HE染色方法观测凋亡细胞的形态学变化;运用免疫组织化学SP法检测用药前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达改变。结果:用蛴螬提取物处理的人肺癌A549细胞生长抑制率明显高于对照组;施药早期细胞出现凋亡形态学变化;A549细胞经蛴螬提取物处理后CyclinD1表达均下降。结论:蛴螬提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制与下调CyclinD1的表达有关。

细胞周期调控因子在分化型甲状腺癌中的表达及相关性研究

目的:研究细胞周期调控因子p16、p27和CyclinD1在分化型甲状腺癌中的蛋白表达情况,及其在分化型甲状腺癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化S-P法对40例分化型甲状腺癌包括甲状腺乳头状癌和滤泡癌以及30例甲状腺腺瘤组织中p16、p27和CyclinD1的蛋白表达情况进行检测。结果:p16、p27和Cy-clinD1三种蛋白在40例分化型甲状腺癌的阳性表达率分别为57.5%、70.0%和62.5%;p16蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移之间具有相关性(P<0.05);p27蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的大小及包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);CyclinD1蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);p16的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.283);p27的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.279)。结论:p16、p27和CyclinD1三种蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。

应用组织芯片技术观察HPV16/18相关外阴尖锐湿疣DNA倍体类型及cyclinD1、P53、P21^(WAF1)蛋白的表达

目的 : 探讨HPV16 18阳性的尖锐湿疣DNA倍体和cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 蛋白表达的改变。方法 : 使用组织芯片技术和DNA计算机图像分析方法观察 2 2 7例外阴尖锐湿疣和 2 1例外阴鳞状细胞癌的DNA倍体类型 ,并进行cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 免疫组化研究。结果 : HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣 2C细胞占 (4 4 .36± 6 .6 6 ) % ,3C～ 4C占 (37.72± 8.4 3) % ,5C占 (15 .2 1± 6 .33) % ,>5C占 (2 .71± 1.0 4 ) %。 98例HPV16 18阳性尖锐湿疣中 ,cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 阳性者分别为 39例 (39.80 % )、5 2例 (5 3.0 6 % )、4 7例(4 7.96 % )。HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣与阴性者差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 : HPV16 18阳性外阴尖锐湿疣DNA倍体图像分析显示高度增殖活性 ,cyclinD1、P5 3高表达 ,P2 1WAF1

P27 Cyclin D_1在胆囊癌中的表达及意义

目的研究p2 7、CyelinDl 在胆囊癌中的表达情况 ,并探讨它们与肿瘤分化程度及生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学S -P法检测 10例胆囊炎及 32例胆囊癌标本p2 7及CyelinDl的表达状况。结果p2 7在胆囊炎上皮中为低表达 ,在胆囊癌中少部分表现出高表达。而CyelinDl 在胆囊炎上皮中低表达 ,而在胆囊癌中大部分呈现高表达 ,两者间差异显著 (P <0 .0 5 )。结论CyclinDl在胆囊癌的发生发展中有重要作用 ,且与患者预后有关。

肝癌细胞H22培养上清液对鼠细胞L929细胞周期、CyclinD1、P27蛋白表达的影响

目的:探讨小鼠肝癌细胞H22培养上清液对鼠L929细胞细胞周期、CyclinD1、P27蛋白表达的影响。方法:采用肝癌细胞H22的培养上清液诱导正常成纤维细胞L929,诱导细胞为L929-H22。采用流式细胞术检测L929细胞与L929-H22细胞细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测2种细胞中CyclinD1、P27蛋白的表达。结果:与L929相比,L929-H22G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(P<0.05),增殖指数PI明显升高(P<0.05);CyclinD1的表达增强(P<0.05),P27的表达减弱(P<0.05)。结论:小鼠肝癌细胞培养上清液诱导的细胞CyclinDl、P27的表达及细胞周期分布与正常细胞不同,CyclinDl表达增强和P27表达减弱可能在细胞恶性转化过程中发挥作用。

Cyclin D_1和p53基因与结肠癌相关性研究

目的:探讨癌基因Cyclin D1、抑癌基因p53与结肠癌发展的生物学行为的关系。方法:采用免疫组化LSAB法测定80例结肠癌、50例结肠黏膜不典型增生组织和80例结肠正常黏膜组织。结果:Cyclin D1在正常结肠组织中无表达,在结肠不典型增生组织阳性率为20%,在结肠癌组织中为40.16%。p53在正常结肠组织中的阳性率为96.25%,结肠不典型增生组织为92%,在结肠癌组织中为47.54%(P<0.05)。Cy-clin D1与p53呈负相关(P<0.05)。结论:Cyclin D1的高表达、p53的低表达在结肠癌的发展中起着重要作用,并有可能成为研究结肠癌发展的有用指标。

原位套细胞淋巴瘤:一种意外发现的具有惰性临床过程的病变

CyelinD1阳性的B细胞可偶尔出现于反应性淋巴滤泡的套区，此时称为“原位套细胞淋巴瘤”。目前该病变的临床意义还不清楚。本文对23例初诊为“原位套细胞淋巴瘤”的病例进行临床和病理学特征分析，其中也包括SOX11的表达情况。结果发现17／23例符合原位套细胞淋巴瘤的诊断标准，大部分病例是在反应性淋巴结中偶然被发现。

CyclinD1和p27蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达

目的探讨膀胱移行细胞癌中cyclinD1和p27蛋白的表达及其意义。方法采用免疫组化技术检测48例膀胱癌组织中cyclinD1与p27蛋白的表达。结果cyclinD1及p27表达在膀胱移行细胞癌和正常组织之间各有统计学差异,cyclinD1和p27与膀胱肿瘤分期、分级相关。cyclinD1与p27蛋白呈反方向表达。结论cyclinD1与p27有助于评估膀胱移行细胞癌的生物学行动。

p16、p21^(WAF1/CIP1)、CyclinD1表达与乳腺癌病理特征

目的 探讨乳腺癌组织分型、分级等临床病理特征和ER、PR与p16、p2 1WAF1/CIP1和CyclinD1蛋白表达的关系。方法 进行免疫组化染色法检测 5 0例术前均未作放化疗的乳腺癌组织中p16、p2 1WAF/CIP1和CyclinD1蛋白的表达。结果 p16蛋白表达阳性率为 5 8 0 % (2 9/ 5 0 ) ,在浸润性导管癌Ⅱ级与Ⅲ级之间p16蛋白表达有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,阳性率分别为 75 0 %、41 7%。p16、p2 1CyclinD1蛋白表达 ,p2 1蛋白表达阳性率为 30 0 % (15 / 5 0 ) ,p2 1表达阳性者与阴性者相比 ,淋巴结转移率有显著性差异 (P <0 0 5 )。CyclinD1蛋白表达阳性率为 32 0 % (16 / 5 0 )。与临床病理特征、ER和PR未见相关 (P >0 0 5 )。结论 p16和p2 1蛋白可作为判断肿瘤生物学行为的参数。

没药倍半萜抑制前列腺癌细胞的增殖活性初探

目的初步探讨没药两个倍半萜单体化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制。方法应用倍半萜单体化合物处理人前列腺癌细胞株LNCaP后,MTT检测化合物对细胞增殖的影响;流式细胞术进一步分析细胞周期时相的变化;反转录PCR(RT-PCR)检测细胞周期相关蛋白p21WAF/CIP1(p21)和cyclinD的表达水平。结果两个没药倍半萜单体化合物对前列腺癌细胞均有显著的抑制活性(P<0.001),使细胞停滞于G0/G1期;并且能在mRNA水平诱导p21的表达,同时降低cyclinD的表达。结论没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞增殖,可能是通过上调p21的表达、下调cyclinD蛋白的表达来实现的。

多孔中空柱状钛种植体复合牛骨形成蛋白的实验研究 Ⅰ生物力学测试

目的 :通过抗拔力和抗扭转力测试 ,评价种植体的生物力学性能。方法 :将多孔中空柱状钛种植体与牛骨形成蛋白复合 (B组 )植入狗的股骨中 ,以实心柱状种植体 (A组 )及单纯多孔中空柱状钛种植体(C组)为对照 ,分别于植入后2 ,4 ,8 ,16 ,24周处死动物 ,进行抗拉拔力及抗扭转力测试。结果 :在各时间点 ,B组的剪切强度都明显高于A组 ,除植入后24周 ,B、C两组的剪切强度无明显差异外 ,其余时间点B组都明显高于C组;扭矩值随时间增大 ,各时间点上 ,B组均大于A、C两组 ,C组大于A组。结论 :骨形成蛋白与中空多孔种植体复合 ,可提高种植体的力学性能 ,缩短种植周期 ,有重要的临床应用价值。

冷冻治疗对荷瘤Wistar大鼠生存期的影响和机制

[目的]研究冷冻治疗对荷瘤Wistar大鼠生存期的影响和机制。[方法]建立大鼠C6脑胶质瘤模型,冷冻治疗后免疫组化检测p27kip1和CyclinD1蛋白的表达,观察动物生存期。[结果]与未实施冷冻治疗对照组比较,冷冻治疗可延长动物生存期,上调p27kip1蛋白的表达,下调CyclinD1蛋白的表达。p27kip1蛋白阳性表达率与荷瘤鼠生存期呈正相关,CyclinD1蛋白的阳性表达率与荷瘤鼠生存期呈负相关。p27kip1蛋白阳性表达率和CyclinD1蛋白的阳性表达率呈负相关。[结论]冷冻治疗可延长动物生存期,其机制同上调p27kip1蛋白和下调CyclinD1蛋白的表达有关。

CyclinD1干扰RNA对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的作用

[目的]探讨干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2的CyclinD1基因表达以及细胞增殖、凋亡的影响。[方法]将表达CyclinD1 siRNA的重组质粒pU6-CyclinD1-siRNA导入HepG2细胞,同时设立阴性对照空载体转染组及空白对照组。倒置荧光显微镜观察G418筛选稳定转染的细胞。MTT法检测细胞生长增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、Western Blot方法检测CyclinD1沉默效果。[结果]与阴性对照组及空白对照组相比,转染组细胞生长速度减慢,凋亡率上升,CyclinD1 mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P均<0.05)。[结论]RNA干扰技术可有效抑制细胞增殖,导致细胞凋亡,使CyclinD1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降。