不同程度邪毒证H22荷瘤小鼠肾上腺皮质酮合成酶及其转录因子表达的差异

目的:探讨小鼠荷瘤状态下不同程度邪毒证肾上腺皮质酮合成与分泌的差异。方法:在220只昆明种小鼠右腋下接种H22肝癌腹水细胞,复制肝癌荷瘤小鼠模型,于接种肿瘤后第9天进行小鼠四诊检测,依据邪毒程度将各荷瘤小鼠排序,并排除气血阴阳虚证小鼠,筛选邪毒壅盛证组18只、邪毒微弱证组18只,并以18只正常小鼠为对照组。第11天处死各组小鼠,剥离肿瘤称瘤重,用ELISA方法检测血浆激素含量;应用实时荧光定量PCR检测各组小鼠肾上腺组织Cyp11b1、Cyp11a1、Star、Fdx1、Fdxr、Mc2r、Nr4a1、Nr5a1、Nr0b1、Gata6基因mRNA表达,并以Gapdh和β-actin两个基因作内参照;应用Western blot方法检测St AR和CYP11A1蛋白表达。结果:邪毒壅盛证小鼠肿瘤质量明显大于邪毒微弱证组(P<0.05);不同程度邪毒证肝癌小鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)均高于正常组(P<0.05);皮质酮合成最后一步关键酶Cyp11b1、促肾上腺皮质激素受体(Mc2r)及铁氧还蛋白还原酶(Fdxr)基因表达在邪毒壅盛证组显著升高(P<0.05);转录抑制因子Nr0b1在邪毒壅盛证组明显低于邪毒微弱证组(P<0.05);转录因子Nr4a1、Nr5a1和Gata6基因表达在不同程度邪毒证肝癌小鼠均高于正常组(P<0.05);St AR蛋白表达在不同程度邪毒证肝癌小鼠均显著升高(P<0.05)、且邪毒壅盛证组显著高于邪毒微弱证组(P<0.05)。结论:小鼠肿瘤形成后,邪毒程度越重者,为适应机体慢性应激反应,其肾上腺皮质功能呈现失代偿性增加,导致垂体与肾上腺皮质激素储备功能减少,可能与邪毒壅盛证荷瘤小鼠带瘤生存期缩短有关,提示肿瘤早期治疗也需注意扶助正气。