贲门癌组织CYP1A1和CYP2E1基因多态变化

目的 :对河南贲门癌高发区林州市贲门癌组织代谢酶基因CYP1A1与CYP2E1的多态性进行检测 ,更深入了解该地区贲门癌变易感性分子机制。方法 :利用“病例 对照”设计 ,采用PCR RFLP和PCR SSCP方法对 19例贲门腺癌和 72例正常对照组织中代谢酶基因CYP1A1、CYP2E1的多态型进行检测。结果 :贲门腺癌与正常对照组织中 ,CYP2E1在 5’侧翼区域的RsaI基因多态 (c2 )分别占 2 6 %和 36 % ,c2基因变体能够降低个体对贲门癌的易感性(OR =0 .5 1) ;CYP2E1的DC和CC基因型合并在一起分别为 32 %和 4 8% ,C基因变体也能够降低个体对贲门癌的易感性 (OR =0 .5 0 ) ;CYP1A1的TC和CC合并在一起分别占 5 3%和 6 7% ,C等位基因并未影响个体对贲门癌的易感性 (OR =0 .80 ) ;2种组织中均未在CYP1A1基因第 7内含子内检测出Ile/Val基因多态。结论 :CYP1A1基因多态对贲门癌易感性无明显影响 。

卵巢癌CYP1A1基因的MspI位点多态性分析

目的：检测卵巢癌患者CYPlAl基因的MspI位点多态性，探讨CYPlAl基因MspI位点多态性与患者临床资料的关联。方法：术后病理证实为卵巢恶性肿瘤患者81例，抽取手术前空腹外周血，进行CYPlAl的MspI位点多态性检测；对81例不同基因型卵巢癌患者相应的临床资料进行比较。结果：81例卵巢癌患者CYPlAl基因中，A基因型（野生型T／T）47例（58％），B基因型（杂合型T／C）25例（31％），C基因型（突变纯合型C／C）9例（11％）。12～29岁患者基因型频数分布为A基因型1例（2．1％），B基因型5例（20.O％），C基因型0例；30～49岁患者基因型频数分布为A基因型12例（25．5％），B基因型8例（32．0％），C基因型3例（33．3％）；50～69岁患者基因型频数分布为A基因型31例（66．6％），B基因型8例（32．0％），C基因型4例（44．4％）；≥70岁患者基因型频数分布为A基因型3例（6．4％），B基因型4例（16．0％），C基因型2例（22．2％）。各基因型患者的发病年龄比较差异均具有显著性（P〈O．05）。上皮性肿瘤A基因型40例（85．1％），B基因型15例（60．0％），C基因型9例（100％），3种基因型卵巢病理类型的构成比比较差异具有显著性（P〈O．05）。结论：卵巢癌患者存在CYPlAl基因MspI多态性；卵巢癌的发病年龄与CYPlAl基因型有关；卵巢上皮性恶性肿瘤发生率A基因型（野生型T／T）高于其他基因型；携带突变等位基因c的患者卵巢非上皮性肿瘤的比例呈增加趋势。

基因多态性与血清p53蛋白过表达的关系

目的 探讨细胞色素P4 5 0 1A1(cytochromeP4 5 0 1A1,CYP1A1)和谷胱甘肽转硫酶M1(GlutathioneS -trans ferasesM1,GSTM1)基因多态性与血清p5 3蛋白过表达之间的关系。方法 以 12 7名血清p5 3蛋白过表达阳性者为病例组 ,以 12 7名血清p5 3蛋白阴性者为对照组 ,分别采用多重差异PCR(multi-differentialPolymerasechainreaction ,MD -PCR)检测外周血淋巴细胞GSTM1的缺失和采用等位特异PCR(allele -specificPoly -merasechainreaction ,AS -PCR)检测外周血淋巴细胞CYP1A1基因的等位变异 ,采用 χ2 检验来比较GSTM1和CYP1A1的多态性的差异。结果 单独分析CYP1A1和GSTM1基因多态性在 2组中的分布没有显著性差异 (P >0 0 5 ) ,但GSTM1基因缺失型即GSTM1(- )和CYP1A1基因纯合突变型即CYP1A1Val/Val基因型联合增加了血清p5 3蛋白过表达的危险性 (P <0 0 5 ) ,OR及 95 %CI为 3 86 (0 95～ 15 5 9)。结论 CYP1A1和GSTM1的等位变异联合增加了血清p5 3蛋白过表达的危险性。

基于网络药理学的概念探讨烟焦油的致癌作用机理

目的：采用网络药理学的概念探讨烟焦油致癌作用的机理，主要探讨烟焦油中的致癌成分B（a）P通过代谢酶激活以及激活后的产物的致癌途径，绘制出B（a）P致癌网络，为寻找抗癌新药提供有效的导航图。方法：通过国内、外近几年的对B（a）P致癌机理文献的收集整理绘制出B（a）P的致癌机理图：（1）B（a）P代谢图构建：B（a）P经过药物代谢酶CYPlAl、CYPlBl代谢后转化成二氢二醇环氧苯并芘（BaP-7，8-dihydrodiol-9，10-expomde，BPDE）。

浅谈蛋白免疫印迹技术方法的改进

目的：探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法。方法：以小鼠为研究对象，采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYPlAl的表达水平。结果：不仅缩短实验时间，而且获得的目标条带清晰，非特异性的本底显色浅。结论：改良的蛋白免疫印迹技术一定程度上能够很好的分离目标蛋白，降低本底，获得比较满意的实验结果，有利于对蛋白质的进一步分析研究。

2,3,7,8-TCDD对B淋巴瘤细胞株CH12.LX抗体分泌功能的毒性效应及机制研究

目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对B淋巴细胞株CH12.LX的抗体分泌功能的毒性效应,及其可能的受体机制。方法以B淋巴细胞株CH12.LX为细胞模型,以ELISA法检测系列浓度TCDD处理对LPS活化CH12.LX的IgM分泌功能的影响,以RT-PCR和Western blot法检测CH12.LX细胞内芳香烃受体(AhR)的表达水平,以及TCDD对细胞色素P450Cyp1a1的诱导效应。结果较低浓度的TCDD(0.03nmol/L)即对CH12.LX的IgM分泌能力产生了显著的抑制效应(P<0·05),同时TCDD(10nmol/L)可显著诱导CH12.LX细胞内Cyp1a1 mRNA的表达(P<0·05),并于CH12.LX细胞内发现AhR有一定水平的表达。结论TCDD对B淋巴细胞株CH12.LX存在显著的抗体分泌抑制效应;同时,推测TCDD的这一免疫毒性效应主要可能由AhR介导。

CYP1A1和CYP1A2基因多态性与汉族女性乳腺癌的关系

目的 探讨CYP1A1基因MspⅠ位点与CYP1A2基因C734A位点多态性与汉族女性乳腺癌的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术和限制性核酸内切酶酶切的方法,检测2011年9月至2012年8月在四川省医学科学院四川省人民医院确诊的144例女性乳腺癌患者（乳腺癌组）和152例同期健康体检正常女性（对照组）CYP1A1基因MspⅠ与CYP1A2基因C734A多态性位点的基因型,用χ2检验比较两组等位基因频率的差异.结果 在乳腺癌组与对照组中,CYP1A1基因MspⅠ位点T等位基因频率分别为0.73和0.65,两者差异有统计学意义（χ2=4.94,P=0.03）,C等位基因与T等位基因相比,乳腺癌发病风险OR为0.67 （95%CI：0.47～0.96）;CYP1A2基因C734A位点C等位基因频率分别为0.26和0.29,两者差异无统计学意义 （χ2=0.63,P=0.43）.将乳腺癌组按照ER、PR表达与否进一步分组后,CYP1A1基因MspⅠ与CYP1A 2基因C734A 2个多态性位点的等位基因频率在ER（＋）与ER（-）组之间以及PR（＋）与PR（-）组之间差异均无统计学意义[ER（＋）组比ER（-）组：χ2=0.34、0.01;PR（＋）组比PR（-）组：χ2=0.60、0.68;P均〉0.05].结论 汉族女性CYP1A1基因MspⅠ位点多态性与乳腺癌相关联.

KRAS、FCGR、CYP3A5与CYP1A1检测对转移性结直肠癌化学靶向药物临床疗效预测作用的研究

目的研究鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）、FCG受体（FCGR）、细胞色素P450—3A5（CYP3A5）、CYP1A1基因与转移性结直肠癌（mCRC）患者化疗疗效的动态关系，探讨其对临床疗效的预测作用。方法收集采用西妥昔单抗（C225）联合卡培他滨联合奥沙利铂（CapeOx）化疗，且治疗前实施KRAS基因检测所证实的KRAS野生型结直肠癌患者12例，对每例病例实施FCGR、CYP3A5、CYP1A1基因的突变检测，运用免疫组织化学染色法（sP）检测第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）在结直肠癌组织与对应的癌旁组织中的表达情况，分析FCGR、CYF3A5、CYP1A1突变和PTEN表达与生存期的关系。结果12例KRAS野生型患者中，检测到FCGR的突变率为16．7％，CYPA5的突变率为25％，CYPIAI的突变率为16．7％。PTEN主要在细胞核内表达，呈黄褐色；在癌旁组织内完全表达，表达率为100％；在病灶组织内的表达率为41．7％；PTEN在病灶组织中表达降低或缺失。KRAS、FCGR、CYP3A5、CYP1A1均为野生型的患者对C225联合CapeOx化疗的有效（CR＋PR）反应率为80％，但存在FCGR、CYP3A5、CYP1A1突变患者的有效（CR＋PR）反应率分别为0、33．6％以及50．0％（P〈0．05）。PTEN表达阳性的患者有效（CR＋PR）反应率为50％，明显高于PTEN表达阴性的患者（有效反应率37．5％，P〈0．05）。KRA^FCGR／CYP3AS／CYP1A1野生型患者无进展生存期、总生存期分别为15．56、25．03个月，明显大于FCGR、CYP3A5、CYP1A1突变患者无进展生存期、总生存期的8．12、19．21个月（均P〈0．05）。PTEN阳性表达患者无进展生存期、总生存期分别为9．13、24．25个月，明显大于PTEN阴性表达患者无进展生存期、总生存期的7．87、18．74个月（均P〈0．05）。结论FCGR、CYP3A5、CYP1A1突变和PTEN表达的缺失明显影响C225联合CapeOx化疗的临床治疗效果及生存期，可用于mCRC临床疗效及预后的预测。