CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激及凋亡机制

目的:研究CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激及凋亡的作用机制。方法:HL-7702细胞用RPMI-1640培养,分为正常对照组、铝负荷组、MK-571+铝组,分别给予相应药物干预后,用MTT法检测细胞活力,确定CysLTR1抑制剂(MK-571)给药浓度。采用细胞流式技术检测各组细胞凋亡的情况,运用试剂盒检测各组细胞中的ALT、AST水平,SOD和MDA含量。运用WB技术测定各组细胞中Caspase3、Caspase9、Bcl-2和BAX的蛋白表达。结果:给予MK-571(3nmol/L)可以提高铝负荷L02细胞生存率(P<0.01),并降低铝负荷L02细胞凋亡指数(P<0.01),降低铝负荷细胞中ALT和AST水平(P<0.01),减少MDA的含量(P<0.01),同时提高SOD的活力(P<0.01)。MK-571还可以下调铝负荷细胞中Caspase3、Caspase9和BAX蛋白的表达(P<0.05和P<0.01),上调Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论:CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激,影响细胞凋亡机制,保护铝负荷肝细胞凋亡。

蠲哮汤对哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA的影响

目的:探讨疏利气机、涤痰行瘀方蠲哮汤对哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA的影响。方法:将189只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、孟鲁司特钠组(C组)、地塞米松组(D组)、蠲哮汤低、中、高剂量组(E-G组),卵蛋白氢氧化铝溶液致敏,并长期雾化吸入卵蛋白激发哮喘,A组予0.9%氯化钠溶液雾化代替,分别持续1、2、4周,各时间点处死每组大鼠9只,检测肺组织CysLTs和CysLTR1mRNA。结果:肺组织CysLTs:同时间段,与B组比较,C组、D组、F组和G组CYSLTs表达显著下调(P<0.05)。不同时间段,各药物治疗组第4周CYSLTs表达显著低于本组第2周CYSLTs表达(P<0.05)。肺组织CysLTR1m RNA:同时间段,与B组比较,C组、D组、F组和G组CysLTR1 mRNA相对表达水平均显著下调(P<0.05)。不同时间段,各药物治疗组第4周CysLTR1 mRNA表达低于本组第2周CysLTR1 mRNA表达(P<0.05)。结论:蠲哮汤干预哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA有效。蠲哮汤可能是通过影响CysLTR1 mRNA表达干预CysLTR1介导的哮喘CysLTs炎症作用达到防治哮喘的目的。

基于气道炎症及Th1/Th2免疫通路探究抗支糖浆对雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的影响

目的:基于气道炎症及Th1/Th2免疫通路探究抗支糖浆对雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的影响。方法:将90只健康SPF级雌性KM小鼠随机分为9组,即空白组(A组)、模型组(B组)、模型+抗支糖浆低剂量组(C组)、模型+抗支糖浆高剂量组(D组)、模型+孟鲁司特组(E组)、模型+雾化烟草提取物组(F组)、模型+雾化烟草提取物+抗支糖浆低剂量组(G组)、模型+雾化烟草提取物+抗支糖浆高剂量组(H组)、模型+雾化烟草提取物+孟鲁司特组(I组)。除A组外,其他各组用卵白蛋白(OVA)联合氢氧化铝凝胶致敏及OVA雾化,并给予孟鲁司特片、抗支糖浆进行药物干预。F、G、H、I组给予雾化烟草提取物。实验后进行肺组织病理检查,统计肺泡灌洗液(BALF)中细胞的分类及计数,采用ELISA法测定BALF中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、LTD4的含量,Western Blot法和RT-PCR法检测CysLTR1的蛋白和基因表达。结果:空白组支气管及肺泡结构正常,未见明显病理改变,模型+雾化烟草提取物组病理改变最为明显。与空白组相比,其余组的白细胞总数、EOS绝对计数等各项指标均增多;模型组、模型+雾化烟草提取物组IFN-γ含量减少,其中,模型+雾化烟草提取物组减少更明显(P<0.05),而IL-4、IL-5、IL-13、LTD4含量增多(P<0.05);模型组、模型+雾化烟草提取物组CysLTR1的蛋白表达水平增多,模型+雾化烟草提取物组增多更明显(P<0.05);模型组、模型+雾化烟草提取物组CysLTR1mRNA相对表达量增多,模型+雾化烟草提取物组增多更明显(P<0.05)。经药物干预后,各给药组的生理生化指标均有不同程度好转。结论:抗支糖浆可改善雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的一般病理状态,减轻雾化烟草提取物环境哮喘气道炎症,可通过调节IL-4、IL-5、IL-13、LTD4、IFN-γ的表达,恢复Th1/Th2免疫平衡状态,下调CysLTR1mRNA的表达,从而干预CysLTR1介导的哮喘CysLTs炎症通路,达到防治雾化烟草提取物环境哮喘的目的。

温肺合剂对闭塞性细支气管炎模型大鼠肺组织纤维化和半胱氨酰白三烯受体1表达的影响

目的:探讨温肺合剂对闭塞性细支气管炎(BO)模型大鼠肺组织纤维化和半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR-1)表达的影响。方法:将200只大鼠随机分为正常组、模型制备组,BO造模结束后将模型制备组大鼠随机分为模型组、温肺合剂低、中、高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组。正常组、模型组按大鼠处死时间点分为第7天、第14天、第21天、第28天,药物干预组按处死时间点分为第14天、第21天、第28天,每个亚组10只大鼠。比较各组大鼠肺系数变化情况判断肺纤维化情况;采用HE染色观察大鼠肺组织炎症及纤维损伤结果;采用蛋白质免疫印迹法观察肺组织CysLTR-1表达水平。结果:温肺合剂中、高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组肺系数显著低于模型组(P<0.01)。HE染色观察肺组织病理发现,药物干预各组实验前期病理表现与模型组类似,后期温肺合剂中、高剂量组纤维化程度小于温肺合剂低剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组。模型组CysLTR-1表达水平显著高于正常组(P<0.01)。温肺合剂高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组各时间点CysLTR-1表达水平均显著低于模型组(P<0.01),且两者之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:温肺合剂可抑制闭塞性细支气管炎模型大鼠肺组织CysLTR-1的表达,阻断CysLTs介导的炎症及纤维化。

Cys LTR-1和NEDD9在胰腺癌中的表达及与临床病理参数的关系

目的分析半胱氨酰白三烯受体1(Cys LTR-1)、神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)在胰腺癌和癌旁组织中的表达情况,及其与胰腺癌的发展关系。方法回顾性收集2015年1月至2016年10月行手术治疗的86例胰腺癌患者的癌和癌旁组织样本,分别检测样本中Cys LTR-1 mRNA和NEDD9,并对Cys LTR-1 mRNA、NEDD9的表达情况与临床病理特征的关系进行分析。结果 Cys LTR-1 mRNA和NEDD9在癌组织中的表达均显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);且胰腺癌组织中Cys LTR-1 mRNA及NEDD9的表达情况与患者肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Cys LTR-1 mRNA和NEDD9在胰腺癌组织中呈高表达,可能与胰腺癌侵袭、浸润等有关,可作为判断胰腺癌预后的分子标志物。

醒脑静提取物对脑缺血再灌注炎性损伤5-LOX-CysLTs-CysLT通路的影响

目的:通过检测缺血2h再灌22h时,实验性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织5-LOX、LTB4、LTD4、Cys LTs含量变化和Cys LTR受体在皮层和海马的表达,以期发现5-LOX通路在脑缺血再灌注损伤的作用,并探讨醒脑静对该通路的防治作用。方法:大鼠连续灌胃给药5天后,复制MCAO模型,缺血2h再灌注22h,用ELISA法检测上述时间点患侧脑匀浆中5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs的含量;用Western blot方法检测了Cys LT1和Cys LT2受体蛋白表达。结果:1大鼠脑缺血2h再灌注22h时,模型组大鼠脑匀浆中5-LOX含量与假手术组相比有明显增强,醒脑静(25mg/kg)与模型比较有明显降低,齐留通组亦出现显降低;2模型脑匀浆中LTB4与假手术相比明显增强,与模型比较,醒脑静25mg/kg组和齐留通组明显含量有所降低;3模型脑匀浆中LTD4与假手术有明显增强,与模型比较,各给药组均出现明显降低;4模型脑匀浆中Cys LTs与假手术有明显增强,与模型比较,醒脑静50mg/kg组现明显降低。结论:急性脑缺血损伤后5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs的模型含量均有不同程度增高,试验药醒脑静各剂量组和5-LOX阻断剂齐留通组可使造模组5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs含量不同程度减轻,表明醒脑静可能通过抑制花生四烯酸5-LOX途径产生抗实验性脑缺血损伤。