神经源性和白三烯依赖性炎症在上下气道过敏性疾病中的作用研究

目的探讨神经源性和白三烯依赖性炎症在上下气道过敏性疾病中的作用。方法选择雌性BALB/c小鼠39只,采用随机数字表法将小鼠分为单纯上气道变应性疾病(SU)小鼠、单纯下气道变应性疾病(SL)小鼠、联合上下气道变应性疾病(CUL)小鼠各12只和对照组小鼠3只。将SU、SL和CUL小鼠再分为模型组、神经肽P物质受体拮抗剂干预(NI)组、白三烯受体拮抗剂干预(LI)组和神经肽P物质受体拮抗剂与白三烯受体拮抗剂混合干预(NLI组),每组3只,合计12组,均给予腹腔注射致敏液400μL,并分别予以鼻腔、气管及鼻腔与气管联合滴入激发液建立相应动物模型。9个药物干预组再分别予神经肽P物质受体拮抗剂、孟鲁司特钠及受体拮抗剂与孟鲁司特钠联合行药物干预。分组后第33天对13组小鼠灌注获得鼻腔灌洗液(NLF)和肺泡灌洗液(BALF),随后过量麻醉处死并取出鼻黏膜和肺组织。采用HE染色观察小鼠鼻黏膜和肺组织嗜酸性粒细胞浸润情况,免疫组化检测小鼠鼻黏膜和肺组织中半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR1)和神经肽P物质受体(NPR)的表达水平。采用ELISA法评估NLF和BALF中半胱氨酸白三烯(CysLTs)、神经营养因子和神经递质的水平。结果与对照组比较,SU-模型组、CUL-模型组在鼻黏膜和肺组织均可见嗜酸性粒细胞明显浸润,而SL-模型组在肺组织中可见嗜酸性粒细胞浸润,NPR和CysLTR1在3个模型组的鼻黏膜和肺组织中表达水平高于对照组。在NLF中,SU-模型组、CUL-模型组CysLTs、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经激肽A(NKA)、神经激肽B(NKB)和神经肽P物质(NP)水平高于对照组,SU-NI组、SU-LI组、SU-NLI组CysLTs、BDNF、NGF、CGRP、NKA和NP水平低于SU-模型组,SU-NLI组CGRP、NP水平低于SU-NI组、SU-LI组,SL-模型组小鼠NP水平高于对照组,SL-NI组、SL-LI组和SL-NLI组NP水平低于SL-模型组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组BDNF和NGF水平低于CUL-模型组,CUL-LI组和CUL-NLI组CGRP和NKA水平低于CUL-模型组,CUL-NLI组NKA水平低于CUL-LI组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组NKB低于CUL-模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在BALF中,SL-模型组、CUL-模型组CysLTs水平高于对照组,SL-模型组NGF、CGRP、NKA、NP水平高于对照组,CUL-模型组CGRP水平高于对照组,SL-NI组、SL-LI组和SL-NLI组CysLTs、NGF、CGRP、NKA和NP水平均低于SL-模型组,SL-NLI组CysLTs水平低于SL-NI组和SL-LI组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组的CGRP水平低于CUL-模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在过敏性疾病中,上气道炎症可以通过神经源性炎症和白三烯依赖性炎症引起下气道炎症,而下气道炎症几乎不能影响上气道。NP受体或白三烯受体的拮抗作用有助于缓解气道炎症性疾病。

半胱氨酰白三烯受体CysLT_1R和CysLT_2R以及GPR17在帕金森病模型小鼠脑内的表达分布

目的:探讨MPTP小鼠帕金森病(PD)模型脑内半胱氨酰白三烯受体CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达分布特征。方法:C57BL/6小鼠连续5 d皮下注射MPTP 25 mg/kg诱导PD模型,第10 d处死动物。应用免疫组化方法,观察CysLT1R、CysLT2R和GPR17在黑质表达的变化,并用免疫双标方法进行细胞定位。结果:正常小鼠黑质中有CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达,主要表达在TH阳性多巴胺能神经元以及小胶质细胞,CysLT2R还表达于星形胶质细胞;其中,在多巴胺能神经元中91%表达GPR17,77%表达CysLT1R,52%表达CysLT2R。与对照组比较,PD模型组小鼠黑质中TH阳性细胞数显著减少;同时CysLT1R、CysLT2R和GPR17阳性细胞数以及表达CysLT1R、CysLT2R和GPR17的多巴胺细胞数均显著减少。在正常小鼠纹状体中有CysLT1R、GPR17表达,主要表达于神经元;而CysLT2R表达很少,主要表达于星形胶质细胞。PD模型组小鼠纹状体中CysLT1R、GPR17阳性细胞数减少;但CysLT2R表达升高,主要表达于增生的星形胶质细胞。结论:CysLT1R、CysLT2R和GPR17可能参与MPTP所致的小鼠PD损伤过程。

咳嗽变异性哮喘患者血清中sPLA2-X含量与CysLT、iNOS、IL-33及FeNO的关系研究

目的:研究咳嗽变异性哮喘(CVA)患者血清中sPLA2-X含量与CysLT、iNOS、IL-33及FeNO的关系,进一步研究sPLA2-X对CVA的影响。方法:选择贵州省人民医院呼吸与危重症医学科2018年6月至2019年11月门诊经确诊CVA的患者为研究对象及同期在我院健康体检中心体检的健康志愿者为对照组,分为CVA治疗前组(41例)和健康对照组23例。CVA治疗前组经规范化治疗3月后成CVA治疗后组(41例)。采用ELISA方法检测咳嗽变异性哮喘(CVA)患者血清中sPLA2-X、CysLT、iNOS、IL-33、IL-17、总IgE的含量;采用肺功能仪检测肺功能;呼出气一氧化氮检测仪检测FeNO。结果:与健康对照组相比,CVA治疗前组血清中sPLA2-X、CysLT、iNOS、IL-33的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,CVA经规范治疗后,CVA治疗后组血清中sPLA2-X、CysLT、iNOS、IL-33及总IgE显著降低,FeNO明显降低、肺功能改善,差异均具有统计学意义(P<0.05)。而CVA治疗前组血清中IL-17与健康对照组相比,无显著差异。CVA治疗前组血清中sPLA2-X含量与CysLT、FeNO、iNOS、IL-33呈正相关(r=0.854 7、0.622 9、0.644 9、0.778 9,P<0.001),IL-17与血清中sPLA2-X含量无相关性(r=0.058 5,P=0.127 6)。结论:CVA患者为支气管哮喘特殊类型,其血清中sPLA2-X与CysLT、iNOS、IL-33均显著升高,同时FeNO显著升高。经治疗后血清中sPLA2-X、CysLT、iNOS、IL-33显著降低。血清中sPLA2-X含量与CysLT、iNOS、IL-33及FeNO呈正相关。

支气管肺炎患儿血清IGF-Ⅱ、hs-CRP和LT检测的临床应用

目的:探讨了支气管肺炎患儿治疗前后血清IGF-Ⅱ、hs-CRP和LT水平的变化及临床意义。方法:应用放免法、免疫比浊法和酶联法对33例支气管肺炎患儿进行了治疗前后血清IGF-Ⅱ、hs-CRP和白三烯(leukotriene,LT)测定,并与35名正常健康儿做比较。结果:支气管肺炎患儿在治疗前血清IGF-Ⅱ、hs-CRP和LT水平非常显著地高于正常儿组(P<0.01),经治疗2周后则与正常儿组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测支气管肺炎患儿治疗前后血清IGF-Ⅱ、hs-CRP和LT水平的变化对疾病的诊断、治疗和预后判断均具有一定临床价值。

PON2与LT在儿童睡眠呼吸暂停综合征中的变化分析

目的探讨对氧磷酶2(PON2)和白三烯(LT)在儿童睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中表达的相关性及临床生物学意义,为探索OSAS细胞乏氧代谢损伤机制提供分子病理学研究基础。方法选择2015年2月至2016年6月于西安市儿童医院初诊确诊为OSAS且未经治疗的患儿32例,以及同期正常体检的儿童18例,以正常儿童群体为对照,比较PON2和LT在OSAS睡眠状态及清醒状态中的差异。结果与正常对照组相比,OSAS(睡眠状态)组中的轻度组和中重度组分别与OSAS(清醒状态)组的患儿比较,PON2和LT的表达水平差异均有统计学意义(t值分别为1.56、1.60、1.45;1.41、1.58、1.60,均P<0.05)。OSAS(睡眠状态)组整体与OSAS(清醒状态)组的PON2和LT表达水平比较差异均无统计学意义(t值分别为1.79、1.81,均P>0.05)。Spearman相关性分析显示,PON2和LT的表达水平与呼吸暂停低通气指数(AHI)分级呈正相关,r值分别为0.78和0.66,均P<0.05。结论 PON2和LT与OSAS患儿的AHI分级存在关联,并可作为独立因子辅助其诊断及分级。

稳定转染hCysLT_2受体的HEK293细胞株的构建及其受体拮抗剂的初筛

目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCysLT2基因的表达。稳定表达hCysLT2受体的HEK293细胞株,以激动剂LTD4诱导细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)增高为指标,初步筛选有拮抗作用的化合物。结果:转染后的HEK293细胞中挑选12个单克隆细胞株,11株高表达hCysLT2受体。阳性刺激物ATP为50μmol/L及LTD4 100 nmol/L能升高[Ca2+]i。AP-2100984抑制LTD4诱导的hCysLT2-HEK293细胞[Ca2+]i升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。新合成化合物DXW2、DXW3、DXW4、DXW5、DXW9、DXW25、DXW26、DXW29、DXW35在1μmol/L能显著抑制LTD4引起的[Ca2+]i升高,其中DXW4和DXW5的IC50分别为0.25μmol/L和7.5μmol/L。结论:成功构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并可用于有拮抗活性化合物的筛选。

腺样体肥大患儿腺样体组织病原菌和IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2与IL-32及其预测价值

目的分析腺样体肥大患儿腺样体组织病原菌和白细胞介素-25(IL-25)、半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR-1)、半胱氨酸白三烯受体2(CysLTR-2)、IL-32及其预测价值.方法纳入2020年3月-2023年3月菏泽市立医院收治的腺样体肥大患儿162例进行研究,术中留取腺样体表面分泌物及腺样体实体组织标本,行细菌培养,检出病原菌52例纳入研究组,未检出病原菌的110例纳入对照组;分析腺样体肥大患儿感染病原菌,分析两组临床症状评分、腺样体实体组织标本IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标单独及联合检测对腺样体肥大患儿感染病原菌检出的预测价值.结果162例腺样体肥大患儿分泌物和(或)腺样体组织共检出感染病原菌52例,共培养分离出条件致病菌68株,主要为流感嗜血杆菌(58.82%)、金黄色葡萄球菌(14.71%)、肺炎链球菌(11.76%);研究组患儿症状(鼻塞、流涕、鼻痒、喷嚏)评分更高(P<0.05);研究组腺样体实体组织标本IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32水平较对照组更高(P<0.05).将腺样体肥大患儿感染病原菌纳入阳性组,腺样体肥大患儿无感染病原菌纳入阴性组,绘制ROC曲线,曲线下面积(AUC)为0.864、0.875、0.694、0.748和0.947,联合检测价值高于单独检测.结论腺样体肥大患儿感染病原菌检出以流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌为主,合并感染的患儿临床症状更明显,腺样体组织中IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32表达水平升高,且联合检测有助于腺样体肥大患儿感染的诊断.

槲皮素抗大鼠速发型过敏反应

目的研究槲皮素对免疫球蛋白E(Ig E)介导的速发型过敏反应大鼠Ig E和白三烯(LT)水平、嗜酸性粒细胞(EOS)数量及肺组织炎症面积的影响。方法大鼠随机分为模型组,孟鲁司特钠组,槲皮素高(40 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量组。除空白组(未处理大鼠)给予生理盐水外,其他各组大鼠腹腔注射含氢氧化铝和卵白蛋白(OVA)的生理盐水,14 d后,尾静脉注射卵白蛋白(15 mg/kg)以诱发速发型过敏反应(3 d,1次/d)。大鼠血清中LT和Ig E水平采用ELISA法确定,肺泡灌洗液(BALF)和全血中EOS的数量通过细胞计数法统计,肺组织炎症面积采用病理学检查进行评价。结果槲皮素高、低剂量组大鼠血清中LT和Ig E含有量、BALF和全血中EOS的数量及肺组织炎症面积均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论槲皮素可能通过抑制炎性介质释放、降低炎性反应而发挥抗速发型过敏反应的作用。

新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。

蠲哮汤对哮喘大鼠CysLTs和IL-4、IFN-γ的影响及相关性研究

目的:探讨蠲哮汤对哮喘大鼠半胱氨酸白三烯(CysLTs)和白细胞介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)的影响及相关性。方法:将189只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组(A组),模型组(B组),孟鲁司特钠组(C组),地塞米松组(D组),蠲哮汤低、中、高剂量组(E、F、G组),卵蛋白氢氧化铝溶液致敏,并长期雾化吸入卵蛋白激发哮喘,A组予0.9%氯化钠溶液雾化代替,分别持续1、2、4周,各周结束时,处死每组大鼠9只,检测肺泡灌洗液(BALF)中CysLTs及IFN-γ、IL-4含量,并作相关性分析。结果:CysLTs:与A组同期比较,第1、4周各药物干预组降低,第2周各组升高(P﹤0.05);与B组同期比较,A组、蠲哮汤各剂量组均显著降低(P﹤0.05),各浓度组组间比较无显著性差异;D组低于其他药物干预组(P﹤0.05)。IL-4:与A组同期比较,第1、4周各药物干预组降低,第2周各组升高(P﹤0.05);与B组同期比较,A组、G组、D组均显著降低(P﹤0.05),各浓度组组间比较无显著性差异。CysLTs与IL-4呈正相关性、与IFN-γ呈负相关性。结论:IL-4、IFN-γ与CysLT通路相关,蠲哮汤可能是通过影响CysLTs干预哮喘炎症白三烯通道及通过影响IFN-γ、IL-4干预Th1/Th2失衡而达到治疗哮喘的目的。

半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。

布地奈德联合孟鲁司特钠治疗哮喘儿童的临床效果及对患儿免疫功能、Cys LTs及FLAP表达的影响

目的:探讨布地奈德联合孟鲁司特钠治疗哮喘儿童的临床效果及对患儿免疫功能、血清半胱氨酸白三烯(Cys LTs)及5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的影响。方法:选取2015年3月至2017年1月我院收治的支气管哮喘患儿118例,按随机原则将其分为对照组和观察组,每组各59例。对照组通过布地奈德气雾剂进行治疗,观察组在对照组的基础上联用孟鲁司特钠进行治疗,分析和比较两组的临床疗效、治疗前后肺功能、免疫功能、血清Cys LTs及FLAP水平的变化。结果:治疗后,观察组临床总有效率(93.22%)显著高于对照组(77.97%)(P<0.05);两组FEV1、FVC及FEV1/FVC均较治疗前显著增加(P<0.05),且观察组FEV1、FVC及FEV1/FVC较对照组显著增加(P<0.05);两组CD4^+及CD4^+/CD8^+较治疗前显著增加,CD8^+较治疗前显著降低(P<0.05),观察组CD4^+及CD4^+/CD8^+较对照组显著增加,CD8^+较对照组显著降低(P<0.05);两组Cys LTs及FLAP较治疗前显著降低(P<0.05),观察组Cys LTs及FLAP较对照组显著降低(P<0.05)。结论:布地奈德与孟鲁司特钠联合用药能有效的提高哮喘患儿的临床疗效,改善患儿肺功能,其作用机制可能与增强患儿免疫功能及降低血清Cys LTs及FLAP的表达有关。

鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化

目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01～1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blotting和免疫组化检测的要求;CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的BV2细胞损伤。

白三烯D_4体外诱导小胶质细胞激活的作用

目的:观察白三烯D4(LTD4)激活小胶质细胞株BV2细胞的作用,探讨介导BV2细胞激活的半胱氨酰白三烯受体(CysLT受体)亚型。方法:以Western blotting和免疫组化鉴定BV2细胞上CysLT受体的表达;以LTD4及CysLT受体拮抗剂处理BV2细胞后,采用MTT还原法检测细胞活性,微珠示踪法(以流式细胞仪检测)观察细胞吞噬的变化,RT-PCR检测炎症因子IL-6 mRNA的表达变化。结果:LTD4不影响BV2细胞增殖,但随着LTD4浓度增高可增强细胞吞噬、增加IL-6mRNA的表达,100 nmol/L LTD4使细胞吞噬增高为对照的1.4倍(P<0.001),IL-6 mRNA的表达增高为对照的2倍(P<0.01);LTD4诱导BV2细胞上调表达IL-6 mRNA可被CysLT1受体选择性拮抗剂孟鲁司特和CysLT1/CysLT2非选择性拮抗剂BAY u9773抑制,而CysLT2受体选择性拮抗剂HAMI 3379对此无明显影响;HAMI 3379和BAY u9773(100 nmol/L)能进一步增强LTD4诱导的BV2细胞吞噬。结论:体外LTD4可激活BV2细胞,LTD4诱导细胞IL-6 mRNA上调表达由CysLT1受体介导,LTD4诱导的细胞吞噬增强受CysLT2受体负性调节。

儿童难治性支原体肺炎肺泡灌洗液中白三烯水平研究

目的检测难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中LTB4及CysLTs水平,探讨RMPP患儿病变局部白三烯水平的变化及其意义。方法选择RMPP患儿(42例)为研究对象。根据是否有湿疹、过敏性鼻炎、荨麻疹及相关过敏性疾病家族史等将42例RMPP患儿分为特应性组(11例)和非特应性组(31例)。以同期因支气管异物在该院住院,异物取出4周后纤维支气管镜复查的患儿为对照(12例)。对RMPP患儿及对照患儿BALF中细胞学成分进行分析,并采用ELISA方法检测BALF中LTB4及CysLTs水平。同时测定BALF标本的蛋白含量。结果与对照组比较,RMPP组患儿BALF中细胞总数上升(P<0.05),其中以中性粒细胞上升为主(P<0.01);RMPP组患儿BALF中LTB4及CysLTs较对照组儿童均有升高,其中LTB4显著升高(P<0.05),且中性粒细胞百分比与LTB4浓度呈正相关(γ=0.742,P<0.01)。特应性组及非特应性组BALF中CysLTs较对照组差异无显著性(P>0.05)。特应性组较非特应性组BALF中CysLTs有显著升高(P<0.05)。特应性组及非特应性组BALF中LTB4较对照组均有升高,以特应性组升高为甚,各组间两两相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论 RMPP患儿BALF细胞数显著增加,尤以中性粒细胞为甚,LTB4可能参与了RMPP患儿气道炎症的变化调节。在具有特应性体质患儿LTB4的水平高于非特应性体质者。RMPP患儿BALF中CysLTs升高不明显;但具有特应性体质患儿CysLTs含量升高明显,提示CysLTs的水平可能与机体的过敏状态相关。

平喘中药对致敏性哮喘豚鼠气道的作用

为研究平喘中药对气道的作用，我们测得致敏性哮喘豚鼠支气管灌洗液（ＢＡＬＦ）白蛋白、细胞总数及嗜酸性粒细胞数均比正常对照组豚鼠明显增多（Ｐ＜０．０１）。淋巴毒素Ｃ＿４（ＬＴＣ＿４）及Ｅ＿４（ＬＴＥ４）比对照组增高（Ｐ＜０．０５）。致敏豚鼠在吸入过敏原促发哮喘前腹腔注入平喘中药（麻黄、百部、地龙、杏仁和防风），而哮喘时ＢＡＬＦ的白蛋白、细胞总数及嗜酸性粒细胞比未用中药的哮喘组明显下降（Ｐ＜０．０１），ＬＴＣ＿４和ＬＴＥ＿４也有所下降（Ｐ＜０．０５）。结果显示平喘中药能抑制嗜酸性粒细胞增多，减少内皮损伤和白蛋白渗出。表明平喘中药在哮喘发作时，对气道具有重要保护作用。

5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯途径不参与大鼠C6胶质瘤细胞缺氧缺糖损伤

目的：观察缺氧缺糖（OGD）是否损伤大鼠C6胶质瘤细胞,以及5-脂氧酶（5-LOX）/半胱氨酰白三烯（CysLT）途经是否参与OGD损伤。方法：在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞化学法观察5-LOX蛋白的细胞内分布;以RT-PCR法检测CysLT1和CysLT2受体mRNA表达;并观察白三烯D4（LTD4）对C6细胞的作用。结果：OGD4-8h并恢复24-72h后,可诱导C6细胞损伤;5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂对OGD损伤无明显作用。OGD未诱导5-LOX的核膜移位。C6细胞高表达CysLT2受体,但CysLT1受体表达很微弱,OGD不影响它们的表达。此外,LTD4对C6细胞没有明显作用。结论：OGD可诱导C6细胞损伤,但5-LOX/CysLT途径不参与OGD诱导的损伤。

白三烯及其受体与哮喘的关系及中医药研究进展

[目的]总结哮喘发病机理中白三烯及其受体作用的最新研究情况。[方法]查阅近5年CNKI、维普数据、PUBMED数据中以白三烯及哮喘为关键词的研究文献,并分别从白三烯、白三烯受体拮抗剂与哮喘的关系,及中药对哮喘中白三烯的影响几个方面进行分类、汇总。[结果]大量临床研究、动物体内及体外实验表明,白三烯及其受体在多细胞、多环节中参与哮喘发病及进展,并与多种细胞因子相互影响。白三烯在哮喘及其他炎症疾病发病机理中起到重要作用,可以调节免疫应答。[结论]以"整体性"为特征的"组学"技术,更适合成为主要手段应用在具有整体观念的中医药研究领域,为中医药领域研究药物调控白三烯途径及治疗哮喘提供新观点。

半胱氨酰白三烯受体1参与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的调节

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的关系。方法:鱼藤酮及CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特处理PC12细胞后,以MTT方法检测PC12细胞活性变化;以Western blotting检测鱼藤酮处理前后,PC12细胞CysLT1受体的表达变化;不同浓度鱼藤酮处理24 h及3μmol/L鱼藤酮处理不同时间,以免疫细胞化学方法观察CysLT1受体分布变化。结果:鱼藤酮(0.3～30μmol/L)可诱导PC12细胞损伤,孟鲁司特(1、5μmol/L)可显著减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤。1～10μmol/L鱼藤酮作用PC12细胞24 h及3μmol/L鱼藤酮处理3 h和24 h,均可诱导CysLT1受体蛋白水平表达升高。鱼藤酮能浓度和时间依赖性引起CysLT1受体从细胞核移位到细胞浆。结论:CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤。

华东地区ALOX5AP基因单核苷酸多态性与缺血性脑卒中的相关性研究

目的 探讨5-脂氧合酶激活蛋白（ALOX5AP）基因多态性位点与中国华东地区汉族人群缺血性脑卒中的相关性.方法 本研究共纳入658例缺血性脑卒中患者,704例健康者做对照研究,并进一步将病例组进行TOAST分型,采用Taqman探针技术检测基因多态性.运用统计软件进行基因型、等位基因等关联分析,以及基因多态性与缺血性脑卒中及其亚型之间患病风险的独立相关性分析.结果 rs17222919位点突变与华东地区缺血性脑卒中的发生成正相关.rs17222919 TG型能显著升高缺血性脑卒中的发病风险（OR=1.34,95%CI=1.02～1.75）,尤其与小动脉闭塞型（SAO）脑卒中发病密切相关（OR=1.40,95%CI=1.02～1.93）.TG和TG/GG型能显著增加女性脑卒中的发病风险,并经传统危险因素高血压分层后,同样能够显著增加高血压人群患脑卒中风险.而rs9579646位点经过性别分层后,AG和AG/GG型能降低男性缺血性脑卒中的发病风险,并且按照传统危险因素分层后,AG型能降低非高血压人群脑卒中的发病风险.结论 ALOX5AP多态性与中国华东地区汉族人群缺血性脑卒中患者密切相关,提示该基因多态性可能参与了中国华东地区汉族人群缺血性脑卒中的发生.