Cysteinyl leukotrienes and their receptors: Bridging inflammation and colorectal cancer

Long-standing inflammation has emerged as a hallmark of neoplastic transformation of epithelial cells and may be a limiting factor of successful conventional tumor therapies.A complex milieu composed of distinct stromal and immune cells,soluble factors and inflammatory mediators plays a crucial role in supporting and promoting various types of cancers.An augmented inflammatory response can predispose a patient to colorectal cancer(CRC).Common risk factors associated with CRC development include diet and lifestyle,altered intestinal microbiota and commensals,and chronic inflammatory bowel diseases.Cysteinyl leukotrienes are potent inflammatory metabolites synthesized from arachidonic acid and have a broad range of functions involved in the etiology of various pathologies.This review discusses the important role of cysteinyl leukotriene signaling in linking inflammation and CRC.

NLRP3、AIM2和CASP1基因在慢性阻塞性肺疾病急性加重发病中的作用

目的:探讨固有免疫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱天冬酶1(CASP1)基因和白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)炎症因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作期(AECOPD)患者体内的表达情况,阐明其作用机制。方法:收集健康对照组(12例)和AECOPD患者(20例)的痰液,分别进行痰处理,采用实时荧光定量PCR法检测NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平,通过ELISA法检测痰上清中的IL-1β和IL-18蛋白表达水平。结果:与健康对照组比较,AECOPD组患者NLRP3、AIM2和CASP1基因表达分别上调3.83、1.70和2.42倍,NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平明显增高(P<0.01),AECOPD组患者痰上清中IL-1β和IL-18蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论:NLRP3及AIM2炎性体参与AECOPD的病理过程,其作用机制可能与固有免疫活化有关。

探讨CRTh2、CysLT1R及H1R在支气管哮喘患者外周血CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞中的表达

目的:探讨Th2细胞趋化因子同源分子(chemoattractant receptor homologous molecule expressed on Th2 cells,CRTh2)、半胱氨酸白三烯受体1(cysteinyl leukotriene 1 receptor,CysLT1R)及组胺1型受体(histamine 1 receptor,H1R)在支气管哮喘(bronchial asthma,BA)患者外周血CD3^(+)CD56^(+)自然杀伤T细胞(natural killer T cells,NKT)中的表达情况及临床意义。方法:收集2020年9月至2021年9月锦州医科大学附属医院BA患者(BA组,n=40)和健康对照组(healthy control,HC组,n=38)的外周血,流式细胞仪检测BA组和HC组外周血中CRTh2、CysLT1R及H1R在CD3^(+)CD56^(+)标记的NKT细胞上的表达,同时对其与血清总IgE(total immunoglobulin E,TIgE)、呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)及肺功能第一秒用力呼气量/用力肺活量%(forced expiratory volume in the first second/forced vital capacity%,FEV1/FVC%)的相关性分析。结果:BA组[22.50(15.78,29.20)]外周血CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞百分比较HC组[27.90(21.50,32.45)]降低(P=0.024);进一步比较BA组[70.05(63.20,78.45)]CD3^(+)淋巴细胞百分比低于HC组[73.70(69.88,79.38)](P=0.035)。BA组[0.08(0.05,0.17)]CysLT1R百分比较HC组[0.16(0.10,0.34)]降低(P=0.004);BA组CRTH2、H1R百分比[1.12(0.53,1.88);5.21(1.41,10.10)]与HC组[1.17(0.60,4.25);4.61(1.42,8.53)]比较,无统计学差异(P=0.234;P=0.697)。进一步对比CRTh2、H1R的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),BA组[925.52(623.50,1279.25)]CRTh2 MFI较HC组[1345.50(891.00,1977.75)]降低(P=0.002);BA组[769(657.50,975.00)]H1R MFI与HC组[835.00(560.00,959.25)]无统计学差异(P=0.834)。CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞与血清TIgE、FeNO无明显相关性(r=-0.052、r=0.014),与FEV1/FVC%水平呈正相关(r=0.402,P=0.01)。CRTH2(r=0.166、r=-0.040)、CysLT1R(r=0.114、r=-0.150)及H1R(r=0.103、r=-0.096)与血清TIgE、FeNO无明显相关性。结论:CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞可能在支气管哮喘发病过程中起重要作用,H1R在CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞上可能不表达,CRTh2与CysLT1R在BA患者CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞上表达减少可能会为临床精准诊疗提供依据。

伊可新滴剂联合普米克令舒治疗毛细支气管炎患儿的疗效及其对血清SIL-2R、CysLTs、Eotaxin的影响

目的探讨伊可新滴剂联合普米克令舒治疗毛细支气管炎患儿的疗效及其对血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、半胱氨酰白三烯(CysLTs)、嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)的影响.方法选取我院2016年1月至2018年4月所收治的90例毛细支气管炎患儿作为研究对象,按照随机数表法分为观察组46例,对照组44例.在常规治疗基础上,对照组给予普米克令舒治疗,观察组在对照组的基础上,给予伊可新滴剂治疗,均连续治疗7d.比较两组血清SIL-2R、CysLTs、Eotaxin的变化,临床疗效,临床症状改善时间及不良反应.结果治疗后,观察组总有效率高于对照组(93.48%vs.77.27%,P<0.05),血清SIL-2R、CysLTs、Eotaxin低于对照组[(151.23±10.08)pg/mlvs.(165.81±12.42)pg/ml,(24.59±3.07)ng/mlvs.(32.37±4.33)ng/ml,(14.94±2.56)ng/Lvs.(22.15±2.88)ng/L,P<0.05],咳嗽、喘憋、肺部湿啰音、哮鸣音、气促改善时间较对照组缩短[(3.16±0.65)dvs.(4.17±0.74)d,(3.49±0.47)dvs.(4.26±0.58)d,(3.94±0.55)dvs.(4.73±0.60)d,(3.28±0.37)dvs.(3.95±0.48)d,(2.98±0.4)dvs.(3.76±0.50)d,P<0.05].治疗期间两组患儿无明显不良反应发生.结论伊可新滴剂联合普米克令舒在毛细支气管炎患儿的治疗中效果显著,可有效降低血清SIL-2R、CysLTs、Eotaxin的表达,促进疾病恢复,安全性高.

支气管哮喘患者白三烯受体1基因MicroRNA的表达

目的探讨支气管哮喘患者外周血细胞白三烯受体—1(CysLTR1)基因MicroRNA的表达及临床意义。方法选择支气管哮喘急性发作患者17例(哮喘发作组)、支气管哮喘诊断明确且临床症状完全缓解3个月以上患者15例(哮喘缓解组)和健康体检者20例(正常对照组),采用RT—PCR技术检测外周血细胞CysLTR1基因MicroRNA的表达,并比较分析3组检测结果。结果CysLTR1基因MicroRNA在正常对照人群和支气管哮喘患者中均有表达,但表达水平不同:哮喘发作组、哮喘缓解组和正常对照组CysLTR1/GAPDH分别为2.4059±0.1983、2.1800±0.2210和1.2300±0.1174,与正常对照组相比,哮喘发作组和哮喘缓解组CysLTR1基因MicroRNA的表达均明显增高(均P<0.05);哮喘发作组与哮喘缓解组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论哮喘患者CysLTR1基因MicroRNA高表达可能与哮喘发生或急性发作相关。

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注肠组织半胱氨酰白三烯受体1表达和病理的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)保护作用和机理。方法:30只大鼠分为3组,假手术对照组、I/R模型组和中药治疗组各10只。通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变。结果:1与对照组比较,中药治疗组大鼠肠道组织的病理改变均明显减轻。2肠I/R时肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R肠道组织的病理损害,并能抑制大鼠肠黏膜抑制肠组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

半胱氨酰白三烯受体-1在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor,CysLTsR1)在肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的可能作用.方法:以I/R大鼠肠I/R损伤模型为研究对象,并运用不同剂量CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特(0.2、2和20 mg/kg)加以干预,通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变、检测小肠质量变化、确定CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特对小肠的炎症程度的影响.结果:肠I/R可造成肠组织损伤,小肠含水量增加(模型组78.13 g±1.35 g vs正常组78.13 g±1.35 g,P<0.05),肠I/R时肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);应用孟鲁司特后,小肠含水量降低(低、中、高剂量组分别为76.47 g±1.48 g、72.67 g±5.35 g及75.39 g±3.66 g),肠组织损伤减轻,肠组织CysLTsR1蛋白表达和mRNA表达水平均减低(P<0.05).结论:CysLTsR1参与了肠I/R损伤的形成,孟鲁司特可以减轻肠I/R对肠组织的损伤,CysLTsR1是保护肠I/R损伤的新的作用靶点.

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肠组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肠黏膜细胞凋亡的影响

目的研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法 30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肠组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察小肠病理改变,检测小肠重量变化,TUNEL-方法检测小肠黏膜细胞凋亡。结果 (1)与对照组比较,中药组大鼠肠组织的病理改变均明显减轻(均P<0.05);与对照组比较,模型组小肠含水量明显增加(P<0.05),而中药组小肠含水量显著降低(P<0.01);(2)肠I/R时肠组织CysL.TR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与模型组比较,中药组小肠黏膜细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)小肠黏膜中CysLTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、黏膜病理损伤、小肠含水量呈正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论柴芍承气汤能减轻肠I/R肠组织的病理损害和降低小肠黏膜细胞凋亡,并能抑制肠黏膜组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

腺样体肥大患儿腺样体组织病原菌和IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2与IL-32及其预测价值

目的分析腺样体肥大患儿腺样体组织病原菌和白细胞介素-25(IL-25)、半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR-1)、半胱氨酸白三烯受体2(CysLTR-2)、IL-32及其预测价值.方法纳入2020年3月-2023年3月菏泽市立医院收治的腺样体肥大患儿162例进行研究,术中留取腺样体表面分泌物及腺样体实体组织标本,行细菌培养,检出病原菌52例纳入研究组,未检出病原菌的110例纳入对照组;分析腺样体肥大患儿感染病原菌,分析两组临床症状评分、腺样体实体组织标本IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标单独及联合检测对腺样体肥大患儿感染病原菌检出的预测价值.结果162例腺样体肥大患儿分泌物和(或)腺样体组织共检出感染病原菌52例,共培养分离出条件致病菌68株,主要为流感嗜血杆菌(58.82%)、金黄色葡萄球菌(14.71%)、肺炎链球菌(11.76%);研究组患儿症状(鼻塞、流涕、鼻痒、喷嚏)评分更高(P<0.05);研究组腺样体实体组织标本IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32水平较对照组更高(P<0.05).将腺样体肥大患儿感染病原菌纳入阳性组,腺样体肥大患儿无感染病原菌纳入阴性组,绘制ROC曲线,曲线下面积(AUC)为0.864、0.875、0.694、0.748和0.947,联合检测价值高于单独检测.结论腺样体肥大患儿感染病原菌检出以流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌为主,合并感染的患儿临床症状更明显,腺样体组织中IL-25、CysLTR-1、CysLTR-2、IL-32表达水平升高,且联合检测有助于腺样体肥大患儿感染的诊断.

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肝组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肝细胞凋亡的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)继发肝损伤的保护作用及其机制。方法:30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肝组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,Cys LTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察肝脏病理改变,TUNEL方法检测肝细胞凋亡。结果:(1)与对照组比较,模型组有大鼠肝脏病理损伤,中药组大鼠组肝脏组织的病理改变明显减轻(均P<0.05);(2)肠I/R时肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与对照组比较,模型组肝细胞凋亡指数升高;与模型组比较,中药组肝细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)肝组织中Cys LTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、肝脏组织病理损伤正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R继发肝脏损伤的病理损害和降低肝细胞凋亡,并能抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达,柴芍承气汤可能通过抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达和抑制肝细胞凋亡减轻肠I/R继发肝损伤。

普仑司特对链佐星诱导的1型糖尿病小鼠记忆损害和神经损伤的影响

目的研究半胱氨酰白三烯受体1(Cys LT1R)拮抗剂普仑司特对链佐星(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠记忆损害及神经炎症和凋亡的影响。方法选用雄性ICR小鼠,尾静脉注射STZ 150 mg·kg-1制备1型糖尿病小鼠模型。糖尿病小鼠每天ig给予普仑司特,连续给药4周。Morris水迷宫检测小鼠隐藏平台潜伏期、穿台次数及目标象限停留时间;Western蛋白印迹法检测小鼠脑海马和前额叶皮质Cys LT1R,NF-κB p65,白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α),剪切胱天蛋白酶3,Bax和Bcl-2蛋白表达水平;测定小鼠的空腹血糖、血清胰岛素含量以及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果 Morris水迷宫结果显示,与正常对照组比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长,穿台次数和目标象限探索时间均显著降低(P<0.05);给予普仑司特0.6和1.2 mg·kg-1组小鼠逃避潜伏期均显著缩短(P<0.05),穿台次数和目标象限探索时间均显著增加(P<0.05)。Western蛋白印迹结果显示,模型组小鼠海马和前额叶皮质Cys LT1R,NF-κB p65,IL-1β,TNF-α和剪切胱天蛋白酶3蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值显著升高(P<0.05);给予普仑司特0.6和1.2 mg·kg-1能显著抑制糖尿病小鼠脑内上述蛋白表达的变化(P<0.05)。但普仑司特对糖尿病小鼠高血糖、低血清胰岛素和脂质代谢紊乱无明显影响。结论普仑司特能够改善STZ诱导的1型糖尿病小鼠学习记忆损害和神经损伤。

支气管肺发育不良早产儿外周血清5-脂氧合酶激活蛋白、白三烯C4合成酶及半胱氨酰白三烯受体1的表达研究

目的:探讨新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)及支气管肺发育不良(bronchopul-monary dysplasia,BPD)患儿血清中5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase activating protein,FLAP)、白三烯C4合成酶(leukotriene C4 synthase,LTC4S)及半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)水平变化的意义,旨在寻找BPD早期敏感的生物学指标。方法:收集2015年8月—2017年12月在南京医科大学第一附属医院儿科收治入院的胎龄<37周、出生体重<2 500 g的新生儿病例。待其出院后根据患儿完整住院信息将病例整理为无肺部疾病的早产儿65例(对照组),不合并BPD的NRDS早产儿60例(NRDS组),BPD早产儿49例(BPD组)。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测新生儿生后3、7、14 d血清中FLAP、LTC4S、CysLTR1水平。比较3组各时间点各指标的浓度水平,采用方差分析、t检验及卡方检验等进行统计学分析。结果:生后3 d BPD组血清FLAP、CysLTR1水平均高于对照组和NRDS组(P均<0.05)。生后7 d BPD组血清FLAP、LTC4S、CysLTR1水平均高于对照组(P均<0.05),BPD组血清FLAP和CysLTR1水平分别高于NRDS组(P <0.05)。生后14 d BPD组仅血清LTC4S水平高于对照组(P <0.05)。结论:生后3 d血清PLAP、CysLTR1水平,生后7 d血清FLAP、LTC4S和CysLTR1水平,生后14 d血清LTC4S水平可作为BPD早期诊断的生物学指标。

结肠癌组织中CysLTR-1 mRNA的表达及意义

目的检测结肠癌组织中半胱氨酰白三烯受体-1(CysLTR-1)mRNA的表达,并探讨其意义。方法收集70例结肠癌患者的癌组织及其癌旁正常组织,采用Real-time PCR法检测各组织样本中CysLTR-1 mRNA相对表达量,分析CysLTR-1表达与患者临床病理特征的关系及CysLTR-1表达对结肠癌患者预后的影响。结果结肠癌组织中CysLTR-1 mRNA相对表达量高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P=0.000)。结肠癌组织中CysLTR-1表达与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,CysLTR-1高表达者的术后3年总生存率低于CysLTR-1低表达者(P=0.032)、中位生存时间短于CysLTR-1低表达者(P=0.049)。结论结肠癌组织中CysLTR-1 mRNA呈高表达;监测结肠癌组织中CysLTR-1表达,有助于对患者进行病情判断和预后评估。

CysLTR1基因多态性与孟鲁司特治疗变应性鼻炎患儿反应性的关系

目的探讨半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)基因多态性与孟鲁司特治疗变应性鼻炎患儿反应性的关系。方法前瞻性选取2018年1月—2021年4月就诊的变应性鼻炎患儿310例,男173例,女137例。均接受孟鲁司特治疗1个月。收集患儿基线资料、临床资料、实验室资料、肺功能指标等,以聚合酶链式反应(PCR)技术检测两组CysLTR1(927T/C、434 T/C)基因多态性,采用Logistic回归分析评价CysLTR1多态性与孟鲁司特治疗变应性鼻炎患儿反应性之间的关系。结果治疗后,根据治疗反应性分为反应性良好组和反应性不良组。反应性不良组45例(14.52%),反应性良好组265例(85.48%)。两组患儿年龄、性别、家族史等一般资料对比差异无统计学意义(P>0.05);两组患儿体重指数、合并哮喘比例、血清25羟维生素D3[25(OH)D3]、CysLTR1434 T/C多态性对比差异具有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示体重指数(OR=1.520,95%CI=1.045~2.211)、合并哮喘(OR=97.737,95%CI=10.656~896.442)、CysLTR1434 T/C多态性中与TT型比较,CT型(OR=62.486,95%CI=6.440~606.304)、CC型(OR=159.229,95%CI=15.457~1640.252)是孟鲁司特治疗反应性的危险因素;血清25(OH)D3(OR=0.673,95%CI=0.568~0.797)是孟鲁司特治疗反应性的保护因素(P均<0.05)。结论CysLTR1基因多态性与孟鲁司特治疗变应性鼻炎患儿的反应性相关。

加味麻杏石甘汤对小儿支原体肺炎抗炎因子及机体免疫和外周血ESR、TLR2、TIPE2表达影响

目的观察加味麻杏石甘汤对小儿支原体肺炎抗炎因子及机体免疫和外周血Toll样受体2(TLR2)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)、血沉(ESR)的表达影响。方法选择2020年5月—2021年5月于秦皇岛市中医医院治疗的90例支原体肺炎患儿,以随机数字表法分组,45例患儿为研究组,45例患儿为对照组,对照组患儿给予阿奇霉素序贯疗法治疗,研究组采用阿奇霉素序贯联合加味麻杏石甘汤治疗,治疗前、后检测两组患儿白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-17(IL-17)、人半胱氨酰白三烯(CysLTs)、ESR、TLR2、TIPE2、免疫球蛋白IgG、IgA及T淋巴细胞亚群CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)水平,检测两组患儿用力肺活量(FVC)、1秒用力呼气容积(FEV1)、1 min最大通气量(MVV)、呼气峰值流速(PEF)水平,给予两组临床疗效比较。结果研究组IL-17水平低于对照组(P<0.05),研究组IL-2、IL-10水平高于对照组(P<0.05),研究组CysLTs、TLR2、ESR水平低于对照组(P<0.05),研究组TIPE2水平高于对照组(P<0.05),研究组患儿IgA、IgG、CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)水平高于对照组(P<0.05),研究组患儿FEV1、PEF、FVC、MVV水平高于对照组(P<0.05),研究组总有效率高于对照组(97.78%VS 86.67%)(P<0.05)。结论加味麻杏石甘汤治疗支原体肺炎患儿可提升抗炎因子水平,抑制机体炎症,提升机体免疫功能,降低外周血CysLTs、ESR、TLR2水平,提升TIPE2水平,改善患儿肺功能,提升临床疗效。

孟鲁司特对大鼠小肠缺血再灌注伤肾脏CysLTsR1表达及肾功能的影响

目的研究孟鲁司特对大鼠小肠缺血再灌注伤(IIR)肾脏CysLTsR1表达及肾功能的影响。方法30只成年雄性wistar大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(模型组)和孟鲁司特组,每组各10只。采用钳闭大鼠肠系膜上动脉建立IIR模型。建模3 h后观察各肾组织病理学形态并评分;免疫组化、Western blot和RT-PCR法检测肾组织CysLTR1和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白表达水平;生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)。结果模型组与对照组比较肾组织损伤严重,病理损伤Paller评分明显增高[(408.9±17.3)分vs(110.3±10.0)分],CysLTR1 mRNA水平显著升高[(3.60±0.84)vs(1.93±0.11)],CysLTR1蛋白表达显著升高,血清BUN和Cr值均显著升高[(21.82±2.39)vs(6.25±0.56);(57.85±8.18)vs(25.55±2.92)],NAGL表达显著升高[(677.67±6.03)vs(576.67±12.66)],差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比较,孟鲁司特组病理损伤Paller评分显著低于模型组[(323.4±14.9)分vs(408.9±17.3)分];CysLTR1 mRNA水平显著降低[(2.80±0.36)vs(3.60±0.84)];CysLTR1蛋白表达显著降低(P<0.01);血清BUN和Cr均显著降低[(13.50±1.31)vs(21.82±2.39);(30.85±3.94)vs(57.85±8.18)],差异有统计学意义(P<0.01),NAGL表达降低[(645.00±38.20)vs(677.67±6.03)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论孟鲁司特可减轻小肠缺血再灌注肾损伤,其机制与其抑制肾组织CysLTR1的活化有关。

人脑胶质瘤CysLT1和AQP4的表达及临床意义

目的探讨半胱氨酰白三烯受体1（CysLT1）和水孔蛋白4（AQP4）在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病理分级和脑水肿程度的相关性。方法利用免疫组织化学方法对22例胶质瘤患者的胶质瘤组织和4例“正常脑组织样本”中CysLT1和AQP4的表达进行检测，同时结合患者的影像学资料评定瘤周水肿指数（EI）。结果22例胶质瘤组织中CysLT1和AQP4表达均呈阳性。高级别胶质瘤的CysLT1和AQP4表达明显强于低级别胶质瘤，且两者呈正相关性（P〈0．05）；高级别胶质瘤的瘤周EI也明显高于低级别胶质瘤。结论CysLT1和AQP4在胶质瘤引起的脑水肿中起着重要作用。CysLT1的受体表达增加可能会上调AQP4的表达，从而影响脑水肿的发展。

半胱氨酰白三烯受体1调节APP/PS1小鼠原代神经元β淀粉样蛋白生成及机制

目的探究半胱氨酰白三烯受体1(CysLT_(1)R)对体外培养的APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠(APP/PSI小鼠)皮质原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响及机制。方法①将携带CysLT_(1)R的慢病毒-绿色荧光蛋白载体(LV-CysLT_(1)R-EGFP)或空载体(LV-EGFP)转染至APP/PS1小鼠皮质原代神经元,使神经元过表达CysLT_(1)R(CysLT_(1)R-OE),采用Western印迹法检测神经元CysLT_(1)R蛋白表达水平。②分别以CysLT_(1)R激动剂YM17690(1μmol·L^(-1))单用或与CysLT_(1)R拮抗剂普仑司特(Pran 1μmol·L^(-1))联用处理CysLT_(1)R-OE神经元12 h;采用ELISA检测细胞培养基内Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)水平;Western印迹法检测神经元中淀粉样前体蛋白(APP)、β淀粉样前体蛋白切割酶1(BACE1)、早老素(PS)1和PS2表达水平。以YM17690(1μmol·L^(-1))单用或与Pran(1μmol·L^(-1))联用处理CysLT_(1)R-OE神经元2 h后,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞内的分布。③采用渗透差法在CysLT_(1)R-OE神经元中导入核定位序列多肽(NLS-pep,10 g·L^(-1))竞争性抑制CysLT_(1)R核转位或阴性对照多肽(NON-pep,10 g·L^(-1)),随即以YM17690(1μmol·L^(-1))处理CysLT_(1)R-OE神经元12 h,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R激活后细胞培养基内Aβ水平、胞质中APP和BACE1表达水平;以YM17690(1μmol·L^(-1))处理导入多肽后的CysLT_(1)R-OE神经元2 h,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞内的分布。结果①CysLT_(1)R-OE神经元CysLT_(1)R蛋白表达水平较对照组显著增加(P<0.01)。②与CysLT_(1)R-OE组相比,CysLT_(1)R-OE+YM17690组神经元分泌Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)显著增加(P<0.05),胞质中BACE1及细胞核中CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基表达水平显著增加(P<0.05),而神经元中APP,PS1和PS2表达水平无明显改变。YM17690和Pran联用(CysLT_(1)R-OE+YM17690+Pran组)可消除上述改变。③与CysLT_(1)R-OE+YM17690组相比,CysLT_(1)R-OE+NLS-pep+YM17690组CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞核内的表达水平显著下降(P<0.05),神经元分泌Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)显著下降(P<0.05),胞质中BACE1表达水平下调(P<0.05),APP未见显著改变。结论CysLT_(1)R被激活后,通过上调BACE1表达从而促进Aβ的生成,其机制可能是通过CysLT_(1)R发生核转位并激活NF-κB信号通路介导。

新型选择性半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)拮抗剂的设计合成及构效关系研究

半胱氨酰白三烯(CysLTs)是炎症脂介质,其受体(CysLTsR)在哮喘、过敏性鼻炎和癌症等疾病的发生发展中发挥重要作用.已发现3-取代1H-吲哚-2-羧酸衍生物具有半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)拮抗活性,但较差的溶解度限制了其进一步研究.基于已有研究基础继续进行结构优化,设计合成了多个系列化合物,其中3-{2-[(1E)-3-({3-[(1E)-2-(7-氯喹啉-2-基)乙烯基]苯基}氨基)-3-氧亚基丙-1-烯基]苯基}丙酸(T9)展现出良好的选择性CysLT1受体拮抗活性和改善的溶解度,其IC50值为(0.0066±0.0023)μmol/L,在水中溶解度为4.16×10^(-5) g/mL.

半胱氨酰白三烯受体拮抗剂pranlukast对小鼠局灶性脑缺血的治疗作用

目的 观察半胱氨酰白三烯受体拮抗剂pranlukast(ONO 10 78)在小鼠局灶性脑缺血后的治疗作用。方法 采用大脑中动脉阻塞造成小鼠持续性局灶性脑缺血 ,缺血后1、6、2 4h分别给小鼠腹腔注射 pranlukast或依达拉奉 ,观察药物对缺血 2 4、4 8h后的神经功能缺损症状 ,4 8h后的脑梗死体积、两侧大脑半球比值、神经元密度的影响。结果 Pranlukast 0 1、0 2mg·kg-1及依达拉奉 3、10mg·kg-1均能减轻神经症状、减小脑梗死体积、降低缺血侧 /非缺血侧大脑半球比值、减轻海马CA1区、皮层和纹状体的神经元密度降低。结论 Pranlukast脑缺血后给药对脑损伤有治疗作用 ,提示有治疗缺血性脑卒中的临床前景。