不同种植区库尔勒香梨树腐烂病菌Cytospora pyri营养体亲和性研究

[目的]使用Nit突变体体系,探索来自新疆香梨种植区不同地理来源的腐烂病菌遗传多样性。[方法]首次使用Nit突变株技术(抗氯酸盐的硝酸盐利用缺陷突变体)对来自南疆3个不同种植区的13株库尔勒香梨树腐烂病菌Cytospora pyri的营养体亲和性进行了研究。[结果]13个菌株在含氯酸盐培养基(KPS)培养出115个Nit突变体,其中41个没有发生突变。在突变体稳定性鉴定中,鉴定出33个稳定的Nit突变体,82个不稳定的Nit突变体。产生的Nit突变体的表型85%被鉴定为NitD,15%被鉴定为NitB。[结论]获得2个Nit突变体,说明C.pyri的氮同化途径可能发生了2种突变。所有被检测的分离株都能够利用次黄嘌呤,使用次黄嘌呤的能力排除了钼辅助因子位点被阻断的可能性。

新疆苹果树腐烂病病原菌(Cytospora schulzeri)的分离、鉴定及其生物学特性的研究

采集新疆苹果产区苹果树腐烂病标本,以组织分离法从标本中获得了5个菌株：PG576、PG431-2、PG534、PG650-1、PG787-1,通过室内致病性测定发现,5株菌均能够在健康枝条上致病且表现与田间相同的症状。经形态学特征结合多基因片段（ITS、NL、EF、ACT）的分子系统发育分析,明确PG576、PG431-2、PG534、PG650-1、PG787-1菌株为Cytospora schulzeri,首次发现该菌能够在新疆苹果树上造成危害。5株菌的最适生长条件为：PDA培养基,pH值6.0~7.0,28℃连续光照培养。

林木腐烂病主要致病菌Cytospora sacculus致病力分化的初步研究

为了明确不同寄主来源的新疆林木腐烂病主要致病菌Cytospora sacculus致病力分化情况。采用不同寄主枝条接种法筛选出代表菌株;采用二硝基水杨酸法、菌丝生长速率法和高效液相色谱法测定果胶酶活性、菌丝生长速率和毒素。结果表明,不同寄主来源的C.sacculus菌株存在明显的致病性差异,其对原分离寄主枝条的致病力最强,对其他树种枝条的致病力较弱。果胶酶活性、菌丝生长速率以及毒素产生种类及数量是造成不同寄主来源菌株致病力差异的主要原因。

2013-2022年新疆林木腐烂病模拟传播轨迹数据集

新疆林业病害中腐烂病的发生较为严重,对林果产业发展造成了重大损失。本研究根据野外调查数据,确定林木腐烂病在流行区域内病菌源点;采用美国国家海洋和大气管理局(NOAA)提供的全球再分析气象数据,基于HYSPLIT模型,使用MeteoInfo软件模拟得到22个菌源点2013-2022年间3月至10月的腐烂病菌孢子随大气传播轨迹数据,每日分00、06、12、18,4个时次计算48小时前向轨迹;对产生的逐月轨迹文件进行合并,分别生成春季、夏季、秋季的轨迹数据,最终形成本数据集。在数据处理过程中采用多重验证方法确保了数据集的可靠性和科学性。本数据集对研究新疆林木腐烂病随气流远程传播的范围、特征和规律,制定新疆林木腐烂病监测和防控策略有重要参考价值。

杨树腐烂病菌SNARE蛋白CcNyv1的功能

【目的】解析SNARE蛋白Nyv1在杨树腐烂病菌中调控囊泡运输相关过程的功能,探究该病菌在生长发育和致病过程中的作用机制,为阐明SNARE蛋白在杨树腐烂病菌致病过程中的调控机制提供理论依据,并为该病害防控提供参考。【方法】1)利用酿酒酵母Nyv1的氨基酸序列进行Blastp分析,获得其同源的CcNyv1基因;2)利用生物信息学软件对CcNyv1编码的氨基酸序列和其他真菌中的Nyv1同源序列进行多序列比对,并构建系统发育树;3)采用Split-marker方法和PEG介导的遗传转化体系,构建CcNyv1基因缺失突变体及其回补菌株;4)通过PDA平板生长试验观察菌丝生长速率,分析CcNyv1基因及其Longin、SNARE结构域对菌丝的营养生长和盐胁迫响应的影响;5)通过对1年生杨树枝条烫伤接种观察病斑扩展面积,评价CcNyv1基因及其Longin、SNARE结构域对杨树腐烂病菌致病力的影响;6)利用FM4-64染剂染色,探究CcNyv1基因和Longin、SNARE结构域对该病菌的内吞作用产生的影响。【结果】1)通过酿酒酵母Nyv1的氨基酸序列blast比对,在杨树腐烂病菌中获得其同源基因CcNyv1,该基因全长780 bp,包含1个内含子,编码1个233 aa的囊泡运输相关R-SNARE蛋白,该蛋白含有1个N端的Longin结构域和1个C端的SNARE结构域;2)多序列对比和系统发育分析表明,CcNyv1和其他子囊菌中的Nyv1同源基因具有较高的序列相似度,且在进化上较为保守,与寄生隐丛赤壳中的同源基因的亲缘关系最为接近;3)成功构建CcNyv1基因缺失突变体、Longin结构域缺失突变体、SNARE结构域缺失突变体和CcNyv1基因回补菌株;4)菌丝生长表型和侵染杨树枝条致病表型分析表明,CcNyv1基因缺失突变体和Longin、SNARE结构域缺失突变体在菌丝营养生长、盐胁迫响应以及致病力等方面存在明显缺陷;5)比较FM4-64染色后野生型和缺失突变体菌株的囊泡分布情况,可见CcNyv1基因和Longin、SNARE结构域影响杨树腐烂病菌的内吞作用。【结论】杨树腐烂病菌SNARE蛋白CcNyv1在营养生长、胁迫应答、致病力及内吞作用等方面发挥重要调控作用。

杨树烂皮病生物防治的研究

通过已筛选出的对杨烂皮病有明显拮抗作用的5种菌种:,Trichoderma sp.,Penicillinm sp., Aspergillus sp., Eurotium sp., Fusarium sp., 用PDA固体培养基和查彼(czapek)培养液培养,分别获得各菌种抱子和发酵液,对扬烂皮病树刮皮喷雾防治,进行林间筛选试验。室内测定结果表明:平扳对峙培养,Trichoderma sp.和Fusarium sp.的抑菌效果好于其它三种拮抗菌;孢子萌发试验,5种菌的培养过滤液均对病菌孢子萌发有较强的抑制作用;接种试验,先接拮抗效果最好,为33.3％—100％,混合接效果要次之,为0％—72.2％,后接效果最差,为5.6％—33.3％。林间筛选试验结果表明,孢悬液防治效果好于发酵液防治,其中Tyichodeyma sp.和Fusayium sp.的防治效果最好,而且在树干上存活时间较长。治愈率除Aspergillus sp.外,均达70％以上。

2种杨树烂皮病害早春症状

在固定试验地内采取肉眼观察、组织解剖和物候观察的方法,对银中杨和107杨的烂皮病早期症状进行了研究。结果显示:2种杨树在早春时期均可以观察到明显不同的烂皮病症状,不同时期症状不同。银中杨病斑组织解剖后多表现为黑色坏死、腐烂,而107杨多表现为棕色坏死。2种杨树的韧皮部坏死病斑大于表皮病斑。银中杨的花芽、107杨叶芽和幼枝表皮的颜色可作为鉴别病害发生时期的物候特征。

新疆南疆核桃树腐烂病菌鉴定

【目的】明确新疆南疆核桃腐烂病菌种类。【方法】从南疆3个地方采集核桃腐烂病样10份,采用组织分离法分离获得10个分离物,根据科赫氏法则进行致病性测定,结合形态学观察和18 S rDNA-ITS、β-tubulin两个基因序列分析。【结果】经形态学特征鉴定,菌落形态、分生孢子器、分生孢子与已报道的金黄壳囊孢Cytospora chrysosperma一致;从18 S rDNA-ITS、β-tubulin两个基因序列分析可以得出,18 S r DNA-ITS序列分析结果与C.chrysosperma(登录号:KP114125.1)相似性为99%,β-tubulin序列分析结果与C.chrysosperma(登录号:KP117038.1)相似性达到98%。【结论】新疆南疆核桃树腐烂病菌为金黄壳囊孢C.chrysosperma。

东北杨树烂皮病发生流行的时空分析

利用数理统计和空间分析方法,对2002-2009年黑龙江省、吉林省、辽宁省和内蒙古自治区杨树烂皮病发生的时间和空间特点进行分析。结果表明:近8年,东北4省(区)均有不同程度杨树烂皮病发生,其中辽宁省发生杨树烂皮病的面积最大,尤其在2006年以后,平均发生2.69万hm2/年;吉林省,黑龙江省和内蒙古自治区发生的面积较小。近2年东北4省(区)杨树烂皮病的发生均有上升趋势;东北4省区的杨树烂皮病发生地主要集中在中东部,其中吉林省的松原市近8年来,每年都有杨树烂皮病发生,平均0.360 7万hm2/年。此项研究将为林业部门和气象部门建立杨树烂皮病发生发展气象预报与灾损评估服务平台,开展该病害的预测预报和影响评价提供必要的研究基础。

塔里木河下游胡杨树腐烂病病原鉴定

对新疆塔里木河下游胡杨树Populus euphratica腐烂病病原菌进行分离和鉴定。从新疆巴音郭楞蒙古自治州铁门关市采集胡杨树腐烂病典型病样12份,采用组织分离法分离获得12个分离物,根据科赫氏法则测定致病性,结合形态学观察和18S r DNA-ITS,β-tubulin两个基因序列分析,将其鉴定为金黄壳囊孢Cytospora chrysosperma。

新疆南疆农田防护林主要树种腐烂病病原鉴定

采用组织分离法对新疆南疆农田防护林主要树种腐烂病的病原菌进行分离,用形态学和分子生物学对病原菌进行鉴定。结果表明:从新疆杨Populus alba cv.pyramidalis,箭杆杨Populus nigra cv.Afghanica,胡杨Populus euphratia,柳树Salix matsudana上共分离得到52个菌株,鉴定出3种病原菌分别为金黄壳囊孢Cytospora chrysosperma(有性型Valsa sordida),C.nivea(有性型Leucostoma niveum)和Cryptosphaeria pullmanensis,其中Cytospora chrysosperma为主要种。

江苏杨树烂皮病发生状况调查及化学防治试验

通过对江苏省杨树烂皮病发生状况调查发现,在新沂,六合和仪征3个地区有杨树烂皮病发生。在调查的4 417株杨树中,平均发病率占11.32%;杨树烂皮病的发生与树种、树龄、地形、土壤、坡向以及虫害的关系均较密切。苗圃内不同药剂、配比度对杨树苗刮皮后的涂药试验发现,吡唑醚菌酯500,1 000,1 500倍液3种配比度的防治效果均在88%以上,嘧菌酯500倍液的防治效果高于80%。说明在苗圃用吡唑醚菌酯1 000倍和1 500倍液防治杨树烂皮病,可以取得良好的防治效果。

杨树烂皮病菌颉颃菌株的初步筛选与分子鉴定

对杨树烂皮病菌的平板对峙试验结果表明,6种颉颃真菌中木霉的抑菌率最高为51%,而颉颃细菌4个菌株的抑菌率均在60%左右,说明颉颃细菌的抑菌效果明显高于颉颃真菌;对B137等4株颉颃细菌的分子鉴定认为,1株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),2株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),还有1株为苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt);解淀粉芽孢杆菌和苏云金杆菌对杨树烂皮病菌有较好的颉颃效果。

新疆野苹果NAC基因分析及抗腐烂病基因筛选

【目的】探明新疆野苹果(Malus sieversii)中NAC基因资源,筛选潜在的抗腐烂病NAC基因。【方法】以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NAC蛋白为种子构建隐马可夫模型,从新疆野苹果转录组数据库中鉴定NAC转录因子,利用Protparam及qRT-PCR等手段对其理化性质、亚细胞定位、保守基序、系统进化及腐烂病菌侵染后的表达谱进行分析。【结果】从新疆野苹果中鉴定到165个NAC基因,根据蛋白系统进化关系分为12个亚组,且MsNACs在各亚组间分布不均。蛋白理化性质分析结果表明,MsNACs大多属酸性,且多为亲水性蛋白。保守基序分析结果表明,大多数MsNAC转录因子拥有由7个保守基序组成的完整NAC结构域,少数存在亚结构域的缺失。膜结合域分析结果表明,有18个MsNACs蛋白具有膜结合域,且大多定位于细胞核,少数定位于内质网、线粒体等其他细胞器。表达分析结果表明,34个MsNACs在腐烂病菌侵染后差异表达,可根据表达模式分为A、B、C三个亚簇,其中MsNAC073和MsNAC102表达变化剧烈,分别在5 dpi下调近6倍和上调近140倍。【结论】基于新疆野苹果转录组数据,首次对MsNAC家族基因进行鉴定、分类和表达量分析,为新疆野苹果抗病响应关键NAC基因的功能研究奠定了基础,也为其他物种中抗病基因的筛选提供了参考。

杨树烂皮型、水泡型溃疡病的药剂防治试验

以相关文献中药剂抑菌试验的结果为参考,选用7种常见杀菌剂,在天津汉沽地区针对烂皮型溃疡病较重的毛白杨和水泡型溃疡病较重的107杨开展药剂防治试验,防治前后分别进行病情调查,并对调查结果和防治成本进行了统计分析。防效分析结果表明:腐烂净(腐殖酸铜)、轮腐净(甲硫·福美胂)对烂皮型溃疡病防效最好,病情抑制率依次为75.33%,70.89%,且二者防效无显著差异(P>0.05);80%多菌灵可湿性粉剂和轮腐净(甲硫·福美胂)对水泡型溃疡病防效最好,病情抑制率依次为72.00%,68.44%,且二者防效无显著差异(P>0.05)。防治成本分析表明:不包含病斑刮除的人工费用(80元·百株-1),腐烂净(腐殖酸铜)和轮腐净(甲硫·福美胂)成本最低,分别为44.6元·百株-1和51.5元·百株-1,80%多菌灵可湿性粉剂成本较高,达到73.5元·百株-1。综合考虑防治效果和经济效益,轮腐净(甲硫·福美胂)是防治两种类型溃疡病的最优选择。

沙棘腐烂病病原菌初报

作者研究了阿勒泰地区的沙棘腐烂病病原菌。经病原菌分离培养、接种试验及症状观察和形态鉴定,确定沙棘腐烂病病原菌为沙棘壳囊孢Cytospora hippophaes Thüm.。林间调查和接种试验发现冬季气候寒冷和春季多风干旱是引起此病害的重要原因。

黑杨派杨树烂皮病早春症状观察

采取肉眼观察、病斑解剖和物候特征观测的方法研究黑杨派杨树辽育3号、108杨和中辽1号烂皮病的早春病斑症状。结果表明:3个杨树品种在早春均可观察到烂皮病的发病症状,且在病斑的表现上具有一定的差异,不同时期症状也不同。3个杨树品种在4月中下旬均可见到韧皮部黑色坏死或深棕色坏死,且108杨和中辽1号发生丝状腐烂现象。烂皮病病斑在韧皮部的坏死范围均要大于病斑表面的坏死范围。不同时期叶芽和嫩枝颜色的变化可作为鉴别病害发生时期的物候特征。

杨树烂皮病对湖北地区杨树的危害风险

杨树烂皮病是湖北地区近年来危害性上升迅速的林业有害生物,其主要寄主在湖北种植广泛。其病原金黄壳囊孢菌Cytospora chrysosperm侵染杨树枝干部,从而导致死亡。依据林业有害生物风险分析指标体系,采用多指标综合评价法对杨树烂皮病危险性进行定量化分析和评判。结果表明,杨树烂皮病在湖北省的危害风险值为2.01,即:杨树烂皮病在湖北地区为中度危险性的林业有害生物。此结果将为我省应杨树烂皮病的综合防控技术研究提供基础科学依据。

景观复杂性和林分因素对两种土壤条件下杨树腐烂病发生的混合影响

【目的】本文探究了不同土壤条件下景观复杂性和林分因素对杨树腐烂病的影响机制,为合理配置景观格局从而有效控制杨树腐烂病提供理论依据,促进杨树人工林的可持续发展。【方法】于2018年和2019年分别调查了新疆维吾尔自治区克拉玛依市和玛纳斯县两种不同的土壤理化性质下杨树腐烂病的发病情况。通过建立广义线性混合效应模型(GLMMs),以年份为随机效应,在景观尺度上分析景观复杂性和林分因素对杨树腐烂病的发生影响。【结果】黑杨和新疆杨腐烂病的发生与林分密度和害虫的香农多样性指数呈显著正相关关系,黑杨腐烂病与第一活枝高有显著正相关关系。两种杨树的腐烂病的发生与非杨树寄主的比例,以及海拔高度呈负相关关系;腐烂病与土壤理化性质具有显著相关性,同一景观结构中,克拉玛依的病害发病率高于玛纳斯,而且同一土壤条件下,简单景观中腐烂病的发病率高于复杂景观。【结论】本研究表明可以通过样地管理和在景观尺度上增强树木抗性来降低杨树腐烂病的发病率,从而为森林有害生物的管理提供理论依据。在造林规划中要考虑周边的景观结构特征对有害生物的潜在影响。同时利用土地覆被数据长期有效地监管景观特征对杨树腐烂病的影响,可以达到改善经济和环境效益的目的。

凌海地区杨树烂皮病发生情况调查

通过对凌海地区杨树烂皮病发生情况的调查,结果表明,烂皮病一般发生在3月下旬,当温度达4～5℃时,菌丝开始活动,病害开始发生;不同杨树品种对烂皮病的感病性具有显著差异,108杨和辽育3号发病程度最重,发病率分别为25.4%和20.3%,感病指数分别为13.6和11.5;造林密度越大,烂皮病发生越重,发病程度与造林密度呈正相关;108杨生长到5～6年生时发病最重,发病率分别为24.9%和25.2%;在不同立地条件下,公路旁杨树烂皮病发病率最高。