不同病程尖锐湿疣患者特异性CTL细胞频率和功能分析

目的利用负载人乳头瘤病毒6型（HPV-6）E7抗原肽的HIA-A$0201四聚体染色结合流式细胞术，分析不同病程HLA—A2阳性HPV-6所致尖锐湿疣（CA）患者外周血中特异性CTL细胞的频率和功能。方法以负载HPV-6E7抗原肽1、2细胞（表达HLA—A2分子）作为刺激细胞，与不同病程CA患者的外周血淋巴细胞（PBL）共培养，获得特异性CTL。体外制备PE标记HLA—A2／HPV-6E7四聚体，利用该四聚体和FITC．CD8单克隆抗体对这些特异性CTL进行双色荧光染色，经流式细胞仪分析双阳性细胞的频率；同时采用乳酸脱氢酶释放法（LDH）测定这些特异性CTL的杀伤活性。结果经混合淋巴细胞培养4周后，正常对照组特异性CTL细胞频率为（0．320±0．076）％，复发期CA患者组特异性CTL细胞频率为（1．100±0．064）％，缓解期cA患者组的特异性CTL为（1．115±O．071）％，均显著高于正常对照组（t值分别为19．23和18．66，P均〈0．001），复发期CA患者组与缓解期CA患者组间差异无统计学意义（t值为0．34，P=0．74）。复发期患者组特异性CTL杀伤活性为（51．18±0．48）％，缓解期CA患者的特异性CTL杀伤活性为（59．33±1．71）％，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论缓解期CA患者与复发期CA患者外周血中特异性CTL数量相近，但缓解期CA患者特异性CTL杀伤活性明显强于复发期CA患者，这可能是不同病程CA患者转归差异的根本原因。