Electroporation: A New Approach Enhancing Antitumor Effects of Cytoxan

Electrochemotherapy (ECT) is a novel cancer treatment in which electric pulses (EPs) inducing cell membrane pored (electroporation) are used as a means of delivering antitumor drugs to the cytoplasm of cancer cells. In vitro, with scan electromicroscope (SEM) and Trypan blue staining examination, the best parameter of EPs of electroporation is studied by the S-180 cells exposed to EP with various voltages, pulses , capacitance. The best parameter of EP of electroporation is 600V/cm, 6 pulses, 10 μF. In the in vivo study, ECT is studied with the Cytoxan (CTX) injected directly into the tumor followed immediately by a local EP at the tumor site. Four parameters, which include the tumor inhibitory ratio, the curing ratio and the vas capillare of tumor, the tumor’s histopathological characteristics are determined and compared among the ECT group, the control group, the EP-only group and the drug-only group. The results indicate that the antitumor effect of CTX is significantly enhanced by electroporation.

血浆置换治疗抗MDA5阳性皮肌炎伴肺间质纤维化临床疗效及安全性分析

目的探讨血浆置换联合泼尼松(PDN)联合环磷酰胺(CTX)治疗抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)伴肺间质纤维化(ILD)患者疗效及安全性。方法回顾性分析2014年6月—2023年6月普洱市人民医院诊断的MDA5阳性DM伴ILD患者40例,其中治疗组20例,采用血浆置换联合PDN 1 mg/kg每日1次口服,4周后减量,每周减总量10%,CTX 1 g每月1次静脉滴注,共6次治疗;另20例设为对照组,采用PDN 1 mg/kg每日1次口服,4周后减量,每周减总量10%,CTX 1 g每月1次静脉滴注,共6次治疗,分别于治疗后3月、6月检测一氧化碳弥散量(DLCO)、第1秒用力呼气量(FEV1),血清铁蛋白(SF)、C-反应蛋白(CRP)、涎液化糖链抗原(KL-6)、MDA5转阴率行疗效评估。结果在治疗3个月和6个月时,两组患者的DLCO、FEV1、SF、CRP、KL-6、MDA5转阴率等指标的完全缓解率不一致。其中,3个月时,治疗组上述指标的完全缓解率依次为95%、85%、90%、90%、90%、85%,对照组依次为15%、20%、20%、15%、0%、0%。两组患者在治疗3个月的DLCO、FEV1、SF、CRP、KL-6水平和MDA5转阴数均有所不同。其中治疗组的DLCO、KL-6、CRP水平均较对照组降低(P<0.01),治疗组FEV1水平较对照组升高(P<0.01),治疗组SF水平较对照组降低(P<0.05),两组治疗6个月时,治疗组上述指标缓解率依次为95%、85%、90%、90%、90%、85%,对照组依次为20%、25%、20%、20%、20%、5%。两组患者在DLCO、FEV1、SF、CRP、KL-6水平以及MDA5转阴数和死亡例数方面比较差异均有统计学意义,其中治疗组的DLCO、KL-6和CRP水平均较对照组降低(P<0.01),治疗组FEV1水平较对照组升高(P<0.01),SF水平治疗组较对照组降低(P<0.05)。结论在MDA5抗体阳性DM伴ILD患者治疗中,给予血浆置换联合PDN、CTX治疗,可以提高疗效,降低病死率。

番木瓜籽提取物对免疫抑制大鼠免疫调节作用研究

探讨番木瓜籽提取物苄基硫代葡萄糖苷(BG)对免疫抑制大鼠免疫调节作用。以前期提取的番木瓜籽已知成分BG含量为72%的提取物作为给药组,将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左旋咪唑阳性对照组(LMS,50 mg/kg)及低、中、高给药组(50、100、150 mg/kg);模型组与空白组均灌胃等量的生理盐水,连续给药10 d;各组(空白组除外)从第4天开始腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺(CTX)制备骨髓抑制动物模型,隔日给药,给予3次;进行血细胞检测、吞噬功能测定、脾脏细胞因子与转录因子测定;选择最佳剂量组对外周血T淋巴细胞亚群数量进行测定。结果显示,番木瓜籽提取物中、高剂量组对白细胞(WBC)、红细胞(RBC)具有升高作用,能显著提高巨噬细胞的吞噬指数和吞噬率(p<0.05或p<0.01),对脾脏细胞因子及转录因子具有调节作用,最佳剂量组能够明显提高CTX降低的CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞的数量(p<0.05或p<0.01)。番木瓜籽提取物对免疫抑制大鼠具有免疫增强作用。

淫羊霍对环磷酰胺致大鼠附睾结构和功能改变的拮抗作用

目的:探讨淫羊藿对化疗药物引起雄性大鼠附睾损伤的逆转作用。方法:60d的雄性SD大鼠50只,随机分为对照组、化疗1组、化疗2组和中药1组、中药2组,每组10只,化疗组接受腹腔内注射环磷酰胺30mg/(kg.d),中药组除环磷酰胺外,同时给予淫羊霍配制液灌胃30mg/(100g.d)。化疗1组、中药1组和化疗2组、中药2组分别于用药10、20d后观察附睾上皮细胞超微结构的改变。结果:①电镜显示化疗1组、2组大鼠附睾上皮细胞主要损伤为细胞水肿,线粒体肿胀,部分空泡化,细胞核呈瘤细胞样改变,部分核染色质凝集边移,趋于凋亡。中药1组上皮细胞超微结构与对照组基本相似,中药2组上皮细胞仅有轻度损伤,除线粒体嵴结构不清,胞浆内有少量空泡,部分核膜内陷或外突外,其余结构类同对照组。②化疗2组与对照组比较精子数量[(10.63±3.82)×106/mlvs(15.59±4.01)×106/ml,P<0.01]、精子存活率[(60.03±7.54)%vs(76.71±10.11)%,P<0.01]和唾液酸含量[(13.62±7.81)mg/gprotvs(19.38±9.34)mg/gprot,P<0.05]显著降低;淫羊藿能明显升高精子存活率,化疗2组精子存活率显著低于中药2组[(60.03±7.54)%vs(69.90±12.58)%,P<0.05]。结论:淫羊藿可减轻化疗造成的附睾损伤,对生殖功能具有保护作用。

黄蘑多糖对荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用

目的研究黄蘑Hohenbuehelia serotina多糖对环磷酰胺(CTX)化疗H22荷瘤小鼠的减毒和增效作用。方法建立小鼠体内移植性肝癌模型;小、中、大剂量治疗组分别ip黄蘑多糖提取物20、40、80mg/kg,连续给药10d,测定荷瘤小鼠的生命延长率和化疗药物CTX的毒副作用以及黄蘑多糖对CTX的减毒和增效作用。同时检测黄蘑多糖对淋巴细胞转化率、IL-2水平等免疫系统功能的影响。结果中、大剂量黄蘑多糖具有抑制肿瘤生长,延长荷瘤小鼠的生存率的作用。与CTX伍用可发挥协同作用,提高抑瘤率(P<0.05、0.01);提高荷瘤小鼠生存质量,体重、白细胞计数及免疫器官指数,与CTX阳性对照组比较均显示显著差异(P<0.05、0.01);实验结果显示黄蘑多糖与CTX伍用具有良好的减毒和增效作用,可增强荷瘤小鼠机体免疫力,提高淋转和IL-2的水平(P<0.05、0.01)。结论黄蘑多糖作为生物反应调节剂可提高机体的免疫力,增强CTX的抗肿瘤作用,同时减轻CTX的毒性。

环磷酰胺对睾丸组织中SCF表达的影响及意义

目的:通过环磷酰胺对大鼠睾丸组织中干细胞因子的表达及增殖指数影响的研究,以探讨环磷酰胺所致生精功能损害的原因。方法:选取9天龄雄性Wistar大鼠,腹腔注射大、中、小剂量的环磷酰胺后24h、4w、8w分别采集睾丸标本,应用RT-PCR技术检测睾丸组织中SCF的表达,同时光镜下计数4w时睾丸组织的增殖指数。结果:(1)对照组随年龄的增加,睾丸组织中分泌型干细胞因子表达无显著差异(P>0.05),膜型干细胞因子均有显著增加(P<0.05)。(2)同一时期各实验组和对照组比较,分泌型干细胞因子表达无显著差异(P>0.05),但膜型干细胞因子表达均有显著降低(P<0.05);同一时期各实验组间比较,随环磷酰胺剂量增加,膜型干细胞因子表达有显著降低(P<0.05)。(3)同一剂量三个时期比较,各实验组分泌型干细胞因子无显著差异(P>0.05);膜型干细胞因子比较,大剂量组中无显著差异(P>0.05),中、小剂量组中24h较4w、8w均有显著降低(P<0.05),4w与8w比较无显著差异(P>0.05)。(4)增殖指数检测,4w时各实验组与对照组比较,均有显著降低(P<0.01),并与剂量负相关。结论:本研究结果提示由于环磷酰胺的毒性作用,导致了睾丸组织中膜型干细胞因子表达下调,进而影响增殖指数降低,这可能即是临床上环磷酰胺使用后产生不同程度生精功能障碍的原因之一。

雷公藤多苷与环磷酰胺对照治疗肾病综合征的Meta分析

目的:比较雷公藤多苷片(TG)及环磷酰胺(CTX)治疗肾病综合征的疗效(显效率、总有效率),为临床应用雷公藤多苷片治疗肾病综合征提供指导。方法:按系统评价的要求,以雷公藤多苷/环磷酰胺/糖皮质激素/肾病综合征(中英文)为检索词,在1979年—2011年在国内公开发表的中英文文献,统一纳入标准和排除标准,所得文献进行Meta分析。结果:雷公藤多苷片联合泼尼松治疗肾病综合征的显效率(OR=1.00,95%CI为0.57～1.75)和总有效率(OR=0.87,95%CI为0.41～1.85)与CTX联合泼尼松的疗效没有显著性差异。显效率、总有效率、复发率"漏斗图"图形基本对称。结论:雷公藤多苷片联合泼尼松与CTX联合泼尼松治疗肾病综合征的疗效相当。

来氟米特联合泼尼松对增殖型狼疮性肾炎诱导期治疗效果的临床研究

目的评估来氟米特(LEF)联合泼尼松治疗增殖型狼疮性肾炎患者的临床疗效及安全性。方法采用单中心前瞻性研究,纳入我院肾脏内科2013年1月至2015年12月间经肾穿刺病理活检确诊后的增殖型狼疮性肾炎患者30例,采用简单随机法将其分为两组,每组15例,分别使用来氟米特(LEF)联合泼尼松(LEF组)及环磷酰胺(CTX)联合泼尼松(CTX组)进行诱导期治疗24周。定期复查尿常规、血常规、生化、抗ds-DNA定量、补体C3、T细胞亚群、SLEDAI评分及记录不良反应,对比两组患者在不同治疗时间段的各项指标变化,以评价来氟米特对增殖型狼疮性肾炎的治疗有效性及副作用。结果两组患者治疗24周后,24 h蛋白尿定量、红细胞尿、血浆白蛋白、血肌酐及狼疮活跃性指标均较治疗前明显好转,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗8周时,CTX组患者的尿蛋白总缓解率、血浆白蛋白、狼疮免疫指标恢复均优于LEF组,差异均有统计学意义(P<0.05),但治疗24周结束时两组患者的上述各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗过程中,ALT、白细胞、血红蛋白均无变化(P>0.05),T细胞亚群各指标较治疗前有所下降(P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05);CTX组患者的各项不良反应均高于LEF组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论来氟米特对增殖型狼疮性肾炎在诱导期治疗中具有良好的效果。虽然与传统的环磷酰胺治疗相比起效偏慢,但诱导期结束时疗效基本类似,而且副作用、不良反应少于环磷酰胺,提示其值得在增殖型狼疮性肾炎患者中进一步使用。

泼尼松联合CTX对IgA肾病患者疗效及肾功能指标的影响

目的探讨泼尼松联合环磷酰胺(CTX)治疗原发性免疫球蛋白A(IgA)肾病患者的疗效及对肾功能指标的影响。方法选取本院2013年6月至2015年6月收治的86例IgA肾病患者为研究对象,根据随机数字表将患者分为观察组及对照组各43例。对照组给予泼尼松治疗,观察组在对照组基础上应用CTX治疗,两组均持续治疗12周,对比分析两组患者治疗疗效、肾功能指标的变化。结果观察组总有效率为97.67%,对照组总有效率为79.07%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr),24h尿蛋白分别为(4.33±1.24)mmol/L、(85.36±5.85)mol/L、(1.89±0.24)g低于对照组[(6.32±2.02)mmol/L、(158.25±8.36)mol/L、(4.22±0.32)g],差异均有统计学意义(P<0.05),而内生肌酐清除率(Ccr)(85.98±14.02)高于对照组(68.23±12.02),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后肾血管指数、肾小球指数、肾小管-间质指数积分及新月体指数分别为(2.12±0.96)分、(2.12±0.88)分、(2.02±0.85)分及0.22±0.08,均低于对照组[(3.02±0.85)分、(3.85±1.22)分、(3.12±0.96)分及0.48±0.10)],差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论泼尼松联合CTX可提高IgA肾病患者临床治疗效果,改善患者肾功能,且不良反应率低,安全有效,值得临床推广应用。

大剂量环磷酰胺冲击治疗儿童严重过敏性紫癜肾炎疗效观察

目的:观察大剂量环磷酰胺(CTX)冲击治疗儿童严重过敏性紫癜肾炎(HSPN)的近期疗效及不良反应。方法:选择病理改变为Ⅱb级、Ⅲb级、Ⅵ级的HSPN患儿20例接受CTX冲击治疗,冲击剂量按20～25mg/(kg·次),每2周为1个疗程,3个疗程后改每月1个疗程,连续3次后改每3个月1个疗程,再连续3次后改每半年1个疗程,1年累积剂量<150mg/kg;CTX治疗同时联合使用泼尼松。结果:CTX治疗Ⅱb级、Ⅲb级HSPN有效率分别为100%,92.31%,66.67%,总有效率为90%(18/20),组间比较无显著性差异(P均>0.05);伴随不同肾小管-间质病变的HSPN疗效无显著性差异(P>0.05)。结论:CTX治疗儿童HSPN近期疗效确切,不良反应少,是临床治疗重症HSPN的重要手段。

黄芪提取物对小鼠学习记忆及免疫功能的影响

目的观察黄芪提取物对免疫抑制小鼠学习记忆及免疫功能的影响。方法采用小鼠跳台法测定学习记忆功能 ;采用吞噬鸡红细胞法检测腹腔巨噬细胞的吞噬功能 ;采用 3H_TdR掺入法测定外周血T淋巴细胞增殖反应 ;采用ELISA法测定血中IFN_γ含量。结果黄芪提取物 (25,50mg·kg-1,ig,21d)能改善CTX降低的小鼠学习记忆功能 ,同时能提高降低的单核细胞吞噬能力、T淋巴细胞增殖反应以及血中IFN_γ含量。结论黄芪提取物可改善小鼠学习记忆功能和具有免疫调节作用。

灵芝孢子粉对小鼠的免疫调节及抑瘤作用研究

目的研究灵芝孢子粉对小鼠免疫系统和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法将小鼠按体重随机区组分组,根据小鼠体重的2%分别经口灌胃蒸馏水和不同剂量的灵芝孢子粉溶液,每日1次,连续30日,观察各组小鼠的瘤重、迟发型变态反应(DTH)、自然杀伤(NK)细胞的活性和用以测定单核-巨噬细胞功能的吞噬指数。结果 75 mg/kg灵芝孢子粉组小鼠的瘤重、DTH、NK细胞的活性和单核-巨噬细胞的功能与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论一定剂量的灵芝孢子粉增强了小鼠的免疫功能,对肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用。

半枝莲多糖协同环磷酰胺治疗肝癌的作用机制研究

目的:探讨半枝莲多糖(SBPS)对化疗药物(CTX)的增效减毒作用及其作用机制。方法:采用移植性H22肝癌小鼠,随机分为阴性对照组、CTX组和联合用药组。连续给药10d后,测定其抑瘤率、WBC数、吞噬指数和IL-2活性。结果:SBPS能提高CTX的抑瘤率,能减轻CTX的毒副作用,并能提高单核吞噬细胞功能和IL-2、TNF-α活性。结论:SBPS对化疗药物CTX具有明显的增效减毒作用,可能是通过增强机体的免疫功能实现的。

针刺、艾灸膈俞穴对低白细胞模型大鼠白细胞及骨髓造血功能的调节作用

目的 研究针刺或艾灸膈俞穴对低白模型大鼠提升白细胞和增强骨髓增殖功能的作用。方法 选用Wister大鼠为实验对象,用环磷酰胺(CTX)腹腔注射造成白细胞减少及免疫功能抑制模型,分组处理后,在不同时相进行白细胞计数,并计数骨髓有核细胞数,以评估针刺或艾灸膈俞穴的升白及增强骨髓造血功能的作用。结果 针刺、艾灸膈俞穴及常规西药治疗均可显著提升白细胞、增加骨髓有核细胞计数,且艾灸膈俞穴组疗效优于针刺膈俞穴组及常规西药对照组(P<0. 05)。结论 艾灸膈俞穴可明显提升低白模型大鼠外周血白细胞数和骨髓有核细胞计数。

扶正消瘤方对H_(22)荷瘤小鼠抑癌及其化疗减毒作用

目的考察扶正消瘤方(人参、黄芪、猪苓等)抗肝癌作用及其减轻环磷酰胺引起的毒性。方法 ICR小鼠采用右前肢皮下接种造H_(22)荷瘤模型,灌胃给予扶正消瘤方后,检测生命延长率、瘤重、抑瘤率、T淋巴细胞增殖率、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。H_(22)荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺(50 mg/kg),测定扶正消瘤方给药后血液学指标、血清溶血素水平及抗体形成细胞数。结果扶正消瘤方可明显抑制肿瘤生长,升高血清SOD活性,减少MDA水平,促进T淋巴细胞增殖。而且,它还能拮抗环磷酰胺引起的白细胞及血小板数量下降,并升高抗体形成细胞数。结论扶正消瘤方具有良好的抗肝癌作用,并能减轻化疗所致的毒性,可能与增强机体抗氧化和免疫能力有关。

环磷酰胺对家兔动脉粥样硬化的影响

将 2 1只雄性大白兔随机等分成 3组 :环磷酰胺组 ( A组 )、动脉粥样硬化对照组 ( B组 )和正常对照组 ( C组 ) ,观察免疫抑制剂环磷酰胺对高脂血症动物的血脂、抗体、补体以及动脉粥样硬化 ( atherosclerosis,AS)病变的影响。实验结束时发现 :A、B两组的血脂、抗体、补体及循环免疫复合物 ( CIC)水平明显高于 C组 ;A、B两组血脂水平相比无明显差异 ,但免疫指标相比有明显差异 ;A组的主动脉斑块面积和主动脉内膜厚度明显小于 B组 ( P<0 .0 1)。本实验提示 AS的发生与免疫反应有关 ,环磷酰胺可以减轻兔主动脉粥样斑块的形成 ,但不是通过降血脂途径。

半枝莲多糖对环磷酰胺增效减毒作用的实验研究

目的:探讨半枝莲多糖对环磷酰胺(CTX)的增效减毒作用。方法:移植性H22肝癌小鼠随机分为阴性对照组、半枝莲多糖组、CTX组和联合用药组。连续给药10d后,测定其抑瘤率及q值、WBC数、胸腺指数和脾指数。结果:半枝莲多糖与CTX合用有增效作用,q值大于0.85;能减轻CTX的毒副作用;对CTX所致WBC减少、免疫器官萎缩等有一定保护作用。结论:半枝莲多糖对CTX具有明显的增效减毒作用。

27例小儿狼疮肾炎的临床分析

通过对２７例小儿狼疮肾炎的病例分析，发现狼疮肾炎是系统性红斑狼疮患儿较早出现的脏器损害，多数在起病后一年内发生，同时伴有肾内外多样化表现。其中临床分型为肾病综合征型占７４％，提示此型为小儿狼疮肾炎的好发类型，该型对四种不同治疗效果均较其它型为差。目前临床提倡早期规则给予环磷酰胺冲击治疗，以防止肾纤维化，抑制其活动性。

环磷酰胺对小鼠酯酶同工酶的影响及寿胎丸的拮抗作用

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法研究了雌、雄小鼠（昆明种）７种组织的酯酶（Ｅｓｔ）同工酶的变异，环磷酰胺（ＣＴＸ）对各组织Ｅｓｔ同工酶的影响，以及寿胎丸（ＦＰＰ）的拮抗作用．结果表明：１）各种组织间Ｅｓｔ同工酶带型差异明显，并存在一定的性别差异； ２）ＣＴＸ可导致小鼠Ｅｓｔ同工酶发生显著变化，并且雌、雄小鼠间舌、脾及肌肉组织受ＣＴＸ影响的差异较显著，３）本研究中ＣＴＸ造成的Ｅｓｔ同工酶变化大都体现在酶的相对量（活性）上，没有发现新酶带的出现； ４）ＦＰＰ对ＣＴＸ对Ｅｓｔ同工酶的影响有十分明显的拮抗作用．

巴戟天萃取液对环磷酰胺损伤大鼠生精功能的影响

目的：探讨巴戟天萃取液（MO）对环磷酰胺（CTX）损伤成年雄性SD大鼠生精功能的影响。方法：56只成年雄性SD大鼠（重约210～250 g）按巴戟天不同浓度,随机分为7组,空白对照组、CTX模型组、CTX＋生理盐水（NS）组、CTX＋10 g/kg MO组、CTX＋20 g/kg MO组、CTX＋30 g/kg MO组、CTX＋40 g/kg MO组。以不同浓度的环磷酰胺构建大鼠生精功能损伤动物模型;巴戟天水提物用乙酸乙酯萃取后取水层成分,分别以10 g/（kg·d）、20 g/（kg·d）、30 g/（kg·d）、40 g/（kg·d）的浓度给予4组治疗组灌胃,持续2周。观察各组大鼠体重、睾丸指数、附睾指数;睾丸组织经HE染色后,观察微细结构,比较各组生精小管直径和睾丸活检评分。结果：治疗后CTX＋NS组体重（234.83±28.77）g和附睾指数（2.71±0.34）与CTX＋10 g/kg MO组、CTX＋20 g/kg MO组、CTX＋30 g/kg MO组、CTX＋40 g/kg MO组之间比较无差异。CTX＋NS组睾丸指数[（12.15±1.04）g]与CTX＋20 g/kg MO组[（13.71±0.97）g]、CTX＋30 g/kg MO组[（13.30±0.29）g]、CTX＋40 g/kg MO组[（13.48±0.51）g]比较显著升高（P〈0.05）。光镜下观察可见CTX＋NS组明显病理改变,4个治疗组的睾丸生精小管的结构明显改善。CTX＋NS组、CTX＋10 g/kg MO组、CTX＋20 g/kg MO组、CTX＋30 g/kg MO组、CTX＋40 g/kg MO组的生精小管直径分别为[（189.74±8.55、204.78±11.03、216.55±10.93、218.03±11.23、218.59±14.06）μm],睾丸活检评分分别为（5.95±1.21、9.03±0.39、9.69±0.26、9.83±0.18、9.89±0.11）,CTX＋NS组与4个治疗组比较存在显著性差异（P〈0.05）,随着巴戟天萃取液治疗浓度的提高治疗效果也随之提高。结论：巴戟天萃取液对环磷酰胺损伤的大鼠生精功能具有修复作用,并且以30 g/（kg·d）、40 g/（kg·d）的治疗浓度治疗效果最佳。