儿童患者RhD弱阳性变异体的初步分析

目的对RhD弱阳性儿童患者进行RhD变异体检测分析。方法用微柱凝胶血型鉴定卡及盐水试管法进行RhD血型初筛;微柱凝胶抗球法进行弱D确认试验;确认试验RhD弱阳性者进行PCR-SSP及RHD外显子测序分析。结果 RhD初筛阴性46例(0.38%),确认实验检出弱阳性4例(8.7%);4例RhD弱阳性标本经基因检测,1例1227A杂合子(Del型),1例DⅢa型,2例弱D15型。结论 Del型也可能被血清学方法检出;RhD弱阳性患者中抗原数量减少者较多;针对RhD阳性红细胞是否产生需进一步研究。

中山地区RhD阴性血型标本D^(el)表型基因分型研究

目的探索中山地区RhD阴性血型标本D^(el)型表型及基因分型特征,提高D^(el)型诊断水平。方法 2017年12月~2019年2月在102例初筛为RhD阴性标本中进行RHCE分型与PCR-SSP基因分型,以抗球卡法(IAT)确认RhD阴性95例,吸收放散试验鉴定D^(el)型28例,最后结合国内数据分析D^(el)型表型与基因分型特征,总结中山地区D^(el)型特征和地区特异性。结果血清学试验初筛RhD阴性的102例血型标本中,RhD阴性95例;确定D^(el)RHD 1227A型28例,未见其它D^(el)型等位基因;其中20例RHCE抗原分型为Ccee (71.4%),8例为CCee (28.6%),与国内其它地区无差异性。中山地区RhD阴性D^(el)分布频率29.5%(28/95),并存在地区差异性:与南昌,浙江,武汉无差异;而与上海,台湾,福州有差异。结论本次调查中,D^(el)表型与Ce单体型密切相关,与国内其它地区无差异性;D^(el)型在RhD阴性分布频率29.5%,存在地区差异性;D^(el)型以RHD1227A为主要等位基因。

无偿献血者弱D61标本基因分析

目的 对本市献血者中筛查到的1例D^(el)标本进行基因检测,分析造成其血清学表型的分子基础。方法 献血者EDTA抗凝血分离白膜层提取核酸用于基因分型和外显子编码序列分析,红细胞用于血清学检测,采用试管法和微柱凝胶法做血清学分型,采用基因分型试剂盒做基因分型,通过测序分析基因编码的外显子多态性,确定基因突变的位点或类型。结果 血清学检测结果本例标本RhD表型为D^(el),RhCE表型为CCEe,荧光定量PCR结果显示本例标本RHD编码基因外显子均为阳性,排除弱D15和RHD~*DEL1[RHD(1227G>A)],RHD编码基因外显子序列分析结果显示,该标本在外显子编码序列的第28位发生点突变,为弱D61,基因型为RHD~*01 W.61[RHD(28C>T)]。结论 在本市无偿献血者中发现1例弱D61。