Hypoglycemic Activity of Jatrorrhizine

Summary： The hypoglycemic activity and its mechanism of Jatrorrhizine （Jat） were studied. The normal mice and alloxan-induced hyperglycemic mice were given with different doses of Jat. Blood glucose and liver glycogen levels were determined by spectrophotometry with glucose-oxidase and iodine reagents respectively. The levels of blood lactic acid （LC） and liver lactate dehydrogenase （LDH） activity were measured to explore the effect of Jat on anaerobic glycolysis. Succinate dehydrogenase （SDH） activity in liver was measured to evaluate the effect of Jat on aerobic glycolysis in liver. It was found that Jat （50 mg/kg, 100 mg/kg） could significantly decrease blood glucose level in a dose- and time-dependent manner in both normal and alloxan-diabetic mice, increase the activity of SDH, but had no significant effects on the LC level and LDH activity. Jat could significantly reduce the content of liver glycogen in normal mice. Moreover, Jat could inhibit the platelet aggregation in rabbits in vitro in a dose-effect relationship. It was concluded that Jat induced the pronounced decrease in blood glucose in normal and hyperglycemic mice. The hypoglycemic activity of Jat may be attributed to the enhancement of aerobic glycolysis.

基于网络药理学和细胞实验探究盐酸药根碱抗酒精性肝炎的作用机制

目的基于网络药理学技术和体外细胞实验探究盐酸药根碱(jatrorrhizine hydrochloride,JH)治疗酒精性肝炎(alcoholic hepatitis,AH)的作用机制,为后续研究提供参考。方法基于PubMed数据库查询JH药物成分,借助SWISS数据库预测药物作用目标,在GeneCards和OMIM数据库中找出AH的目标点。通过DAVID数据库实现基因本体(gene ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,利用STRING数据库和Cytoscape软件建立蛋白质互作网络(protein-protein interaction network,PPI),并通过体外细胞实验验证。利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞构建体外炎症模型,将细胞分为五组,采用MTT法测定不同浓度JH对细胞活性的作用,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定JH对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等炎症因子产生和释放的影响。结果利用网络药理学分析得到25个JH与AH的关键靶点,结合GO和KEGG富集分析及PPI网络构建结果,确定ESRI、NT5E、PGR等基因为后续实验靶点。根据ELISA实验结果进一步证实,相较于对照组,LPS组RAW264.7的M1型巨噬细胞中与炎症相关的因子TNF-α和IL-6的分泌显著增加;相较于LPS组,含有JH的组别细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的分泌有降低的趋势,尤其是随着JH浓度增加,其降低效果更加显著。结论在炎症模型细胞中,JH可以调控M1极化,表明JH可能是治疗AH的潜在分子。

药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖的影响

目的研究药根碱(Jat)的降血糖作用,并比较Jat、小檗碱(Ber)、黄连煎剂(HLD)及模拟方(Ber+Jat)对小鼠血糖水平的影响。方法采用薄层扫描法测定HLD中Ber和Jat的质量分数,并根据其比值配制模拟方。小鼠ip四氧嘧啶制备糖尿病模型,模型小鼠和正常小鼠均ig给予不同剂量Jat、Ber、HLD和模拟方,葡萄糖氧化酶法测定血糖。结果Jat、Ber、HLD和模拟方均有不同程度的降低糖尿病和正常小鼠血糖的作用,HLD作用最强,Jat较同剂量Ber作用弱,模拟方与单用Ber作用相当。结论黄连中可能还有除Ber和Jat之外的降血糖成分,以天然成分比例配伍Ber和Jat,未见明显协同或拮抗作用。

苏元胡的生物碱成分研究

应用多种色谱方法从苏元胡Corydalis humosa Migo的块茎的乙醇提取物中分离得到6个化合物,它们的结构分别被鉴定为:四氢巴马汀(1)、药根碱(2)、小檗碱(3)、四氢小檗碱(4)、巴马汀(5)及(-)-四氢黄连碱(6).化合物1～3为从本植物中首次分离得到.

不同栽培条件黄连的质量分析与评价

目的建立黄连药材HPLC指纹图谱分析方法及含量测定方法,比较分析不同栽培条件、不同产地和不同炮制方法制备的黄连药材的质量。方法采用HPLC-UV方法建立了黄连药材指纹图谱,应用HPLC-MS联用技术指认了主要色谱峰;并对黄连药材中的小檗碱、巴马汀和药根碱进行含量测定。结果指认了黄连药材指纹图谱中7个主要的色谱峰,含量测定结果表明不同的栽培条件中,遮荫条件、生长年限对黄连中小檗碱、巴马汀和药根碱的含量影响较大,而种植密度的影响不是很明显;现代生态技术栽培的黄连中这3种生物碱的含量均高于对照药材或与之基本相当。不同产地的黄连中这3种生物碱的含量差别较大。应用不同炮制方法制备的黄连中这3种生物碱的含量差别不明显。结论现代生态栽培技术替代传统人工搭棚方式栽培黄连是可行的,同时为科学炮制黄连提供依据。

黄连粉末中盐酸小檗碱及盐酸药根碱的体内肠吸收特性

目的研究大鼠小肠对黄连粉末中盐酸小檗碱及盐酸药根碱的吸收特性。方法采用大鼠体内肠灌注实验研究黄连粉末中盐酸小檗碱和盐酸药根碱在大鼠小肠内的吸收过程,采用高效液相色谱法分别测定其含量。结果黄连粉末中盐酸小檗碱、盐酸药根碱与对照品盐酸小檗碱、盐酸药根碱比较,吸收速率常数(Ka)差异无统计学意义(均P>0.05),但吸收百分率差异有统计学意义(均P<0.01);黄连粉末中盐酸小檗碱吸收百分率为对照品盐酸小檗碱吸收百分率的近3.6倍,对照品盐酸药根碱吸收百分率为黄连粉末中盐酸药根碱吸收百分率的近2倍。结论黄连粉末直接服用有利于其所含盐酸小檗碱在小肠部位的吸收,而不利于盐酸药根碱的吸收。

4种黄连生物碱的抑菌作用

目的小檗碱,药根碱,黄连碱和巴马亭是黄连中4种主要的生物碱,为深入研究4种黄连生物碱成分的抑菌特性差异,本实验对它们的抑菌谱和抑菌活性进行了实验研究。方法以从石柱黄连中提取的4种生物碱为实验药物,采用抑菌圈实验法,在2 000μg/mL药液浓度下对常见的19种微生物进行了药物敏感性试验,并通过比浊法对敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)进行了检测。结果4种生物碱成分的敏感菌范围相同但抑菌活性不同,其中小檗碱的抑菌活性最大,黄连碱和巴马亭次之,药根碱最小;4种黄连生物碱对革兰氏阳性菌的抑制活性大于革兰氏阴性菌和酵母菌;每种生物碱对耐药金葡菌(MR)和金葡菌的抑菌能力基本相同。结论4种黄连生物碱均为黄连的抗菌活性成分,抑菌谱相同,但抑菌活性有较大差异;4种黄连生物碱对耐药金葡菌的耐药性具有消除作用。

黄连生物碱的HPLC-MS分析

目的:利用高效液相色谱-质谱法,对黄连药材中的化学成分进行定性研究并对主要成分进行定量研究。方法:采用Waters Symmetry C18(3.9 mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈和0.05%甲酸水梯度洗脱;检测波长345 nm;流速为0.8 mL/min;柱温35℃;正离子检测模式;电喷雾离子化(ESI)。结果:鉴定了8个成分分别为木兰花碱、格陵兰黄连碱、黄连碱、表小檗碱、非洲防己碱、药根碱、小檗碱和巴马汀;同时对小檗碱、药根碱、黄连碱和巴马汀进行了含量测定。结论:该方法简便、准确,可用于黄连药材的质量评价。

氮素形态对黄檗幼苗三种生物碱含量的影响

通过改变水培溶液中NH+4-N和NO3--N的比例,探讨了氮素形态对黄檗幼苗主要药用成分小檗碱、药根碱及掌叶防己碱含量的影响。结果表明,小檗碱的含量与氮素形态有明显关系,在根和茎中都表现为NO3--N比例高更有利于小檗碱的积累。单纯的NO3--N供给最有利于药根碱在黄檗幼苗根中的积累,而处理46d后,NH4+-N/NO3--N为75/25和25/75时黄檗幼苗茎中的药根碱含量最高。黄檗幼苗根和茎中的掌叶防己碱含量对营养液中NH4+-N和NO3--N的比例反应类似,在处理46d后,掌叶防己碱含量由高到低所对应的NH4+-N/NO-3-N为25/75、50/50、75/25、0/100、100/0。处理33d后,黄檗幼苗根中的小檗碱、药根碱、掌叶防己碱含量随处理天数的增加呈下降趋势,而在茎中呈上升趋势。如果同时考虑氮素形态对黄檗幼苗生物量的影响,那么NH4+-N/NO3--N为0/100时其小檗碱产量(含量与生物量乘积)最高,而NH4+-N/NO-3-N为25/75时药根碱和掌叶防已碱的产量最高。

长柱十大功劳中药根碱、巴马汀和小檗碱的高效液相色谱法同时测定

建立了高效液相色谱法同时测定长柱十大功劳中药根碱、巴马汀、小檗碱含量的方法。样品用盐酸-甲醇(体积比1∶100)混合溶液超声提取,C18柱色谱分离,以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(磷酸调pH值至3.0)(体积比28∶72)为流动相,检测波长:265 nm。方法线性良好,相关系数均大于0.999,盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的加标回收率及相对标准偏差分别为99%,1.43%;100%,1.93%;99%,2.82%。

天然黄檗不同季节主要生物碱含量差异的研究

次生代谢产物小檗碱、掌叶防己碱和药根碱是黄檗中重要的药用生物碱,本研究在吉林省5个林业局选取了65株不同年龄的天然黄檗,利用反相高效液相色谱法研究了黄檗多器官中3种生物碱含量的季节差异。结果表明:小檗碱在根皮、多年生枝、当年生枝和叶中的季节差异显著,各器官中小檗碱含量夏季最低(叶除外);叶中小檗碱含量,在各个龄组均表现为从春到秋含量依次升高,变化幅度在0.017～0.124mg/g之间;小檗碱在根皮中最高,平均值达到24.27mg/g,其余依次是茎皮、多年生枝皮、当年生枝和叶片。掌叶防己碱在根皮、茎皮、当年生枝、叶和幼龄阶段的多年生枝皮中的季节差异显著,秋季含量最高(叶除外);叶中掌叶防己碱含量,在各个龄组均表现为春季最高;掌叶防己碱在茎皮中含量最多,平均值为7.02mg/g,其余含量由大到小依次是多年生枝皮、根皮、当年生枝和叶。药根碱在茎皮、多年生枝皮、当年生枝、叶和成熟阶段的根皮中的季节差异显著,多数器官夏季含量最低;叶中药根碱含量,在各个龄组均表现为春季最高;药根碱在各个器官中的分布规律与小檗碱一致,根皮中含量最高,平均值为0.84mg/g,其余含量由大到小依次是茎皮、多年生枝、当年生枝叶。

药根碱对实验动物心肌缺血和复灌性损伤的保护作用

Jat(10mg/kg iv)对大鼠心肌缺血和复灌所致的心律失常均有对抗作用,可使心肌缺血和复灌期间心律失常的开始时间推迟、持续时间缩短,并使复灌期间室性心律失常的发生率和动物死亡率降低。耳静脉注射Jat(每次0.75mg/kg)还能使家兔冠脉结扎所致的心肌梗死范围缩小(n=6;P<0.01)。

液相色谱-串联电喷雾离子阱质谱法鉴定大鼠尿液中药根碱代谢物

目的 研究药根碱在大鼠体内的主要代谢产物。方法 健康大鼠尾静脉注射12mg·kg^-1药根碱，收集0～72h的尿样，尿样经C18小柱固相萃取分离纯化后，经液相色谱-串联电喷雾离子阱质谱（LC—ESI／ITMS^n）分析鉴定其中的代谢物代谢物的结构鉴定主要依据各代谢物与原药的一级质谱电离规律和二级或三级质谱裂解规律间的关联性。结果 在大鼠尿样中检测到7种Ⅰ相代谢产物（如原药的脱氢、脱甲基、羟基化代谢物）及11种Ⅱ相代谢产物（如甲基化轭合物和葡糖醛酸轭合物）。结论 本方法用于大鼠尿样中药根碱的代谢物研究不仅操作简单、快速，而且灵敏度高、专属性强。

水分胁迫对黄檗幼苗三种生物碱含量的影响

黄檗(Phellodendronamurense)是东北阔叶红松林的重要伴生树种,也是我国名贵中药关黄柏的药源植物,小檗碱(berberine)、药根碱(jatrorrhizine)、掌叶防己碱(palmatine)是研究者通常关注的主要黄檗生物碱。通过池栽法和渗灌控水方式设置了对照、轻度干旱、重度干旱和水涝(土壤水势分别控制在-40^-20KPa、-80^-60KPa、<-80KPa和-20~0KPa)4种水分处理,比较了不同水分状况下黄檗幼苗小檗碱、药根碱及掌叶防己碱含量的变化。对于当年生的黄檗幼苗,总体上轻度干旱有利于上述3种生物碱的合成与积累,重度干旱处理下幼苗3种生物碱的含量与对照差异不大,而水涝处理则导致幼苗3种生物碱的含量显著降低。同时,干旱或水涝处理都导致黄檗幼苗生长受抑,幼苗的株高、茎径和生物量都显著低于对照幼苗,因此3种生物碱的单株产量仍是对照的黄檗幼苗最高。茎外皮是中药黄柏的药用部位,也是黄檗幼苗中3种生物碱含量最丰的部位,实验结果预示短期的轻度干旱处理可以提高茎外皮的小檗碱含量,这对以获取生物碱为目的的黄檗幼苗培育可能有参考价值。

HPLC法同时测定黄檗皮中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量

建立一种高效快速从黄檗皮中同时测定小檗碱、掌叶防己碱、药根碱含量的方法。采用高效液相色谱法 ,以乙腈∶水为 1∶1(10 0 0mL溶液中含磷酸二氢钾 3.4g及十二烷基磺酸钠 1.7g)为流动相 ,流速 1.0mL/min ;检测波长为 345nm。在上述色谱条件下 ,3种生物碱达到分离完全 ,且峰形良好。该方法简单、快速、准确测定原料中 3种生物碱含量 ,为原料的质量控制奠定了基础。

RP-HPLC测定金果榄药材中巴马汀和药根碱的含量

目的 采用RP -HPLC测定金果榄药材中巴马汀和药根碱的含量。方法 采用ODS柱 ,流动相为水 -乙腈 (1∶1) (含磷酸二氢钾 3.4g·L-1、十二烷基磺酸钠 1.7g·L-1) ;检测波长 345nm ;流速 1ml·min-1;外标法峰面积定量。结果 药材中巴马汀和药根碱的平均回收率分别为 97.6 4 %和 98.77%。结论 所用方法准确、简便、灵敏度高。

十大功劳属部分植物茎中生物碱的高效毛细管电泳法测定

目的 :对十大功劳属植物中 3种生物碱的含量进行测定 ,为其内在质量的评价提供科学依据。方法 :运用毛细管区带电泳 (CZE)模式 ,以马钱子碱为内标化合物 ,测定了小檗碱、巴马亭和药根碱的含量。背景缓冲溶液为0 1mol·L-1磷酸缓冲液 (pH 7 0 )与甲醇 ( 2∶1)的混合体系。线性范围 :盐酸小檗碱为 4 9～ 4 98 6μg·mL-1(γ =0 9990 ) ;盐酸巴马亭为 5 0～ 5 0 4 9μg·mL-1(γ =0 9996) ;盐酸药根碱为 5 1～ 5 0 5 8μg·mL-1(γ =0 9984 )。回收率 :盐酸小檗碱为 96 0 0 %～ 10 1 66% ;盐酸巴马亭为 10 0 15 %～ 10 2 97% ;盐酸药根碱为 96 68%～ 10 2 4 4%。结果 :不同品种、不同产地、不同采集时间的植物中的生物碱含量均有较大差别。结论 :高效毛细管电泳法是中草药质量控制的一种简便、快速、有效的方法。十大功劳属多种植物生物碱含量较高 。

黄连与干姜配伍对黄连中5种生物碱的大鼠体内药动学影响

目的:考察黄连与干姜配伍后对黄连的5种主要生物碱(小檗碱、巴马汀、药根碱、黄连碱和表小檗碱)大鼠体内药动学的影响。方法:Wistar大鼠分别单次灌胃给予黄连单煎液和黄连干姜合并液后,运用HPLC法同时测定不同时间点的5种生物碱血药浓度,分别求算其药动学参数,比较配伍前后在大鼠体内药动学的变化。结果:黄连干姜合并液组与黄连单煎液组比较,黄连的5种主要生物碱的药时曲线下面积(AUC0-t)和峰浓度(Cmax)增加,半衰期(t1/2z)和平均滞留时间(MRT0-t)均降低,达峰时间(Tmax)无明显变化。结论:黄连与干姜配伍后能够促进黄连中生物碱在大鼠体内的吸收量和加速其消除速率,干姜能够显著影响黄连5种生物碱在大鼠体内的药动学。

药根碱药物相互作用及其机制研究

目的 研究药根碱 (Jat)与华法令 (War)、硫喷妥钠(Thi)、甲苯磺丁脲 (D86 0 )合用时对药物效应的影响及其机制。方法 ①以药效学方法观察Jat与War合用对小鼠凝血时间的影响 ;②观察Jat与Thi合用对小鼠睡眠时间的影响 ;③观察Jat与甲苯磺丁脲合用时 ,对小鼠血糖的影响 ;④根据荧光静态猝灭理论 ,采用荧光法测定Jat与人血清白蛋白的结合常数。结果 ①Jat与War合用 ,小鼠凝血时间延长 (P <0 0 1)。①Jat与Thi合用 ,能延长小鼠睡眠时间 (P<0 0 5)。③Jat与甲苯磺丁脲合用时能降低小鼠血糖水平(P <0 0 1)。④荧光法测得Jat与人血清白蛋白的结合常数为 1 2 9× 10 4 L·mol- 1,结合常数大 ,表明二者有高度的结合。结论 Jat与War、Thi、甲苯磺丁脲合用 ,可使其药效(或毒性 )增强 ,导致药物相互作用。其可能的机制是Jat竞争血浆蛋白结合部位 ,使其游离药物浓度增高 ,药效 (或毒性 )

一年生黄檗幼苗药用生物碱的分布及其含量变化

对一年生黄檗幼苗各部位中小檗碱、药根碱和掌叶防己碱含量及动态变化过程进行了分析,结果表明三种生物碱在茎外皮含量最高,其次是根,而茎木质部含量极低.茎外皮和茎木质部中三种生物碱总的变化趋势是随发育期逐渐升高,尤其在落叶前升高幅度较大;根中三种生物碱含量总体上是随生长进程先上升,而在生长后期下降.结合生物量计算得到单株产量,结果为越接近生长后期三种生物碱单株总产量越高,其中根的产量最高.