DAB2IP基因及其相关信号通路在恶性肿瘤中的研究进展

DAB2IP是一种肿瘤抑制蛋白,能够调节各种致癌途径的细胞质步骤,DAB2IP最初被发现是RASGTPase(Ras-GAP)家族的成员,与肿瘤抑制因子DOC2/DAB2(卵巢癌-2/Disabled-2中差异表达)相互作用,转化细胞中DAB2IP的功能抑制有利于对多种细胞外输入的促癌反应。

敲低DAB2相互作用蛋白(DAB2IP)促进膀胱癌细胞增殖并抑制其凋亡

目的研究残疾基因同源物2(DAB2)相互作用蛋白(DAB2IP)在人膀胱癌组织中的表达并分析与肿瘤病理分级、临床分期的相关性,同时观察DAB2IP与膀胱癌化疗耐药的关系。方法通过免疫组织化学染色方法检测初发和复发膀胱癌中DAB2IP的表达差异。应用RNA干涉(RNAi)技术敲低5637和253J膀胱癌细胞中DAB2IP的表达后,采用MTT法、克隆形成实验验证癌细胞对吡柔比星的敏感性的变化,流式细胞术检测吡柔比星处理后DAB2IP低表达细胞的凋亡率。结果 DAB2IP的表达与膀胱癌TNM分期、病理分级及淋巴结转移等负相关,复发的膀胱癌组织DAB2IP的表达低于初发膀胱癌组织。DAB2IP的低表达与膀胱癌细胞抗药性相关,敲低DAB2IP的水平增强膀胱癌细胞的集落形成能力,促凋亡蛋白PARP和caspase-3表达减少,抑制凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达增加,癌细胞凋亡能力降低、引起化疗耐受。结论敲低DAB2IP的水平可促进膀胱癌细胞的增殖并抑制凋亡,同时增强其化疗耐受性。

膀胱尿路上皮癌中DAB2IP和β-catenin的表达及临床意义

目的探讨DAB2相互作用蛋白(DOC-2/DAB2 interactive protein,DAB2IP)及β-连环蛋白(β-catenin)在膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测104例BUC组织和40例癌旁正常膀胱黏膜组织中DAB2IP及β-catenin蛋白表达,并分析两者表达与BUC临床病理特征及预后的关系。结果BUC组织中DAB2IP蛋白表达明显低于癌旁正常膀胱黏膜组织,β-catenin蛋白表达明显高于癌旁正常膀胱黏膜组织(P<0.05)。DAB2IP蛋白表达与BUC组织学分级、病理分期及5年生存率差异有显著性(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径以及初发/复发患者无相关性(P>0.05)。β-catenin蛋白表达与BUC患者年龄、组织学分级、病理分期、肿瘤直径及5年生存率有相关性(P<0.05),与患者性别以及初发/复发患者无相关性(P>0.05)。BUC组织中DAB2IP及β-catenin蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论 BUC组织中DAB2IP表达下调,β-catenin表达升高,且两者表达呈负相关,DAB2IP和β-catenin异常表达与BUC组织学分级、病理分期及预后有关。

不同临床预后患者胃癌组织中DAB2IP表达的差异

目的探讨胃癌中人DOC-2/DAB-2交互蛋白(DOC-2/DAB-2 interaction protein,DAB2IP)的表达与临床预后生存时间的关系。方法收集82例正常胃黏膜及胃癌组织,采用免疫组化方法进行蛋白检测,对随访资料进行Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析。结果 DAB2IP在正常胃黏膜组织中多以强阳性表达;在胃癌组织中阳性表达较少,多以弱阳性或阴性为主;DAB2IP在胃癌组织中的阳性评分低于正常黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。DAB2IP阳性表达的胃癌患者中位生存时间为40.8个月,明显长于阴性表达患者的中位生存时间(33.7个月),差异有统计学意义(P<0.05)。COX多因素回归分析显示,较低的DAB2IP表达水平和较高的TNM分期是胃癌预后生存时间的独立危险因素(P<0.05)。结论 DAB2IP下调可能在胃癌的发生、发展中起一定的作用,对预测胃癌患者的预后生存时间具有一定的意义。

DAB2IP基因及蛋白在结直肠癌组织中的表达研究

目的从mRNA和蛋白两个水平上探讨DAB2IP在结直肠癌组织中的表达及意义。方法应用核酸原位杂交和免疫组织化学两种方法分别检测127例结直肠癌组织和36例癌旁正常黏膜组织中DAB2IP的表达情况,分析DAB2IP基因及其蛋白表达与结直肠癌淋巴结转移、分化程度及Dukes分期等临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织中DAB2IP mRNA与蛋白的阳性表达率分别为85.04%、79.53%,低于癌旁正常组织的100.00%、94.45%,差异有统计学意义(P均<0.001)。高、中分化到低分化结直肠癌组织中,DAB2IP的阳性表达率均逐渐下调,3组间差异有统计学意义(P<0.01)。结直肠癌无淋巴结转移组中的DAB2IP阳性表达率高于淋巴结转移组,且其mRNA与蛋白表达水平与淋巴结转移呈负相关(r=-0.2361,r=-0.3060;P均<0.01)。DAB2IP的表达水平与Dukes分期有关,从A期到D期DAB2IP表达逐渐下调,差异有统计学意义(P<0.01);但DAB2IP表达与结直肠癌患者的年龄、性别、发生部位及肿瘤大小均无关(P>0.05)。结论 DAB2IP在结直肠癌的发生、发展中具有重要作用,且其表达水平与淋巴结转移呈负相关,可作为预测结直肠癌转移潜能及判断预后的一个重要指标。

DAB2IP在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究DAB2IP(DOC-2/DAB2 interactive protein)在人前列腺癌、前列腺增生组织中的表达,探讨其与前列腺癌Gleason评分的关系。方法:应用免疫组织化学S-P法检测50例前列腺癌和30例前列腺增生组织中DAB2IP蛋白的表达情况,分析DAB2IP表达水平与前列腺癌Gleason评分之间的相关性。结果:DAB2IP在前列腺癌及前列腺增生组织中均可检出,在50例前列腺癌组织中,DAB2IP主要呈局灶性低表达,强阳性表达率为10.0%(5/50);而在30例前列腺良性增生组织切片中,DAB2IP的阳性表达率为100.0%(30/30),其强阳性表达率为83.3%(25/30),差异具有统计学意义(P<0.05);前列腺癌中DAB2IP表达强度在不同Gleason评分之间差异有统计学意义(P<0.05),但是与神经侵犯不相关(P>0.05)。结论:DAB2IP表达下调可能在前列腺癌的发生发展过程中发挥促进作用,为前列腺癌的诊治提供新的思路和线索。

新型Ras-GAP蛋白DAB2IP在前列腺癌中的研究进展

DAB2IP是Ras-鸟苷三磷酸酶激活蛋白(Ras-GAP)家族的新成员。作为一种新型抑癌基因,其表达在多种类型肿瘤细胞中普遍缺失。近年来,我们对DAB2IP在前列腺癌(PCa)恶性进展中作用的研究取得了重大突破,发现了它是维系前列腺上皮细胞自身稳定的重要支架蛋白,协调细胞内部多种信号通路的平衡,其表达缺失可促发细胞内信号紊乱,引起PCa细胞耐受凋亡、生长失控和侵袭转移。本文将综述DAB2IP的发现、表达调节以及生理功能的研究进展,重点论述其在PCa发生、发展中的作用及机制,为进一步开展有关PCa恶性进展的基础与临床研究提供参考。

抑癌基因DAB2IP在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨抑癌基因DAB2IP在结直肠癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法对103例结直肠癌组织、正常黏膜和转移淋巴结组织进行蛋白检测。结果:DAB2IP在正常黏膜中的表达远高于结直肠癌组织和转移淋巴结组织(P<0.05),其表达水平与淋巴结转移、远处转移、淋巴结转移度、临床Dukes分期、CEA和生存时间相关(P<0.05),DAB2IP是结直肠癌重要的预后因素(P<0.05)。结果:DAB2IP下调可能导致结直肠癌的发生、浸润转移和生存时间减少。

ZEB1与DAB2IP在子宫腺肌病中的表达及意义

目的探讨转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与抑癌基因DAB2相互作用蛋白(DAB2IP)在子宫腺肌病中的表达及临床意义,为提高子宫腺肌病的诊治水平提供依据。方法对我院2014年3月至2016年9月手术切除的73例子宫腺肌病子宫内膜、48例正常子宫内膜组织的临床病理特征进行回顾性分析,比较两组中ZEB1与DAB2IP的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。结果 (1)子宫腺肌病子宫内膜组织ZEB1阳性表达率为80.82%,DAB2IP阳性表达率为72.60%;(2)两组中ZEB1与DAB2IP阳性表达率比较存在明显差异,有统计学意义(P<0.05);(3)子宫腺肌病子宫内膜组织中ZEB1、DAB2IP表达与患者的年龄、痛经、月经异常无关(P>0.05),但与患者腺肌瘤大小、肌瘤浸润深度密切相关(P<0.05);(4)经多元Cox逐步回归分析:腺肌瘤>3 cm、肌瘤深层浸润为子宫腺肌病患者的独立危险因素(P<0.05)。结论子宫腺肌病子宫内膜组织中ZEB1、DAB2IP阳性表达率高,其表达水平与肌大小、浸润深度密切相关,联合检测对评估子宫腺肌瘤病预后情况具有重要意义。

DAB2IP基因慢病毒载体构建及其在前列腺癌PC3细胞中的表达

目的:构建重组慢病毒质粒pSin-EF2-Puro-DAB2IP并转染前列腺癌PC3细胞,观察其转染效率及其在PC3细胞中的表达。方法:以人前列腺癌PC3细胞基因组cDNA为模板PCR扩增获得目的基因DAB2IP片段后,应用基因重组技术将目的片段克隆到PC3-pSin慢病毒表达载体,经PCR、双酶切和测序鉴定后,重组慢病毒表达质粒和包装质粒共转染293FT细胞,获得携带DAB2IP基因的重组慢病毒。取病毒上清感染人前列腺癌PC3细胞,以PC3-pSin-EF2为对照,分别采用RT-QPCR、Western blotting法检测DAB2IP在靶细胞中的表达水平。结果:重组慢病毒质粒pSin-EF2-Puro-DAB2IP经PCR、EcoRⅠ和NheⅠ双酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的DAB2IP基因序列(NM_138709)完全一致。重组慢病毒质粒转染293FT细胞收获慢病毒上清可高效感染PC3细胞,对照组细胞株PC3-pSin-EF2及过表达细胞株PC3-pSin-EF2-DAB2IP内DAB2IP基因的相对拷贝数分别为0.001±0.000和0.158±0.013,与对照组细胞比较,过表达细胞内DAB2IP基因mRNA表达水平上调(179.37±15.89)倍,差异有统计学意义(P<0.001);Western blotting法,对照组PC3-pSin-EF2细胞中DAB2IP蛋白表达水平为内参的(1.002±0.783)倍,PC3-pSin-EF2-DAB2IP细胞组为内参的(2.431±0.892)倍,过表达组DAB2IP蛋白表达水平为对照组的(2.415±0.961)倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建携带DAB2IP基因的慢病毒表达载体pSin-EF2-Puro-DAB2IP,并使目的基因在靶细胞中稳定表达,为进一步研究DAB2IP基因的相关功能提供了优质的稳定转染载体。

DAB2IP在前列腺相关疾病谱系组织中的表达及意义

目的探讨DAB2IP(DOC-2/DAB2 interactive protein)在前列腺相关疾病谱系组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化Eli Vision法检测37例激素非依赖性前列腺(HIPC)组织、38例激素依赖性前列腺癌(HDPC)组织、29例前列腺高级别上皮内瘤(HGPIN)组织、40例良性前列腺增生组织组织中DAB2IP蛋白的表达情况,分析DAB2IP表达水平与前列腺疾病谱系之间的相关性。结果 DAB2IP在前列腺癌及前列腺增生组织中均可检出,40例前列腺良性增生组织中,DAB2IP的阳性表达率为100%(30/30),中到强阳性表达率为82.50%(33/40);29例HGPIN组织中,中到强阳性表达率为20.69%(6/29);38例HDPC组织中,中到强阳性表达率为5.26%(2/38);37例HIPC组织中,中到强阳性表达率为2.70%(1/37),差异有统计学意义(P<0.05)。结论DAB2IP是与前列腺癌密切相关的抑癌基因,DAB2IP表达下调促进前列腺癌的发生发展。

R11介导的DAB2IP功能片段P10对宫颈癌细胞系Siha放疗增敏效应的研究

目的本研究旨在探索R11-P10靶向穿膜肽在肿瘤细胞中的摄取及生物学作用。方法构建、纯化细胞穿膜肽,利用流式细胞仪检测细胞内荧光摄取率;通过测绘生长曲线,观察R11-P10是否对宫颈癌细胞系Siha起生长抑制作用及流式细胞术检测转染前后Siha的细胞周期分布变化;用Western-blot方法测定Siha转染R11-P10或/和UV照射前后p-AKT蛋白表达量的变化。结果流式细胞仪检测结果显示R11可携带多肽片段P10进入Siha,且R11-P10能增加Siha细胞的G2期阻滞。而细胞克隆形成实验发现R11-P10可增强Siha的放疗敏感性,Western blot结果表明R11-P10处理后的Siha细胞株接受放疗后,p-Akt含量显著下降。结论本课题为宫颈癌治疗提供了一种新型高效的多肽靶向药物,对宫颈癌放疗耐受和肿瘤复发的治疗策略具有重要意义。

DAB2IP在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:通过在乳腺癌中检测DAB2IP的表达,探讨其引发肿瘤的机制及临床意义。方法:收集本院住院乳腺癌患者254例,且均经病理诊断证实为浸润性癌,通过HE切片观察病理形态改变,参照WHO(2012)乳腺肿瘤分类标准进行组织病理学分级,采用免疫组化法检测DAB2IP在乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中的表达。结果:DAB2IP在乳腺癌中的表达率为78.74%(200/254),正常乳腺组织中的阳性表达率为95.83%(69/72),两者间差异有统计学意义(P<0.05);DAB2IP在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌组织中的阳性表达率逐渐下调,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移组中DAB2IP的阳性表达明显下调,与无淋巴结转移组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。DAB2IP在乳腺癌中的表达水平与临床TNM分期相关,从Ⅰ期到Ⅳ期DAB2IP表达率逐渐下调,差异有统计学意义(P<0.05);但DAB2IP表达与乳腺癌患者的年龄、部位及肿瘤大小均无关(P>0.05)。结论:DAB2IP在乳腺癌中的表达与病理学分级、淋巴结转移、临床TNM分期密切相关,可作为协助HE染色判断形态学观察进行组织学分级,预测淋巴结转移潜能及判断预后的重要参考指标。

DAB2IP基因多态性与冠心病发病的相关性研究

目的研究江苏省淮安地区汉族人群DAB2IP基因多态性（rs7025486）与冠心病及其严重程度的相关性。方法采用Taqman—MGB技术检测277例冠心病患者（冠心病组）和343名健康受试者（对照组）rs7025486基因型。结果冠心病组和对照组rs7025486基因型AA、AG、GG频率分别为9．0％、47．3％、43．7％和19．8％、44．9％、35．3％，等位基因A、G频率分别为32．7％、67．3％和42．3％、57．8％，2组间基因型频率和等位基因频率的差异有统计学意义（P〈0．01）。G等位基因患者患冠心病的风险高于A等位基因的患者（P=0．001，OR=1．515，CI=1.200～1．914）。结论江苏淮安地区汉族人群DAB2IP基因存在多态性，其与冠心病发病有关。

胃癌中DAB2IP、Twist的表达及其临床意义

目的探讨胃癌中DAB2IP、Twist的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测胃癌及癌旁组织中DAB2IP与Twist蛋白表达,分析两者表达与胃癌临床病理特征的关系,运用Spearman法分析DAB2IP与Twist表达的相关性,Kaplan-Meier法分析患者3年生存情况。结果与癌旁正常组织相比,胃癌组中DAB2IP阳性率降低,Twist阳性率升高(P<0.05);DAB2IP、Twist蛋白与淋巴结转移、浸润深度、病理分期、分化程度密切相关;Spearman分析结果显示DAB2IP与Twist呈负相关(r=-0.820,P<0.05);Kaplan-Meier法显示DAB2IP阳性组3年总生存率及中位生存时间高于阴性组[(71.4%vs 34.2%)、(28.93 vs 22.42)个月]。Twist阴性组患者3年总生存率及中位生存时间高于阳性组[(58.8%vs 28.6%)、(25.12 vs 19.86)个月]。结论胃癌组织中DAB2IP阳性率下降,Twist阳性率升高,两者呈负相关;DAB2IP、Twist的表达与胃癌的发生、发展及预后密切相关。

DAB2IP在多种肿瘤中的作用的研究进展

DAB2IP是一种新的GTP酶激活蛋白,是RAS和肿瘤坏死因子介导的凋亡通路等多条信号通路中的重要参与者,并且参与了多种基因的表达调节以及细胞的生长调控,因而具有功能多样性。现有的研究发现DAB2IP在多种肿瘤中表达下降,进而推测它是一种肿瘤抑制因子。而肿瘤的发生、发展涉及多种因素的改变,通过研究DAB2IP所参与的相关通路的信号分子的变化,推导出一些其对肿瘤产生的调控机制。本文就这些机制做一个收集、整理,以便为研究者进一步的研究起到承上启下的作用。

DAB2IP基因与肿瘤

DAB2IP是新发现的抑癌基因，是Ras—GTP酶激活蛋白家族的新成员。它通过介导多种肿瘤相关信号通路，如MAPK—ERK，P13K-Akt，ASK1-JNK和GSK-3B—B—catenin等，影响细胞的增殖、存活和凋亡。研究发现DAB2IP在多种肿瘤中表达下调，包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胃肠肿瘤、肝细胞癌以及成神经管细胞瘤等，并且与肿瘤的进展及预后密切相关。本文拟对当前关于DAB2IP与肿瘤相关性的研究文献进行汇总综述，讨论DAB2IP作为分子标志物判断肿瘤恶性进展以及治疗预后的可行性。

DAB2IP基因的研究进展

hDAB2IP（human DOC2/DAB2 interaction protein）基因为一种新发现的肿瘤抑制基因,参与细胞的信号转导,影响细胞的生长发育和凋亡,近来的研究发现它在多种恶性肿瘤的发生发展过程中表达下调,因而引起人们的关注。DAB2IP是Ras GTPase-activating protein（Ras GAP）家族的新成员,它与DAB2/DOC2蛋白的N末端相结合,是DAB2信号途径的下游效应器;而DAB2是一个重要的肿瘤抑制基因,在多种肿瘤的发生中发挥作用。DAB2IP作为一种新的GTPase激活蛋白,

胃癌患者DAB2IP的表达及预后意义

目的探讨胃癌患者癌组织中卵巢癌差异表达基因2相互作用蛋白(DAB2IP)的表达情况及其与临床预后的相关性。方法选取2014年1月—2015年12月收治的100例胃癌组织作为病例组,抽取40例胃癌癌旁正常组织作为对照组,采用免疫组织化学SP法检测DAB2IP的表达情况;并分析DAB2IP在胃癌组织中表达与患者临床病理参数间的关系,同时根据DAB2IP在胃癌组织中表达情况对随访资料进行Kaplan-Meier生存分析。结果病例组的DAB2IP阳性表达率显著低于对照组(P<0.05)。DAB2IP在胃癌中的表达与胃癌的组织学类型、浸润深度、临床分期、淋巴结是否转移显著相关(P<0.05)。DAB2IP阳性表达胃癌患者的中位生存时间明显长于DAB2IP阴性表达胃癌患者(P<0.05)。结论 DAB2IP下调可能在胃癌的发生、发展中起一定的作用,能为胃癌的诊断、术后疗效评估、预后判断提供参考。

DAB2IP表达载体的构建及其对前列腺癌细胞LNCaP DNA合成及凋亡的影响

目的构建表达载体pEGFP-N1-DAB2IP,观察DAB2IP在前列腺癌细胞LNCaP中高表达后对细胞凋亡及DNA合成的影响。方法 PCR扩增DAB2IP基因全长,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后T4 DNA连接酶连接,DH5α转化,用酶切及测序签定来确定构建的质粒正确。用对照载体pEGFP-N1和pEGFP-N1-DAB2IP转染前列腺癌细胞LNCaP,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot检测DAB2IP蛋白的表达,应用BrdU/PI掺入法检测DAB2IP对细胞DNA合成的影响,应用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测两组细胞凋亡情况。结果 pEGFP-N1-DAB2IP表达载体经酶切和测序鉴定正确,并成功转染LNCaP细胞,Western blot显示转染后DAB2IP的蛋白表达水平明显升高。BrdU/PI掺入法检测:pEGFP-N1组BrdU+细胞比例:0.66±6%,pEGFP-N1-DAB2IP组BrdU+细胞比例:0.45±3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示DAB2IP能抑制LNCaP细胞的DNA合成。细胞凋亡检测:pEGFP-N1组凋亡细胞比例:7.44±0.68%,pEGFP-N1-DAB2IP组:17.98±1.5%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示DAB2IP能诱导前列腺癌细胞LNCaP的凋亡。结论成功构建了表达载体pEGFP-N1-DAB2IP,并在前列腺癌细胞LNCaP中成功高表达DAB2IP,DAB2IP高表达后能抑制LNCaP DNA合成并诱导细胞的凋亡。