GSDME在DADS诱导白血病K562细胞焦亡中的作用研究

目的:研究DADS(Diallyl disulfide, DADS)诱导K562细胞焦亡(pyroptosis)及其分子机制。方法:Western Blot检测Kasumi、K562、THP-1、HL-60、NB4细胞的Gasdermin家族蛋白E(Gasdermin E, GSDME)、Gasdermin家族蛋白D(Gasdermin D,GSDMD);甲基特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)法检测K562及NB4细胞GSDME基因启动子检测区甲基化情况;CCK-8检测DADS对K562细胞增殖活力的影响;Western Blot、LDH释放实验检测DADS处理K562细胞后GSDME、GSDME-N、IL-1β、Cleaved IL-1β蛋白表达水平及乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase, LDH)释放量变化;慢病毒转染技术构建GSDME敲低的稳转K562细胞株;Western Blot检测下调GSDME对DADS处理K562细胞GSDME-N端蛋白表达水平的影响。结果:Kasumi、K562、THP-1、HL-60、NB4中GSDME、GSDMD的蛋白表达水平存在差异;NB4细胞的GSDME基因启动子检测区甲基化扩增出阳性条带,而非甲基化扩增为阴性;K562细胞GSDME基因启动子检测区甲基化未能扩增出阳性条带,而非甲基化扩增为阳性;DADS处理后K562细胞的LDH释放量、GSDME-N、Cleaved-IL-1β蛋白均显著升高(P<0.01);与NC组相比,敲低组的K562细胞中mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);DADS处理后,NC组的GSDME-N蛋白水平明显上升(P<0.001),QD组GSDME-N蛋白的水平无显著差异(P>0.05);与NC-DADS组相比,经过DADS处理的QD组GSDME-N蛋白水平明显下降(P<0.001)。结论:DADS诱导K562细胞发生细胞焦亡,其分子机制可能与GSDME介导的焦亡通路有关。

中国特色新型智库信息公开何以必要与何以可为——基于DADS模型的综合分析

[目的/意义]信息公开在中国特色新型智库建设中具有重要意义。对智库信息公开何以必要与何以可为予以剖析,有助于提升智库的公信力和专业性,进而推动中国特色新型智库实现高质量发展。[方法/过程]借助文献研读和理论推演的方法,从内部动因与外部动因两个方面阐释新型智库信息公开何以必要。通过对新型智库信息公开情况的统计与分析,剖析新型智库信息公开存在的现实困境,在阐释新型智库信息公开内容要旨的基础上,尝试运用公开–分析–发布–惩罚(disclosure-analysis-dissemination-sanction,DADS)模型构建新型智库信息公开的理论模型,并剖析该模型的运行过程及特点,进而从“公开环节–内部结构–外部力量”三个维度提出优化新型智库信息公开的政策建议。[结果/结论]新型智库既在非营利性组织属性及提升自身独立性与公信力等内部因素的驱动下主动进行信息公开,也会在外部利益相关者的影响下对外部信息需求做出回应,以期获取更多的外部资源。新型智库既要优化信息披露–分析–发布–激励与惩罚等信息公开的具体环节,又要完善内部治理结构,同时应充分发挥法律法规、主管部门、第三方评估组织、政策需求者等多元力量的监督约束作用。

DADS抑制JAK1/STAT3信号通路诱导人白血病HL-60细胞分化

目的探讨JAKs/STATs信号转导通路在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病HL60细胞分化中的变化及其调控机制。方法将HL60细胞与DADS或JAKs/STATs信号通路的激酶抑制剂AG490在体外共同培养,观察细胞形态变化,检测药物作用前后细胞NBT还原能力及细胞表面分化抗原CD11b的改变;用Westernblot检测JAKs,STATs各家族成员在DADS诱导HL60细胞分化中的改变;并用免疫细胞化学法检测核转录基因STATs,cmyc,cfos,cjun的表达变化。结果DADS和AG490均可诱导HL60细胞向成熟粒系分化,且DADS在1.25mg·L-1时诱导分化作用达峰值;Westernblot检测JAK1,STAT3的酪氨酸激酶发生了磷酸化改变;免疫细胞化学示STAT3与cmyc基因蛋白核内表达下降,cjun,cfos基因蛋白核内表达上升。结论JAK1,STAT3酪氨酸激酶的磷酸化抑制参与了DADS诱导HL60细胞分化的调控,其机制可能通过调控与HL60细胞增殖分化相关的基因表达,抑制细胞DNA合成,从而抑制细胞增殖,诱导分化。DADS的作用相当于JAK1/STAT3信号通路的阻断剂。

基于DADS的履带车辆多体模型与仿真

将建模与仿真方法应用于履带车辆,对于深入研究履带车辆性能,降低研究成本,缩短研制周期具有重要意义。本文针对某型履带车辆,分别对其车体、悬挂装置、推进装置进行了基于DADS的多体建模与仿真。并将仿真结果与实验数据进行了比较,表明这个模型对于研究履带车辆的平稳性能是合理的。

多体系统动力学分析的两大软件——ADAMS和DADS

】对多体系统分析（机械系统仿真分析）领域中最广泛使用的两个软件ＡＤＡＭＳ和ＤＡＤＳ，从理论基础、组成模块、分析功能和建模元素等几个方面进行了对比，从而对二者的特点有进一步的了解，便于选用最为适合的软件。最后。

DADS抑制食管胃交界部腺癌细胞OE19增殖及诱导凋亡的机制

目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)体外抑制食管胃交界部腺癌细胞株OE19增殖并诱导凋亡的作用及相关机制。方法 DADS处理OE19,倒置显微镜下观察细胞形态变化;MTT检测DADS对OE19细胞的增殖抑制作用;使用流式细胞术分析不同浓度DADS处理OE19后的凋亡率;Real-time PCR检测DADS对OE-19细胞Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax以及NF-κB mRNA表达水平的影响。结果作用24、48h后,DADS可以抑制OE19增殖,抑制作用呈剂量依赖性。使用40、80μg/mL的DADS处理OE19细胞24、48h,凋亡细胞比例分别为14.0%、25.4%和19.0%、27.2%。Real-time PCR检测发现DADS能够上调OE19细胞Caspase-3、Caspase-9mRNA的表达,并且能够下调NF-κB、Bcl-2mRNA的表达,且呈剂量-反应关系,Bcl-2/Bax的比值明显降低。结论 DADS在体外能够抑制食管胃交界部腺癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其凋亡机制可能是通过线粒体途径,同时NF-κB通路以及Bcl-2家族成员均参与了该过程。

DADS抑制裸鼠肝癌HePG2细胞移植瘤的实验研究

目的:初步探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对肝癌细胞的抑制效应及其相关机制。方法:以HepG2细胞为研究对象,进行裸鼠成瘤实验。观察DADS对裸鼠成瘤的影响并绘制生长曲线。应用免疫组织化学方法和Western印迹技术检测细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达,应用TUNEL检测细胞凋亡情况。结果:DADS可抑制裸鼠移植瘤的生长。TUNEL实验结果提示DADS可促进HepG2细胞凋亡。DADS也可促进促凋亡蛋白caspase-3表达并抑制抑凋亡蛋白bcl-2表达和PCNA的表达。结论:DADS可抑制肝癌HepG2细胞在裸鼠体内的生长,与促进细胞凋亡和抑制细胞增殖有关。

DADS对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响。方法建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型。15只实验裸鼠分为3组,每组5只。观察DADS对裸鼠致瘤的影响,并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。光镜下观察移植瘤组织形态学改变,采用免疫组织化学法检测瘤组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、p21WAF1蛋白表达情况,应用流式细胞术检测移植瘤细胞周期分布。结果 DADS能明显降低人结肠癌SW480细胞致瘤性,抑制移植瘤生长,降低肿瘤组织异型性,引起细胞周期G2/M阻滞,抑制PCNA蛋白表达,增强p21WAF1蛋白表达。结论 DADS可明显降低人结肠癌SW480细胞的致瘤性,抑制SW480细胞增殖,引起G2/M期阻滞,其可能与抑制PCNA蛋白表达、增强p21WAF1蛋白表达有关。

DADS对TE-1体外以及裸鼠体内生长的影响及作用机制

目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对TE-1细胞体外以及裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法 MTT法检测24 h、48 h不同浓度DADS体外对食管癌TE-1细胞活力的影响。使用TE-1细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和DADS低浓度治疗组(20 mg/kg)、DADS高浓度治疗组(40 mg/kg),腹腔注射14次,隔日1次,观察动物状态并监测移植瘤生长状况,28 d后处死动物,使用Western blot检测不同组别移植瘤中磷酸化p38、磷酸化ERK1/2、caspase-3、活化caspase-3的表达水平。结果 MTT结果提示DADS能够在体外抑制TE-1的增殖,且具有剂量依赖性。DADS药物治疗组移植瘤生长速度明显低于对照组,以高剂量组为著。Western blot检测结果显示,DADS药物组移植瘤中p38MAPK磷酸化水平升高、ERK1/2的磷酸化水平显著降低,活化caspase-3水平明显升高,且均呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 DADS在裸鼠体外、体内均能显著抑制人食管癌TE-1细胞的生长,其作用机制可能与DADS活化p38MAPK通路并抑制ERK通路,活化caspase-3进而抑制肿瘤增殖并促进TE-1细胞凋亡有关。

医疗信息公开与医疗服务监管的DADS模式

医院作为福利性的社会公益机构,其内部运作的神秘性和信息的不透明性,以及监管职能的弱化与困难,使公众的信任和利益受到严重的损害。“披露—分析—发布—惩罚”解决方案(DADS模式)对完善我国医疗信息公开政策、加强医疗服务监管,恢复公众对医院及医疗服务人员的信任具有重要的指导意义。

DADS模式在医疗收费管理中的应用

本文将"披露-分析-发布-惩罚"(DADS)模式引入医疗收费管理,以期能对完善医疗收费管理;增加医疗收费的透明度;加强医疗服务监管;控制医疗费用的不合理增长;进一步缓解"看病贵"问题发挥理论指导作用。

DADS模式在公立医院社会资本监管中的应用

DADS模式是专门为非营利性机构和政府组织设计的监管模式,它的使用对提高医院资本透明度、运营效率具有十分重要的意义。文章通过对我国政府职能、卫生政策法规、舆论监督环境以及患者相关信息需求的调查分析,指出DADS模式在公立医院社会资本监管中的可行性,并就需要注意的问题展开探讨。

DADS诱导小细胞肺癌细胞株NCI-H446凋亡及其分子机制

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)诱导人肺癌细胞株NCI-H446凋亡及其分子机制。方法流式细胞仪检测DADS诱导NCI-H446细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜检测NCI-H446细胞内Ca2+水平变化;利用免疫细胞化学法检测NCI-H446细胞内Bcl-2蛋白表达。结果与对照组相比,DADS处理组细胞的凋亡率显著增加(P<0.05);DADS处理组细胞内Ca2+水平升高(P<0.05)。DADS下调Bcl-2(P<0.05)。结论 DADS诱导小细胞肺癌细胞株NCI-H446凋亡,其具体机制可能与DADS下调Bcl-2蛋白表达和促进细胞内Ca2+水平升高有关。

ERK通路在DADS诱导人胃癌细胞分化中的作用

目的：研究ERK通路在DADS作用于人胃癌MGC－803细胞导致其分化中的作用机理。方法：用MTT法，免疫组化法及Westem Blot等技术进行分析。结果：DADS对MGC803细胞具有明显的生长抑制效应；DADS处理后ras P21表达减弱；ERK1／2（p44/p42)MAP激酶活性在DADS诱导人胃癌细胞分化中随时间变化（2－120min)在15－30min明显受抑制，MEK抑制剂U0126能加强该抑制;随浓度从20－35ug/ml抑制作用逐渐加强（P＜0．05），结论：DADS可能通过抑制ERK通路诱导人胃癌细胞分化。

DADS对人白血病细胞和淋巴瘤细胞诱导凋亡作用比较研究

大蒜及其烯丙基硫化物的抗肿瘤作用正日益受到关注[1-2].我们的前期研究显示,DADS对人白血病HL60细胞具有双效作用,小剂量DADS（〈1.25mg·L^-1）诱导人白血病细胞分化,而中等剂量DADS（〉1.25mg·L^-1）可诱导人白血病细胞凋亡[3-4].我们的前期研究表明,Rac2与DADS诱导人白血病细胞凋亡相关[5],且DADS通过活性氧介导的JNK信号通路诱导HL-60细胞的凋亡,且NADPH氧化酶的活化是DADS诱导HL-60细胞凋亡过程ROS的主要来源[6-7].本研究在前期工作基础上.

DADS对食管癌细胞侵袭能力的影响及作用机制

目的:探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对食管癌细胞株ECA-109体外侵袭能力的影响及其作用机制。方法:MTT法检测DADS对食管癌ECA-109细胞活力的影响,Transwell侵袭试验测定DADS在不同浓度时对ECA-109细胞侵袭能力的抑制作用。Western blot检测DADS在不同浓度下对ECA-109细胞MMP-2、MMP-9,TIMP-1、TIMP-2蛋白表达水平的影响。结果:DADS作用24h后,当浓度大于30μg/ml时,DADS可以显著抑制ECA-109细胞的活力,且随浓度升高其抑制作用相应增加;在浓度为10μg/ml-30μg/ml时,DADS能够明显减少穿过侵袭小室基底膜的肿瘤细胞数量,且抑制作用呈剂量依赖性;DADS可以使ECA-109细胞中MMP-2、MMP-9的表达水平降低,同时TIMP-1、TIMP-2的水平升高。结论:DADS在体外能够显著降低食管癌细胞的侵袭能力,其作用机制可能与DADS抑制MMP-2、MMP-9表达,上调TIMP-1、TIMP-2的表达有关。

DADS联合P-gp抑制剂比立考达协同逆转A549/DDP多药耐药性的研究

目的为研究DADS(二烯丙基二硫)联合第二代P-gp抑制剂比立考是否可协同逆转肺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的多药耐药,增强化疗敏感性。方法 MTT进行药物毒性试验,Western和RT-PCR检测P-gp及其编码基因MDR-1表达变化。结果非细胞毒性剂量的8 mg/L DADS和2.3μmol/L的比立考达都可以增加CDDP(顺铂)对A549/DDP细胞毒性,且二者联合具有协同作用。并通过Western和PCR验证经8 mg/L DADS作用后耐药细胞系A549/DDP后P-gp与MDR-1表达明显降低,经8 mg/L DADS和2.3μmol/L的比立考达共同作用后A549/DDP后P-gp与MDR-1表达进一步降低。结论 DADS与比立考达在逆转肺癌多药耐药具有协同作用。

大蒜成分DADS抑制人类乳腺癌细胞MDA-MB-231的恶性表型及环氧化酶-2的基因表达

目的探讨DADS治疗侵润性乳腺癌的可能性。方法应用软琼脂集落形成实验,检测细胞不依赖停泊生长能力;观察乳腺细胞在Matrigel培养的形态,检测细胞的浸润性;应用照相和计数的方法检测饱和密度。结果DADS抑制MDA-MB-231细胞的不依赖停泊生长能力,浸润性和饱和密度,并在转录水平抑制环氧化酶-2的表达。结论DADS部分地抑制高度侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231恶性表型,提示DADS可用于治疗浸润性乳腺癌。

DADS对人肝癌细胞株HepG_2增殖和凋亡的影响

目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT、细胞计数检测DADS对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响;应用流式细胞仪检测DADS对HepG2细胞周期和细胞凋亡率的影响。结果:DADS使细胞增殖明显受抑制且抑制率呈药物浓度时间依赖性(P<0.05),DADS组细胞的倍增时间延长(P<0.05)。与对照组比较DADS处理组G2/M期细胞比例显著增加,而G0/G1期细胞比例则明显下降,细胞的凋亡率显著增加(P<0.05)。结论:DADS对人肝癌细胞株具有抗增殖作用,且与药物浓度及作用时间相关。DADS能阻滞细胞周期在G2/M期,并诱导细胞凋亡。