胃腺癌组织中NKG2D及DAP10表达的初步研究

目的观察NKG2D、DAP10在胃腺癌和癌旁正常组织中的表达情况,探讨两者在胃癌发生发展中的可能作用。方法对20例胃腺癌患者的胃癌及癌旁正常组织,应用免疫组化SP法检测NKG2D、DAP10的表达水平及差异,分析它们在不同组织中的表达率、表达强度及相互关系。结果胃癌组织中NKG2D的表达率明显低于癌旁正常组织(55%vs100%,P<0.01);且胃癌组织中NKG2D的表达强度显著低于癌旁正常组织(P<0.01)。胃癌组织中DAP10的表达率虽然高于癌旁正常组织,但差异无显著性意义(100%vs90%,P>0.05);其表达强度明显强于癌旁正常组织(P<0.01)。胃癌组织中NKG2D与DAP10的表达强度无明显相关性(r=-0.425,P>0.05)。结论胃癌组织中NKG2D的表达下调,而DAP10的表达上调,提示胃癌组织中NKG2D/DAP10信号途径存在明显紊乱,可能与胃癌免疫逃逸有关。

血管活性肠肽与胃腺癌炎性细胞中NKG2D分子、衔接体蛋白质10、细胞外信号调节激酶表达的相关性研究

目的观察NKG2D和相关信号分子衔接体蛋白质10（DAP10）、ERK在胃腺癌和癌旁组织炎性细胞内的表达情况，以及血管活性肠肽（VIP）对健康志愿者NK细胞中NKG2D、DAP10、ERK表达的影响。初步分析VIP对炎性细胞，尤其是NK细胞中NKG2D及其相关信号分子的作用。方法通过免疫组织化学方法检测36对胃腺癌组织和癌旁正常组织炎性细胞中NKG2D分子、DAP10、ERK表达情况。使用补体裂解法原代分离、纯化30名健康志愿者外周血NK细胞，通过免疫细胞化学和RTPCR方法检测VIP干预前后NK细胞中NKG2D分子、DAP10、ERK表达情况。两组间计量资料比较用t检验。计数资料采用秩转换的非参数检验（Kruskal—wallisH检验）。结果胃腺癌炎性细胞中NKG2D分子、DAP10和ERK的蛋白表达强度显著低于癌旁正常组织（H=30．640、24．910、20．320，P均〈0．01）。且NKG2D分子、DAP10和ERK在低分化（H=4．049、11．830、8．118）、Ⅲ至Ⅳ期（H=4．275、11．560、7．686），NKG2D分子和ERK在有淋巴结转移（H=6．513、6．064）的胃腺癌中蛋白表达更低（P均d0．05），但与患者性别、年龄、病变部位无明显的相关性（P均〉0．05）。VIP作用后的NK细胞中NKG2D分子、DAP10、ERK的表达降低（蛋白：H=12．438、4．798、13．745，mRNA：F=337．640、638．579、1055．015，P均〈0．05）。结论胃癌组织可能通过分泌VIP下调NK细胞中NKG2D、DAP10、ERK的表达，参与胃癌的免疫逃逸。

IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8^+ T细胞高表达NKG2D

目的观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中,NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律。方法使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况。使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养,之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况。使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10 mRNA的表达变化。结果使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,但是在CD4+T细胞表面始终不表达。同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用。半定量RT-PCR结果显示,使用大剂量IL-2活化人PBMC之后,NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化。结论大剂量IL-2培养人PBMC之后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一。