多发性骨髓瘤手术治疗患者外周血细胞积分和IL-32与预后的关系

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)手术治疗患者外周血细胞积分和白细胞介素(IL)-32水平与预后的关系。方法选取2019年1月—2021年1月大连市第二人民医院行手术治疗的MM患者102例。检测所有患者术前1 d的单核细胞绝对数(MO#)、血小板(PLT)计数、红细胞平均体积(MCV)和IL-32水平,计算外周血细胞积分。收集所有患者的临床资料和实验室检测结果。对患者进行术后随访(1年),根据MM患者的生存情况分为存活组(76例)和死亡组(26例)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标判断MM患者术后死亡的效能。采用Kaplan-Meier生存曲线分析MM患者的预后情况,采用Cox比例风险回归分析评估MM患者术后死亡的危险因素。结果死亡组外周血细胞积分2~3分、MO#>0.6×10^(9)·L^(-1)和MCV>100 fL所占比例,以及胱抑素C(Cys C)、IL-32水平均高于存活组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血细胞积分、IL-32单项检测和联合检测(串联)判断MM患者术后死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.811、0.837、0.905。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,外周血细胞积分2~3分组生存率显著低于0~1分组(P<0.05),高IL-32组(IL-32≥62.38 ng·L^(-1))生存率显著低于低IL-32组(IL-32<62.38 ng·L^(-1))(P<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,外周血细胞积分、IL-32和Cys C均是MM患者术后1年死亡的危险因素[风险比(HR)分别为3.854、3.677、3.575,95%可信区间(CI)分别为1.394~10.650、1.330~10.161、1.294~9.880]。结论外周血细胞积分联合IL-32可作为判断MM患者术后1年死亡的敏感指标。

胃癌组织中IL-32与Apaf-1蛋白的表达及意义

目的 分析胃癌组织中白细胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)与凋亡蛋白酶激活因子-1(Apoptotic Protease Activating Factor-1,Apaf-1)的表达及意义。方法 回顾性选取2019年1月—2022年12月南通市肿瘤医院收治的100例胃癌患者的临床资料,分别取其胃癌组织标本(胃癌组)和正常胃黏膜标本(癌旁组),通过免疫组化法(Streptavidin-perosidase,SP)检测胃癌标本与正常标本中IL-32、Apaf-1蛋白的阳性表达情况。结果胃癌组IL-32阳性表达率高于癌旁组,Apaf-1蛋白阳性表达率低于癌旁组,差异有统计学意义(P均<0.05);胃癌患者高中分化程度与低分化程度之间,浸润深度<肌层与≥肌层之间,TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期与分期为Ⅲ、Ⅳ期之间以及有无淋巴结转移之间的IL-32、Apaf-1蛋白阳性表达率对比,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 IL-32与Apaf-1蛋白的阳性表达可为胃癌患者的临床诊断和治疗提供重要的参考价值。

纤维支气管镜肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32及PCT水平对呼吸机相关性肺炎病情及预后判断的价值

目的:探讨纤支镜支气管肺泡灌洗液中可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、白细胞介素32(IL-32)及降钙素原(PCT)水平与呼吸机相关肺炎(VAP)患者病情及预后判断的价值。方法:选取确诊的53例VAP患者作为VAP组;另选取同期实施机械通气但是未发生VAP的56例患者作为对照组。记录两组患者肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32、PCT水平、CPIS评分、APACHEⅡ评分,并探究其与患者病情和预后的相关性。结果:VAP组患者肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平及CPIS评分、APACHEⅡ评分均高于对照组(P<0.05);VAP组患者肺泡灌洗液的sTREM-1、IL-32、PCT水平与CPIS评分正相关(r=0.614、0.603、0.621,P<0.05);VAP组患者肺泡灌洗液的sTREM-1、IL-32、PCT水平与APACHEⅡ评分正相关(r=0.414、0.463、0.409,P<0.05);53例VAP患者,经过28 d治疗,死亡17例、存活36例,死亡的VAP患者肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平及CPIS评分、APACHEⅡ评分均高于存活组(P<0.05);肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平预测VAP患者不良预后结局的受试者工作曲线下面积(AUC)分别为0.900、0.862、0.917。结论:VAP患者肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32、PCT水平升高,并且与患者肺部感染程度、病情危重程度正相关,对于预测患者不良结局具有较高的价值。

血清IL-8、IL-32、TNF-α水平与细菌性肺炎患儿病情严重程度的相关性

目的:分析血清白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-32(IL-32)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与细菌性肺炎患儿病情严重程度的相关性。方法:回顾性分析2021年7月至2022年7月该院收治的106例细菌性肺炎患儿的临床资料,设为观察组,并根据病情严重程度将其分为重症肺炎患儿51例和非重症肺炎患儿55例。另回顾性分析同期于该院行健康体检的106名健康儿童的临床资料,设为对照组。比较观察组与对照组、重症肺炎患儿与非重症肺炎患儿血清IL-8、IL-32、TNF-α水平,采取Spearman相关性分析血清IL-8、IL-32、TNF-α水平与细菌性肺炎患儿病情严重程度的相关性。结果:观察组血清IL-8、IL-32、TNF-α水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重症肺炎患儿血清IL-8、IL-32、TNF-α水平均高于非重症肺炎患儿,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清IL-8、IL-32、TNF-α水平均与细菌性肺炎患儿病情严重程度呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:血清IL-8、IL-32、TNF-α水平与细菌性肺炎患儿病情严重程度均呈正相关。

白细胞介素-32、脂蛋白相关磷脂酶A2水平与阿尔茨海默病患者认知功能损害的相关性分析

目的探讨白细胞介素-32(IL-32)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平与阿尔茨海默病(AD)患者认知功能损害的相关性,为临床治疗提供参考。方法选取2021年7月至2023年8月泰州市第五人民医院收治的70例AD患者为AD组,另选取同期于泰州市第五人民医院体检的50例健康志愿者为健康组,进行回顾性分析。根据简易智力状态检查量表(MMSE)评分将AD组分为轻度组(21~26分,22例)、中组(10~20分,35例)、重度组(<10分,13例)。比较AD组和健康组研究对象的IL-32、Lp-PLA2水平,以及轻、中、重度组研究对象的IL-32、Lp-PLA2水平,分析IL-32、Lp-PLA2水平与AD患者认知功能损害的相关性。结果AD组研究对象IL-32、Lp-PLA2水平均高于健康组;重度组研究对象IL-32、Lp-PLA2水平均高于轻、中度组,中度组研究对象IL-32、Lp-PLA2水平均高于轻度组(均P<0.05)。IL-32、Lp-PLA2水平与AD患者认知功能损害均呈正相关(r=0.775、0.803,均P<0.05)。结论IL-32、Lp-PLA2水平与AD患者认知功能损害具有较高的相关性,可作为临床反映AD患者病情进展的敏感血清标志物。

尾巨桉DH32-28组培再生过程中激素浓度筛选与转基因愈伤组织获得

探索尾巨桉良种无性系DH32-28的组培再生体系,进而建立稳定的遗传转化系统,以期为进一步获得转基因桉树再生植株,以及开展桉树基因功能及分子育种研究提供参考。以DH32-28组培苗叶片和茎段为外植体,通过筛选植物生长调节剂噻苯隆(TDZ)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、1-萘乙酸(NAA)以及吲哚丁酸(IBA)的合适浓度,进行外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根诱导;通过测定愈伤组织诱导阶段以及生根诱导阶段组培材料对卡那霉素的耐受力,确定卡那霉素的临界筛选浓度,用于农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化实验。结果表明:以MS为基本培养基,0.025 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA、0.05 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA的激素配比分别最适于DH32-28叶片和茎段的愈伤诱导,愈伤诱导率均为98.3%。将诱导出的叶片和茎段愈伤组织转移到含有0.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA的不定芽分化培养基中,不定芽分化率分别为44.4%和96.7%。以1/2MS为基本培养基,添加0.5 mg·L^(-1)IBA对DH32-28再生芽的不定根诱导率最高,不定根诱导率为72.8%。愈伤组织和不定芽诱导阶段的卡那霉素最适筛选浓度为5 mg·L^(-1),生根阶段最适浓度为20 mg·L^(-1)。本研究成功建立了尾巨桉无性系DH32-28高效的再生体系,并采用农杆菌介导的遗传转化方法将红色荧光蛋白报告基因DsRed2导入到DH32-28茎段受体材料,获得了表达DsRed2的转基因愈伤组织。

LncRNA MIR503HG靶向miR-32-5p调控 ITGA6表达对非小细胞肺癌增殖与迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR503HG、微小RNA(miRNAs)-32-5p、整合素α(ITGA)6在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对NSCLC细胞增殖和迁移的影响。方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中提取273例NSCLC患者癌组织及其对应癌旁组织的LncRNA、miRNA及转录组mRNA的芯片数据,R软件中MAX STAT函数包统计分析LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6在NSCLC中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测80例NSCLC患者癌组织标本和NSCLC细胞系中LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6 mRNA表达。双荧光素酶实验证明LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6的关系。依次以LncRNA MIR503HG-mimic-NC、LncRNA MIR503HG-mimic、miR-32-5p-agomir-NC、miR-32-5p-agomir、LncRNA MIR503HG-mimic+miR-32-5p-agomir、LncRNA MIR503HG-mimic+miR-32-5p-agomir+pcDNA3.1-ITGA6、miR-32-5p-agomir+pcDNA3.1-ITGA6转染H1299细胞,另设定正常(Normal)组细胞。EDU染色实验与Transwell小室实验检测各组细胞体外增殖与转移活性;裸鼠体内皮下种植肿瘤模型检测细胞体内生长与转移能力。Western印迹检测ITGA6、E-钙黏蛋白(cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达。结果 在线分析结果显示,与癌旁组织和BEAS-2B细胞相比,LncRNA MIR503HG、ITGA6 mRNA在NSCLC组织和NSCLC细胞表达升高,miR-32-5p mRNA下降,差异具有统计意义(均P<0.05)。双荧光素酶实验证实LncRNA MIR503HG靶向miR-32-5p表达,miR-32-5p靶向ITGA6表达。过表达LncRNA MIR503HG可增强H1299细胞的体外增殖与转移及体内生长与转移能力,ITGA6和Vimentin表达升高,E-cadherin表达降低,miR-32-5p-agomir可部分逆转这一作用,而pcDNA3.1-ITGA6可部分修复这一逆转作用,差异均具有统计意义(P<0.05)。结论 下调LncRNA MIR503HG表达能降低H1299细胞增殖与转移能力,发挥抑癌效应,其机制可能与靶向miR-32-5p调控ITGA6表达水平有关,为NSCLC的治疗提供靶点。

不同造林模式对1年生尾巨桉DH32-29生长效应和土壤理化性质的影响

设置林耕带外沿种植(T1)、林耕带内侧种植(T2)和传统人工整地造林(CK)3种模式,研究机械开垦林耕带造林和传统造林对1年生尾巨桉DH32-29生长效应和林下土壤理化性质的影响。结果表明:T1、T2较CK的生长指标增益显著;T1和T2处理的人工林A层土壤(0~20cm)透气度、渗水度,B层土壤(20~40cm)和C层土壤(40~60cm)的田间持水率均显著优于CK的各层土壤;各处理在A层土壤的全氮和速效氮含量和B层土壤的速效氮含量差异极显著,表现为CK>T2>T1;A、B层的全钾和A层的速效钾含量以T2最高,B、C层的速效钾含量以T1最高。采用随机森林算法对尾巨桉DH32-29单株材积与土壤理化性质进行重要性排序,发现表层土壤的透气渗水性和中层土壤的持水性是尾巨桉DH32-29生长量积累的主控土壤理化因子。机械开垦林耕带造林模式在一定程度上改善了林地的土壤理化性质,增强了中层土壤持水性,提高了土壤生态功能,促进了尾巨桉DH32-29对养分的吸收,取得了比传统人工整地造林更高的生长效益。

多发性骨髓瘤患者血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平及临床意义

目的探究多发性骨髓瘤(MM)患者血清白细胞介素-32(IL-32)、白细胞介素-37(IL-37)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平及临床意义。方法回顾性分析2018年1月至2021年3月于江西省上饶市人民医院就诊的130例疑似MM患者临床资料,根据骨髓涂片检测分为MM组(n=75)和非MM组(n=55)。比较两组入院时血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平差异,经受试者工作特征(ROC)曲线分析入院时血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平对MM患者的预测价值。基于Durie-Salmon(DS)分期的临床分期标准,将MM患者分为DSⅠ期、Ⅱ期及Ⅲ期3个亚组,比较不同病情严重程度亚组患者入院时的血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平差异;根据3年内患者生存情况将其分为存活组和死亡组,经ROC曲线分析入院时血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平对MM患者的预后效能。结果入院时,MM组的血清IL-32、sIL-2R水平显著高于非MM组(P<0.05),而MM组的IL-37水平显著低于非MM组(P<0.05);经ROC曲线分析发现,血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平三者单一指标检测的ROC曲线下面积(AUC)值分别为0.905、0.922、0.846,差异有统计学意义(P<0.05)。入院时,MM组不同DS分期患者的血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平对比,差异均有统计学意义(P<0.05)。根据MM患者3年内生存情况,其中12例患者死亡,纳入死亡组,剩余病例自动纳入存活组;经ROC曲线分析发现,血清IL-32、IL-37、sIL-2R水平三者单一指标检测的AUC值分别为0.926、0.882、0.860,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中IL-32、IL-37及sIL-2R水平与MM的发展和临床表现密切相关,可帮助评估疾病的进展和预后,为个体化治疗提供依据。

系统性红斑狼疮患者外周血HMGB1、IL-32水平变化及对预后的影响

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-32(IL-32)水平变化及对预后的影响。方法:选取2020年5月—2022年5月许昌市中心医院收治的168例SLE患者作为研究对象。根据治疗6个月后是否出现永久性脏器损伤分为预后不良组(54例,出现永久性脏器损伤)和预后良好组(114例,未出现永久性脏器损伤),根据入院时SLE活动评分量表(SLEDAI)分为无活动(58例,0~4分)、轻度活动(43例,5~9分)、中度活动(35例,10~14分)、重度活动(32例,≥15分)4个亚组。比较不同活动程度患者入院时及两组患者不同时间点外周血HMGB1、IL-32水平,分析入院时外周血HMGB1、IL-32水平与SLEDAI评分的相关性,根据受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血HMGB1、IL-32水平联合检测对SLE患者预后不良的预测价值,危险度评价各指标对SLE患者预后不良的影响。结果:治疗1个月、3个月后预后不良组外周血HMGB1、IL-32水平高于预后良好组,差异有统计学意义(t=14.486、25.838、13.067、26.499,P<0.05);无活动患者入院时外周血HMGB1、IL-32水平<轻度活动患者<中度活动患者<重度活动患者,差异有统计学意义(F=347.793、201.076,P<0.05);相关性分析发现,入院时外周血HMGB1、IL-32水平与SLEDAI评分均呈正相关(r=0.639、0.577,P<0.05);治疗1个月、3个月后外周血HMGB1、IL-32水平联合预测SLE预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.751、0.833,最佳敏感度、特异度分别为(85.19%、64.91%)(96.30%、70.18%),均高于各指标单一预测;治疗1个月、3个月后外周血HMGB1、IL-32高水平患者预后不良的危险度分别是低水平的2.903、1.885、3.333、2.554倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血HMGB1、IL-32水平与SLE患者活动度及预后密切相关,在SLE诊断及预后评估中具有可靠价值。

血清β-CTX、IL-32水平与强直性脊柱炎的相关性研究

目的 探讨血清骨Ⅰ型胶原交联C端末端肽β(β-CTX)、白介素-32(IL-32)对强直性脊柱炎(AS)的预测价值。方法 将59例AS患者设为研究组,122例骨关节炎患者设为对照组。分别采用全自动血液分析仪检测患者包括白细胞(WBC)、中性粒细胞(NE)、淋巴细胞(L)、血小板(PLT)在内的血常规检查指标。免疫比浊法检测患者的C反应蛋白水平(CRP)。酶联免疫吸附法检测患者的β-CTX、IL-32水平。利用Logistic回归方程计算患者发生AS的独立预测因素。绘制受试者工作曲线(ROC),根据曲线下面积(AUC)评价患者血清β-CTX、IL-32水平预测发生AS的诊断效能。结果 患者PLT、CRP、WBC、β-CTX、IL-32水平为发生AS的影响因素。患者血清β-CTX、IL-32水平预测AS发生的AUC分别为(0.781)、(0.773),两者联合检测AUC(0.859)明显高于单项检测。患者血清β-CTX、IL-32水平预测AS0~Ⅱ级、Ⅲ~IV级的AUC分别为(0.726)、(0.801),两者联合检测AUC(0.895)明显高于单项检测。结论 血清β-CTX、IL-32水平可有效预测患者是否发生AS,并且可与作为AS分级诊断的有效辅助指标。

坡位和密度对尾巨桉DH32-13林分生长的影响

对不同坡位和初植密度的尾巨桉DH32-13无性系生长量及经济效益进行调查与分析,结果表明:坡位、密度对8年生尾巨桉DH32-13林分生长量和经济效益均有显著或极显著影响,下坡的生长量最大、经济效益最高,最适初植密度为1650株·hm^(-2);最优坡位和最适初值密度的平均造林成活率分别达95.9%和95.7%,8年生林分保存率、胸径、树高、单株立木材积和蓄积量分别达80.0%~83.3%、16.2~16.8 cm、21.7~24.4 m、0.2070~0.2519 m^(3)、285.6~332.5 m^(3)·hm^(-2),净利润达11.15~14.40万元·hm^(-2),合适的造林坡位和适宜的初植密度能提高尾巨桉DH32-13无性系林分生产力和经济效益。

基于环介导等温扩增快速检测转基因大豆SHZD32-1成分

转基因大豆SHZD32-1是由我国自主研发的耐除草剂抗性品系。为给该品系转基因生物安全监管提供技术支撑,本研究开发其转基因成分的快速便捷式检测方法,主要基于环介导等温扩增技术,设计并筛选该转化体最佳特异性LAMP引物组,优化扩增温度和时间,并分析灵敏度、特异性及稳定性,建立SHZD32-1的LAMP检测体系。结果显示:在62~64℃条件下反应40~60 min扩增效果最佳;灵敏度标准达到质量分数0.05%,高于普通PCR(0.1%);特异性和稳定性较高,检测结果同普通PCR扩增一致。转基因大豆SHZD32-1成分LAMP技术不需要特殊仪器,检测时间短,结果可视化,灵敏度、特异性和稳定性高,有望用于转基因耐草甘膦大豆SHZD32-1的现场快速检测。

左旋多巴诱导帕金森病异动症与纹状体DARPP-32磷酸化的关系

目的观察帕金森病(PD)异动症(LID)大鼠模型纹状体区多巴胺和环磷腺苷调节的磷酸化蛋白-32(DARPP-32)蛋白Thr75位点磷酸化表达数量及表达位点的改变。方法给予PD大鼠模型左旋多巴治疗21d,评估大鼠行为学变化;采用免疫荧光和Western blot检测大鼠纹状体区DARPP-32蛋白Thr75位点磷酸化表达数量和表达部位的改变情况。结果 PD大鼠长期使用左旋多巴出现类似于人类LID行为学表现。免疫荧光结果显示PD组和LID组大鼠损伤侧DARPP-32(Thr75)的表达多位于强啡肽阳性神经元。Western blot结果显示PD组大鼠损伤侧DARPP-32(Thr75)表达为(159.90±7.22)%,与假手术组比较升高(P<0.05);LID组大鼠损伤侧纹状体DARPP-32(Thr75)的表达为(52.60±4.45)%,与假手术组和PD组比较降低(P<0.05)。结论纹状体黑质投射神经元内DARPP-32蛋白Thr75位点磷酸化表达的改变可能参与了LID的发病。

纹状体A_(2A)R/D_2DR表达及DARPP-32磷酸化在运动疲劳调控中的作用

目的通过观察跑台运动大鼠力竭前后纹状体腺苷A2A受体/多巴胺D2受体(A2AR/D2DR)表达、磷蛋白DARPP-32表达及其磷酸化,探讨A2AR/D2DR通过纹状体-苍白球通路对运动疲劳调控的可能机制,为寻求新的抗疲劳药物及手段提供理论与实验依据。方法实验选用8周龄雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为安静对照组(CG)、力竭即刻组(EG)和力竭后恢复90 min(RG)组,每组10只,建立一次性力竭运动疲劳模型。采用免疫荧光双标技术,观察大鼠安静状态、力竭即刻及恢复90 min时纹状体A2AR和D2DR表达的变化;采用免疫荧光和免疫印迹技术,观察大鼠在安静状态、力竭即刻及恢复90 min时纹状体苍白球神经元(D2-MSNs)内DARPP-32表达及磷酸化水平的变化特征。结果大鼠跑台运动至力竭时纹状体A2AR阳性细胞个数显著增高(P<0.01),D2DR阳性细胞个数显著下降(P<0.01),且A2AR和D2DR共表达于D2-MSNs的胞膜上;恢复90 min时A2AR阳性细胞依然显著高于安静状态(P<0.05),D2DR依然低于安静状态(P<0.05);相比安静状态,力竭运动即刻Thr34-DARPP-32磷酸化增加(P<0.01),恢复90 min时表达显著下降(P<0.05),p-Thr34-DARPP-32/DARPP-32比值增加(P<0.01),恢复90 min后有所下降,但没有显著性差异。结论 A2AR和D2DR共同参与了对运动中枢疲劳的调控;大鼠力竭运动过程中,A2AR和D2DR是通过调节Thr34-DARPP-32磷酸化程度而发挥对运动疲劳的调控作用;运动至力竭时A2AR和D2DR调节作用异常,可能是运动疲劳时纹状体神经元异常兴奋的原因之一。

DARPP-32磷酸化参与天芪平颤颗粒缓解帕金森病运动并发症的发生

目的研究天芪平颤颗粒对帕金森病(PD)运动并发症大鼠异常不自主行为学及纹状体DARPP-32(Thr75)磷酸化表达的影响,探讨长期左旋多巴使用后天芪平颤颗粒对异动症(LID)的作用机制。方法 6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备PD大鼠模型并给予左旋多巴治疗4周,制备LID大鼠模型,将LID大鼠随机分为5组,分别给予大鼠生理盐水(LID模型组)、左旋多巴(西药组)以及小、中、大剂量天芪平颤颗粒组,另设假手术组(n=5)为对照组,并用免疫组化和Western blotting法观察各组大鼠纹状体内磷酸化DARPP-32(Thr75)的表达情况。结果长期使用左旋多巴后,PD大鼠出现刻板运动和进行性增加的对侧旋转等行为学改变。天芪平颤颗粒可明显缓解LID大鼠的不自主运动行为。免疫组化结果显示,西药组磷酸化DARPP-32(THr75)表达较LID模型组降低〔(3.53±0.20)×104 vs.(3.85±0.30)×104,P<0.05〕,大、中、小剂量中药组磷酸化DARPP-32(THr75)表达量分别为(8.54±0.17)×104、(8.10±0.31)×104、(7.06±0.69)×104,较西药组升高(P<0.05)。Western blotting结果与免疫组化基本一致,西药组磷酸化DARPP-32(THr75)灰度值与LID模型组比较无统计学差异〔(0.97±0.24)×106 vs.(1.08±0.12)×106,P>0.05〕,大、中、小剂量中药组大鼠纹状体磷酸化DARPP-32(THr75)灰度值分别为(2.40±0.09)×106、(2.37±0.16)×106、(1.44±0.14)×106,较西药组升高(P<0.05)。结论天芪平颤颗粒可降低LID大鼠的异常不自主运动评分,其机制可能是通过逆转磷酸化DARPP-32(THr75)表达的进一步下降,从而抑制了PKA通路的过度活化;DARPP-32磷酸化参与了治疗PD运动并发症的机制。

血清IL-32 sRAGE及NLR与多发性骨髓瘤合并肾损伤的相关性分析

目的:探讨血清白细胞介素-32(IL-32)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与多发性骨髓瘤(MM)合并肾损伤的相关性分析。方法:选取2020年6月至2022年6月如皋市人民医院诊治的82例MM患者作为观察组,并根据患者肾功能情况分为肾损伤组(n=27)和非肾损伤组(n=55),同期选取41例健康体检者设立为健康对照组。对比IL-32、sRAGE、NLR水平;采用二元Logistic回归分析IL-32、sRAGE、NLR对MM患者并发肾损伤的影响;采用ROC曲线分析IL-32、sRAGE、NLR预测MM患者并发肾损伤的AUC值、敏感度、特异度。结果:观察组的IL-32、NLR均高于健康对照组,而sRAGE低于健康对照组(P<0.05)。肾损伤组的IL-32、NLR均高于非肾损伤组,而sRAGE低于非肾损伤组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,IL-32、NLR水平升高和sRAGE水平下降是影响MM患者并发肾损伤的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清IL-32、sRAGE、NLR预测MM患者并发肾损伤的AUC值分别为(0.761、0.765、0.802,P<0.05)。结论:血清IL-32、sRAGE、NLR表达水平会随MM患者并发肾损伤而升高。

DARPP-32、多巴胺系统与神经元信息整合

Dopamine and CAMP-regulated Phosphoprotein(DARPP-32)是脑内新纹状体等重要核团的神经元内存在的一种具有多方面信息调节与整合作用的蛋白质。多巴胺、谷氨酸等神经递质与相应受体结合后,使DARPP-32的34-苏氨酸等的磷酸化状态发生改变,继而影响PP-1、PP2B等重要磷酸酯酶的活性,使神经元内从各种途径获取的信息得以整合,神经元的生理功能及其控制的行为发生改变。DARPP-32的功能与多种神经递质及其受体密切相关,其功能可用基因敲除技术进行探究。

缺血引起沙土鼠纹状体DARPP-32磷酸化状态的变化

采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉阻断前脑缺血模型 ,以放射自显影 (反向磷酸化 ,back phosphorylation)及免疫印迹 (Westernblotting)法体外测定缺血时纹状体DARPP 32磷酸化水平和蛋白含量的变化。结果表明 ,短暂性缺血纹状体DARPP 32的免疫学活性和蛋白含量无明显改变。在缺血 10min内 ,随缺血时间的延长 ,体外DARPP 32的 [32 P]的掺入量在缺血 5min时升高 ,在缺血 2、7、10min时均降低 ,而反向磷酸化的测定结果表明体内DARPP 32磷酸化水平增高 ,说明缺血可诱导DARPP 32磷酸化水平变化。

DARPP-32磷酸化状态与左旋多巴诱发异动症形成间关系的研究

目的:研究纹状体区DARPP-32磷酸化水平变化和直接通路活动的改变在左旋多巴诱发的异动症(LID)形成中所起的作用。方法:以SCH23390(D1受体拮抗剂)治疗LID大鼠,观察LID大鼠的行为学改变,并用逆转录聚合酶链反应技术检测LID大鼠纹状体区前强啡肽原(PDyn)基因mRNA的表达情况,免疫印迹技术检测纹状体内DARPP-32蛋白Thr-34位点和Thr-75位点磷酸化修饰水平的变化。结果:LID大鼠纹状体区PDyn mRNA基因表达和磷酸化的Thr-34位点DARPP-32水平较对照组均明显增高,Thr-75位点磷酸化无显著改变。经SCH23390治疗后,LID大鼠异常不自主运动明显减少,PDyn基因表达和Thr-34位点磷酸化水平降低,Thr-75位点磷酸化水平升高。结论:大鼠纹状体区PDyn基因表达和Thr-34位点磷酸化水平的升高与LID的形成有关,提示直接通路活动异常及基底节环路功能异常参与了LID的发生。