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葡萄卷叶伴随病毒-3外壳蛋白的原核表达及其特异性抗血清的制备
被引量:
8
1
作者
徐章逸
王国平
+2 位作者
刘亚萍
王彩霞
洪霓
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期129-134,共6页
利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因。序列分析结果表明,cp基因的长度为942bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%...
利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因。序列分析结果表明,cp基因的长度为942bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%~99%,编码的氨基酸相似性为95%~100%。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,cp在大肠杆菌中可表达出分子量约为35kDa的蛋白。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)及斑点免疫结合测定(DBIA)结果显示,制备的特异抗血清可用于检测田间感病葡萄样品中的GLRaV-3。
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关键词
GLRaV-3
CP
基因克隆
原核表达
PAS—ELISA
dbia
原文传递
题名
葡萄卷叶伴随病毒-3外壳蛋白的原核表达及其特异性抗血清的制备
被引量:
8
1
作者
徐章逸
王国平
刘亚萍
王彩霞
洪霓
机构
湖北省作物病害监测和安全控制实验室
华中农业大学国家果树脱毒种质资源室内保存中心
出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期129-134,共6页
基金
科技部"863"课题资助(2006AA10Z434-04)
文摘
利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因。序列分析结果表明,cp基因的长度为942bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%~99%,编码的氨基酸相似性为95%~100%。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,cp在大肠杆菌中可表达出分子量约为35kDa的蛋白。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)及斑点免疫结合测定(DBIA)结果显示,制备的特异抗血清可用于检测田间感病葡萄样品中的GLRaV-3。
关键词
GLRaV-3
CP
基因克隆
原核表达
PAS—ELISA
dbia
Keywords
GLRaV-3
cp
gene cloning
prokaryotic expression
PAS-ELISA
dbia
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
葡萄卷叶伴随病毒-3外壳蛋白的原核表达及其特异性抗血清的制备
徐章逸
王国平
刘亚萍
王彩霞
洪霓
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
8
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