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CAT基因敲除对热带假丝酵母产DCA13代谢网络的影响 被引量:2
1
作者 高弘 黄英明 +3 位作者 刘铭 张剑 华玉涛 曹竹安 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期2157-2161,共5页
肉毒碱乙酰转移酶在脂肪酸β-氧化过程中起着重要作用.利用同源重组技术,构建了热带假丝酵母CAT基因单拷贝缺失菌CZ-15和双拷贝缺失菌CKC-11后,发现CZ-15的β-氧化过程受到抑制,与原始菌F10-1相比,十三碳二元酸的产量和烷烃转化率都得... 肉毒碱乙酰转移酶在脂肪酸β-氧化过程中起着重要作用.利用同源重组技术,构建了热带假丝酵母CAT基因单拷贝缺失菌CZ-15和双拷贝缺失菌CKC-11后,发现CZ-15的β-氧化过程受到抑制,与原始菌F10-1相比,十三碳二元酸的产量和烷烃转化率都得到了明显提高,菌体生长情况与F10-1基本一致;CKC-11则无法代谢烷烃,菌体生长也受到了较大的影响.采用代谢动力学模型对发酵数据进行了计算与分析,实验结果与模型相符.根据实验和模型计算结果完善了热带假丝酵母代谢葡萄糖和十三碳二元酸的途径. 展开更多
关键词 十三碳二元酸 热带假丝酵母 代谢网络 重组菌
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十三碳二元酸发酵与肉毒碱乙酰基转移酶酶活动力学研究
2
作者 高弘 李春 +2 位作者 乔岚 华玉涛 曹竹安 《化学工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期57-60,共4页
在利用热带假丝酵母发酵生产十三碳二元酸(DCA13)的过程中,建立了用荧光法测定酵母体内肉毒碱乙酰基转移酶(CAT)酶活的方法,方法简单,重现性高,测量精确。研究了热带假丝酵母中CAT酶活动力学与产酸速率的关系,结果表明:代谢前期细胞以... 在利用热带假丝酵母发酵生产十三碳二元酸(DCA13)的过程中,建立了用荧光法测定酵母体内肉毒碱乙酰基转移酶(CAT)酶活的方法,方法简单,重现性高,测量精确。研究了热带假丝酵母中CAT酶活动力学与产酸速率的关系,结果表明:代谢前期细胞以生长为主,CAT酶活较高可提供更多的生长动力,而代谢后期细胞进入产酸期,CAT酶活与产酸速率的变化趋势成反比,即产酸速率高时,CAT的酶活较低。 展开更多
关键词 十三碳二元酸(dca13) 热带假丝酵母 β-氧化 肉毒碱乙酰基转移酶(CAT)
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肉毒碱乙酰转移酶基因敲除对长链二元酸生产代谢过程的影响 被引量:5
3
作者 高弘 张剑 +2 位作者 华玉涛 李春 曹竹安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期102-105,共4页
在利用热带假丝酵母发酵生产长链二元酸的过程中 ,脂肪酸将进入 β 氧化途径 ,代谢产生能量 ,从而降低产物收率。首次以负责运输的肉毒碱乙酰转移酶为改造目标 ,在肉毒碱乙酰转移酶基因中插入潮霉素B抗性基因 ,构建DNA转化质粒 ,并进行... 在利用热带假丝酵母发酵生产长链二元酸的过程中 ,脂肪酸将进入 β 氧化途径 ,代谢产生能量 ,从而降低产物收率。首次以负责运输的肉毒碱乙酰转移酶为改造目标 ,在肉毒碱乙酰转移酶基因中插入潮霉素B抗性基因 ,构建DNA转化质粒 ,并进行一次同源重组 ,得到肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝敲除的基因工程菌。根据摇瓶实验结果 ,该基因工程菌与原始菌株相比 ,十三碳二元酸的产量与摩尔转化率分别提高了 13 0 %和 11 8%。 展开更多
关键词 肉毒碱乙酰转移酶 十三碳二元酸 热带假丝酵母 同源重组 代谢调控
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热带假丝酵母及其重组菌产十三碳二元酸的补糖发酵实验 被引量:1
4
作者 高弘 刘铭 +2 位作者 黄英明 华玉涛 曹竹安 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期814-817,共4页
利用热带假丝酵母原始菌F10-1及已构建的肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失重组菌CZ-15,在5L发酵罐中进行了补糖发酵批式培养,生产十三碳二元酸(DCA13).结果表明,肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失后,CZ-15菌株的最佳补糖时间和补糖浓度都... 利用热带假丝酵母原始菌F10-1及已构建的肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失重组菌CZ-15,在5L发酵罐中进行了补糖发酵批式培养,生产十三碳二元酸(DCA13).结果表明,肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失后,CZ-15菌株的最佳补糖时间和补糖浓度都与原始菌F10-1不同.采用补糖工艺后,F10-1与CZ-15的十三碳二元酸的产量分别提高了25.0%和23.4%,达到99.5和108.1g/L,烷烃转化率分别提高了35.5%和28.6%. 展开更多
关键词 肉毒碱乙酰转移酶 十三碳二元酸 热带假丝酵母 基因工程菌 补糖发酵
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