运动和罗格列酮降低ADMA的协同作用及其机制研究

目的:研究运动与罗格列酮联合对T2DM大鼠ADMA水平的影响,观察其是否存在协同效应。方法:采用高质饮食结合腹腔注射低剂量STZ的方法建立T2DM大鼠模型,将实验动物分为正常对照组、T2DM组、T2DM+运动组、T2DM+罗格列酮组和T2DM+运动+罗格列酮组,每组给予相应的干预10周。结果:罗格列酮可以降低T2DM大鼠CML(P<0.01)和ADMA(P<0.01),同时上调肝脏PPAR-γ(P<0.01)和DDAH-1(P<0.01)mRNA表达,而运动可以降低T2DM大鼠CML(P<0.01)和ADMA(P<0.05),同时上调肝脏PPAR-γ(P<0.05)和DDAH-1(P<0.01)mRNA表达;运动和罗格列酮联合干预组CML明显低于罗格列酮单独干预(P<0.01),ADMA明显低于单独运动干预(P<0.05),肝脏PPAR-γ和DDAH-1mRNA表达分别显著高于单独运动((P<0.01)和单独罗格列酮(P<0.01)干预。结论:运动和罗格列酮在降低ADMA保护血管内皮方面可能存在协同效应,其机制可能是基于AGEs/PPAR-γ/DDAH/ADMA途径。

氯沙坦通过降低ADMA水平诱导血管内皮保护作用

目的本实验拟观察在培养的人脐静脉内皮细胞,氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管内皮活化的保护作用是否与降低非对称二甲基精氨酸（ADMA）水平有关。方法用不同浓度的AngⅡ（10^-9-10^-6mol.L^-1）孵育不同时间（6-48 h）,并加入不同浓度的氯沙坦（1、3、10μmol.L^-1）预处理1 h,检测细胞培养上清液中的ADMA、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,细胞中蛋白甲基转移酶（PRMT）蛋白表达、二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）和活化蛋白（AP-1）活性。结果AngⅡ呈浓度和时间依赖性增加PRMT的表达,AngⅡ（10^-6mol.L^-1,24 h）显著增加培养液中ADMA、TNF-α水平,减少NO的生成,降低细胞DDAH活性,增加细胞AP-1活性。氯沙坦可拮抗AngⅡ所致的上述效应。结论这些结果提示氯沙坦诱导的血管内皮细胞保护作用可能与降低ADMA水平有关。

二甲基精氨酸二甲胺水解酶-1的理论研究

运用分子对接和分子动力学方法研究二甲基精氨酸二甲胺水解酶-1(DDAH-1)与其抑制剂亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸(L-VNIO)和亚胺基丙基-L-鸟氨酸(Me-L-NIO)的相互作用和结合模式,并根据实验得到的结论设计了亚胺基苯乙基-L-鸟氨酸(Ph-L-NIO)抑制剂.结果表明:L-VNIO比Me-L-NIO对DDAH-1的抑制效果更强,这个结果与实验测得L-VNIO和Me-L-NIO对DDAH-1的半抑制浓度IC50值大小一致.Phe75、Asp78、His172、Ser175和Asp268这五个氨基酸残基在三种抑制剂形成的复合物中起到非常重要的作用,从计算结果推断在这三个抑制剂中我们设计得到的Ph-L-NIO对DDAH-1的抑制效果最好.