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DDX3X/NF-κB通路介导蛛网膜下腔出血小鼠早期神经元凋亡
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作者 郝广志 郇宇 +2 位作者 韩雨薇 董玉书 梁国标 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期85-90,共6页
目的:研究DDX3X/NF-κB通路在蛛网膜下腔出血(SAH)小鼠早期神经元凋亡过程中的作用。方法:利用颈内动脉穿刺的方法构建SAH小鼠模型,对小鼠进行神经功能评分。使用表达DDX3X靶向shRNA的重组慢病毒(Lv-shDDX3X)预先敲低脑内DDX3X的表达,... 目的:研究DDX3X/NF-κB通路在蛛网膜下腔出血(SAH)小鼠早期神经元凋亡过程中的作用。方法:利用颈内动脉穿刺的方法构建SAH小鼠模型,对小鼠进行神经功能评分。使用表达DDX3X靶向shRNA的重组慢病毒(Lv-shDDX3X)预先敲低脑内DDX3X的表达,或者通过NF-κB抑制剂NF-κB-IN-1(简称IN-1)抑制NF-κB信号通路,利用Western Blot检测小鼠皮质DDX3X和NF-κB(p65)的表达,通过TUNEL/NeuN染色检测各组小鼠大脑皮质神经元的凋亡。结果:SAH术后24 d小鼠神经功能显著障碍(P<0.05),皮质中DDX3X表达显著增加而NF-κB(p65)的表达显著降低(P<0.05)。预先敲低DDX3X后,小鼠神经功能显著恢复,NF-κB(p65)蛋白表达显著高于SAH组(P<0.05);当在敲低DDX3X表达的同时使用IN-1抑制NF-κB活性,则小鼠神经功能恢复不明显。TUNEL/NeuN染色显示敲低DDX3X表达后小鼠脑组织中TUNEL阳性的死亡神经元数量少于SAH组(P<0.05),而如果在敲低DDX3X表达的同时使用IN-1抑制NF-κB活性,则TUNEL阳性的神经元数量减少不明显。结论:DDX3X/NF-κB通路介导了SAH后早期脑损伤小鼠的细胞死亡。 展开更多
关键词 DEAD-box RNA解旋酶3(ddx3X) NF-ΚB 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 凋亡 小鼠
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MicroRNA-1285及其靶标DDX3X对猪塞内卡病毒感染PK-15细胞的调控作用
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作者 孙媛 唐晓钰 +5 位作者 白杨 陈雨琪 郑瑶瑶 吴佼玲 蓝天 马静云 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期357-366,共10页
[目的]探究MicroRNA-1285(miR-1285)及其靶标DDX3X在猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞中的调控作用。[方法]利用qRT-PCR、双荧光素酶活性及Western blot等方法研究miR-1285和DDX3X对I型干扰素(IFN-β)分泌及RIG-I信号通路... [目的]探究MicroRNA-1285(miR-1285)及其靶标DDX3X在猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞中的调控作用。[方法]利用qRT-PCR、双荧光素酶活性及Western blot等方法研究miR-1285和DDX3X对I型干扰素(IFN-β)分泌及RIG-I信号通路的作用,分析miR-1285及DDX3X对SVA 3C蛋白基因表达的影响。[结果]SVA感染PK-15细胞后,miR-1285表达量显著升高,并且miR-1285与DDX3X存在负靶向关系,二者可促进IFN-β转录及蛋白水平的表达。miR-1285通过靶向DDX3X对RIG-I信号通中的MAVS、TRAF3信号分子起调控作用。对于SVA 3C蛋白基因,DDX3X可以显著抑制其转录,并且可以逆转miR-1285所诱导的上调趋势。[结论]SVA感染PK-15细胞后,宿主miR-1285及其靶标DDX3X对IFN-β及病毒3C蛋白的表达具有调控作用,研究结果将为明确miRNAs调控SVA感染的分子机制奠定基础,并为SVA的防控和诊断提供新的科学依据。 展开更多
关键词 MicroRNA-1285 ddx3X 猪塞内卡病毒 IFN-Β RIG-I信号通路
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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠脑干中的表达变化 被引量:3
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作者 张雅雯 王箐 +5 位作者 原萌 刘焕彩 王巧真 丁昊宇 周风华 陈燕春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-6,共6页
目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干... 目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干,应用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光染色技术分别检测ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1ε的表达规律,在脑干运动核团舌下神经(12 N)和面神经(7 N)中阳性细胞的分布特点及细胞定位,每组均选择相同数量的同窝野生型鼠作为对照。结果 RT-PCR和Western blotting结果显示,与同窝野生型鼠相比,ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1εmRNA于95 d、108 d、122 d表达均无明显变化,DDX3和CK1ε蛋白在95 d和108 d表达上调,122 d表达下调(P<0.01,P<0.001)。免疫荧光结果显示,在ALS鼠和野生型鼠脑干的12 N和7N区域均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞,DDX3和CK1ε表达在神经元,在星形胶质细胞不表达。ALS鼠和野生型鼠DDX3和CK1ε免疫反应性具有差异。结论 DDX3和CK1ε在脑干中的表达异常与ALS发病密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 脑干 ddx3 酪蛋白激酶Ⅰε 免疫印迹法 反转录聚合酶链反应 小鼠
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DDX3和CK1ε在ALS转基因小鼠大脑皮层中的表达变化 被引量:2
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作者 王箐 原萌 +5 位作者 刘焕彩 梁婵婵 林宝勇 张雅雯 周风华 陈燕春 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期15-20,共6页
目的:观察RNA解旋酶DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的表达变化,探讨DDX3与CK1ε表达改变在ALS发病中的作用和意义。方法:选择SOD1-G93A转基因小鼠进行试验,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)、晚期(122 d)... 目的:观察RNA解旋酶DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的表达变化,探讨DDX3与CK1ε表达改变在ALS发病中的作用和意义。方法:选择SOD1-G93A转基因小鼠进行试验,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)、晚期(122 d)取材。应用免疫荧光双标染色方法检测DDX3和CK1ε在ALS转基因小鼠大脑皮层中的表达变化规律及其与神经元的共定位关系。应用RT-PCR和Western Blot技术检测ALS转基因小鼠大脑皮层组织中DDX3和CK1ε在mRNA、蛋白水平的表达变化,每组均选择同年龄的野生型小鼠作为对照组。结果:与野生型鼠相比,ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的DDX3蛋白和mRNA早期表达均无明显变化,中、晚期表达均升高;CK1ε蛋白在ALS小鼠发病早期没有明显改变,中、晚期表达升高,mRNA表达无明显变化。免疫荧光双标结果显示,ALS转基因小鼠和野生型小鼠大脑皮层组织中均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞,且与神经元共表达。ALS转基因小鼠大脑皮层组织内DDX3与CK1ε免疫反应性较同龄野生型鼠明显增强。结论:DDX3与CK1ε表达异常与ALS大脑皮层病变密切相关,参与了ALS发病。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 转基因小鼠 大脑皮层 RNA解旋酶ddx3 酪蛋白激酶1ε 小鼠
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DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化 被引量:2
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作者 王箐 王巧真 +5 位作者 刘永新 张雅雯 马晓君 赵春艳 杜红梅 陈燕春 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期369-372,411,共5页
目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应... 目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4 h无改变,8、12、24 h均升高,48 h则降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生。 展开更多
关键词 环磷酰胺 神经管畸形 RNA解旋酶 ddx3 DDX5 大鼠
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RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后关系的研究
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作者 胡金飞 胡望远 《中国妇幼健康研究》 2018年第10期1264-1268,共5页
目的探讨RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后的关系。方法收集2010年1月至2012年12月间就诊金华市中心医院确诊为转移性乳腺癌(Ⅳ期)的患者共83例,经RT-PCR技术检测术后癌组织及癌旁组织RNA解旋酶DDX3的表达情况,分析其与转移性乳腺癌患... 目的探讨RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后的关系。方法收集2010年1月至2012年12月间就诊金华市中心医院确诊为转移性乳腺癌(Ⅳ期)的患者共83例,经RT-PCR技术检测术后癌组织及癌旁组织RNA解旋酶DDX3的表达情况,分析其与转移性乳腺癌患者术后生存状况的关系。结果通过RT-PCR检测结果显示,RNA解旋酶DDX3在转移性乳腺癌组织中的表达(0.49±0.06)显著高于癌旁组织的表达量(0.23±0.02)(t=4.956,P<0.05)。同时,RNA解旋酶DDX3在转移部位、转移部位数、雌激素受体/孕激素受体(ER/PR)状态临床因素中表达存在明显差异(t/F值分别为8.013、9.227、8.246,均P<0.05),而在年龄、是否绝经、癌组织类型临床因素中不存在明显差异(t/F值分别为1.432、0.914、1.107,均P>0.05)。DDX3的表达水平≥0.45在术后3年的复发率明显高于其表达水平<0.45者(χ2=8.121,P<0.05)。同时,DDX3的表达水平≥0.45者的平均复发时间也短于其表达水平<0.45者,两组差异均具有统计学意义(t=7.235,P<0.05)。利用Cox风险回归模型分析结果显示,转移部位、转移部位数、DDX3的表达量是转移性乳腺癌术后预后的独立危险因素(OR值分别为1.427、1.203、2.886,均P<0.05),术后辅助放化疗是保护因素(OR=0.779,P<0.05)。结论 RNA解旋酶DDX3是转移性乳腺癌患者术后预后的影响因素,通过对RNA解旋酶DDX3的检测可为转移性乳腺癌患者临床诊治提供一定的参考价值。 展开更多
关键词 RNA解旋酶ddx3 乳腺癌 转移性 生存率 COX回归
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Ddx3基因在不同日龄小鼠睾丸组织中的表达
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作者 龚淼 张雷 +3 位作者 李莉 赵昱 赵春芳 任广伟 《中国民康医学》 2017年第4期1-4,22,共5页
目的:观察小鼠睾丸初次生精过程中的发育特点;检测Ddx3基因与蛋白在小鼠睾丸生精过程中的表达模式;探讨Ddx3基因对小鼠睾丸生精的影响。方法:采用HE染色与PAS染色的方法观察不同日龄小鼠睾丸组织的石蜡切片;用荧光实时定量PCR的方法检测... 目的:观察小鼠睾丸初次生精过程中的发育特点;检测Ddx3基因与蛋白在小鼠睾丸生精过程中的表达模式;探讨Ddx3基因对小鼠睾丸生精的影响。方法:采用HE染色与PAS染色的方法观察不同日龄小鼠睾丸组织的石蜡切片;用荧光实时定量PCR的方法检测Ddx3 mRNA在小鼠睾丸精子发生过程中的表达;采用免疫组织化学和Western blot方法检测DDX3蛋白在小鼠睾丸初次生精过程中的表达特点和细胞内定位。结果:HE染色结果显示4、13、21、35、42和60日龄是小鼠睾丸发生初次生精过程的特定阶段;荧光实时定量PCR结果显示Ddx3 mRNA在4日龄以后小鼠睾丸组织中均有表达,于35日龄开始明显增高,随后表达水平保持稳定;Western blot显示DDX3蛋白在35、42和60日龄小鼠睾丸生精小管中出现特异性表达并逐渐增高;免疫组织化学法显示DDX3蛋白主要在初级精母细胞和精子细胞的细胞质和细胞核中表达。结论:DDX3蛋白在小鼠初次精子发生过程中呈现特异性表达,提示Ddx3基因可能在精母细胞与精子细胞的发育中发挥作用。 展开更多
关键词 ddx3基因 小鼠 精子发生 睾丸 DEAD box 精母细胞
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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠海马中的表达 被引量:5
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作者 蒲蕾东 张雅雯 +5 位作者 王箐 刘焕彩 刘永新 王巧真 管英俊 陈燕春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期375-380,共6页
目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马中的表达变化,揭示DDX3和CK1ε的表达改变与ALS发病的关系。方法 33只ALS转基因鼠和33只野生型鼠分别于发病不同时期取材,应用RT-PCR和Western blotting技术检... 目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马中的表达变化,揭示DDX3和CK1ε的表达改变与ALS发病的关系。方法 33只ALS转基因鼠和33只野生型鼠分别于发病不同时期取材,应用RT-PCR和Western blotting技术检测海马组织中DDX3和CK1ε的表达变化;通过免疫荧光双标染色技术观察DDX3和CK1ε阳性细胞的分布特点及其与神经元、星形胶质细胞等的共表达情况。结果与野生型鼠相比,ALS转基因鼠海马中DDX3 mRNA和蛋白在发病早期变化不明显,中期和晚期表达均明显降低;CK1εmRNA和蛋白则在发病早期、中期和晚期表达均降低。免疫荧光双标结果显示,在ALS鼠和野生型鼠海马齿状回区和CA区均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞。DDX3和CK1ε主要表达在神经元,在星形胶质细胞未见表达。与野生型鼠比较,ALS转基因鼠海马中DDX3和CK1ε免疫反应性明显降低。结论 DDX3和CK1εmRNA和蛋白在ALS转基因鼠海马中表达均降低,表明DDX3和CK1ε表达异常与ALS海马区病变密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 海马 ddx3 酪蛋白激酶1ε 转基因 免疫印迹法 小鼠
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DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达 被引量:2
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作者 原萌 王箐 +5 位作者 刘金梦 林宝勇 梁婵婵 刘焕彩 孙钰凯 陈燕春 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期243-248,共6页
目的:检测DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达变化,探讨其在ALS纹状体病变中的作用,为ALS研究提供新的实验依据。方法:将发病早期、中期和晚期(即95 d、108 d和122 d)的成年野生型小鼠和SOD1-G93A突变型ALS转基因... 目的:检测DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达变化,探讨其在ALS纹状体病变中的作用,为ALS研究提供新的实验依据。方法:将发病早期、中期和晚期(即95 d、108 d和122 d)的成年野生型小鼠和SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠分别处死取材,运用免疫荧光技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的表达水平进行检测,运用RT-PCR技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的m RNA水平进行检测,运用Western Blot行蛋白水平变化检测。结果:野生型小鼠和SOD1-G93A突变型转基因小鼠纹状体中均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞。DDX3和CK1ε在神经元表达,但在星形胶质细胞不表达。在发病的中期和晚期,DDX3在ALS转基因小鼠纹状体中的m RNA和蛋白表达与野生型鼠相比均升高。CK1εm RNA在ALS发病的早期不变化,在中期、晚期较野生型鼠降低;而在ALS发病的早期转基因小鼠纹状体中CK1ε蛋白表达量较野生型鼠升高,在中期、晚期降低。结论:DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体中表达异常与ALS纹状体的病变密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩性侧索硬化症 转基因小鼠 纹状体 ddx3 CK1ε
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奶山羊DDX3Y蛋白多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 杜伟伟 代邦国 +1 位作者 钟玉玲 史怀平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第1期1-9,16,共10页
【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到奶山羊DDX3Y基因CDs区全序列,测序后通过生物信息学... 【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到奶山羊DDX3Y基因CDs区全序列,测序后通过生物信息学方法比对分析确定DDX3Y蛋白N端1-120氨基酸及C端570-660氨基酸为抗原片段,然后用PCR分别克隆这2个片段的基因,最后利用搭桥PCR方法得到奶山羊DDX3Y截短抗原基因序列。将DDX3Y截短抗原基因序列连接pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-DDX3Y原核表达载体,将该载体导入到大肠杆菌BL21中诱导表达。通过Ni-NTA Resin纯化重组蛋白后免疫3月龄雌性新西兰大耳兔,采用间接ELISA(iELISA)法测定抗体效价,用Western blot测定抗体特异性。【结果】PCR扩增得到1 983 bp奶山羊DDX3Y基因CDs区全长序列及CDs区5′端360 bp(1-360 bp)序列和3′端273 bp(1 710-1 983 bp)序列。搭桥PCR获得了633 bp的DDX3Y截短抗原基因序列。成功构建了pET32a(+)-DDX3Y载体,并表达出分子质量约为42 ku的重组蛋白。制备出奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白多克隆抗体,iELISA法检测抗体效价为1∶10~5;Western blot检测表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别原核表达的奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白以及公羊睾丸组织DDX3Y蛋白。【结论】成功制备出了奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白多克隆抗体。 展开更多
关键词 奶山羊 多克隆抗体 H-Y抗原 ddx3Y
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猴源DDX3X基因的克隆及生物信息学分析
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作者 杨洪 田浪 +5 位作者 张升波 张喜懿 温贵兰 程振涛 王开功 周碧君 《贵州农业科学》 CAS 2019年第12期70-75,共6页
为猴源DDX3X基因与相关病毒作用机理的深入研究奠定基础,根据Gen Bank预测的猪源DDX3X基因序列(登录号HQ266638)设计合成特异性引物,采用RT-PCR从猴源肾细胞中扩增DDX3X基因,将其克隆至pMD-19T载体测序,并对其进行生物学特征分析。结果... 为猴源DDX3X基因与相关病毒作用机理的深入研究奠定基础,根据Gen Bank预测的猪源DDX3X基因序列(登录号HQ266638)设计合成特异性引物,采用RT-PCR从猴源肾细胞中扩增DDX3X基因,将其克隆至pMD-19T载体测序,并对其进行生物学特征分析。结果表明:克隆的猴源DDX3X基因全长1989 bp,与猕猴的核苷酸序列同源性达99.6%,与绿猴、猕猴和人并列在同一遗传进化分支上,与三者的一致性较高;蛋白编码有662个氨基酸,共计20种氨基酸;甘氨酸含量最高,为11.5%,理论等电点为6.73;猴源DDX3X基因含有DEAD-Like解旋酶超家族结构域和C端结构域,DDX3X蛋白具有良好的亲水性,二级、三级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。猴源DDX3X基因与多个调节细胞进程、RNA加工的关键蛋白存在相互作用。 展开更多
关键词 ddx3X基因 猴源肾细胞 T克隆 生物信息学分析
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DDX3 RNA解旋酶在基因调控、肿瘤和病毒感染中的功能
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作者 武炜 孙英杰 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第1期95-102,共8页
DEAD-box RNA解旋酶DDX3是一种多功能的蛋白,其参与RNA代谢的多个过程,包括转录、剪接、mRNA核输出、翻译、RNA降解和核糖体生物合成。此外,DDX3还参与了细胞周期调控、细胞凋亡、Wnt-β-catenin信号和肿瘤发生等。最近研究表明,DDX3参... DEAD-box RNA解旋酶DDX3是一种多功能的蛋白,其参与RNA代谢的多个过程,包括转录、剪接、mRNA核输出、翻译、RNA降解和核糖体生物合成。此外,DDX3还参与了细胞周期调控、细胞凋亡、Wnt-β-catenin信号和肿瘤发生等。最近研究表明,DDX3参与天然免疫信号通路并且促进抗病毒分子(如:干扰素调控因子3和Ⅰ型干扰素)的产生,DDX3也是一些病毒的主要靶点,因此,DDX3可作为研发抗病毒药物的新靶点。本文简单介绍了DDX3的结构和功能,总结了其在基因表达调控、细胞周期调控和细胞凋亡过程中发挥的作用,最后阐述了病毒如何通过与DDX3的互作调控宿主先天性免疫,以期为细胞的稳态调控和抗病毒先天性免疫调控提供新的思路。 展开更多
关键词 ddx3 RNA解旋酶基因 调控 肿瘤 病毒感染
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DDX3X regulates cell survival and cell cycle during mouse early embryonic development 被引量:4
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作者 Qian Li Pan Zhang +8 位作者 Chao Zhang Ying Wang Ru Wan Ye Yang Xuejiang Guo Ran Huo Min Lin Zuomin Zhou Jiahao Sha 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2014年第4期282-291,共10页
DDX3X is a highly conserved DEAD-box RNA helicase that participates in RNA transcription, RNA splicing, and mRNA transport, translation, and nucleo-cytoplasmic transport. It is highly expressed in metaphase II (MII)... DDX3X is a highly conserved DEAD-box RNA helicase that participates in RNA transcription, RNA splicing, and mRNA transport, translation, and nucleo-cytoplasmic transport. It is highly expressed in metaphase II (MII) oocytes and is the predominant DDX3 variant in the ovary and embryo. However, whether it is important in mouse early embryo development remains unknown. In this study, we investigated the function of DDX3X in early embryogenesis by cytoplasmic microinjection with its siRNA in zygotes or single blastomeres of 2-cell embryos. Our results showed that knockdown of Ddx3x in zygote cytoplasm led to dramatically diminished blastocyst formarion, reduced cell numbers, and an increase in the number of apoptotic cells in blastocysts. Meanwhile, there was an accumulation of p53 in RNAi blastocysts. In addition, the ratio of cell cycle arrest during 2-cell to 4-cell transition increased following microinjection of Ddx3x siRNA into single blastomeres of 2-cell embryos compared with control. These results suggest that Ddx3x is an essential gene associated with cell survival and cell cycle control in mouse early embryos, and thus plays key roles in normal embryo development. 展开更多
关键词 ddx3X early embryo P53 APOPTOSIS cell cycle
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MiR-206调控DDX3X促进胰腺癌不良预后及其机制的分析
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作者 段怡平 陈梁玥 +6 位作者 朱翠雯 马甜甜 李东旭 柳家翠 赵允畅 朱光庭 喻明霞 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第2期222-227,共6页
目的研究miR-206在胰腺癌(PAAD)中表达和关键靶基因预测,分析靶基因DDX3X在PAAD中表达及突变与预后的关系,研究其在PAAD恶性进展中的分子机制。方法利用TCGA公共数据集进行生物信息学分析,比较miR-206在PAAD样本和正常样本的表达差异。... 目的研究miR-206在胰腺癌(PAAD)中表达和关键靶基因预测,分析靶基因DDX3X在PAAD中表达及突变与预后的关系,研究其在PAAD恶性进展中的分子机制。方法利用TCGA公共数据集进行生物信息学分析,比较miR-206在PAAD样本和正常样本的表达差异。通过starBase、TargetScan和miRDB在线数据库对PAAD中miR-206的靶基因进行预测,并用韦恩图整合了重叠基因。PPI分析获得评分最高模块的基因,确定关键候选靶基因。利用卡方检验分析DDX3X与患者肿瘤远处转移的关系。通过Kaplan-Meier法分析DDX3X在PAAD中的预后价值。利用KEGG和GO分析探索DDX3X参与的分子通路。结果与正常组织比较,miR-206在PAAD组织表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);筛选出369个基因作为miR-206的潜在靶标;PPI评分最高模块中的14个靶基因作为miR-206在PAAD起关键调控作用的候选基因;靶基因DDX3X在PAAD的突变率为1.1%,与患者不良预后的高风险有关。DDX3X在PAAD组织中表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05),且DDX3X高表达与PAAD患者差的总体生存率相关(HR=1.6,P<0.05);DDX3X与远处转移显著相关(P<0.05);DDX3X高表达与较差的OS有关(HR=1.61,95%CI:1.05~2.48,Logrank P<0.05)。靶基因DDX3X的GO分析发现其可能在蛋白磷酸化、核斑点和转录共激活因子活性等中发挥重要作用;在KEGG数据集中,对靶基因DDX3X显著富集的信号通路分析预测,其主要参与了细胞周期、胰腺癌和调节干细胞多能性、TGF-β、FoxO、MAPK等信号通路的调控,大多与肿瘤相关信号通路有关(P<0.05)。结论MiR-206的低表达水平使DDX3X在PAAD中显著上调,可通过多条分子通路调控PAAD的发生发展,DDX3X可作为PAAD潜在的新型标志物。 展开更多
关键词 胰腺癌 MiR-206 TCGA 预后 ddx3X
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Cloning,Sequencing and Analysis of DDX3Y Gene in Five Male Equus Animals
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作者 Huamin GUO Yanglin CHEN +5 位作者 Shuyu LI Hongmei HAN Jindun ZHANG Lihong FAN Lixia ZHAO Xihe LI 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2015年第4期64-69,共6页
[ Objective] This study analyzed the differences in DDX3 Y gene sequences among male horse, male donkey, male mule, male hinny and male foal to investigate the relationship between DDX3Y gene structure and the mechani... [ Objective] This study analyzed the differences in DDX3 Y gene sequences among male horse, male donkey, male mule, male hinny and male foal to investigate the relationship between DDX3Y gene structure and the mechanism of infertility in male Equus fetus × asirms. [ Method] Partial sequences of DDX3Y gene in male horse, male donkey, male mule, male hinny and male foal were obtained by genome comparison, sequencing and cloning, and compared by bioinformatics methods. [ Result] The CDS regions varied in 5 base pairs and two amino acids. DDX3Y protein was predicted to be an unstable protein. In addition, the results also showed that DDX3 Y gene in male horse displayed a closer phylogenetic relationship to male mule and male foal; DDX3Y gene in male donkey displayed a closer phylogenetic relationship to male hinny. [ Conclusion] This study provided scientific basis for further exploring the function of DDX3 Y gene and the mecha- nism of reproductive regulation in male Equus ferus × asinus. 展开更多
关键词 Male mule Male hinny Male foal ddx3Y INFERTILITY
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基于虚拟筛选从中药中发现高选择性靶向DDX3X抑制剂
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作者 邵晨 宋昱 +3 位作者 史学伟 王宝珍 武靖 董志强 《中国药物经济学》 2024年第3期49-55,共7页
目的基于虚拟筛选从中药中发现高选择性靶向DDX3X抑制剂。方法基于对DDX3X蛋白解旋酶上一段独特基因序列分析,构建出选择性位点,针对该选择性位点从中药数据库中筛选出高选择性的DDX3X蛋白解旋酶抑制剂。通过分子对接、互作模式分析以... 目的基于虚拟筛选从中药中发现高选择性靶向DDX3X抑制剂。方法基于对DDX3X蛋白解旋酶上一段独特基因序列分析,构建出选择性位点,针对该选择性位点从中药数据库中筛选出高选择性的DDX3X蛋白解旋酶抑制剂。通过分子对接、互作模式分析以及计算自由结合能的方法筛选出具有潜在抑制活力的DDX3X抑制剂,并对活性位点的构效关系进行分析。结果最终筛选得到4个化合物(ZINC4096316、ZINC33861462、ZINC67903526、ZINC85530944)可作为潜在的DDX3X蛋白解旋酶抑制剂。结论基于DDX3X蛋白解旋酶上一段独特的基序构建选择性位点并筛选选择性抑制剂,对DDX3X蛋白解旋酶强效选择性抑制剂研发具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 ddx3X抑制剂 人类免疫缺陷病毒1型 分子对接 虚拟筛选 自由结合能
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DDX3表达上调在人宫颈癌细胞增殖中的作用分析 被引量:3
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作者 郭芳芳 赵瑞皎 +2 位作者 李杜娟 徐紫光 孔令非 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期119-124,共6页
目的探讨DDX3表达上调在人宫颈癌细胞增殖中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测2012年4月至2013年3月河南省人民医院59例宫颈癌组织及癌旁非肿瘤组织标本中的DDX3表达情况。同时,以宫颈癌细胞HeLa为研究对象,通过慢病毒介导的宫颈癌... 目的探讨DDX3表达上调在人宫颈癌细胞增殖中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测2012年4月至2013年3月河南省人民医院59例宫颈癌组织及癌旁非肿瘤组织标本中的DDX3表达情况。同时,以宫颈癌细胞HeLa为研究对象,通过慢病毒介导的宫颈癌细胞过度表达来检测DDX3的功能。采用细胞增殖与活性检测试剂盒评估细胞存活率,Boyden室进行迁移和侵袭测定,即时荧光定量聚合酶链反应检测DDX3 mRNA表达水平,Western blot检测细胞中上皮间质转化(EMT)和PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达。结果 DDX3过表达与国际妇产科联盟(FIGO)分期、宫颈浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,DDX3高表达的宫颈癌患者具有较差的总体生存率(P<0.05)。与慢病毒载体对照(pLVX-Con)组相比,在shRNA-DDX3慢病毒(pLVX-DDX3)转染组中检测到DDX3的蛋白表达和mRNA表达均明显增加(均P<0.01)。在pLVX-DDX3转染第72小时的HeLa细胞存活数目显著高于pLVX-Con转染细胞(P<0.05)。与pLVX-Con转染的细胞相比,DDX3过表达显著促进了HeLa细胞的迁移和侵袭(P<0.05),并且显著上调了HeLa细胞的N-Cadherin、波形蛋白和Snail的表达(P<0.05)。在pLVX-DDX3组中,Akt及其下游靶基因p-GSK3β的磷酸化水平和β-catenin表达较pLVX-Con组显著升高(P<0.05),而当向pLVX-DDX3组加入PI3K抑制剂LY294002后,p-Akt、p-GSK3β和β-catenin明显降低(P<0.05),并且N-Cadherin、波形蛋白和Snail的水平表达下调(P<0.05)。结论 DDX3过表达促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并能诱导EMT,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 细胞增殖 肿瘤侵润 ddx3 PI3K/AKT信号通路
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醋酸铅对雄性小鼠附睾Y染色体基因Ddx3y蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 于丽萍 程繁银 +1 位作者 李亚晨 朴丰源 《大连医科大学学报》 CAS 2012年第3期216-219,共4页
[目的]通过观察亚慢性铅暴露对小鼠附睾组织Y染色体基因Ddx3y表达的影响,为探讨铅的雄性生殖毒作用机制提供依据。[方法]昆明种小鼠48只,按体重将小鼠随机分为对照组、0.5 g/L、1.0 g/L和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度... [目的]通过观察亚慢性铅暴露对小鼠附睾组织Y染色体基因Ddx3y表达的影响,为探讨铅的雄性生殖毒作用机制提供依据。[方法]昆明种小鼠48只,按体重将小鼠随机分为对照组、0.5 g/L、1.0 g/L和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度醋酸铅的方式使小鼠染铅,连续染毒60 d后取附睾组织。HE染色观察组织病理学变化,Western blotting和免疫组化方法检测附睾组织Ddx3y蛋白的表达及组织分布。[结果]与对照组比较,染铅组附睾管内精子数和分泌液均减少,尤其1.5 g/L染铅组最为明显。Western blotting检测结果显示,染铅组的小鼠附睾组织中Ddx3y蛋白表达明显低于对照组,且有剂量-反应关系。免疫组化结果显示,随着染铅剂量的增加,附睾组织中抗Ddx3y蛋白免疫反应明显降低。[结论]亚慢性铅暴露显著下调小鼠附睾组织Y染色体基因Ddx3y蛋白表达。 展开更多
关键词 醋酸铅 附睾 雄性生殖毒性 Y染色体 ddx3y
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《Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma》解读——创新转化,擅用科研的临床语言
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作者 赵维莅 《临床血液学杂志》 CAS 2016年第5期691-693,共3页
本文最初发表于《Nature Genetics》杂志2015年第47卷,题录为:Jiang L,Gu ZH,Yan ZX,Zhao X,et al.Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma[J].Nat Genet,2015,47:1061-1066。这是... 本文最初发表于《Nature Genetics》杂志2015年第47卷,题录为:Jiang L,Gu ZH,Yan ZX,Zhao X,et al.Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma[J].Nat Genet,2015,47:1061-1066。这是迄今为止NK/T细胞淋巴瘤最全面系统的基因组学图谱,也是对相关突变基因致病原理及其临床意义进行的深入系统阐述,反映了我国血液学工作者在淋巴瘤研究中的最高水平,有较重要的理论与临床意义。本文经通信作者的许可,再次通过佳文解读的方式对这一研究成果进行阐述,供各位赏析。 展开更多
关键词 自然杀伤/T细胞淋巴瘤 外显子测序 ddx3X基因
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DDX3X基因突变致X连锁精神发育迟滞1例并文献复习 被引量:2
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作者 刘念 王越 +6 位作者 史丹丹 姚运 丁金金 赵盼 罗强 王怀立 田培超 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第15期1188-1190,共3页
回顾性分析2019年4月郑州大学第一附属医院儿科诊断的1例DDX3X基因突变引起X连锁精神发育迟滞102型患儿的临床资料。患儿,女,2岁3个月,因"发育迟缓1年余"就诊,利用二代测序技术进行全外显子检测,结果显示DDX3X基因13号外显子... 回顾性分析2019年4月郑州大学第一附属医院儿科诊断的1例DDX3X基因突变引起X连锁精神发育迟滞102型患儿的临床资料。患儿,女,2岁3个月,因"发育迟缓1年余"就诊,利用二代测序技术进行全外显子检测,结果显示DDX3X基因13号外显子存在c.1463G>A杂合突变,属于新发突变。中国人群尚无DDX3X基因突变患者报道,国外文献共检索到8篇相关病例报道,患儿均有不同程度精神发育迟滞。因此对不明原因的精神发育迟滞患者(尤其是女性),需警惕DDX3X基因突变的可能。 展开更多
关键词 ddx3X基因 X连锁精神发育迟滞 基因突变
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