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楸树DELLA基因家族生信分析及CbuGRAS9的功能分析
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作者 王珊珊 王瑞 +3 位作者 樊二勤 付鹏跃 曲冠证 王楠 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期139-151,共13页
通过鉴定楸树(Catalpa bungei)DELLA家族基因并分析CbuGRAS9的基因功能,为楸树生殖调控性状的遗传改良提供理论依据。基于楸树基因组数据,鉴定并克隆了5个与拟南芥(Arabidopsis thaliana)同源的CbuDELLAs基因;利用ExPASy、SWISS-MODEL、... 通过鉴定楸树(Catalpa bungei)DELLA家族基因并分析CbuGRAS9的基因功能,为楸树生殖调控性状的遗传改良提供理论依据。基于楸树基因组数据,鉴定并克隆了5个与拟南芥(Arabidopsis thaliana)同源的CbuDELLAs基因;利用ExPASy、SWISS-MODEL、Plant-mPloc、PlantCare等在线工具对CbuDELLAs蛋白进行等电点、蛋白结构、亚细胞定位及启动子顺式作用元件预测;以9-1(Catalpa bungei‘Luoqiu No.1’)和‘百日花’楸树(Catalpa‘Bairihua’)为材料,分析了CbuDELLAs基因的表达量差异,并通过异源转化拟南芥证实了CbuGRAS9的分子功能,利用酵母双杂交文库筛选了与CbuGRAS9互作的蛋白。结果表明:5个CbuDELLAs蛋白的氨基酸数目为455~588,蛋白相对分子质量为5.04~6.43 kDa,等电点为4.81~5.14;CbuDELLAs蛋白均含有DELLA和GRAS保守结构域,全部为亲水性蛋白。亚细胞定位预测结果显示CbuDELLAs蛋白均定位于细胞核中。启动子顺式作用元件分析发现,这5个DELLAs基因启动子区均含有参与赤霉素反应的顺式作用元件。qRT-PCR结果显示‘,百日花’楸中CbuDELLAs基因表达量显著高于对照9-1楸,其中CbuGRAS9为差异最显著的基因,CbuGRAS9转基因株系的开花时间被明显推迟。鉴定到与CbuGRAS9互作的蛋白质主要富集在核糖体、氨基酸合成、次级代谢、光合作用、TCA循环等代谢通路。 展开更多
关键词 楸树 dellas 生物信息学分析 功能分析 互作蛋白
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GmSTF accumulation mediated by DELLA protein GmRGAs contributes to coordinating light and gibberellin signaling to reduce plant height in soybean
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作者 Zhuang Li Qichao Tu +7 位作者 Xiangguang Lyu Qican Cheng Ronghuan Ji Chao Qin Jun Liu Bin Liu Hongyu Li Tao Zhao 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2024年第2期432-442,共11页
Plant height influences plant architecture,lodging resistance,and yield performance.It is modulated by gibberellic acid(GA)metabolism and signaling.DELLA proteins,acting as central repressors of GA signaling,integrate... Plant height influences plant architecture,lodging resistance,and yield performance.It is modulated by gibberellic acid(GA)metabolism and signaling.DELLA proteins,acting as central repressors of GA signaling,integrate various environmental and hormonal signals to regulate plant growth and development in Arabidopsis.We examined the role of two DELLA proteins,GmRGAa and GmRGAb,in soybean plant height control.Knockout of these proteins led to longer internodes and increased plant height,primarily by increasing cell elongation.GmRGAs functioned under different light conditions,including red,blue,and far-red light,to repress plant height.Interaction studies revealed that GmRGAs interacted with the blue light receptor GmCRY1b.Consistent with this,GmCRY1b partially regulated plant height via GmRGAs.Additionally,DELLA proteins were found to stabilize the protein GmSTF1/2,a key positive regulator of photomorphogenesis.This stabilization led to increased transcription of GmGA2ox-7b and subsequent reduction in plant height.This study enhances our understanding of DELLA-mediated plant height control,offering Gmrgaab mutants for soybean structure and yield optimization. 展开更多
关键词 della protein GmRGAs GmSTFs Plant height SOYBEAN
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甘蓝DELLA基因家族鉴定及其mRNA在嫁接体中的运输分析
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作者 李必元 赵彦婷 +3 位作者 岳智臣 雷娟利 胡齐赞 陶鹏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期156-164,共9页
DELLA基因家族参与植物激素信号转导通路的调控,其中GAI(GA insensitive)mRNA还是植物体内长距离运输的信号分子。在全基因组范围内鉴定甘蓝(Brassica oleracea var. capitata) DELLA基因家族成员并分析mRNA运输特性,可为甘蓝DELLA基因... DELLA基因家族参与植物激素信号转导通路的调控,其中GAI(GA insensitive)mRNA还是植物体内长距离运输的信号分子。在全基因组范围内鉴定甘蓝(Brassica oleracea var. capitata) DELLA基因家族成员并分析mRNA运输特性,可为甘蓝DELLA基因家族的开发应用提供基础数据。本研究利用甘蓝基因组数据和转录组数据,在甘蓝中鉴定了5个DELLA基因家族成员(BoRGA1、BoRGA2、BoRGL1、BoRGL2和BoRGL3),但甘蓝基因组缺失了GAI基因。采用劈接法将甘蓝(自交系G27)接穗和菜心(Brassica campestris L. ssp. chinensis var.utilis Tsen et Lee)(四九菜心)砧木嫁接在一起,构建异源嫁接体。对砧木菜心花序轴和对应位置的实生苗菜心花序轴(对照)取样进行转录组测序。在甘蓝/菜心异源嫁接体的砧木菜心花序轴的转录组测序文库中分别鉴定到8、9、3、5、1个来自甘蓝BoRGA1、BoRGA2、BoRGL1、BoRGL2和BoRGL3的外源read。甘蓝DELLA家族基因mRNA运输并没有提高砧木菜心中DELLA家族基因的转录表达水平。相关性分析显示,甘蓝DELLA家族基因mRNA运输效率与其自身的序列和接穗甘蓝中的DELLA家族基因的转录表达水平相关。本研究为深入探究甘蓝DELLA家族基因mRNA运输的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蓝 菜心 嫁接 della基因 mRNA运输
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油茶DELLA基因的克隆和表达分析
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作者 谌琦 骆梦琳 +5 位作者 李佳玲 周会汶 张立莎 刘亚男 吴杨 朱智国 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期634-642,共9页
为了解油茶(Camellia oleifera)中DELLA基因功能及其表达特性,采用PCR技术从‘长林4号’油茶中克隆了5个DELLA基因,命名为CoDELLA1~CoDELLA5,对其编码的5个CoDELLA蛋白进行生物信息学分析,并对5个DELLA基因的表达模式以及激素响应活性... 为了解油茶(Camellia oleifera)中DELLA基因功能及其表达特性,采用PCR技术从‘长林4号’油茶中克隆了5个DELLA基因,命名为CoDELLA1~CoDELLA5,对其编码的5个CoDELLA蛋白进行生物信息学分析,并对5个DELLA基因的表达模式以及激素响应活性进行了分析。结果表明,5个CoDELLA基因的编码区长度分别为1791、1875、1848、1593和1581 bp,分别编码597、625、616、531和527个氨基酸。5个CoDELLA蛋白的氨基酸序列相似度较高,丝氨酸残基为主要的潜在磷酸化位点,CoDELLA蛋白N端均含有典型的DELLA结构域。不同物种中DELLA蛋白的系统发育存在差异,CoDELLA与茶树的CsDELLA同源性最高。CoDELLA基因在油茶不同组织中的表达也存在差异,且赤霉素和独脚金内酯等多种激素和非生物胁迫对其表达具有调控作用。CoDELLA基因可能在油茶的生长发育和非生物胁迫响应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 油茶 della 基因 生物信息学 基因表达
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赤霉素关键蛋白DELLA对植物雄蕊发育研究进展
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作者 钱双杰 吴刘清 +1 位作者 邓雨琦 徐晓峰 《上海师范大学学报(自然科学版中英文)》 2023年第6期736-742,共7页
在植物生长发育过程中,DELLA蛋白作为响应赤霉素(GA)信号通路负调控因子,其家族成员在植物雄蕊组织中均有表达,对植物生长发育起着重要作用.通过近几年研究发现,无论是拟南芥还是水稻,DELLA基因的突变都会导致植株的雄性不育.该文综述了... 在植物生长发育过程中,DELLA蛋白作为响应赤霉素(GA)信号通路负调控因子,其家族成员在植物雄蕊组织中均有表达,对植物生长发育起着重要作用.通过近几年研究发现,无论是拟南芥还是水稻,DELLA基因的突变都会导致植株的雄性不育.该文综述了DELLA蛋白基本特征、参与赤霉素信号通路的调控,以及在雄蕊发育中的作用,为今后的研究提供一定的理论基础. 展开更多
关键词 della蛋白 赤霉素(GA) 雄蕊发育
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葡萄全基因组DELLA蛋白基因家族鉴定及其应答外源赤霉素调控葡萄果实发育的特征 被引量:16
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作者 张文颖 王晨 +5 位作者 朱旭东 马超 王文然 冷翔鹏 郑婷 房经贵 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期3130-3146,共17页
【目的】明确DELLA蛋白基因在葡萄基因组数据库中的数量、结构和组织表达差异,探究DELLA蛋白在葡萄赤霉素(GA)信号传导及葡萄无核果实发育机理中的作用机制。【方法】基于拟南芥、水稻等植物中的DELLA蛋白基因,利用HMMER程序和NCBI的CD... 【目的】明确DELLA蛋白基因在葡萄基因组数据库中的数量、结构和组织表达差异,探究DELLA蛋白在葡萄赤霉素(GA)信号传导及葡萄无核果实发育机理中的作用机制。【方法】基于拟南芥、水稻等植物中的DELLA蛋白基因,利用HMMER程序和NCBI的CDD程序鉴定葡萄基因组中的DELLA蛋白基因;以‘白罗莎里奥’葡萄品种为试材,采用PCR技术克隆3个DELLA蛋白基因的c DNA全长序列;通过启动子作用元件分析预测其潜在功能;利用生物信息学软件对其染色体定位、基因结构、系统进化、理化特性、亚细胞定位及蛋白互作等进行分析;利用农杆菌介导的烟草瞬时表达技术分析DELLA蛋白的亚细胞定位情况;采用q RT-PCR方法检测葡萄DELLA蛋白基因应答GA在果皮、果肉、种子(或种子区)的时空表达特征。【结果】鉴定得到3个葡萄DELLA蛋白基因,克隆并验证其精确序列,分别命名为Vv GAI1(VIT_201s0011g05260)、Vv RGA(VIT_214s0006g00640)及Vv SLR1(VIT_211s0016g04630),其染色体定位、开放阅读框(ORF)大小、编码氨基酸数量分别为:Chr1、1 773 bp、590个;Chr14、1 710 bp、569个;Chr11、1 599 bp、532个。基因结构分析表明其DNA序列均无内含子,只有1个外显子,基因结构高度保守。进化分析显示Vv GAI1与Vv RGA亲缘关系较近,被聚类为一组,而Vv SLR1为另一组。3个基因的启动子均含有响应赤霉素和胚乳发育相关的作用元件,表明它们可能参与响应GA信号传导和胚乳发育过程。亚细胞定位结果显示3个DELLA蛋白均定位于细胞核。q RT-PCR结果显示除果皮中Vv SLR1在近成熟期具有表达高峰外,其余均在幼果期高表达,且外源GA处理均不同程度降低了3个DELLA蛋白基因在葡萄果皮、果肉和种子区的表达,尤以种子区下调水平最为显著。蛋白互作分析表明3个DELLA蛋白均为葡萄GA信号传导的核心作用元件,均可能与GIDI1和SLY1互作参与葡萄GA信号传导。【结论】葡萄基因组中含有3个DELLA蛋白基因家族成员;不同物种间DELLA蛋白结构高度保守;GA可能通过负调控这3个成员参与葡萄果皮、果肉和种子区的发育,且3个成员均可能通过应答GA信号调控葡萄无核果实的发育。 展开更多
关键词 葡萄 della 亚细胞定位 表达 互作 赤霉素
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棉花DELLA蛋白基因GhGAI3和GhGAI4启动子的克隆及序列分析 被引量:6
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作者 温玮 崔百明 +4 位作者 于晓玲 郑银英 孙海彦 黎娟华 彭明 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1055-1063,共9页
棉纤维是纺织行业的重要原材料。赤霉素能够促进棉纤维的生长发育,而DELLA蛋白又是赤霉素信号转导通路中的关键调控因子,因此研究棉花DELLA蛋白基因表达的调控模式,对阐明棉纤维生长发育的分子生物学机理具有重要意义。本研究根据两个棉... 棉纤维是纺织行业的重要原材料。赤霉素能够促进棉纤维的生长发育,而DELLA蛋白又是赤霉素信号转导通路中的关键调控因子,因此研究棉花DELLA蛋白基因表达的调控模式,对阐明棉纤维生长发育的分子生物学机理具有重要意义。本研究根据两个棉花DELLA蛋白基因GhGAI3和GhGAI4序列设计特异引物,以陆地棉新陆早13号的基因组DNA为模板,用基因组步移法克隆了棉花DELLA蛋白基因GhGAI3和GhGAI4的启动子。对两个启动子进行序列分析表明,这两个启动子均具有真核生物典型的核心启动子区,同时也都具有一个或多个光响应元件和赤霉素响应元件,说明这两个基因可能受到光信号和赤霉素信号的调控,这与其它植物中DELLA蛋白的表达模式是一致的。此外,这两个启动子还具有各种转录调控相关的顺式作用元件,比如其它激素类的响应元件和逆境胁迫响应元件,说明棉花中DELLA蛋白基因可能在响应其它激素信号以及逆境胁迫中也起到一定的作用。 展开更多
关键词 棉花 启动子 della蛋白 克隆 序列分析
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植物DELLA蛋白的功能及其在大豆中的研究 被引量:14
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作者 张彤 赵琳 +1 位作者 赵建刚 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期874-879,共6页
DELLA属于GRAS核转录调节因子家族,负向调节GA信号途径,并抑制植物生长发育。GA与其受体结合后,与DELLA蛋白发生互作,并通过26S蛋白酶体将DELLA降解,从而解除DELLA对植物发育的抑制作用。DELLA通过与不同的转录因子互作,调控下游基因的... DELLA属于GRAS核转录调节因子家族,负向调节GA信号途径,并抑制植物生长发育。GA与其受体结合后,与DELLA蛋白发生互作,并通过26S蛋白酶体将DELLA降解,从而解除DELLA对植物发育的抑制作用。DELLA通过与不同的转录因子互作,调控下游基因的表达。文章综述了DELLA蛋白在GA信号传导中作用的分子机理和DELLA蛋白调控植物生长发育的功能,以及作为整合因子,DELLA在介导低温、光等环境因子及其它植物激素之间的交互作用的分子机制,并介绍了大豆DELLA功能的研究进展。 展开更多
关键词 della 赤霉素信号转导 大豆
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棉花DELLA蛋白GhGAI2b基因的克隆和功能初步分析 被引量:7
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作者 陈英杰 詹杰鹏 +2 位作者 王志江 崔百明 郑银英 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第5期635-640,共6页
DELLA蛋白是赤霉素信号途径的负调节因子,在棉花纤维发育中有着重要作用。本研究采用同源克隆方法,从棉花中克隆DELLA蛋白Gh GAI2b基因,构建p BP35S:Gh GAI2b和p BP35S:Ghgai2b植物过表达载体,通过农杆菌介导的滴花法转化Col野生型拟南... DELLA蛋白是赤霉素信号途径的负调节因子,在棉花纤维发育中有着重要作用。本研究采用同源克隆方法,从棉花中克隆DELLA蛋白Gh GAI2b基因,构建p BP35S:Gh GAI2b和p BP35S:Ghgai2b植物过表达载体,通过农杆菌介导的滴花法转化Col野生型拟南芥。结果表明,棉花DELLA蛋白Gh GAI2b包含了DELLA蛋白家族中所有的典型保守区域;转基因拟南芥表现出莲座叶半径变短,植株矮化,花序紧凑,花器官发育迟缓等生长发育受抑制表型。说明棉花DELLA蛋白Gh GAI2b基因可能参与GA信号途径抑制植物生长发育。 展开更多
关键词 棉花 赤霉素 della蛋白 GhGAI2b基因
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海岛棉DELLA蛋白编码基因GbGAI的克隆与功能初步分析 被引量:5
10
作者 曲廷云 王拴锁 +2 位作者 彭明 崔百明 郑银英 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第13期30-35,共6页
赤霉素在棉花纤维发育过程中起着重要作用。DELLA蛋白是赤霉素信号传导通路中的一类重要负调节因子。通过同源克隆的方法,克隆了新疆特有棉花栽培种海岛棉中DELLA蛋白的同源基因GbGAI。序列比对分析表明GbGAI编码的氨基酸序列具有DELLA... 赤霉素在棉花纤维发育过程中起着重要作用。DELLA蛋白是赤霉素信号传导通路中的一类重要负调节因子。通过同源克隆的方法,克隆了新疆特有棉花栽培种海岛棉中DELLA蛋白的同源基因GbGAI。序列比对分析表明GbGAI编码的氨基酸序列具有DELLA蛋白的典型结构域。构建其过量表达载体,通过农杆菌侵染花序的方法转入野生型拟南芥中,观察表型。转基因株系表现出晚花,株高变矮等赤霉素不敏感突变体的表型。 展开更多
关键词 海岛棉 赤霉素 della蛋白 拟南芥 转基因植株
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棉花GhGAI3a DELLA功能域缺失过表达载体的构建及其功能初步分析 被引量:6
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作者 李艳 温玮 +3 位作者 彭丽军 崔百明 张文婷 郑银英 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第5期540-544,共5页
本研究对棉花GhGAI3aDELLA功能域缺失片段的克隆及对其功能进行了初步分析。本文以质粒p121GhGAI3aDNA为模板,通过PCR方法获得基因GhGAI3aN端赤霉素响应关键区域DELLA缺失的片段Gh-gai3a,构建出过量表达载体pBP35S:gai3a。利用农杆菌介... 本研究对棉花GhGAI3aDELLA功能域缺失片段的克隆及对其功能进行了初步分析。本文以质粒p121GhGAI3aDNA为模板,通过PCR方法获得基因GhGAI3aN端赤霉素响应关键区域DELLA缺失的片段Gh-gai3a,构建出过量表达载体pBP35S:gai3a。利用农杆菌介导滴花法转化拟南芥获得T1代转基因植株。DNA检测结果显示,获得了24个转基因株系,RT-PCR表明了该基因在部分株系中已有表达。初步的表型观察发现该DELLA区缺失基因严重影响花器官、侧枝的发育,抑制植物的生长。 展开更多
关键词 赤霉素 della蛋白 GhGAI3a
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‘辽宁2号’DELLA蛋白编码基因的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 宋晓波 王红霞 张志华 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-34,共6页
以‘辽宁2号’核桃的叶片为试材,通过同源克隆和RACE技术克隆DELLA家族蛋白的编码基因,并进行了同源性分析和氨基酸序列的多重比对;通过实时荧光定量PCR分析了该基因在‘辽宁2号’核桃中的组织特异性表达情况。主要研究结果如下:获得了D... 以‘辽宁2号’核桃的叶片为试材,通过同源克隆和RACE技术克隆DELLA家族蛋白的编码基因,并进行了同源性分析和氨基酸序列的多重比对;通过实时荧光定量PCR分析了该基因在‘辽宁2号’核桃中的组织特异性表达情况。主要研究结果如下:获得了DELLA蛋白编码基因的cDNA全长,命名为JrGAI(Genebank:JF766606),cDNA全长为2 361bp,包含1 842bp编码区序列,推测其编码的蛋白包含613个氨基酸,分子量为66.78kDa。同源性分析及氨基酸序列的多重比对结果表明该蛋白与其他物种的DELLA蛋白高度相似,并且具有完整的DELLA、TVHYN、VHIID、RVER和SAW等结构域;实时荧光定量PCR结果显示JrGAI基因在‘辽宁2号’核桃的叶芽、混合花芽、叶片、雄花、茎段和果实中普遍表达,并且在休眠期组织中具有较高的表达量,其中以休眠期的混合花芽中的表达量最高。 展开更多
关键词 核桃 矮化 della蛋白 JrGAI 表达分析
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蔷薇科植物DELLA蛋白的生物信息学分析 被引量:6
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作者 宋伟 李鼎立 +3 位作者 王然 原永兵 刘成连 马春晖 《中国农学通报》 CSCD 2013年第19期142-148,共7页
为探索蔷薇科植物DELLA蛋白的结构特征和亲缘进化关系,以蔷薇科植物苹果、梨和玫瑰等19个DELLA蛋白为试材,利用expasy、PSORT和PROSITE数据库、TM-HMM方法、SignalP4.0Server、CDD、DNAMAN和MEGA version5.3等软件对蛋白质进行了生物信... 为探索蔷薇科植物DELLA蛋白的结构特征和亲缘进化关系,以蔷薇科植物苹果、梨和玫瑰等19个DELLA蛋白为试材,利用expasy、PSORT和PROSITE数据库、TM-HMM方法、SignalP4.0Server、CDD、DNAMAN和MEGA version5.3等软件对蛋白质进行了生物信息学分析。结果表明:蔷薇科植物中19个DELLA蛋白氨基酸序列组成成分和理化性质差异不明显,均为非跨膜类亲水性蛋白,且不含信号肽;不同DELLA蛋白之间同源性较高,达到74.38%以上,具有DELLA和GRAS2个保守结构域,功能位点是GRAS;19个DELLA蛋白N端同源性较低,但是存在TVHYNP、VHIID和RVER等DELLA蛋白典型结构域;进化树显示梨属和蔷薇属属内植物DELLA蛋白亲缘关系较近,苹果属内植物亲缘关系相差较远。本研究的开展为蔷薇科植物遗传演化研究提供理论依据。 展开更多
关键词 蔷薇科 della蛋白 生物信息学
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海岛棉DELLA蛋白基因GbGAI2的克隆及其在胚珠中表达分析 被引量:6
14
作者 詹杰鹏 崔百明 +2 位作者 彭明 曲廷云 郑银英 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第5期529-534,共6页
赤霉素(Gibberellins,GA)在棉花纤维的发育过程中起重要作用,DELLA蛋白是GA信号通路中的起关键作用的负调控因子。本研究采用同源克隆方法,获得了海岛棉的DELLA蛋白同源基因GbGAI2。序列比对分析结果表明,GbGAI2编码的氨基酸序列具有DE... 赤霉素(Gibberellins,GA)在棉花纤维的发育过程中起重要作用,DELLA蛋白是GA信号通路中的起关键作用的负调控因子。本研究采用同源克隆方法,获得了海岛棉的DELLA蛋白同源基因GbGAI2。序列比对分析结果表明,GbGAI2编码的氨基酸序列具有DELLA蛋白的典型结构域,并与陆地棉DELLA蛋白GhGAI2氨基酸有90.13%相同。半定量RT-PCR分析结果表明,GbGAI2在1-5DPA和23DPA棉胚中的表达量较高,说明该基因可能在海岛棉棉纤维发育的起始阶段和棉纤维次生壁加厚阶段起作用。 展开更多
关键词 海岛棉 赤霉素 della蛋白 GbGAI2
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拟南芥DELLA蛋白编码基因RGA和GAI的原核表达和多克隆抗体制备 被引量:3
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作者 王玮 管利萍 +1 位作者 张静 侯岁稳 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期422-428,共7页
通过聚合酶链反应方法扩增了RGA和GAI两个拟南芥DELLA蛋白基因,并将其克隆到pGEX-4T-3原核表达载体上,转化大肠杆菌Rosetta菌株,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达了分子量为90 kD的GST-RGA和分子量为85 kD的GST-GAI融合蛋白,这两种融合... 通过聚合酶链反应方法扩增了RGA和GAI两个拟南芥DELLA蛋白基因,并将其克隆到pGEX-4T-3原核表达载体上,转化大肠杆菌Rosetta菌株,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达了分子量为90 kD的GST-RGA和分子量为85 kD的GST-GAI融合蛋白,这两种融合蛋白均以包涵体的形式存在.将包涵体直接作为抗原免疫新西兰白兔,制备出多克隆抗体血清,血清效价超过1:400 000.WB分析结果表明这两种抗体可以特异性识别拟南芥RGA和GAI蛋白,为进一步研究DELLA蛋白的调控机制奠定了基础. 展开更多
关键词 拟南芥 della蛋白 原核表达 包涵体 多克隆抗体
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DELLA家族蛋白研究进展 被引量:5
16
作者 李威 李国瑞 +7 位作者 黄凤兰 孙华军 李跃 丛安琪 齐蒙 白英俊 李孟建 陈永胜 《安徽农业科学》 CAS 2016年第32期147-148,共2页
在已发现的植物GA信号传递分子中,有一类N端具有高度保守的DELLA结构域,称之为DELLA家族蛋白。介绍了DELLA蛋白的保守结构域和降解途径,并综述了其对多种植物激素信号的调控作用,以期提示植物生长发育和植物激素信号转导的奥秘。
关键词 della蛋白 GA 植物激素 保守结构域
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DELLA蛋白缺失对拟南芥干旱胁迫耐受性的影响 被引量:3
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作者 王玮 冯起 +1 位作者 张莉环 杨宁 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期867-872,共6页
为探索DELLA蛋白缺失对拟南芥耐旱能力的影响,对拟南芥野生型Ler和DELLA蛋白缺失突变体della进行干旱处理,测定存活率、萌发率、离体叶片的失水率、脯氨酸、可溶性糖和丙二醛含量,并对发挥植物细胞脱水保护功能的胚胎晚期丰富蛋白编码基... 为探索DELLA蛋白缺失对拟南芥耐旱能力的影响,对拟南芥野生型Ler和DELLA蛋白缺失突变体della进行干旱处理,测定存活率、萌发率、离体叶片的失水率、脯氨酸、可溶性糖和丙二醛含量,并对发挥植物细胞脱水保护功能的胚胎晚期丰富蛋白编码基因LEA和ABA应答基因LOX3、COR15b、COR413的表达量进行了检测。结果表明:(1)干旱21d后复水,della突变体的存活率明显高于野生型Ler;(2)della突变体在含甘露醇的固体培养基上的萌发率显著高于Ler;(3)della突变体离体叶片的失水速率明显低于Ler;(4)干旱胁迫后,della突变体脯氨酸、可溶性糖和丙二醛含量的积累低于Ler;(5)干旱胁迫后,della突变体的LEA基因上调表达程度高于Ler,而ABA应答基因上调表达程度低于Ler。研究表明,DELLA蛋白的缺失有助于提高植物抗旱能力。 展开更多
关键词 della蛋白 干旱胁迫 赤霉素 脱落酸
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木薯赤霉素途径DELLA蛋白基因克隆及其对干旱胁迫的响应 被引量:6
18
作者 廖文彬 彭明 《热带生物学报》 2012年第4期298-304,共7页
赤霉素(GA)信号转导途径是通过DELLA抑制蛋白来调控的。笔者利用拟南芥DELLA蛋白基因序列,通过电子克隆方法首次克隆了1个木薯DELLA蛋白基因,长度为1857bp,具有完整的蛋白编码框的cDNA序列,命名为MeGAI。生物信息学分析显示,该蛋白具有... 赤霉素(GA)信号转导途径是通过DELLA抑制蛋白来调控的。笔者利用拟南芥DELLA蛋白基因序列,通过电子克隆方法首次克隆了1个木薯DELLA蛋白基因,长度为1857bp,具有完整的蛋白编码框的cDNA序列,命名为MeGAI。生物信息学分析显示,该蛋白具有与拟南芥DELLA蛋白一样的保守结构域,如DELLA结构域、VHYNP结构域、POLY(S/T)结构域、核定位信号、VHVID结构域、亮氨酸结构域、GRAS结构域;该基因在干旱胁迫下的表达模式研究结果表明,该基因在干旱胁迫下是下调表达的;GA生物合成重要基因GA20-氧化酶基因在干旱胁迫下的表达模式研究结果表明,两者在干旱胁迫下的表达模式具有良好的相关性,这说明GA途径可能参与木薯抗旱机制。 展开更多
关键词 木薯della蛋白 基因克隆 生物信息学分析 干旱胁迫响应
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棉花DELLA蛋白GhGAI4b基因的克隆及功能初步分析 被引量:5
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作者 彭丽军 温玮 +3 位作者 李艳 吕西洋 黄先忠 郑银英 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期405-413,共9页
【目的】DELLA蛋白已在不同的物种中被广泛鉴定,并且功能区高度保守,是GA信号通路中的负调控因子,在棉花纤维细胞起始和发育中起重要的作用。研究棉花中DELLA基因的功能。【方法】从棉花中克隆DELLA蛋白的同源基因GhGAI4b,构建35S:GhGA... 【目的】DELLA蛋白已在不同的物种中被广泛鉴定,并且功能区高度保守,是GA信号通路中的负调控因子,在棉花纤维细胞起始和发育中起重要的作用。研究棉花中DELLA基因的功能。【方法】从棉花中克隆DELLA蛋白的同源基因GhGAI4b,构建35S:GhGAI4b植物过量表达载体,通过农杆菌侵染花序的方法转入野生型拟南芥中,观察转基因植株的表型。【结果】序列分析表明GhGAI4b全长开放阅读框1 617 bp,编码538个氨基酸,具有DELLA蛋白的典型结构域。采用Clustal X将GhGAI4b的氨基酸序列与其他已知的DELLA蛋白氨基酸序列进行相似性比对,发现GhGAI4b氨基酸序列与陆地棉、拟南芥的相似性较高,达到47%以上。转基因株系表现出叶片颜色深绿,叶片缩小且肥厚,叶片细长呈锯齿状;有些株系会出现多重莲座叶,雄蕊发育不全,晚花,株高变矮等赤霉素不敏感突变体的表型。【结论】过表达GhGAI4b能够抑制拟南芥莲座叶的生长和发育,影响转基因拟南芥花器官的发育,严重时引起转基因拟南芥的不育。 展开更多
关键词 棉花della蛋白 GhGAI4b基因 功能分析
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棉花DELLA蛋白GhGAI4a基因在拟南芥中功能初步分析 被引量:6
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作者 吕西洋 崔百明 +3 位作者 段琛 陈英杰 黄先忠 郑银英 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第5期529-535,共7页
为了探究棉花DELLA蛋白基因GhGAI4a在拟南芥中的功能,构建植物表达载体pBP35S∶GhGAI4a和pBP35S∶Ghgai4a,利用农杆菌介导的花滴法将其转入Col野生型拟南芥。结果显示,2个载体各自获得6个独立的转基因拟南芥纯合株系。分别统计48-96h种... 为了探究棉花DELLA蛋白基因GhGAI4a在拟南芥中的功能,构建植物表达载体pBP35S∶GhGAI4a和pBP35S∶Ghgai4a,利用农杆菌介导的花滴法将其转入Col野生型拟南芥。结果显示,2个载体各自获得6个独立的转基因拟南芥纯合株系。分别统计48-96h种子萌发率,测量生长7d后幼苗的主根长度,与非转基因植株相比,过量表达GhGAI4a、Ghgai4a对拟南芥种子萌发及主根生长具有明显的抑制作用。1μmol/L GA处理转基因植株,GhGAI4a转基因植株主根长和萌发率均增大,而Ghgai4a转基因植株主根长度和萌发率均无显著变化。 展开更多
关键词 棉花 GhGAI4a基因 della蛋白 赤霉素
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