鸡circSFMBT2克隆及对DF-1细胞增殖的影响

【目的】验证鸡circSFMBT2的环形结构,探究其表达规律及功能。【方法】以麒麟鸡和DF-1细胞为研究对象,根据反向剪切位点序列特征设计引物,通过PCR和测序验证circSFMBT2的环形结构。通过RNase R和反转录试验分析circSFMBT2的基本特性,利用qRT-PCR探究不同组织、不同时期circSFMBT2的表达水平。通过构建过表达载体,结合qRT-PCR、Edu和CCK-8等试验,探究circSFMBT2对鸡DF-1细胞增殖的影响。【结果】鸡circSFMBT2全长827 nt,由SFMBT2基因外显子12~18环化形成。RNase R耐受性试验表明,circSFMBT2不易被RNase R降解,随机引物对circSFMBT2的反转录效率是Oligo-d(T)18引物的8倍。组织表达谱表明,circSFMBT2在麒麟鸡14胚龄以及1周龄的肝脏和脾脏中高表达、在胸肌和腿肌中低表达。circSFMBT2在胸肌和腿肌的时序表达谱表明,circSFMBT2在胚胎时期表达量较高,出生后表达量迅速下降。在DF-1细胞中circSFMBT2过表达48 h后,增殖标记基因PCNA和CCND1的表达量分别较对照组上调85%和92%。E d u和C C K-8细胞增殖试验表明,鸡c i r c S F M B T 2可以促进细胞增殖进程。【结论】circSFMBT2是鸡SFMBT2基因的一个环状转录本,可以促进DF-1细胞的增殖,研究结果为深入探究鸡circSFMBT2的生物学功能和作用机制奠定了基础。

贝朗Dialog血液透析机DFS自检过程常见故障分析

分析贝朗Dialog血液透析机透析液通路(DFS)自检过程常见故障及应对策略。广西医科大学第一附属医院血液透析室从2022年开始,对贝朗Dialog血液透析机进行强化质量管理。本研究对2021年和2022年贝朗Dialog血液透析机DFS自检过程常见故障进行统计分析,比较设备故障发生情况、医护人员满意度与患者满意度。结果显示,2022年贝朗Dialog血液透析机DFS自检过程故障发生率低于2021年(P<0.05);2022年医护人员对设备的满意度高于2021年(P<0.05);2022年患者对设备的满意度高于2021年(P<0.05),各项数据差异有统计学意义。研究发现,通过分析贝朗Dialog血液透析机的常见故障,强化质量管理,有助于降低设备故障发生率,提高医护人员及患者对设备的满意度。

浅谈DF4DD型内燃机车机油压力低的原因与处理

DF4DD型内燃机车作为中国铁路运输的关键组成部分,具有强大的功率和可靠的性能。然而,机油压力低问题可能威胁其正常运行。本文探讨了该型机车的特点,深入分析了机油压力低的可能原因,如主机油泵问题、机油泄漏和油位问题、以及油温影响。提出了有效的优化措施,包括处理机油粘度问题、控制温度以维持机油粘度,以及解决低温循环水系统和液压系统问题。通过采取这些措施,可以确保DF4DD型内燃机车保持高效稳定的运行状态,提高铁路运输系统的可靠性和工作效率。这对于保障铁路运输的顺畅运行具有重要意义。

DF4DD内燃机车电气故障及诊断策略分析

内燃机车在现代铁路运输中扮演着至关重要的角色,其电气系统是确保列车安全、高效运行的核心组成部分。DF4DD内燃机车作为我国铁路系统中的主力机车之一,其电气系统不仅提供动力和牵引控制,还负责照明、通信、信号系统等功能,对铁路运输的可靠性和安全性具有重要影响。本论文旨在深入探讨DF4DD内燃机车电气故障及诊断策略,以帮助铁路运输系统更好地理解和解决电气问题。 。

温度对鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1的影响

本文通过在不同温度条件下进行鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞培养实验,同时模拟活细胞株常温运输环境寻找改善UMNSAH/DF-1细胞生长状态及胞体“空泡化”现象的方法。实验结果表明:相较于37℃,39℃的培养温度更有利于UMNSAH/DF-1细胞生长。室温运输时UMNSAH/DF-1细胞“空泡化”程度显著。但是正常传代后,其胞体“空泡化”现象又会显著减少。本文提示:若UMNSAH/DF-1细胞胞体“空泡”数量较多时,可通过优化该细胞最佳生长温度同时增加传代次数进行改善,一般多次传代后UMNSAH/DF-1细胞就会恢复至其正常状态。

基于改进A^(*)算法和DFS算法的割草机器人遍历路径规划

针对割草机器人大面积作业时遍历路径规划覆盖率低、重复率高、普适性弱的问题,提出一种改进A^(*)算法与DFS算法相结合的遍历路径规划算法。首先,根据已知环境全局信息,通过牛耕式分解法将目标区域划分成多个不含障碍物的子区域;然后,根据子区域的邻接关系构建无向图,使用DFS算法规划子区域的遍历顺序;最后,采用改进A^(*)算法进行跨区域路径转移并且往复式遍历各子区域的内部。仿真试验结果表明:该遍历算法的覆盖率达到100%,遍历重复率为0,改进A^(*)算法所规划的跨区域转移路径长度和转向次数比A^(*)算法分别减少3.26%和62.5%。所提出的遍历算法具有覆盖率高、重复率低、普适性强的特点,改进A^(*)算法通过路径平滑性优化和添加防碰撞安全间距对A^(*)算法进行改进,使之规划的路径更平滑、更安全,路径长度更短。该研究结果旨在为割草机器人遍历路径规划提供理论参考。

应用Cephodex 微载体培养DF-1细胞增殖水貂源犬瘟热病毒的技术研究

为了建立水貂源犬瘟热病毒(CDV)的大规模悬浮培养技术,实现细胞高密度生长和病毒高效增殖,本研究应用Cephodex微载体悬浮培养鸡胚成纤维细胞系DF-1细胞,增殖弱毒株CDV3。整个过程采用摇瓶培养法,通过对病毒培养温度、病毒收获时间等关键技术条件进行优化,确立最佳培养条件。结果表明,DF-1细胞37℃培养至72 h,接种CDV3,35℃继续培养72 h收获病毒,病毒滴度每0.1 mL可达10^(5.0) TCID_(50)。CDV微载体悬浮培养技术的初步建立,为高效水貂犬瘟热疫苗的研发生产奠定了重要的基础。

DF控制推理模型的研究

针对控制系统中对象的模糊性和动态性,基于动态模糊集(Dynamic Fuzzy Sets)及动态模糊逻辑(Dynamic FuzzyLogic)系统理论,给出DF控制推理模型的相关概念,如DF向量、DF语言变量、DF语言规则和DF蕴涵关系等,并在此基础上探讨基于DF语言规则的DF推理方法,最后通过实例说明这些概念和方法的应用。

DF控制器的设计方法研究

基于动态模糊集(Dynamic Fuzzy Sets)理论和动态模糊控制推理模型的相关概念,提出了一种DF控制器的设计方法,给出了DF控制器结构,探讨了DF控制规则库、DF控制推理计算、DF化以及清晰化方法,解决了控制过程中的动态模糊性问题,更符合具有动态模糊性特点的控制系统的控制规律,并通过具体的应用实例体现了此设计方法的有效性和可操作性。

DF-1细胞中TLR7编码基因的敲除及其抗FAdV-4感染的天然免疫应答

旨在构建高质量的禽源细胞系,应用CRISPR/Cas9技术实现鸡胚成纤维细胞(DF-1)的Toll样受体7(TLR7)编码基因的敲除,构建稳定的细胞培养禽腺病毒4型(FAdV-4)增殖体系。采用荧光定量PCR的方法对FAdV-4感染DF-1细胞后先天性免疫信号通路中效应分子进行检测,选择转录水平显著上调的基因TLR7作为研究对象;构建sgRNA载体与Cas9表达载体共转染DF-1细胞,经绿色荧光蛋白(GFP)阳性特征分选单克隆,PCR验证及增毒试验筛选后获得TLR7编码序列敲除的DF-1-TLR7-KO#3单克隆细胞系,命名为DF-1-TLR7-KO细胞。对敲除前后DF-1细胞的天然免疫系统对FAdV-4感染的拮抗效应和病毒在不同细胞中增殖效率的差异进行了研究。结果表明:成功构建的TLR7编码序列敲除的DF-1细胞系,与原始细胞相比病毒增殖能力提高。试验对细胞的天然免疫系统与FAdV-4感染的互作机理进行了初步探索,为更好地研究宿主对病毒入侵的应答机制,提高疫苗生产效能提供了研究基础和生物材料储备。

禽致病性大肠杆菌外膜蛋白OmpA对DF-1细胞自噬的影响

【目的】探讨禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)外膜蛋白OmpA对DF-1细胞自噬的影响,为研究OmpA是否协助APEC逃逸宿主细胞自噬介导的清除作用提供依据。【方法】以APEC E058株基因组DNA为模版,通过PCR扩增回收ompA基因片段,经Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,通过酶切及测序鉴定筛选阳性的重组表达质粒pEGFP-N1-ompA;随后将质粒转染至鸡胚成纤维细胞DF-1并通过Western blotting和免疫荧光试验检测OmpA蛋白的表达情况;通过透射电子显微镜、免疫荧光试验及Western blotting方法检测OmpA对DF-1细胞自噬的影响。【结果】测序鉴定正确的重组质粒pEGFP-N1-ompA经Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切,获得大小分别为1038和4700 bp的条带,大小与载体和目的片段相符,表明真核表达质粒pEGFP-N1-ompA构建成功。将重组质粒经脂质体转染DF-1细胞后,通过免疫荧光试验可观察到大量绿色荧光,Western blotting检测到大小为65 ku的蛋白条带,表明成功转染pEGFP-N1-ompA至DF-1细胞中并大量表达ompA-EGFP融合蛋白。同时Western blotting结果显示,过表达OmpA可引起自噬标志性蛋白LC3Ⅱ的表达量增加;通过透射电子显微镜可观察到DF-1细胞中的自噬小体。将单荧光GFP-LC3质粒转染DF-1细胞,OmpA蛋白处理组呈现绿色荧光点的聚集,说明OmpA引发DF-1细胞自噬。进一步研究发现,OmpA影响自噬标志蛋白p62降解,转染双荧光mRFP-GFP-LC3质粒检测显示OmpA可阻断自噬流的发生。【结论】APEC外膜蛋白OmpA可引起DF-1细胞发生自噬,但其抑制自噬流的发生,引发DF-1细胞的不完全自噬,这将为进一步探讨APEC逃逸宿主细胞的清除作用提供参考。

2020年山东长清M4.1地震前DF地脉动信号的变化特征

地震前重力仪可能记录到与震源有关的高频扰动信号。2020年2月18日山东长清发生M4.1地震,距离震中约52 km的泰安站PET重力仪记录数据在震前5 d出现能量增强、 DF地脉动垂直位移增大(0.13×10^(-6)m)的现象。为了厘清该现象与长清地震的关系,本文首先对2020年2月的重力数据进行0~0.5 Hz频段的时频分析并计算了DF脉动信号垂直位移,得到结果与地震背景噪声能量辐射的全球模型(ASSM)同步;在排除台风影响,对比分析嘉祥台重力数据和泰安站JCZ-1地震计垂直向速度记录数据,同时结合芝罘海洋观测站数据,判定该信号源自海浪激发的脉动信号。泰安站重力仪DF地脉动垂直位移均方差作为预测指标的R值检验,结果表明该DF信号的增强不符合异常识别指标,与2020年长清M4.1地震无关。本文对重力数据变化的分析方法和流程,以及对造成数据变化信号源的判定方法和思路,为重力仪观测数据的异常识别和判定提供了参考,可应用于相关地震分析预报工作。

传染性法氏囊病病毒疫苗株B87在DF-1细胞和Vero细胞感染性研究

为比较传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)疫苗株B87对DF-1细胞和Vero细胞易感性,对比了IBDV B87株感染两种细胞后的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒基因组dsRNA、半数组织感染量(median tissue culture infective dose,TCID 50)水平、病毒载量及VP2基因表达水平。结果显示,IBDV B87株感染后,DF-1细胞CPE程度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒基因dsRNA荧光密度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒载量荧光密度高于Vero细胞,且DF-1细胞中病毒滴度(105.423±0.03296 TCID 50/0.1 mL)极显著高于Vero细胞中病毒滴度(102.592±0.03428 TCID 50/0.1 mL,P<0.01),VP2基因表达量显著高于Vero细胞(P<0.05)。说明IBDV B87株对DF-1细胞的感染性高于Vero细胞。

深度森林DF21模型在土壤镉含量高光谱反演中的性能评价

高光谱技术可提供近乎连续的地物光谱曲线,对土壤组分定量反演具有极大的潜力。针对受污染土壤,通过综合分析实验室测定的土壤镉(Cd)含量和同期获取的高光谱数据,提出了一种基于深度森林2021(Deep Forest 2021,DF21)算法的高光谱土壤Cd含量反演模型。采用原始光谱数据(OS)和其经主成分分析(PCA)降维处理后的数据作为模型输入参数,分别构建了基于原始光谱数据的DF21(OS-DF21)模型和基于PCA降维数据的DF21(PCA-DF21)模型。随后,基于相同训练样本,OS-DF21和PCA-DF21分别建立了土壤Cd含量和输入参量之间的关系,并据此对检验样本土壤Cd含量进行了定量反演和对比分析。选取决定系数(R^(2))、均方根误差(RMSE)和相对分析误差(RPD)对模型反演性能进行了评估。分析结果表明:OS-DF21模型反演精度最佳,其R^(2)、RMSE和RPD分别可达0.873、0.120和2.892。相比而言,PCA降维处理虽可降低光谱数据的冗余度,但PCA-DF21模型的预测能力有所下降。尽管如此,PCA-DF21模型仍表现出较好的土壤Cd含量反演能力,其R^(2)、RMSE和RPD分别为0.779,0.159和2.190。因此,DF21算法可作为研究区及类似环境区域的土壤重金属快速勘测的补充手段。

鸡乳酸脱氢酶A基因突变对DF-1细胞能量代谢和法氏囊病毒增殖的影响

通过启动子优化构建了适用于DF-1细胞的CRISPR载体;随后通过同时共转靶向GgLDHA的2条sgRNAs,获得了13株GgLDHA基因突变型细胞株,其蛋白表达水平和酶活出现不同程度的下降。通过对突变克隆细胞株生长、葡萄糖和乳酸代谢、能量代谢以及IBDV增殖研究发现,乳酸对葡萄糖得率从2.1显著下降为1.6,腺苷三磷酸(ATP)合成速率明显提高,相比对照细胞最高提高了57%,突变细胞株的能量代谢效率获得了有效改善。突变型细胞株的IBDV滴度较野生型均有明显增加,相比对照最大提高了5倍。通过定向突变GgLDHA基因,明显降低了DF-1细胞的乳酸积累,有效改善了细胞的能量代谢,并显著促进了IBDV病毒的增殖,为提高IBDV病毒疫苗的生产能力提供了一种新思路。

带趋势项持久性变点的DF比检验

用DF比检验方法研究带趋势项的长记忆向单位根的持久性变点检验问题.首先利用最小二乘方法估计截距和斜率参数,对数据进行去趋势;其次,利用去趋势后的序列构造DF比统计量;最后,在一定假设条件下,推导了DF比统计量的极限分布并通过Monte Carlo方法进行仿真模拟,模拟结果表明,该检验方法能很好的控制经验水平且具有较高的经验势,阐明了检验方法的可行性.

DF关系数据库的函数依赖研究

数据间的函数依赖关系一直是关系数据库理论研究中的重要课题,同样,DF关系数据库中也存在着函数依赖关系.首先,基于DF关系理论给出了DF关系数据模型的定义,并介绍了属性值的表示方法;然后,用动态模糊等价关系及其隶属函数来描述动态模糊函数依赖,给出了DF数据库中函数依赖的基本定义,以及基于DF蕴涵关系的公理系统,并证明其推理规则是正确和完备的;最后讨论了DF关系的规范化设计.

通过DF4C加装后处理研究轨道柴油机车的尾气净化技术

通过利用DF4C内燃机车动力室原有空间,在不改变发动机和机车结构的情况下,设计并加装了一套尾气排放净化装置。该装置能在柴油发动机起机阶段大幅降低可见黑烟,发动机正常运行后除降低可见黑烟外,在尾气温度满足条件时对CO、HC有害气体的处理效率不少于70%。重点解决机车运行在通风条件很差环境下CO排放引起人体中毒及机车起机冒黑烟导致市民投诉的问题,并且通过本次应用改造进行尾气净化技术在柴油机车上的应用可行性分析。本文介绍了柴油机尾气中主要污染物的生成机理、尾气中有害物质的净化原理、基于DF4C机车车型尾气净化装置的结构设计、论证效果以及日常维护的介绍。

红嘴鸥TLR7蛋白多克隆抗体制备及在DF-1细胞中的表达特征分析

【目的】制备红嘴鸥Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)蛋白多克隆抗体,分析红嘴鸥TLR7蛋白在DF-1细胞中的表达特征,为深入了解红嘴鸥TLR7蛋白功能及作用机制提供材料。【方法】设计引物扩增红嘴鸥TLR 7基因CDS区,并构建其原核表达载体与真核表达载体。将重组原核表达质粒pET32a-TLR7转化大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞进行重组蛋白体外诱导表达,并对其诱导温度、诱导时间和IPTG浓度进行优化筛选。选用新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测血清抗体价效,利用Western blotting鉴定抗体特异性。将真核表达质粒pcDNA3.1-TLR7转染至DF-1细胞中过表达,利用间接免疫荧光技术检测红嘴鸥TLR7蛋白在转染DF-1细胞后不同时间点的表达特征。【结果】红嘴鸥TLR 7基因CDS区长约1182 bp,双酶切结果显示出2组大小不同的2条片段,分别为5900、1182 bp(原核表达载体)和5428和1182 bp(真核表达载体),测序后表明原核表达载体与真核表达载体构建成功。体外诱导温度为30℃、IPTG终浓度为1.0 mmol/L时培养5 h得到以包涵体形式大量表达的重组蛋白,蛋白大小为63 ku。间接ELISA法检测抗血清效价为1∶256000以上。Western blotting检测结果表明,制备的多克隆抗体具有较好的特异性。间接免疫荧光结果显示,转染DF-1细胞2 h后即可观察到绿色荧光,随着时间增加绿色荧光密度逐渐增加,且绿色荧光大部分聚集在细胞核及周围,少部分散布在细胞质中。【结论】原核表达的红嘴鸥TLR7蛋白具有良好的免疫原性,制备的多克隆抗体具有较高的反应性和特异性,TLR7蛋白可在DF-1细胞中成功表达。

早熟玉米新品种DF8810

DF8810是吉林省先美达种业有限公司、扶余市优翔种业有限责任公司、吉林省昊翔种业有限责任公司以自交系M15A386为母本、自交系H09B38为父本杂交育成的早熟、高产、优质、多抗、广适玉米新品种。两年区域试验中平均产量较对照品种德美亚3号增产6.0%,生产试验中较对照品种德美亚3号增产6.8%;植株株型紧凑,中抗玉米螟,抗玉米大斑病、茎腐病、丝黑穗病。2022年通过吉林省农作物品种审定委员会审定,审定编号:吉审玉20220103。