电转染哺乳类动物细胞DG44-CHO的方法探讨

目的:建立并验证DG44-CHO细胞快速、无血清培养体系的转染方法。方法:将绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-N1电转入DG44-CHO细胞,用流式细胞仪检测绿色荧光蛋白的表达量;将不同重组蛋白表达质粒C1-28/GL1/pCMV163、C1-28/GL2/pCMV163和TmHL/pCMV163分别电转入DG44-CHO细胞,ELISA检测其培养上清中相应重组蛋白的表达。结果:280 V电压电击20 ms、质粒用量为20μg时,转染细胞中绿色荧光蛋白的表达量最高;同样在该条件下,培养上清中重组蛋白浓度最高。结论:上述电转染条件具有一定的适用性。