利用小孢子培养技术创制红菜薹早熟DH系

为获得早熟型的双单倍体(DH)植株,加快早熟型红菜薹育种进程,本研究以15个早熟型红菜薹品种为试材,进行小孢子培养,观察小孢子发育过程并对再生植株进行倍性鉴定。结果表明,当花瓣/花药(P/A)长度比值为0.6~0.8时,红菜薹小孢子72%~78%处于单核靠边期;共有6个基因型红菜薹出胚,其中出胚率最大的为gy21-55,平均出胚率为14.3胚/蕾;选取子叶形胚进行植株再生,成苗率在90%以上;利用流式细胞仪对再生植株进行倍性鉴定,平均自然加倍率达76.8%。gy21-40、gy21-55表现出早熟特性,与对照植株相比获得的DH植株可分别提早5 d和8 d抽薹。

普通小麦(浙农林12×CASL7AS)DH系株高的分析

小麦株高与植株倒伏密切相关,影响小麦产量。为挖掘小麦株高QTL位点和候选基因,从遗传和分子水平上解释株高分子机理,本研究将野生二粒小麦染色体臂置换系CASL7AS为母本,课题组自选株系浙农林12(简称ZNL12)为父本,杂交F 1经过花培得到178个DH群体。通过4年2个种植点株高数据,利用55K SNP芯片构建高密度遗传图谱,对小麦株高性状进行QTL分析。该遗传连锁图谱包含3655个SNP标记,长度为4738.45 cM,标记间平均遗传距离为1.30 cM,覆盖了小麦21条染色体。其中,A、B、D染色体组分别含有标记1466、1492和697个。QTL分析共检测出53个QTL位点,分布于1A、3A、5A、7A、1B、3B、4B、5B、7B、2D、4D、6D和7D染色体上,可解释2.80%~38.50%表型变异。其中,稳定主效QTL有2个,分别为QPh.zafu.4B-1和QPh.zafu.4D-1,其贡献率分别为25.18%~38.50%和20.67%。经细胞生物学分析,基因型为(0,2)矮秆植株胚芽鞘的表皮细胞长度显著短于基因型为(2,0)的高秆植株,基因型为(0,0)、(2,2)中间型的植株胚芽鞘表皮细胞长度无显著差异,由此推测小麦株高的变异由细胞长度因素决定。QPh.zafu.4B-1候选基因Rht-B1b基因编码区矮秆株系,第904核苷酸处发生碱基“C-T”的突变,形成终止密码子(CAG-TAG);而QPh.zafu.4D-1候选基因Rht-D1b基因编码区矮秆株系,第781核苷酸处碱基突变“G-T”,编码氨基酸中缬氨酸变为天冬氨酸。结果为小麦株高候选基因的筛选和QTL定位提供了优异的遗传位点和候选基因,未来可用于小麦抗倒伏相关的分子标记辅助育种。

甘蓝DH株自交后代2个变异株群差异性分析

以甘蓝F1游离小孢子1个胚状体再生植株自交后代分离出DH12-8-Z型和DH12-8-T型2个变异株群为材料,分析2个株群在幼苗期、莲座期、结球期的植株形态,叶片组织结构,光合色素质量浓度和生理生化指标的差异性。结果显示:(1)形态特征上DH12-8-T型植株比DH12-8-Z型植株幼苗矮小、叶片多、叶柄短缩、节间距小、叶片小而厚、边缘翻卷呈"托盘型";结球植株矮小、外叶簇生严重、叶片褶皱、叶中脉变粗、叶色灰绿、叶球小且紧实。(2)相比DH12-8-T型植株幼苗叶片叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素质量浓度较低;幼苗叶片组织表皮细胞较小且排列整齐紧凑,海绵组织多呈椭圆或近椭圆形,细胞明显较大,叶脉中维管束组织发达,特别是木质部导管明显粗且多。(3)DH12-8-T型植株比DH12-8-Z型植株可溶性糖和可溶性蛋白质质量分数及POD和CAT活性均较高;莲座期SOD活性较低,莲座期和结球期MDA质量摩尔浓度较低。研究表明,DH12-8-Z型植株和DH12-8-T型植株在形态和生理生化等方面都存在显著差异,两者可能是基因型不同的植株群体。

利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA3(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和GA33种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35d后诱导效果下降。【结论】甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L;以生长日龄为25d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。

利用DH群体进行白菜株高和开展度的QTL定位分析

应用AFLP、SRAP、RAPD、SSR及同工酶等标记构建的326个标记位点的白菜遗传图谱和81个DH株系群体,采用M apQTL 5软件对白菜的株高和开展度进行QTL定位。结果表明：通过2年试验,在10个连锁群上共检测到27个QTL,主要分布在R 5、R 10连锁群上：其中控制株高的有11个,控制开展度的有16个;获得2年稳定表达的控制株高的QTL 1个,控制开展度的QTL 3个;各QTL加性效应各不相等,其遗传贡献率为13.3%-29.2%;控制株高和控制开展度的QTL位点表现为紧密连锁或相似的位置,主要集中在R 5连锁群上。

影响甘蓝小孢子DH植株生长的几个因素

旨在筛选甘蓝小孢子DH植株健壮生长的最适培养基和光照强度。为缩短小孢子DH植株培养时间并为获得健壮植株创造条件,从而加快甘蓝DH系育种进程。以甘蓝‘秦甘50’为材料进行游离小孢子培养至诱导分化出不定芽,转接到NAA质量浓度不同的2种培养基上(1/2MS+0、0.1、0.2、0.3mg/L NAA和MS+0.1mg/L NAA),不同光照强度[40、60、80、100μmol/(m2·s)]及添加不同质量浓度NH4NO3(0、0.4、0.8、1.2g/L)培养,研究DH植株的生长势,获得甘蓝小孢子DH植株最适培养基和培养条件。结果表明,在NAA质量浓度不同的培养基中,1/2MS+0.1mg/L NAA培养基中小孢子DH植株生长速度最显著,生根快、植株长势强;在80μmol/(m2·s)光照强度下培养小孢子DH植株净生长高度显著,10.3d再生出根系,根质量较好,叶片大而厚;MS培养基中添加质量浓度为0.4g/L的NH4NO3,小孢子DH植株生长健壮,35d内植株净生长高度最大为56.25mm。以上结果说明,甘蓝小孢子DH植株快速健壮生长的适宜培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA+8g/L琼脂+30g/L蔗糖;在80μmol/(m2·s)光照强度下或MS培养基中添加质量浓度为0.4g/L的NH4NO3均能够促进甘蓝小孢子DH植株根茎叶生长旺盛。

外源激素对甘蓝DH植株生长的影响

【目的】促进甘蓝胚状体再生DH植株在有限时间内健壮生长,根系粗壮,有利于当年提早移栽,进而植株生长达到通过春化营养体。【方法】以甘蓝小孢子培养获得的胚状体不定芽为试验材料,分别在MS+Suc 30g/L+Agar 8g/L培养基上添加不同浓度褪黑素(MT)(0,1,2,5,8和10μmol/L),在MS+Suc 30g/L+Agar 8g/L+5μmol/L MT培养基上添加不同质量浓度萘乙酸(NAA)(0,0.01,0.05,0.1,0.2和0.5mg/L),研究再生植株生长势,筛选再生植株快速健壮生长的培养基;再研究分析DH-A、DH-B和DH-C 3种基因型胚状体不定芽在MS+Suc 30g/L+Agar 8g/L+5μmol/L MT+0.1mg/L NAA培养基上再生植株的生长势,比较MT和NAA对不同基因型DH植株生长的影响。【结果】MS培养基添加MT有利再生植株生长,与对照相比,培养基添加5μmol/L MT处理再生植株净生长高度、茎粗、最大叶宽和叶片数分别增加1.33cm,0.17mm,0.67cm和2.60片,根系变长、侧根增多,翌年抽苔率提高20.0%;MS培养基添加5μmol/L MT和0.1mg/L NAA后再生植株健壮生长,与对照相比,再生植株净生长高度、茎粗、最大叶宽和叶片数分别增加1.90cm,0.52mm,0.88cm和3.00片,根系生长旺盛,翌年抽苔率提高26.6%;5μmol/L MT和0.1mg/L NAA对甘蓝DH植株的促进作用在3种不同基因型间无显著性差异,且DH-A、DH-B、DH-C翌年抽苔率分别较对照提高33.4%,20.0%和20.0%。【结论】在MS培养基中添加5μmol/L MT和0.1mg/L NAA,甘蓝胚状体DH植株生长势最好,当年炼苗移栽,冬前植株生长可达到一定的营养体。

糯玉米DH系主要农艺性状的遗传研究

以育成的5份糯玉米DH系及其杂交组合为研究材料,分析糯玉米DH系主要品质及农艺性状与我国主要生态地区骨干糯玉米亲本自交系的配合力效应,并对其遗传特性和规律作进一步探讨。结果表明,结合单株产量等8个性状特殊配合力效应表现,15ND 13×景白浚34、15ND 15×JN-2、15ND 14×1211是特殊配合力表现优良的前3个组合。供试糯玉米DH系与黑龙江、山东、北京地区糯玉米骨干自交系较易组配出强优势杂交组合,但与山西和河北地区糯玉米骨干自交系较难组配出高产组合。

应用DH群体进行白菜叶片数和单株重的QTL定位与分析

应用AFLP、SRAP、RAPD、SSR及同工酶等5种标记构建的326个标记位点的白菜遗传图谱和81个DH株系群体，采用MapQTL5软件与MQM作图法对白菜的叶片数与单株重进行QTL定位及遗传效应的分析。结果表明，通过两个不同年份的试验，在10个连锁群上共检测到20个QTL，主要分布在R5、R9连锁群上：控制叶片数的有5个，控制单株重的有15个；其中，获得两年稳定表达的QTL共6个：控制叶片数的有1个，控制单株重的有5个；另外，估算了单个QTL的遗传贡献率和加性效应，发现各QTL加性效应各不相等，各位点的遗传贡献率介于9．4％～39．6％之间；控制叶片数的和控制单株重的QTL位点表现为紧密连锁或相似的位置，主要集中在R5连锁群上，这与二者性状表型值相关系数很高相一致。这将为白菜品种改良中产量等性状的分子标记辅助选择提供理论依据。

水稻耐贮藏基因(lox-3)DH作图群体构建方法的比较研究

以与水稻耐贮藏材料 (DawDam)有丰富分子标记多态性的常规材料 2 0 70、明恢 6 3、Dulur/协青早B为亲本 ,分别与之杂交 ,采用改良一步成苗花药培养法对其F1代进行花药培养 ,以一步成苗法为对照 ,评价新方法在构建耐贮藏基因DH作图群体中的应用潜力。研究结果表明 ,改良一步成苗法显著地提高了愈伤组织分化率、植株再生率、绿苗率、绿苗素质 ,而且得到的加倍单倍体系田间表现良好 ,是构建耐贮藏基因DH作图群体的理想方法 ,但在不同基因型间表现有一定的差异性 ,其中DawDam/ 2 0 70、DawDam/明恢 6 3组合的培养效率有较大增幅。利用改良一步成苗法已获得一定数量的DH群体 。

eIF-5A与DHS功能研究及应用进展

脱氧羟腐胺赖氨酸合酶(deoxyhypusine synthase,DHS)在植物、哺乳动物和酵母细胞中普遍存在,参与真核翻译起始因子eIF-5A(eukaryotic initiation factor-5A)的翻译后活化。目前研究表明eIF-5A具有多重生物学功能,如参与细胞增殖、蛋白质翻译、mRNA降解、细胞周期的转化及细胞衰老与凋亡等。eIF-5A是目前已知的DHS的惟一底物,因此研究DHS的功能与作用机理离不开对eIF-5A的功能研究。

盐胁迫甘蓝DH幼苗添加细胞分裂素效果研究

以甘蓝DH12-3为试材,添加不同浓度细胞分裂素溶液处理盐胁迫甘蓝DH植株,探讨细胞分裂素对盐胁迫下甘蓝DH系地上和地下部分生长及植株主要生理生化指标的影响。结果表明,添加100、400mg·L^-16-BA可提高盐胁迫下甘蓝DH系子叶重量,叶绿素、可溶性糖含量及核酮糖二磷酸羧化酶活性,相比对照分别增加5.04、32.36%,13.97、17.10%,79.41、82.91%和17.58、19.30%;甘蓝DH系幼苗根系根表面积、总根体积、根平均直径和总根尖数等较高,分别增加50.40、83.45%,116.81、212.96%,4.96、68.79%和22.82、46.29%。由此可见,添加100mg·L^-16-BA可缓解盐胁迫,减少盐渍伤害,提高甘蓝DH植株抗逆能力,促进DH系幼苗生长。

DH-2型脱氢催化剂的使用及维护

介绍CO2汽提法尿素装置应用DH-2型脱氢催化剂的情况,包括脱氢原理、工艺操作指标、催化剂装填、运行中的注意事项、影响其活性的因素,以及异常情况的处理等。

甘蓝小孢子单倍体植株加倍技术探讨

【目的】比较甘蓝单倍体植株(H植株)茎生叶及其愈伤组织的秋碱处理时间及愈伤组织大小对再生植株加倍效果的影响,筛选加倍效果最佳的秋碱处理时间与合适的外植体,为扩大甘蓝小孢子双单倍体植株(DH株)群体及提高甘蓝小孢子培养效率奠定基础。【方法】以3个甘蓝H植株(H10-23,H10-3和H10-5)的茎生叶为试材,用2.0mg/L秋碱溶液浸泡处理H植株叶片外植体及其愈伤组织以获得再生DH植株,设置15,30和60h3个处理时间,比较分析秋碱处理叶片外植体和愈伤组织的时间对加倍效果的影响;同时用2.0mg/L秋碱溶液处理大(直径≥1cm)、中(1cm>直径≥0.5cm)、小(直径<0.5cm)3种类型的愈伤组织30h,比较愈伤组织大小对加倍效果的影响。【结果】2.0mg/L秋碱处理甘蓝单倍体植株叶片外植体30h,可获得44.80%的平均再生DH株加倍率;2.0mg/L秋碱处理愈伤组织30h,可获得58.13%的平均再生DH株加倍率;2.0mg/L秋碱处理中等大小的愈伤组织30h,可获得51.11%的再生DH株加倍率。【结论】用2.0mg/L秋碱处理甘蓝H植株茎生叶及其愈伤组织30h,可获得较高比例的DH株。

芸薹属异源六倍体的叶片突变体的获得

对芸薹属异源六倍体CGMCC№2553进行游离小孢子培养,获得各时期的胚;经继代培养获得DH再生植株;低温处理15～20d后定植到日光温室中,或者直接定植到日光温室中自然低温处理30～40d。结果表明,CGMCC№2553具有胚胎发生能力,2006年获得172株DH再生植株,2007年获得230株,2008年驯化275株;定植到日光温室中的DH再生植株有些会转变为叶片突变体,2006～2007年共获得8株叶片皱缩突变体,最高获得率为2.29%;目前已获得2份突变体的自交种子;叶片突变体主要表现:生长初期叶片表面皱缩呈瘤状,随着生长的进行,一些皱缩的叶片转变为正常,有的则依然皱缩。进一步研究发现,在同一DH再生植株上常常会萌发出皱缩和野生型的2个或多个分枝,由于皱缩和野生型除了叶片皱缩性状不同外,其他性状完全相同,因此叶片突变体和野生型是研究叶片皱缩性状的理想材料,有利于进一步研究皱缩基因的遗传,定位、克隆叶片皱缩相关基因。

普通小麦白粉病成株抗性的QTL分析

【目的】以普通小麦加倍单倍体(doubled haploid,DH)群体(旱选10号×鲁麦14)的150个株系为材料,鉴定其白粉病成株抗性并进行QTL定位,以期发掘具有显著效应以及不同环境中稳定表达的主效QTL,为改良小麦白粉病成株抗性提供理论依据及分子标记。【方法】运用基于混合线性模型的复合区间作图法,对DH群体在4种单一环境条件下及基因型与环境互作情况下白粉病成株抗性进行QTL定位。【结果】4种单一环境条件下共检测到15个控制白粉病成株抗性的加性效应QTL,对白粉病成株抗性表型变异的贡献率为3.8%～21.0%;考虑基因型与环境互作的情况下检测到9个加性QTL,分别与单一环境下检测到的加性QTL位于相同的标记区间,位于染色体2A、2B、3A、5A、5B、6B、7A、7B和7D上。4种单一环境下检测到17对上位性效应QTL,对白粉病成株抗性表型变异的贡献率为1.1%～28.4%;考虑基因型与环境互作情况下检测到19对上位性QTL,其中7对与单一环境下的上位性QTL位于相同的标记区间。控制白粉病成株抗性的QTL来自于双亲,DH群体中有白粉病成株抗性超亲的株系存在。【结论】白粉病成株抗性受加性和上位性QTL的共同作用;在基因型与4种环境互作情况下检测到的QTL中,分别有9个加性QTL和7对上位性QTL与单一环境下的QTL位于相同的标记区间,这些在不同环境条件下重复出现的QTL具有较好的稳定性;通过分子标记辅助选择等方法重组、聚合目标QTL,将能够选育出白粉病抗性强的小麦品种。

大熊猫主食竹巴山木竹挥发性成分分析

为深入研究巴山木竹综合开发利用价值,采用动态顶空套袋采集法收集其挥发性气体,用全自动热脱附/气相色谱/质谱联用法分析了挥发性气体中有机化合物的种类与相对丰度。结果表明:巴山木竹挥发性有机物共有25种,其中,酯类11种,相对含量占82.85%;醇类3种,相对含量占11.68%;有机酸5种,相对含量占1.96%;醛类3种,相对含量占1.23%;酚、酮各1种,相对含量分别占0.35%和0.03%。研究认为,巴山木竹具有潜在的缓解疲劳、减少焦躁、镇静等功效,以及抗菌、消炎等生理活性,对净化空气有一定作用,具有观赏和保健功能。

基于PLC的选煤厂除尘系统设计与实现

介绍了目前常用的除尘方式及特点;结合新疆某煤矿选煤厂的具体情况,提出了一种基于PLC、采用DH+组网方式和超声负压雾化技术的除尘系统的设计方案,详细介绍了该系统的总体结构、硬件构成、控制流程及通信程序设计。现场应用结果表明,该系统性能稳定,除尘效果良好,操作方便,可靠性高,便于扩展和维护。

不同种植模式的霍山石斛对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 研究不同种植模式的霍山石斛对小鼠急性肝损伤保护作用.方法 将不同模式种植的新鲜霍山石斛茎条榨汁,以高(生药7.5 g/kg)和低(生药1.25 g/kg)剂量每日灌胃给药,持续2周,使用四氯化碳(CCl4)、对乙酰氨基酚(APAP)和环磷酰胺(CTX)分别诱导急性肝损伤模型.测定小鼠血清中ALT、AST水平,肝组织匀浆中SOD、MDA水平,HE染色检测肝组织病理学变化.结果 3种模式种植的霍山石斛能不同程度减轻小鼠肝细胞坏死.与模型组相比,CCl4肝损伤模型在仿野生和林下石子种植高剂量作用下ALT、AST水平降低(P<0.05),各给药组均能提高SOD水平(P<0.01),抑制MDA水平(P<0.05,P<0.01);APAP肝损伤模型在仿野生种植低、高剂量组和林下石子种植低、高剂量作用下ALT,AST水平降低(P<0.01),林下石子种植低、高剂量组和设施种植高剂量作用下SOD水平升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平降低(P<0.01);CTX肝损伤模型在仿野生种植高剂量组和林下石子种植高剂量作用下ALT、AST水平降低(P<0.05,P<0.01),在设施种植高剂量作用下ALT水平降低(P<0.05),在仿野生低、高剂量组和林下石子种植低、高剂量作用下SOD水平升高(P<0.01),在仿野生种植高剂量作用下MDA水平下降(P<0.01).结论 生态种植模式的霍山石斛对小鼠肝损伤的保护作用优于设施种植霍山石斛.

ContrlLogix控制系统在煤场改造中的应用

介绍一种由2套logix5550控制器、1套SLC控制器、CNET网、DH+网组成的控制系统,采用工控机人机接口进行监控和操作,实现了整个焦化厂备煤系统的自动控制.